英国暴发鸡新城疫病

英国暴发鸡新城疫病王彩虹摘译姚四新校最近在英国暴发了三起鸡新城疫病。第一起发生于Ｈｅｒｅｆｏｒｄｓｈｉｒｅ的Ｒｏｓｓ－ｏｎ－Ｗｙｅ附近的一个肉鸡场，时间为１９９７年１月３日。据英国农渔粮食部（ＭＡＦＦ）报告，当确诊为该病时，因死亡率很高，鸡场内的鸡数...     

非毒性新城疫病毒可引起鸡急性胰腺炎

１９９６年４月，从一个家庭鸡群的１只死亡肉鸡呼吸道（肺和气管）中分离到禽副粘病毒１型（ＡＰＭＶ－１）新城疫病毒（ＡＰＭＶ－１９６／８９ＶＢ）。作者介绍了该病毒的生物学特征和在口服接种１日龄ＳＰＦ鸡所见到的组织学病变。对分离出的血凝因子，用可以抑制所有...     

值得警惕的疾病禽流感

一、禽流感发生的历史回顾 禽流感（ＡＩ）是一种古老的疾病，曾给世界养禽业造成巨大损失。禽流感病毒（ＡＩＶ）对鸡、火鸡、鸭等家禽均有较强的侵袭性。 １．鸡：１８７８年意大利首次暴发鸡瘟，１９５５年证实鸡瘟是由 Ａ型禽流感病毒引起的。１９５９年英国暴发禽流感，并分离出禽流感病毒（ＡＩＶ）（Ｈ５Ｎ１），现在已有研究表明禽流感病毒广泛分布于世界范围，１９７６年，澳大利亚（Ｈ７Ｎ７）、１９７８年比利时（Ｎ１Ｎ６，Ｈ６Ｎ２），１９７９年法国（Ｈ９Ｎ２）；其后美国、以色列、日本、前苏联各地区、香港及内陆都分离出…     

用吐温80制备新城疫病毒乳化灭活疫苗

用１０％（Ｗ／Ｖ）吐温８０和０．０５％（Ｖ／Ｖ）福尔马林制备新城疫病毒（ＮＤＶ）水－油－水乳化（ＷＯＷＥ）灭活疫苗，其抗原亚单位平均分子量为３０７ＫＤ，油与水的比例为１：２，乳化的ＮＤＶ可单独应用，也构成ＷＯＷＥ四联疫苗。用４４．７μｌ去污剂处理的ＮＤＶ尿囊液（ＮＤＶ－ＡＦ）为一个剂量的单价苗，用其免疫５周龄商品鸡后７周攻毒，可获完全保护。用１７８．６和８９．３μｌ去污处理的ＮＤＶ－ＡＦ苗接种４周     

犬腺病毒免疫的研究情况

犬腺病毒（Ｃａｎｉｎｅ ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ， ＣＡＶ）属于腺病毒科成员，是在已发现的哺乳动物腺病毒属中致病性最强、感染动物最广的单分子、线状、双股ＤＮＡ病毒，其１型（ＣＡＶ－１）主要引起犬传染性肝炎和熊、狐脑炎；２型（ＣＡＶ－２）主要引起犬科动物传染性喉气管炎和传染性腹泻。犬腺病毒广泛分布于全世界，是对我国养犬业、毛皮动物养殖业危害最大的疫病之一。本文就ＣＡＶ的主动免疫和被动免疫作一简介。１犬腺病霉的主动免疫 人工接种疫苗是防制本病的根本方法。１．１ＣＡＶ－１灭活苗 Ｒｕｂａｒｔｈ和Ｇｒｅｅｎ等人…     

