橄榄苦苷对脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠的保护作用

为了探讨橄榄苦苷对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤小鼠的保护作用,选用80只健康昆明系小鼠分成正常对照组、模型组、地塞米松组和橄榄苦苷组。结果显示,橄榄苦苷能减少炎症细胞浸润,使肺泡壁增厚减轻;能降低血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、白细胞介素6(IL-6)的含量(P0.05,P0.01);能提高肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性,降低丙二醛(MDA)的含量(P0.01);能提高肺组织闭锁蛋白表达水平(P0.01)。说明橄榄苦苷对LPS诱导的急性肺损伤具有明显的保护作用,其机制可能与减少自由基损伤、抑制炎症因子水平及提高肺组织细胞连接蛋白的表达有关。     

黄芩苷对NCI-H292细胞凋亡和LPS所致小鼠急性肺损伤的影响

为探讨黄芩苷对肺上皮细胞(NCI-H292细胞)凋亡和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)所致小鼠急性肺损伤的影响。本试验采用Hoechst染色法和流式细胞法检测黄芩苷(60和120μg/L)对H2O2诱导NCI-H292细胞凋亡率的影响;腹腔注射LPS建立小鼠急性肺损伤模型,观察黄芩苷对LPS诱导的小鼠急性肺损伤的影响。将ICR小鼠随机分为4组,分别为空白对照组、LPS组、黄芩苷150mg/(kg·d)组和300mg/(kg·d)组,予以蒸馏水或黄芩苷灌胃,1次/d,连续3d,于试验第3d灌胃后1h,除空白对照组其他各组腹腔注射LPS(20mg/(kg·d)),造模12h后观察肺组织病理学变化,测定肺组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)的活力,用Western blotting检测肺组织胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)及磷酸化cPLA2的含量。结果显示,Hoechst染色可见黄芩苷60和120μg/L预处理对H2O2诱导NCI-H292细胞凋亡均有保护作用;流式细胞法测定显示,与无黄芩苷刺激的H2O2组相比,黄芩苷作用后呈剂量依赖抑制NCI-H292细胞凋亡。小鼠腹腔注射LPS后12h,肺组织明显充血、水肿,并有大量炎性细胞浸润,肺组织MPO、cPLA2水平显著升高。与LPS组相比,黄芩苷的两个剂量均能显著降低MPO和cPLA2的水平,明显减轻内毒素所致的肺损伤。结果表明,黄芩苷对H2O2诱导的肺上皮细胞NCI-H292凋亡具有保护作用,能通过降低肺组织中MPO含量和cPLA2活性,减轻小鼠内毒素性肺损伤。     

水杨苷和异鼠李素对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的治疗作用研究

急性肺损伤(ALI)是一种常见的危重病,病死率极高,严重威胁患者的生命健康.近年来,研究人员在临床上积极应用中药中提取的有效成分——中药单体进行相关治疗,因中药单体具有相对安全且副作用较少的优势,国内外文献中有很多中药单体抗脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤的研究成果,水杨苷和异鼠李素就是其中两种效果比较明显的中药单体,...     

小鼠急性肺损伤造模条件的探究

为探究构建急性肺损伤模型的条件,本试验选用健康昆明小鼠,经腹腔注射递增剂量脂多糖（LPS）（0、2、4、6、8、10 mg/kg）,观察不同条件下小鼠呼吸频率、死亡率、肺脏干湿重比值及组织结构变化,检测炎症因子IL-10、TNF-α、IL-1β及IFN-γ在不同程度肺损伤中的表达量变化。结果显示,4 mg/kg LPS组肺脏干湿重比值显著高于对照组（P<0.05）;6、8和10 m/kg LPS组肺脏干湿重比值极显著高于对照组（P<0.01）。病理切片分析显示,6 mg/kg LPS组小鼠肺脏出现充血,肺泡腔及肺间质出现渗出,肺泡隔增厚,出现少量中性粒细胞浸润;8、10 mg/kg LPS组小鼠肺脏充血明显,肺泡腔及肺间质出现渗出,肺泡明显隔增厚,出现中性粒细胞浸润;与对照组相比,6、8、10 mg/kg LPS组肺组织中胶原纤维大量增多,且多出现在肺气管周围,10 mg/kg LPS组现象最明显。炎症因子检测分析结果显示,与对照组相比,2、4、6、8、10 mg/kg LPS组炎症因子均极显著增加（P<0.01）。结合病理组织切片及相关检测指标表明,昆明小鼠腹腔注射8 mg/kg LPS并作用12 h,可成功构建急性肺损伤模型。     

