东海原甲藻钙调蛋白的分离纯化及鉴定

以东海原甲藻（Prorocentrum donghaiense Lu）为材料,经热变性、离心处理,上清液依次经DEAE纤维素阴离子交换层析和苯基．Sepharose CL．4B疏水层析分离纯化钙调蛋白（CaM）．SDS—PAGE和Westem blot检测结果显示：东海原甲藻中CaM的相对分子质量为16ku．采用该实验方法首次有效地从海洋浮游植物东海原甲藻中分离纯化出钙调蛋白．     

钙、钙调蛋白与植物的有性生殖

钙、钙调蛋白作为信号转导因子，在植物生长发育过程中起着十分重要的作用，在植物有性生殖过程中，钙，钙调蛋白的分布也发生一系列的变化，综述了植物有性生殖过程中的动态，并介绍了一些广泛运用于钙，钙调蛋白研究的方法。     

猕猴桃钙调蛋白cDNA的克隆及测序

以“秦美”猕猴桃果实呼吸跃变初期ｃＤＮＡ第一链为模板，参考大麦钙调蛋白基因序更合成５端和３端引物，利用多聚酶锭式反应（ＰＣＲ）合成了完整的猕猴桃钙调蛋白ＣＤＮＡ，克隆并测定了其全序列。结果表明，猕猴桃钙调蛋白基因读码框架内序列由４４４个核苷酸组成，共编码１４８个氨基酸，且与植物领域里发表的大麦及苜蓿的钙调蛋白基因有很高的同源性。在核苷酸序列古与大麦有８６．１６％的同源性，与苜蓿有８５．６９％的同源     

木薯钙调蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备

钙调蛋白(CaM)作为重要的抗逆信号转导蛋白,在调控木薯抗逆境和块根采后生理腐烂中起重要作用,为给快速检测木薯在不同生长环境中CaM蛋白的表达水平提供优良抗体,克隆木薯CaM基因并将目的基因插入原核表达载体,经Escherichia coli表达并纯化,用纯化的融合蛋白ACP-CaM免疫Balb/C小鼠,间接ELISA测定小鼠血清效价后,取小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选能产生抗CaM单克隆抗体的杂交瘤细胞株,用Western blot、ELISA等方法对制备的单克隆抗体进行初步鉴定。Western blot分析结果显示原核表达重组质粒在E.coli中能高效表达CaM,免疫小鼠后取效价高的2#小鼠脾细胞和SP2/0细胞融合,共获得7株效价均达到106以上、能稳定分泌抗CaM抗体的细胞株,这7株单抗与淀粉磷酸化酶、His、BSA均无交叉反应,4D5株与标签蛋白ACP有交叉反应,表明其余6株均为CaM特异性抗体;抗体亚型鉴定结果显示7株单抗均为IgG型抗体。     

猕猴桃钙调蛋白cDNA的克隆及测序

以“秦美”猕猴桃果实呼吸跃变初期ｃＤＮＡ第一链为模板，参考大麦钙调蛋白基因序列合成５′端和３′端引物，利用多聚酶链式反应（ＰＣＲ）合成了完整的猕猴桃钙调蛋白ｃＤＮＡ，克隆并测定了其全序列。结果表明，猕猴桃钙调蛋白基因读码框架内序列由４４４个核苷酸组成，共编码１４８个氨基酸，且与植物领域里发表的大麦及苜蓿的钙调蛋白基因有很高的同源性。在核苷酸序列上与大麦有８６．１６％的同源性，与苜蓿有８５．６９％的同源性，其编码的氨基酸与大麦和苜蓿的不同分别只是一个氨基酸的差异，同源率高达９９．３％．     

钙处理对苹果梨叶片钙调蛋白含量及过氧化物酶、多酚氧化酶活性的影响

以延边地区苹果梨树为试材,探索苹果梨树体生长期进行钙处理后对叶片钙调蛋白(CaM)含量及POD、PPO活性的影响。结果表明:钙处理对苹果梨叶片的CaM含量及POD、PPO活性有明显影响。其中幼果期、果实迅速膨大期、果实成熟期3个时期都喷施质量分数为0.5%CaCl2+20 mg/L NAA的处理对增加叶片CaM含量的效果最好,果实迅速膨大期喷施质量分数为0.5%CaCl2对降低叶片POD、PPO活性的效果最好。     