新城疫病毒F48E8株cDNA文库的构建

以新城疫病毒（ＮＤＶ）中国标准强毒株为材料，分别用基因组ＲＮＡ及ｐｏｌｙ（Ａ）＋ｍＲＮＡ为模板反转录合成ｃＤＮＡ。将ｃＤＮＡ通过同聚物加尾ｐｏｌｙ（ｄＣ）后克隆于末端加有ｐｏｌｙ（ｄＧ）的线性化质粒ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（－）上，转化大肠杆菌ＴＧ１，经ＩＰＴＧ和Ｘ－ｇａｌ筛选及电泳检查，其中有５６个克隆含有大小在０．２～２．７ｋｂ范围的外源片段。斑点杂交鉴定有５２个是ＮＤＶｃＤＮＡ克隆，平均长度为１．３１ｋｂ，从而构建了ＮＤＶｃＤＮＡ文库。文库的统计学质量检验表明，拥有５２个克隆的Ｆ４８Ｅ８株ｃＤＮＡ文库可能覆盖ＮＤＶ整个基因组     

以鸡痘病毒为载体的新城疫病毒重组疫苗的免疫效力

构建了表达速发型新城疫病毒（ＮＤＶ）融合蛋白（Ｆ）和血凝素－神经氨酸酶（ＨＮ）糖蛋白的鸡痘重组病毒ＴＲＯＶＡＣ－ＮＤＶ。ＳＰＦ鸡免疫试验表明，一次注射得组病毒有使鸡产生大量血凝抑制（ＨＩ）抗体。并能维持８周以上，而且重凤苗能诱导对经肌肉和呼吸道途径攻击ＮＤＶ的免疫力。带母滞病毒（ＦＰＶ）的免疫力，但ＮＤＶ的特异性体液应签水平降低。     

新城疫病毒F48E9株病毒结构蛋白的分析

采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、激光扫描技术、ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ和糖蛋白染色方法对新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ４８Ｅ９株的结构蛋白进行了分析，结果表明，它具有ＮＤＶ的典型结构特征，与ＬａＳｏｔａ毒株相比无显著差异     

蛋鸡非典型新城疫一例及其病原鉴定

１９９７年３月下旬，上海市郊区某蛋鸡场发生以产蛋下降为第一指征的非典型新城疫，通过临诊调查、抗体测定、病毒分离与鉴定进行了确诊。结果：感染鸡群产蛋下降的幅度可高达５０％；新城疫ＨＩ抗体滴度高达１２ｌｏｇ２或以上；用泄殖腔棉拭接种鸡胚的分离物用标准血清鉴定为新城疫病毒（ＮＤＶ），初代尿囊液的ＥＬＤ５０为１０－７．５（０．２ｍＬ），１日龄ＳＰＦ鸡胚脑内接种致病指数（ＩＣＰＩ）和６周龄ＳＰＦ鸡静脉接种致病指数（ＩＶＰＩ）分别为１．７２５和２．３２，其毒力接近标准毒株—ＮＤＶ北京株Ｆ４８Ｅ９。     

新城疫病毒HN基因分子遗传变异及其功能性研究进展

新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）（PMV-1）是一种高致病性病毒，对禽类危害较大，是世界公认的两大重要禽病之一。新城疫（Newcastle disease，ND）于1926年首次暴发于印尼爪哇121和英国新城，在此之前．中欧亦有类似报道。     

鸡传染性贫血病的综合防制

鸡传染性贫血病（Ｃｈｉｃｋｅｎ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ａｎｅｍｉａ，ＣＩＡ）是由鸡贫血病毒（Ｃｈｉｃｋｅｎ Ａｎｅｍｉａ Ｖｉｒｕｓ，ＣＡＶ）引起的，其特征性病变为骨髓黄化，胸腺萎缩，出现造血机能障碍和免疫机能损害［１，２］。自 １９７９年从日本发现和分离到 ＣＡＶ以来［３］，德国、英国、美国、澳大利亚、荷兰和以色列都已先后报道了本病的存在。对ＣＡＶ感染的流行病学调查已表明，世界各地鸡群中，对ＣＡＶ的感染率都相当高，甚至在曾经认为是ＳＰＦ鸡群中也有４０％－５０％表现出ＣＡＶ抗体阳性。由此可见商品雏鸡中…     