积雪草酸对LPS诱导肉鸡急性肝损伤的保护作用

旨在探讨积雪草酸(asiatic acid, AA)预处理对LPS诱导雏鸡急性肝损伤的影响及AA对AMPK-mTOR通路与肝细胞自噬的作用。60只1日龄雏鸡适应性饲养7 d后,随机分为对照组、LPS组、LPS+AA(低、中、高剂量)预处理组和AA对照组。除对照组和LPS组,AA低、中、高剂量预处理组和AA对照组使用相应剂量的AA预处理14 d外,对照组和LPS组灌胃相同剂量的羧甲基纤维素钠悬浮液。AA预处理组和LPS组在16,18和20日龄腹腔注射LPS(0.5 mg/kg),21 d时采集肝脏样品,-80℃保存,用于后续试验。通过HE染色评估鸡肝细胞的病理损伤,试剂盒检测肝脏组织中AST和ALT的活力,RT-qPCR、Western blot检测自噬相关基因和蛋白的表达;免疫组化、免疫荧光分别检测Beclin 1、LC3-Ⅱ在肝组织的表达。结果显示：LPS导致肉鸡肝脏出现细胞肿胀、大面积空泡变性以及炎性细胞浸润;而AA预处理有效缓解了LPS引起病理变化,下调mTOR的基因和蛋白表达,提高AMPK、ATG5、Beclin 1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的基因和蛋白表达;Beclin 1和L...     

青天葵提取物对小鼠急性肺损伤的保护作用

为探讨青天葵乙酸乙酯提取物对小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的保护作用,本试验选择50只昆明小鼠随机分为模型组、青天葵(高、中、低)治疗组和空白对照组,采用内毒素腹腔注射法建立急性肺损伤模型。观察肺脏湿/干重比(W/D)、病理切片、肺脏组织匀浆中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量变化。结果发现,青天葵乙酸乙酯提取物可以明显减轻损伤肺脏组织的形态学变化,肺脏组织匀浆中MDA、SOD与模型组相比差异极显著,证实青天葵乙酸乙酯提取物对小鼠急性肺损伤具有保护作用。     

砂生槐子生物碱对LPS诱导的小鼠急性肺炎的保护作用研究

探究砂生槐子生物碱对LPS诱导的小鼠急性肺炎的保护作用。将48只SPF雄性昆明小鼠随机分为对照组(Control组)、脂多糖组(LPS组)、地塞米松组(DXMS组,0.8 mg/kg)、砂生槐子生物碱低剂量组(SSHD组,0.34 mg/kg)、砂生槐子生物碱中剂量组(SSHZ组,0.68 mg/kg)、砂生槐子生物碱高剂量组(SSHG组,1.36 mg/kg),每组8只,给药7 d后,通过滴鼻LPS(5 mg/kg)建立小鼠急性肺炎模型。结果表明,SSHD组、SSHZ组、SSHG组小鼠WBC、LYM、GRA显著降低(P<0.05),HGB、RBC、PLT显著升高(P<0.05);SSHD组、SSHZ组小鼠脾系数显著降低(P<0.05),SSHD组、SSHZ组、SSHG组小鼠肺系数、胸腺系数显著降低(P<0.05);SSHD组、SSHZ组、SSHG组小鼠血清中TNF-α、IL-6含量显著降低(P<0.05),CRP、IL-1β含量降低;SSHD组、SSHZ组与SSHG组小鼠肺组织中丙二醛(MDA)显著降低(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)显著...     

辅酶Q10改善LPS诱导小鼠急性肺损伤的效应分析

本研究旨在探究辅酶Q10(coenzyme Q10, CoQ10)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)致小鼠急性肺损伤的保护作用及机制。选取8周龄的健康雄性C57BL/6小鼠72只,随机均分为6组：空白对照组(CON组,100μL玉米油)、CoQ10干预组(CHQ组,50 mg·kg^-1 CoQ10)、模型组(LPS组,100μL玉米油+LPS)、低剂量CoQ10处理组(LDQ组,2 mg·kg^-1 CoQ10+LPS)、中剂量CoQ10处理组(LMQ组,10 mg·kg^-1 CoQ10+LPS)和高剂量CoQ10处理组(LHQ组,50 mg·kg^-1 CoQ10+LPS)。通过灌胃的方式连续给予小鼠不同剂量的CoQ10或玉米油14 d,然后鼻内滴入50μL 1 mg·mL^-1 LPS溶液建立小鼠急性肺损伤模型。24 h后,处死小鼠,摘取左肺称重并烘干,计算肺组织湿干质量比(W/D);检测肺泡灌洗液(BALF)蛋白浓度、肺组织丙二醛(MDA)含量、活性氧(...     

