新型DBI试剂盒在食品微生物生化鉴定中的应用

考查新研制的克罗诺杆菌属和单增李斯特氏菌干制生化鉴定(DBI)试剂盒在微生物生化鉴定中的应用效果。通过标准菌株的比对试验和样品分离菌株的鉴定,比较DBI试剂盒与传统微量生化试验管的鉴定结果,并与API20E细菌鉴定系统比对。结果表明,DBI试剂盒鉴定标准菌株的准确率达到100%;对样品中分离的阪崎克罗诺杆菌和单增李斯特氏菌疑似菌株,3种鉴定方法的生化反应结果完全一致。DBI试剂盒能准确、快速、简单地进行生化鉴定。     

应用PCR技术检测微生物肥料产品的初步研究

微生物肥料产品中的微生物种类多种多样．将各种微生物准确鉴别出来是产品检测和质量判定的依据。常规的检测方法是根据菌落、菌体特征结合菌种鉴定材料进行判断．而面对表型特征不明显或含有多种微生物的样品时容易出现误判现象．此时必须结合生化试验或一些仪器设备对菌种进行辨认。传统的生理生化试验耗时费力．BIOLOG快速鉴定系统、脂肪酸分析法等测定繁琐、成本高．这些方法不能满足肥料检测中的快速、准确的需要。     

利用16S rRNA快速鉴定双歧杆菌的研究

为了建立从生物制品和人粪便中快速分离鉴定双歧杆菌的方法,利用双歧杆菌16S rRNA特异性扩增引物,通过PCR技术对双歧杆菌制剂和人粪便中分离菌种进行快速鉴定;同时结合革兰氏染色、穿刺实验、糖发酵实验等技术对分离的双歧杆菌的生理生化等特征进行了研究。琼脂糖电泳结果表明,利用特异性扩增引物的扩增产物在1 500 bp处出现特异性条带,革兰氏染色、糖发酵试验等也验证了分离菌种为双歧杆菌。说明利用16S rRNA的PCR方法鉴定双歧杆菌具有快速、灵敏、操作简单等优点,可以直接将双歧杆菌快速鉴定到属。     

人红细胞葡萄糖—6—磷酸脱氢酶变异型—Gd(一)湛江型的鉴定及分离纯化

利用自制合成NADP—Sepharose4B亲和胶,分离纯化了1例人红细胞葡萄糖—6—磷酸脱氢酶变异型,并进行了生化特征的鉴定。其生化特性与国内已报道的变异型不同,命名为Gd(—)湛     

入侵性实蝇鉴定分类方法的研究进展

系统分类学不但是生物多样性和物种进化的研究主题,对农业害虫管理或其他生物应用领域也具有重要意义。目前,入侵性实蝇的系统分类问题严重阻碍了果蔬产品的市场准入、贸易和检验检疫。为提供最新的分类鉴定信息以及多样化、综合性分类方法,从形态学、细胞学、分子生物学、生化分类鉴定等方面介绍入侵性实蝇近缘种、复合种和隐蔽种鉴定分类方法的研究进展,同时介绍各种鉴定分类方法的改进及新型的分子生物辅助手段,确保入侵性实蝇分类鉴定工作达到快速、高效、准确的效果。     

奶牛隐性乳房炎志贺氏菌16S rRNA的扩增及序列分析

从牛奶中分离引起隐性乳房炎的病原菌,通过细菌培养、形态鉴定、生理生化试验等,对引起奶牛隐性乳房炎的病原菌进行分离及鉴定,并对分离病原菌16S rRNA序列进行PCR扩增及分析。结合传统生理生化试验和分子鉴定,并参照《常见细菌系统鉴定手册》鉴定为志贺氏菌。通过提取DNA及16S rRNA序列的分析,得到该分离菌与GenBank上发表的志贺氏菌同源性为99.9%。     

浅谈玉米种子纯度鉴定技术

随着科学技术的不断发展,玉米种子纯度鉴定技术由传统的形态鉴定、田间种植鉴定,逐步发展为生化指纹鉴定和分子标记鉴定。文章对玉米种子纯度鉴定的鉴定方法及其应用作了介绍,并分别讨论了各种方法的优缺点。从而使玉米种子纯度鉴定技术变得简便、快速、准确。     