DON暴露对雏鸡神经递质及钙调蛋白含量的影响

【目的】通过DON暴露体内试验,根据雏鸡脑组织中神经递质含量及钙调蛋白(CAM)含量的变化,研究DON对雏鸡的神经毒性作用。【方法】选取120只健康1日龄海兰蛋鸡(公)预饲1周后,按单因素试验设计随机均分为DON低、中、高剂量组和对照组,对照组和试验组饲喂相同的全价日粮。DON低剂量组、中剂量组和高剂量组分别按采食量中含DON 0.27,1.68和12.21mg/kg的剂量灌胃,对照组灌服等量的生理盐水。试验从第8天开始,每隔7d染毒1次,共染毒5次。试验期为36d。试验结束时,每组随机屠宰20只鸡,迅速取出脑组织,检测神经递质含量和CAM含量的变化。【结果】经高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FD)检测,雏鸡脑组织中未发现5-羟色胺吲哚乙酸(5-HIAA);与对照组相比,DON高剂量组雏鸡脑组织中去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)含量显著升高(P0.05),而多巴胺(DA)含量显著降低(P0.05)。与对照组相比,DON中、高剂量组雏鸡神经细胞内游离钙([Ca2+]i)浓度和脑组织中CAM含量显著降低(P0.05),不同DON剂量组CAM mRNA基因相对表达量均显著降低(P0.05)。【结论】DON暴露可引起雏鸡神经钙稳态变化,并影响部分神经递质的分泌,对雏鸡具有一定的神经毒性作用。     

巴西橡胶树钙调蛋白基因的克隆和表达分析

以拟南芥和杨树的钙调蛋白氨基酸序列为探针,对橡胶树转录组数据库进行搜索,并设计引物进行PCR扩增,得到7个橡胶树钙调蛋白基因的c DNA序列,命名为Hb Ca M1-7。序列分析结果发现,Hb Ca M1-7的CDS序列均为450 bp,编码149个氨基酸,分子量为16.8 ku,等电点为3.95。其中,Hb Ca M1-6间氨基酸同源性为100%,Hb Ca M7与其他成员之间的氨基酸同源性为98%。在基因结构组织方面,Hb Ca M1-7均为一个内含子,且内含子的插入位置相同,但内含子的长度明显不同。从氨基酸序列同源性和进化关系分析结果可看出,钙调蛋白基因家族在进化上非常保守。在表达方面,Hb Ca M1-6在各组织中均有表达,除了Hb Ca M3在根中表达丰度相对较高,其他成员均在胶乳中表达丰度相对较高,而Hb Ca M7在各组织中的表达均比较低;乙烯利处理后,Hb Ca M2-7的表达均有一定的上升趋势,而在叶片发育过程中Hb Ca M1-5碷呈明显下调表达。由此可见,橡胶树钙调蛋白与橡胶树叶片发育、胶乳乙烯信号通路具有一定的相关性。     

荞麦蛋白复合物对糖尿病小鼠降血糖作用的研究

采用不同剂量四氧嘧啶制备糖尿病小鼠模型,造模后测定小鼠血糖值,确定小鼠最佳四氧嘧啶腹腔注射给药量为100 mg/(kg·d).以不同剂量的荞麦蛋白复合物灌胃糖尿病模型小鼠并检测小鼠空腹血糖及血浆胰岛素,确定荞麦蛋白复合物最佳灌胃剂量为0.534 g/(kg·d),此剂量对糖尿病小鼠的降血糖作用最为明显.     

河南蜂胶对血糖的调节作用研究

[目的]研究河南蜂胶调节血糖的功能作用。[方法]将糖尿病造模成功的小鼠随机分为模型组、阳性对照组和高、中、低3个蜂胶剂量组;另取一组为正常对照组,观察河南蜂胶对正常小鼠及糖尿病小鼠空腹血糖的调节作用。[结果]与糖尿病模型组相比,蜂胶能明显降低糖尿病小鼠的空腹血糖水平,对正常小鼠血糖没有影响。[结论]河南蜂胶具有降血糖的功能作用。     

熊果酸葡萄糖酯的制备及降血脂作用研究

制备熊果酸葡萄糖酯,对其降血脂作用进行研究。采用ICR小鼠作为实验动物,建立高血脂动物模型,然后饲喂熊果酸葡萄糖酯,探讨熊果酸葡萄糖酯的降血脂作用。结果表明:熊果酸葡萄糖酯组小鼠的血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和动脉硬化指数(AI)均不同程度低于高脂模型组,而高密度脂蛋白(HDLC)却非常显著高于高脂模型组。熊果酸葡萄糖酯具有显著的降血脂保健作用。     

小米糠膳食纤维调节血糖和血脂功能的研究

以小米糠膳食纤维为原料,通过测定空腹血糖、糖耐量、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等指标,研究了小米糠膳食纤维对血糖和血脂的调节作用,结果表明,与对照组比较,低、中剂量组空腹血糖值差异极显著(P＜0.01),高剂量组差异显著(P＜0.05);低剂量组在0、0.5、2h时的血糖值和曲线下面积均低于模型对照组,且差异显著(P＜0.05);中剂量组能显著降低血清总胆固醇水平(P＜0.05);各剂量组对甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇的含量影响不大.     