脂多糖致小鼠急性肺损伤模型给药剂量和时间的筛选

为建立一种理想的急性肺损伤模型,筛选出小鼠急性肺损伤模型最佳造模时间和脂多糖浓度,本试验采用小鼠滴鼻给药途径,选取48只雄性SPF级小鼠随机分成8组,空白对照组、造模时间组(3、6、9 h和12 h)和造模剂量组[1、2 mg/(kg·bw)和5 mg/(kg·bw)]。分别检测各组小鼠肺湿干重比(W/D)、肺脏病理损伤、细胞因子(IL-6、IL-1β、TNF-α)含量、中性粒细胞百分比等指标,筛选出最佳给药剂量及时间。结果表明,脂多糖浓度为2 mg/(kg·bw)、造模时间6 h时,小鼠急性肺损伤模型更加稳定。     

A study of experimental acute lung injury in pigs on zero end-expiratory pressure

OBJECTIVES: Tidal expiratory flow limitation (EFL) has been reported in humans with acute lung injury (ALI) and assumed to be associated with small airway closure. Detection of EFL is important because by selecting positive end-expiratory pressure at such a level that EFL is no longer present in the tidal breath, the repeated opening and closure of small airways can be prevented. The objective of this study was to investigate the occurrence of EFL in two experimental models of ALI. ANIMALS: Ten female piglets. METHODS: Animals were anaesthetized, tracheotomized and mechanically ventilated on zero end-expiratory pressure. Acute lung injury was induced by oleic acid (OA) (n = 5) or saline lavage (SL) (n = 5). Tidal EFL was assessed by the negative expiratory pressure test. Lung and chest wall mechanics were partitioned using an oesophageal balloon. Resistance and static elastance were assessed by a rapid airway occlusion technique at baseline ventilatory settings. RESULTS: There was no EFL at any time before and after ALI in both models. This may be due to an increased elastance which promoted higher expiratory flow after ALI and to a decreased chest wall to lung static elastance ratio which could favour small airways patency. The similar increase in total lung resistance, in the two models, after ALI was mostly due to an increased airway resistance in the OA model and to the lung tissue resistance in the SL model. CONCLUSIONS AND CLINICAL RELEVANCE: Tidal EFL was not detected in experimental ALI. This finding casts some doubt about the usefulness of some experimental models of ALI to mimic some reported findings in human ALI.     

内质网应激和氧化应激在纳米氧化铈所致肺损伤中的作用

观察不同剂量纳米氧化铈颗粒染毒后对大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量的影响及大鼠肺组织GRP78蛋白表达情况,探讨其导致肺损伤的作用机制。将粒径为35nm±3nm的纳米氧化铈颗粒悬液以不同剂量(100mg/kg、400mg/kg)给大鼠气管滴注,染毒28d后,测定大鼠血清中SOD活力、MDA含量及肺组织GRP78蛋白表达情况。与对照组相比,高低剂量纳米氧化铈染毒组大鼠血清中SOD活力及MDA含量均无明显改变(P0.05),GRP78蛋白表达均显著增高(P0.05)。纳米氧化铈染毒大鼠所致肺损伤与内质网应激有关,与氧化应激的关系有待进一步研究。     

龙葵对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用

研究了龙葵对四氯化碳（CCl4）所致小鼠急性肝损伤的保护作用。将60只小鼠随机分成6组：正常对照组、模型组、龙葵高剂量组、龙葵中剂量组、龙葵低剂量组、阳性对照组（水飞蓟素）。给药7 d后除正常组外其余5组按10 mL/kg剂量给予0.35% CCl4 。分别检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）和肝功能氧化指标：丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）。通过统计学处理分析得出龙葵各剂量组与阳性对照组、正常组和模型组之间存在差异性。结果表明,通过龙葵高剂量组的保护作用可以使血清中ALT、AST活性和肝组织中的MDA含量、SOD和GSH-Px活力趋近于正常水平。证明龙葵对CCl4所致小鼠急性肝损伤有明显的保护作用。     