水产品中8株特殊生化型奇异变形杆菌的分离鉴定

[目的]探讨水产品中8株特殊生化型奇异变形杆菌的分离与鉴定。[方法]从8个批次的鱼粉和冻黄鳍金枪鱼样品中分离到8个菌株,通过表型观察、生化鉴定和16s rDNA及rpoB系统进化分析对其进行了鉴定,并对细菌鉴定的方法选择、减少变形杆菌检测鉴定偏差进行了探讨。[结果]从水产样品中分离的8个菌株经鉴定确认为奇异变形杆菌,且它们的生化特征与典型菌株均存在差异。其中,64285等6个菌株鉴定为KCN阴性的奇异变形杆菌,64284菌株鉴定为KCN阴性、木糖阴性的奇异变形杆菌,20932菌株鉴定为鸟氨酸脱羧酶阴性、KCN阴性的奇异变形杆菌,它与典型的奇异变形杆菌相差较大,是一种非常罕见的生化型。[结论]该研究为变形杆菌的准确鉴定以及预防因其引起的疾病提供科学依据。     

食品能力验证样品中沙门氏菌的分离与多相分类鉴定

为沙门氏菌的快速检测与鉴定提供参考，从传统标准检测方法、特异性PCR、分子系统发育3个层面，其中传统标准检测方法基于食品安全国家标准GB 4789.4-2016《食品微生物学检验沙门氏菌检验》、特异性PCR基于invA基因、分子系统发育基于16S rDNA,对能力验证(CFAPA-805)样品进行沙门氏菌的分离鉴定。结果表明：3种检测方法结果一致，样品341中检出沙门氏菌，其中生化鉴定、血清学鉴定与分子系统发育鉴定结果显示，此次阳性样品中的沙门氏菌为沙门氏菌生化群(Ⅰ),肠炎沙门氏菌肠炎亚种，血清分型为O:9,12:H:g, m。本次实验室的能力验证结果为“满意”,肯定实验室沙门氏菌检测能力。通过比较，特异性PCR鉴定可以确定沙门氏菌是否检出，生化鉴定、血清学鉴定和分子系统发育鉴定可以确认沙门氏菌的生化群、血清分型与分子分型。     

抗稻瘟病菌的海绵放线菌Hmp-S14的生物学特性及其鉴定

从大连海域的繁茂膜海绵(Hymeniacidon perleve)中分离到一株具有抗稻瘟病菌(Magnaporthe gmea)活性的放线菌Hmp—S14菌株，对分离菌株的形态特征、培养特征、生理生化特征、细胞壁化学组分、16SrDNA序列进行了系统的研究。在系统发育树中，Hmp—S14菌株与Streptomyoes setonii在同一分支中，二序列相似性为98％，结合形态、生理生化和细胞壁化学组分分析结果，将其鉴定为Streptomyces setonii。     

高温胁迫下8个观赏海棠品种的耐热性比较

以8个欧美观赏海棠品种为材料,在高温胁迫下利用生理生化指标对其耐热性进行评价。结果发现,利用持续7 d在36~38℃高温胁迫后的生理生化指标进行主成分分析和系统聚类可有效区分不同观赏海棠品种的耐热性,并能对其耐热性进行有效评价。品种B4、B10耐热性强,品种A2、B5耐热性较强,品种B7、B19耐热性中等,品种A4、B9耐热性弱。结果表明,对高温胁迫后的生理生化指标进行主成分分析和系统聚类可以作为快速鉴定观赏海棠耐热性的一种方法。     