喹乙醇对小鼠血细胞及骨髓微核率的影响

给小鼠灌喂不同剂量喹乙醇,按毒理学方法检测小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率,并在饲养30d后测定血液中红细胞、白细胞、网织红细胞数.结果表明,当剂量超过120 mg·kg-1·d-1时,骨髓微核率显著或极显著升高,网织红细胞数显著或极显著降低;剂量为1 200 mg·kg-1·d-1时,红细胞数较阴性组和正常组显著降低;各试验组白细胞数虽稍有降低但差异不显著.说明大剂量喹乙醇不但具有遗传毒性,而且可能会抑制小鼠骨髓的造血机能,导致其贫血.     

氯霉素对肉鸡血糖影响的研究

研究了不同浓度的氯霉素对肉鸡血糖水平的影响。含0.06%,0.10%和0.15%氯霉素的饲料喂养肉鸡,使30日龄鸡血糖值明显下降,而使60日龄鸡血糖值明显升高,血清白蛋白水平都增加。血液中氯霉素浓度随饲料中氯霉素的剂量、肉鸡的生长率以及采食量的增加而升高。结果表明:饲料中添加氯霉素以不超过0.06%为宜;不同浓度的氯霉素对日龄相同的肉鸡血糖水平的影响相似。在慢性应激反应中,小鸡与成鸡血糖的改变,可能通过不同的途径。     

苹果多酚及其活性单体的降血糖作用研究

[目的]探讨苹果多酚及其功能活性成分降血糖的作用功效。[方法]将KKAy小鼠随机分为模型组、药物治疗组,通过饲喂高脂饲料构建糖尿病模型,按高、中、低剂量给鼠灌胃,并选10只C57BL/6J小鼠为正常对照组,连续灌胃10周。10周后测定血清空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS),并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。[结果]与正常对照组比较,模型组FBG、FINS、HOMA-IR明显升高;与模型组比较,治疗组FBG、FINS、HOMA-IR明显降低;各种药物比较,根皮苷具有最显著的功效。[结论]苹果多酚中的活性物质,尤其是根皮苷具有显著的降低血糖的功效。     

低聚原花青素对STZ糖尿病小鼠血糖水平的影响

目的:观察低聚原花青素(OPC)对糖尿病小鼠血糖的影响。方法:用低聚原花青素对昆明小鼠进行口服毒性限量试验;采用STZ小剂量多次注射方法诱导糖尿病小鼠模型;实验组分别按50、100、150 mg/kg体质量灌胃给予OPC,模型组和正常对照组则灌胃给予等容积生理盐水,连续4周;观察小鼠的一般情况、动态监测实验动物外周血中血糖含量。结果:小鼠口服OPC限量试验结果>5 g/kg体质量,证实OPC安全、无毒性作用;成模小鼠的空腹血糖水平为18.37±2.13 mmol/L,明显高于正常对照组(P<0.01),并出现三多一少的糖尿病症状,表明糖尿病模型制作成功;3个OPC给药组糖尿病小鼠的血糖水平升高趋势得到控制,血糖随着给药时间延长而下降,与模型组比较,具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:OPC具有控制糖尿病小鼠血糖升高幅度,降低血糖水平、干预糖尿病发生发展进程的作用。     

铁木周果实对大鼠血糖血脂的影响

[目的]研究铁果实的降血糖、降血脂作用。[方法]通过给正常大鼠饲喂高糖高脂饲料,建立高糖高脂大鼠模型;将实验大鼠随机分为正常组、高糖脂模型组、高糖脂模型对照组、铁果实粉低、中、高剂量组,测定各组大鼠的血糖(GLU)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、载脂蛋白A1(APO-A1)、载脂蛋白B(APO-B)、超敏C反应蛋白(HsCRP)等各项指标。[结果]饲喂铁果实粉后高糖脂模型大鼠的GLUT、CT、G和LDL-C等均显著降低(P<0.01)。[结论]铁果实粉具有明显的降血糖和降血脂作用。     

山药汁对糖尿病大鼠血糖的影响

探讨山药汁对糖尿病大鼠血糖的影响,为山药的精深加工与产品开发提供实验参考。以大鼠静脉注射四氧嘧啶(40 mg.kg-1bw)建立糖尿病模型,以山药块茎、山药水煎剂、山药汁高、中、低剂量为不同处理,每日灌胃一次,持续9周,测定空腹血糖和胰岛素及糖化血红蛋白率。山药汁可显著降低糖尿病大鼠的血糖水平和糖化血红蛋白率,并使胰岛素分泌水平具有明显的恢复性升高;山药块茎和水煎剂虽然也有上述功能活性,但显著低于山药汁。