鼠源重组UBC13蛋白对脂多糖诱导的小鼠急性炎症的影响

试验旨在探讨鼠源重组UBC13蛋白对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠急性炎症的影响。将24只SPF雌性小鼠随机分成4组:PBS组,LPS模型组,重组UBC13蛋白高、低剂量组(分别为100和25μg/只),每组6只。LPS模型组与各蛋白剂量组腹腔注射20 mg/kg LPS,PBS组腹腔注射等体积PBS;注射结束1 h后,各蛋白组按相应剂量背部皮下多点注射重组UBC13蛋白,PBS组与LPS模型组注射等体积PBS。给予蛋白24 h后处死小鼠。收集小鼠肺脏、脾脏、胸腺及肝脏组织,计算脏器指数,HE染色观察组织病理学变化,实时荧光定量PCR检测肺脏、脾脏、胸腺和肝脏中IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA的相对表达量,以及肺脏中iNOS mRNA的相对表达量,综合评价鼠源重组UBC13蛋白对LPS诱导小鼠急性炎症的影响。结果显示,与PBS组相比,LPS模型组小鼠肺脏、脾脏及肝脏指数均显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),且肺脏、脾脏和肝脏组织均出现病理变化。实时荧光定量PCR结果显示,与PBS组相比,LPS模型组肺脏、脾脏、胸腺和肝脏中IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量均极显著升高(P<0.01),肺脏中iNOS mRNA相对表达量也极显著升高(P<0.01);与LPS模型组相比,UBC13蛋白高剂量组肺脏、脾脏和肝脏中病理变化明显改善,肺脏、肝脏、脾脏中IL-1β、TNF-α、IL-6及肺脏中iNOS mRNA表达量均极显著降低(P<0.01);胸腺中TNF-αmRNA表达量显著降低(P<0.05),IL-6 mRNA和IL-1β表达量极显著降低(P<0.01)。表明鼠源重组UBC13蛋白可下调炎性因子的表达,从而改善LPS诱导的小鼠急性炎症反应。     

家兔乳头管灌注脂多糖诱发血清急性期蛋白的动态变化

检测和分析经乳头管灌注脂多糖(LPS)前后家兔血清急性期蛋白含量的动态变化。11只泌乳家兔(产后7d)经乳头管灌注LPS建立乳房炎模型,在灌注前2h,灌注后6、12、24、48、72h和5、7d分别测定血清中结合珠蛋白(HP)、C-反应蛋白(CRP)和白蛋白(ALB)含量,同时取乳腺组织观察病理变化。组织病理学结果显示,灌注LPS后6h后乳腺组织出现病理变化,腺泡腔中观察到嗜中性粒白细胞;灌注24h时组织损伤加重,乳腺组织结构紊乱,浸润大量嗜中性粒白细胞;48h后乳腺组织开始自我修复,7d时恢复正常。灌注LPS前血清中HP含量低于检出限,灌注LPS后6h时HP含量显著升高(P<0.05),12h时达到峰值,48h开始显著降低(P<0.05);CRP含量在灌注LPS后6～72h内显著升高(P<0.05),12h时达到峰值,72h后逐渐降低,5d时恢复到健康水平;ALB含量在灌注LPS后12～72h内显著降低(P<0.05),5d时恢复到健康水平。结果表明,HP、CRP和ALB含量在灌注LPS前后发生了规律性的变化,其中HP含量对LPS诱导的急性乳房炎反应敏感,提示HP可作为评价乳腺组织炎症程度和乳房炎的早期诊断...     

清开灵对LPS诱导仔猪发热相关调节因子动态变化的影响

采用LPS人工复制仔猪发热模型,攻毒5h后按要求给于清开灵。监测各时间段的体温以及在0,5,30,72h各时段采血用ELISA法检测PGE2、cAMP、α-MSH和AVP的含量。结果显示:在注射LPS时,各组PGE2、cAMP、AVP、α-MSH的含量无显著性差异(P>0.05);在注射LPS 5h后,与空白组相比,模型组PGE2、cAMP、AVP和α-MSH的含量升高;在30h时,与模型组相比,清开灵各组PGE2、cAMP含量降低,AVP含量升高,且差异显著(P<0.05);在72h时,清开灵各组PGE2、cAMP、AVP和α-MSH的含量与空白组比较差异不显著(P>0.05)。体温与上述相关因子存在显著相关性。结果表明:清开灵有明显的解热作用,其机制可能是通过诸多调节因子共同调节的作用。     

