单环刺螠虫消化道组织学和细胞学

对单环刺螠虫(Urechis unicoinctus VonDrasche)消化道的结构进行了组织学和细胞学观察。单环刺螠虫消化道可分为咽、食道、嗉囊、砂囊、胃、中肠、呼吸肠、直肠和排泄腔。咽、食道和直肠管壁由内向外分为粘膜层、粘膜下层、肌层和外膜，嗉囊、砂囊、胃、中肠和呼吸肠壁仅由粘膜层和外膜组成。除食道外，胃之前的消化道及直肠上皮细胞均有发达的纤毛，中肠和呼吸肠上皮主要为微绒毛。消化道上皮主要分为3类细胞，第1种为柱状上皮细胞；第2种为粘液细胞；第3种为分泌细胞。粘液细胞和分泌细胞散布于柱状上皮细胞之间，且结构和数量随部位而异：粘液细胞在咽、食道、嗦囊、胃、中肠和直肠上皮中有较多的分布，分泌细胞在砂囊、胃、中肠和呼吸肠中数量较多。     

单环刺螠生活史研究

有关单环刺发育周期的研究，国内外迄今未见专门报道。本文报道了烟台沿岸单环刺早期胚胎发育、各期幼虫形态标志、幼和成的形态特征的研究结果。     

单环刺螠虫精子生物学特性和环境因子的关系

解剖成熟的单环刺虫(Urechis uniconctus)成体,直接从肾管中取出新鲜精子进行实验。结果显示,单环刺虫精子为鞭毛型,头部最前端为顶体,呈奶嘴状;细胞核近似杯状,核内有核泡。中段由一个大环状线粒体组成。尾部轴丝为典型的“9+2”型结构。精液的pH值为6.5±0.2;精子密度为(4.2±0.2)×109/mL;新鲜精子经过滤海水(10 cm厚的脱脂棉过滤)的激活率为86.4%±6.3%,涡动时间为(17.0±6.9)min,寿命为(24.4±7.8)min。室温(20±1)℃下,精子保存12 h活力无显著变化,但至24 h活力明显下降;低温(4℃)可明显延长精子活力的保存时间,可保存21 d;盐度和酸碱度对精子的激活率、涡动时间和寿命都有较大的影响,精子适宜的盐度为20~30,最佳盐度为25;适宜的酸碱度为7~9,最佳为8。因此,低温可以较长时间的保存单环刺虫的精子,在盐度稍低或偏碱性的海水中精子活力较高。     

单环刺螠的繁殖生物学

运用实验生态学和组织学方法研究了单环刺螠的性比、性腺指数、繁殖力、胚胎与胚后发育等繁殖生物学特征,并采用正交实验法分析了单环刺螠受精率和孵化率的最佳环境条件,为单环刺螠的人工增养殖提供科学依据。结果显示,单环刺螠雌、雄比例为1∶1.17,雄性略多于雌性。成熟卵径为(145.16±1.70)μm×(141.27±1.94)μm,处于第1次成熟分裂前期。绝对繁殖力为111 800～720 488(449 684±265 905)粒,相对繁殖力为2 214～12 702(6 849±4 854)粒,怀卵量与体质量呈显著正相关。生物学最小型体长约7 cm,体质量为11.21 g。精子密度为(5.88±0.52)×109个/mL,雄性个体平均精子数为(2.41±0.73)×1010个/只。雌性性腺指数在繁殖季节4—5月份呈现2个峰值,表明单环刺螠为分批产卵类型。在盐度25、水温15°C的条件下,胚胎发育经20～24 h孵化。组织学研究表明,单环刺螠为间黄卵,进行不等全裂,且有螺旋卵裂的特征,形成偏极囊胚,原肠作用方式为外包和内陷。胚后发育经担轮幼虫(孵化后1～10 d)、体节幼虫(11～20 d)、蠕虫状幼虫(21～30 d)发育为幼螠。正交实验结果表明,单环刺螠受精率的最佳环境条件为温度25°C、盐度35、pH 8～9;孵化率的最佳环境条件为温度15°C、盐度25、pH 8～9。     