鸡病毒性关节炎病毒的提纯结构蛋白及其免疫活性分析

采用差速离心和蔗糖递度超速离心法提纯了鸡病毒性关节为病毒（ＡＶＡＶ）９３０７株，并用ＳＤＳ－ＰＡＧ电泳技术分析其结构蛋白，该病毒主要由８条多肽组成（ＶＰ１～ＶＰ８），它们的分子量分别是１４５，１３０，１１５，７２，７０，６５，４２，３９ＫＤ。用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ免疫印迹技术分析这些多肽的免疫活性，与同源病毒株抗血清出现５条可见的反应带，分别是ＶＰ１，ＶＰ２，ＶＰ４，ＶＰ５和ＶＰ７；与异     

抗小鹅瘟病毒中和性单克隆抗体研制及实验防治效果

用淋巴细胞杂交瘤技术研制出１１株抗小鹅瘟病毒（ＧＰＶ）单克隆抗这些单抗仅与ＧＰＶ反应，与其它细小病毒（ＰＣＰＶ、ＦＰＶ、ＰＰＶ）和其它禽病毒（ＮＤＶ，ＩＢＤＶ，ＤＨＶ、ＤＰＶ）均不反应，腹水单抗的ＥＬＩＳＡ效价达１０＾－５－１０＾－７，琼扩沉淀效效价达１：２０－１：５１２，鹅胚中和效价达１：３０－１：１２２，鹅体中和效价为１：５４－－１：９６。ＧＰＳ１和ＧＰＧ５２株单抗对人工感染ＧＰＶ的雏鹅具有良     

牛轮状病毒重组株的血清学和基因型特性

从母牛接种过Ａ组ＢＲＶ株ＮＣＤＶ－Ｌｉｎｃｏｌｎ（Ｐ１：Ｇ６）苗的两个吡邻牛场分离到两株牛轮状病毒（ＢＲＶ），编号为ＮＳ－１和ＮＳ－２，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ试验表明，ＮＳ－１和ＮＳ－２有相的的Ａ组ＲＮＡ电泳模式，而且全部基因片段同源，体外中和试验表明，ＮＳ－１株病毒能被Ｇ６特异性单克隆抗体（ＭｃＡｓ）和抗ＢＲＶＢ６４１株（Ｐ５：Ｇ６）豚鼠高免血清（ＧＰＡＳ）中和，但不被Ｇ１０特异性Ｍ     

禽流感RT—PCR诊断法的建立

根据禽流感病毒（ＡＩＶ）Ａ／Ｃｈｉｃｋｅｎ／Ｂｒｅｓｌｉｎ／１９０２（Ｈ７Ｎ７）株的血凝素（ＨＡ）基因参考序列设计合成一对Ｈ７ＨＡ特异引物,并应用ＳＤＳ－蛋白酶Ｋ法提取病毒ＲＮＡ,建立了逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＡＩＶＲＮＡ的方法,应用此法对鸡胚培养ＡＩＶ尿囊液,ＳＰＦ感染鸡粪便进行了检测,并与琼脂扩莠试验和电镜技术作了对比,特异性试验以新城疫病毒（ＮＤＶ）,传染性氏囊病病毒（ＩＢＤ     

猪水泡病病毒主要抗原蛋白基因在大肠杆菌中的表达

将编码猪水泡病病毒（ＳＶＤＶ）主要抗原蛋白的基因片段克隆到大肠杆菌表达载体ｐＢＶ２２０的ＰｒＰ１串联启动子的下游,分别构建了重组质粒ｐＢＶ２２０－ＶＰ３（０．６ｋｂ）及ｐＢＶ２２０－ＶＰ３－ＶＰ１（约１．６ｋｂ）,表达的蛋白经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测,结果表明,表达的ＶＰ３蛋白只与猪水泡病病毒ＶＰ３特异性亚单位抗血清反应,而ＶＰ３－ＶＰ１蛋白未能成功表达。该实验为ＳＶＤＶ疫苗研究奠定了基础。     