SB203580对猪流感病毒诱导小鼠急性肺损伤中炎症因子的影响

为探讨SB203580对猪流感病毒(SIV)诱导小鼠急性肺损伤(ALI)中炎症因子的影响,将180只6⁸周龄SPF级BALB/c雌性小鼠,随机平均分成SIV感染组(感染组)、SIV感染+SB203580组(SB组)和对照组,于感染后2、4、6、8和14d,分别进行临床症状、肺脏病理组织学观察和肺组织中炎症因子测定。结果显示,感染组和SB组小鼠均表现明显的ALI症状,但SB组小鼠症状较轻,肺损伤程度明显低于感染组;感染组和SB组中炎症因子水平均高于对照组,SB组小鼠肺脏炎症因子水平较感染组降低。说明p38MAPK特异性抑制剂SB203580可以下调磷酸化p38MAPK的表达水平,降低炎症因子的表达,减轻ALI中肺组织的病理损伤。     

Identification and examination of a novel 9‐bp insert/deletion polymorphism on porcine SFTPA1 exon 2 associated with acute lung injury using an oleic acid‐acute lung injury model

The pulmonary surfactant‐associated protein (SFTPA1, SP‐A) gene has been studied as a candidate gene for lung disease resistance in humans and livestock. The objective of the present study was to identify polymorphisms of the porcine SFTPA1 gene coding region and its association with acute lung injury (ALI). Through DNA sequencing and the PCR‐single‐strand conformation polymorphism method, a novel 9‐bp nucleotide insertion (+) or deletion (‐) was detected on exon 2 of SFTPA1, which causes a change in three amino acids, namely, alanine (Ala), glycine (Gly) and proline (Pro). Individuals of three genotypes (?/?, +/? and +/+) were divided into equal groups from 60 Rongchang pigs that were genotyped. These pigs were selected for participation in the oleic acid (OA)‐ALI model by 1‐h and 3‐h injections of OA, and there were equal numbers of pigs in the control and injection groups. The lung water content, a marker for acute lung injury, was measured in this study; there is a significant correlation between high lung water content and the presence of the 9‐bp indel polymorphism (P < 0.01). The lung water content of the OA injection group was markedly higher than that of the control group and lung water content for the +/+ genotype was significantly higher than that of the others in the 1‐h group (P < 0.01). No differences in the expression of the SFTPA1 gene were found among individuals with different SFTPA1 genotypes, indicating that the trait is not caused by a linked polymorphism causing altered expression of the gene. The individuals with the ?/? genotype showed lower lung water content than the +/+ genotype pigs, which suggests that polymorphism could be a potential marker for lung disease‐resistant pig breeding and that pig can be a potential animal model for human lung disease resistance in future studies.     

脂多糖对小鼠子宫内膜Toll样受体4介导的炎性信号通路的影响

革兰阴性菌感染可引起子宫内膜炎,机体的Toll样受体4(TLR4)可接受革兰阴性菌的细胞壁主要成分脂多糖(LPS)的刺激引发一系列炎症反应。为了研究LPS对TLR4介导的炎性信号通路的影响,本试验以小鼠为模型,分别用不同浓度的LPS对小鼠进行在体子宫灌注和处理体外培养的子宫内膜上皮细胞系。组织学观察显示,灌注不同浓度LPS后子宫内膜组织中炎性细胞增多。通过RT-PCR对各组中TLR4和核转录因子κB(NF-κB)、IL-6的mRNA表达水平进行检测,发现LPS刺激能够增强TLR4和NF-κB、IL-6 mRNA表达,影响TLR4介导的炎性信号通路。     

脂多糖对小鼠乳腺组织中Toll-like Receptor4表达的影响

将40只雌性ICR小鼠,受孕后随机分为试验组和对照组。雌鼠产后10-11d,试验组经第4对乳头灌注LPS,对照组灌注生理盐水,分别于灌注后不同时间采集样本,组织学分析乳腺病理变化;分析对各组乳腺组织中TLR4和TNF-α mRNA表达变化。组织学结果显示,灌注1．5h后乳腺组织中炎性细胞增多,6、12h乳腺腺泡内有大量的炎性细胞浸润,腺泡结构崩解;6h TLR4 mRNA表达极显著高于对照组（P〈0．01）;4个试验组中TNF-αmRNA表达极显著高于对照组（P〈0．01）。试验结果表明LPS能够增强TLR4和TNF-α mRNA表达。