单环刺螠精巢年周期发育及精子发生

采用组织学方法观察了单环刺螠(Urechis unicinctus)精巢的形态结构及其年周期发育,并利用超微技术观察了精子的发生过程。结果表明,单环刺螠的精巢呈条带状,位于虫体尾部,两端通过肌束分别与呼吸肠管壁外侧和体壁内侧相连。精巢由生精细胞团与结缔组织组成,结缔组织位于精巢中央,精原细胞团分布于结缔组织外周,精母细胞团散布于结缔组织内,各级精母细胞脱离精巢落入体腔液中,历经精母细胞、精细胞,最后形成精子脱离细胞团进入肾管。根据精巢的组织学特征,将单环刺螠的精巢年周期发育划分为增殖期、生长期、成熟期、排放期和休止期5个时期。光镜和电镜下观察了精巢和体腔液中精子发生各时期的结构变化,包括细胞核形态的变化、顶体发生以及尾部的形成。本研究揭示了单环刺螠的精巢发育特点、精子发生历经的场所和分化特征。     

单环刺螠受精过程的细胞学观察

利用组织学和荧光显微镜对单环刺螠(Urechis unicinctus)受精过程中精子入卵以及核相变化进行了观察.结果表明:单环刺螠成熟卵呈卵圆形,核相处于生发泡尚未破裂的第1次成熟分裂前期.在(21±1)℃时,精卵混合后约5 min,精子由卵偏向植物极一侧入卵,受精膜开举起,继而精核发生第1次膨胀.直至受精后约25 min,受精膜完全举起;受精后10～50 min,卵核相继完成二次成熟分裂,分别形成第一极体和第二极体;受精后50～70 min,精核卵核分别膨胀,形成雄原核和雌原核,进而相向迁移,最后在卵的中央联合形成合子核.受精后70～90 min,受精卵完成第1次卵裂,形成2个大小相等的卵裂球.单环刺螠受精全过程历时约70 min,略长于多数海洋无脊椎动物的受精持续时间.本研究旨在为今后单环刺螠人工育苗和新品种的培育提供基础资料.     

单环刺螠增养殖生物学的研究

单环刺螠个体鲜出肉率大致为冬季39～47％,春季17～27％。食性为滤食性,以水中悬浮性颗粒为食。气温7℃,干露时间持续72h．均能成活。生活水温是0～30℃,临界高温32．5℃,临界低温-4℃。生活的盐度范围是15～36,适宜盐度范围24．94～35．77。pH值的耐受范围是4．46～9．5,适宜范围7.5～9．42。在溶解氧含量达1．14mg／L时,活动正常。     

单环刺螠消化道的发生和分化

用组织学、组织化学和电镜技术对单环刺螠（Urechis unicinctus）消化道的发生及分化进行研究。结果表明，单环刺螠消化道起源于原肠胚期内陷而成的原肠腔；至早期担轮幼虫时期，消化道连通，开始摄食，此时据管腔直径不同消化道可分为口、食道、胃、中肠及后肠。附着变态后，其消化道在结构及功能上都有了明显的发育与分化。至蠕虫状幼虫时期。食道、胃及后肠已出现黏膜下层及肌层。嗉囊与砂囊可明显区分。中肠已产生肌纤维的分化，呼吸肠由中肠分化而来，其胞体细长，且核质比较小，可与中肠明显区分。至幼螠时期，食道前端产生了咽部的分化，至此消化道各部位在结构及功能上都与成体有了很大的相似性。即由口、咽、食道、嗉囊、砂囊、胃、中肠、呼吸肠、后肠和肛门组成。组织化学研究结果表明，随着发育，消化道各部位分别呈现不同的碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、脂酶、ATP酶、非特异性酯酶及多糖类物质活性。     

单环刺螠体腔液抑菌特性研究

自体质量(18.03±1.35)g单环刺螠中抽取体腔液,于4℃、3000 r/min(离心半径13.5 cm)离心20 min,取体腔液上清液,再将离心所得血细胞沉淀用无菌生理盐水重悬后,经超声波破碎仪4℃破碎5 min,取体腔细胞破碎液上清液,以牛津杯法和生长曲线抑制法检测单环刺螠体腔液上清液和体腔细胞破碎液上清液对...     