应用葡萄球菌A蛋白协同凝集试验快速检测鸭肝炎病毒的研究

用提纯的鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）免疫家兔制备高免血清，常规方法提取ＩｇＧ，与１％葡萄球菌Ａ蛋白（ＳＰＡ）阳性菌悬液混合，以ＰＨ７．２０．２ｍｏｌ／ＬＰＢＳ作缓冲液，制成鸭病毒性肝炎（ＤＶＨ）ＳＰＡ协同凝集试验（ＳＰＡ－ＣｏＡ）诊断试剂，同时制备阴性对照试剂。用ＳＰＡ－ＣｏＡ检测人工感染致死的雏鸭肝脏、含ＤＨＶ强毒的鸭胚液、适应鸡胚的疫苗毒鸡胚尿囊毒的检出率均为１００％。用ＳＰＡ－ＣｏＡ检测强毒时，样品     

禽脑脊髓炎灭活油乳剂疫苗的研制

将ＡＥＶ－ＶＲ株接种于６日龄ＳＰＦ鸡胚卵黄囊，孵化至１６日龄时迫杀，采集鸡胚绒毛尿囊膜、尿囊液、胚体称重，研磨、离心取上清液加入福尔马林灭活，以灭菌ＰＢＳ（ｐＨ７．２）稀释成１：１、１：１０、１：２０三种浓度，加入吐温－８０制成水相，另以白油、司斑－８０和硬质酸铝煮沸灭菌制成油相，搅拌混合制成不同浓度的灭活油乳剂疫苗，分别免疫２日龄ＳＰＦ雏鸡，安全可靠．用ＡＥＶ－ＶＲ、ＡＥＶ－１１４３、ＡＥＶ－ＮＨ９３７三株混合毒做攻毒试验证明１：１稀释的灭活苗效果最好，保护率可达１００％．用ＡＥＶ－ＶＲ，ＡＥＶ－１１４３、ＡＥＶ－ＮＨ９３７及以上三株混合毒同法制成１：１浓度的灭活油乳剂疫苗，分别免疫２日龄商品雏鸡后用其相应的毒株做攻毒试验，表明该疫苗是安全的，而且可使免疫鸡抵抗ＡＥＶ的感染，具有良好的免疫效果．     

PCR检测鸡减蛋综合征病毒

根据已报道的鸡减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）病毒ＤＮＡ序列，设计合成了１对引物，建立了ＥＤＳ－７６病毒的双温式聚合酶链反应（ＰＣＲ）诊断方法。该方法对ＥＤＳ－７６病毒长春株、河南株和广东株扩增结果均为阳性；而对致死鸡胚孤儿病毒（ＣＥＬＯＶ）、鸡病毒性关节炎病毒（ＶＡＶ）、鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）、鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）和鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）的扩增结果均为阴性。可检测ＥＤＳ－７６病毒ＤＮＡ为０．３×１０－４ｐｇ。结果表明该方法特异且敏感。此外，将常规的三温式ＰＣＲ的操作规程改为双温式，反应体积由常规５０～１００μＬ改为２０μＬ，使其更加快速、简便、经济     

新城疫病毒弱毒株分子生物学特性的研究

于１９９６年从长春地区一养鸡场分离到一株新城疫病毒（ＮＤＶ长春株）,经过病毒生物学特性的研究表明该ＮＤＶ毒株为弱毒株。将ＮＤＶ长春株纯化培养后,提取病毒ＲＮＡ,经ＲＴ－ＰＣＲ扩增Ｆ基因,并测定出Ｆ基因的全部核苷酸序列为１７５８ｂｐ,编码有５５３个氨基酸残基。与国内外发表的部分ＮＤＶ病毒的强毒株和弱毒株的相同序列进行比较,其核苷酸同源性在８８．２％￣９６．７％之间,氨基酸同源性在９０．１％￣９８．１％之间,并与所有弱毒株Ｆ蛋白裂解位点区（１１２￣１１７）氨基酸序列Ｇｌｙ－Ａｒｇ／Ｌｙｓ－Ｇｌｎ－Ｇｌｙ／Ｓｅｒ－Ａｒｇ－Ｌｅｕ相同,从基因和分子水平上进一步证明ＮＤＶ长春株为ＮＤＶ弱毒株。