单环刺螠规模化人工育苗技术

概述了人工培育单环刺螠(Urechis unicinctus)苗种的技术要点,包括亲螠的选择、采卵与授精、孵化及胚胎发育、幼体培育、投放附着基及苗种管理等。     

pH、温度和盐度对单环刺螠消化酶和溶菌酶活力的影响

采用L25(56)正交试验法测定了不同pH(6、7、8、9、10)、温度(10、15、20、25、30℃)和盐度(15、20、25、30、35)对体质量为(71.2±8.5)g的单环刺螠肠蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和脂肪酶活力的影响,以及不同盐度对单环刺螠血液溶菌酶活力的影响。试验结果表明,单环刺螠肠消化酶活力的最适环境条件分别为,蛋白酶:pH 8、温度30℃、盐度35;淀粉酶:pH 9、温度25℃、盐度25;纤维素酶:pH6、温度30℃、盐度35;脂肪酶:pH 6、温度25℃、盐度30。盐度15和20两组单环刺螠血液溶菌酶活力均先降后升再降,而盐度30和35两组则先升后降。至处理第4d,各试验组溶菌酶活力依次为:盐度3025352015,盐度15和20两组溶菌酶活力显著低于盐度较高试验组(P0.05)。盐度25~35、pH 6~9为单环刺螠适宜的环境条件,高温(25~30℃)下其消化酶活力较高,而低盐度(15~20)下其消化酶活力和免疫能力明显降低。     

Effects of stocking density on the growth performance,physiological response and intestinal microbiota of juvenile Echiura worms (Urechis unicinctus)

Aquaculture of the Echiura worm Urechis unicinctus has developed rapidly in recent years. However, the artificial cultivation technology remains to be perfected. In this study, the effects of stocking density on the growth performance, physiological responses and intestinal microbiota of U. unicinctus juveniles were evaluated. Juvenile worms were randomly stocked at densities of 200 U (U. unicinctus/m³), 500 U, 1,000 U and 2,000 U, in aquariums. The results indicated that the contents of triglycerides, glucose, total cholesterol, lactic acid, alkaline phosphatase, acid phosphatase and aspartate transaminase in the coelomic fluid of U. unicinctus juveniles were significantly enhanced with increasing stocking density. The digestive enzyme activities increased with increasing stocking density from 200 U to 1,000 U, before exhibiting a significant decrease in the 2,000 U group. In contrast, the antioxidant capacity of U. unicinctus juveniles was suppressed under high stocking density conditions. In case of the intestinal microbiota of U. unicinctus juveniles, Actinobacteria were more abundant in the 200 U group; SJA15, Gluconobacter and OP81 were higher in the 1,000 U group; Burkholderiales and Limnohabitans were enriched in the 2,000 U group. The highest and lowest survival rates of the U. unicinctus juveniles were recorded in the 500 U and 200 U groups respectively, and high stocking densities negatively affected the individual growth performance. In summary, due to the highest survival rate and appropriate growth performance and physiological responses, 500 U was considered to be the optimal stocking density for the cultivation of U. unicinctus juveniles.     

高体革鯻仔稚鱼的生长和发育

通过观察、描述和拍照对高体革鯻(Scorturn barcoo)仔、稚鱼的生长和发育进行了研究,以了解高体革鯻仔、稚鱼的发育规律,为规模化苗种培育工作提供基础数据.在水温26.6～29.7℃的培养条件下,高体革鯻初孵仔鱼全长为(2.65±0.19)mm(n=20),其卵黄囊体积为(0.74±0.15)mm3(n=20),油球体积为(0.07±0.17)mm3(n=20).1日龄仔鱼,眼睛有色素沉积,鳃弓显现;2日龄仔鱼,嘴可张开,肠道会蠕动,鳔可见;3曰龄仔鱼,开口摄食,个体发育进入仔鱼后期;20日龄,运动器官发育完全并生出鳞片,个体发育进入稚鱼期;23日龄,稚鱼侧线鳞可见;28日龄,全身披鳞,个体发育进入幼鱼期.对仔稚幼鱼全长和日龄进行回归,其生长模型为TL=-0.0003 D3 0.0339 D2 0.1992 D 3.4288(R2=0.9913).体重与体长的相关式为W=0.0001L2.5059(R2=0.9976).体高与体长的相关式为L=0.0005H3-0.0353H2 1.0125H-4.620(R2=0.993).     

单环刺虫益人工育苗技术的研究

在单环刺自然繁殖期，以诱导法或剖取法获取精、卵，在水温１５～２２℃下，进行授精、孵化、幼虫培育。对幼培育过程的设施、理化条件、管理技术等进行了研究试验。结果：１９９４年，单位水体平均培育幼１６８４个／；１９９５年，单位水体平均培育幼４０６万个／。经专家鉴定，这项成果达国际先进水平