应用VITEK2全自动微生物鉴定系统检测养殖用水中的大肠杆菌

采用国家相关的检验养殖用水标准方法、API 20E微生物生化试验、VITEK2全自动微生物鉴定系统,对养殖用水样品进行了大肠杆菌的检测方法比较和鉴定。VITEK2鉴定系统自动打印的实验报告和API 20E微生物生化试验的判读比对结果显示:3个参试样品分别为阴沟肠杆菌、产气肠杆菌和大肠埃希菌,VITEK2与API 20E两种方法的鉴定结果符合率100%。从实验可知,利用VITEK2全自动微生物鉴定系统,对被污染的养殖用水中细菌源的鉴定速度快,方法简便,结果准确、实用。此方法也可用于各种污染环境及食品污染源的监测和鉴定。     

三峡库区猪致病性大肠杆菌分离鉴定及药敏试验

从三峡库区10个区的猪场采集仔猪腹泻粪便等病料112份,经过细菌分离和生化鉴定分离到82株猪源性大肠杆菌,其中75株为致病性大肠杆菌。对82株猪大肠杆菌进行了15种抗生素敏感性试验,结果发现,分离菌株对15种抗菌药物均有不同程度的耐药。     

芽胞杆菌资源库管理系统的构建

建立芽胞杆菌菌种资源库的收集保藏系统和以脂肪酸、rRNA和传统生理生化特性的细菌鉴定系统,以气质联用、液质联用鉴定结果构建细菌次生代谢物库;在此基础上建立一整套针对作物病害、虫害、线虫为害以及杂草的微生物农药候选菌株的筛选评价系统。通过建立这套系统,能够大大加快菌株的筛选,尽快将有用的菌株从保存转入前期研究阶段,对存在重大潜在应用价值的菌株的生理生化、发酵培养等特性进行基础性研究,使其能够尽快地进入开发阶段,为相关菌株的产业化做好充分的准备。     

FLUS—ISO快速鉴定杂交水稻种子纯度技术

成果持有单位:仲恺农业技术学院 湖南杂交水稻研究中心 成果主要内容:创立FLUS—ISO先进系统现代技术,能快速、准确鉴定杂交水稻原种真实性和测定种子纯度。 ① 准确率在95％以上。 ② 可检测原种真伪,真实性,种子纯度,混杂类型及种子生活力等项目。     

鏈霉菌属的一个新种、一个亚种和一个变种

我们于1979—1982年在内蒙古锡林郭勒盟、中国科学院内蒙草原生态系统定位站永久样地内进行草原土壤微生物研究时,曾分离到9株特异性较强的菌株,经过形态和培养特征、生理特征、拮抗作用等较系统的鉴定,发现其中有的菌株与已知典型种有差别,根据形态培养特征为主,生理生化为辅的原则,获得一个新种、一个亚种、一个变种。特征描述如下:     

三七细菌性叶斑病病原菌鉴定

[目的]对引起三七细菌性叶宽病的病原菌进行系统鉴定。[方法]以2011及2012年在云南文山及石林县的三七苗圃采集的三七细菌性叶斑病病株为材料,采用柯赫氏法则,检测分离菌株致病性并重新分离得到病原菌。通过病菌形态观察、致病性测定、16SrD—NA序列分析及生理生化特性分析（Biolog系统）对其进行鉴定。[结果]确定三七细菌性叶斑病病原菌为丁香假单胞菌丁香致病变种（Pseudomonas syringae pv．syringae）。[结论]该研究为三七细菌性叶瘫病菌详细鉴定的国内首报。     

传统发酵肉制品中葡萄球菌的分离、纯化和筛选

实验采用中国传统发酵肉制品作为采集样品,从中分离出具有革兰氏阳性和触霉阳性的葡萄球菌。利用平板划线纯化菌株,并采用平板半定量法,快速筛选出硝酸盐还原酶活性较大的菌株,进行H2S试验、耐酸试验、发酵葡萄糖产气试验等发酵基本试验,从中选出不产粘液、发酵葡萄糖不产气、不产H2S、不具有氨基酸脱羧酶、不产氨、15℃能还原硝酸盐、pH4.5条件下生长的菌株,生化鉴定表明具有上述条件的菌株为发酵肉制品中的优良葡萄球菌株。     

婴幼儿配方乳粉中阪崎肠杆菌检测方法探讨

通过对婴幼儿乳粉中阪崎肠杆菌的菌落形态、生化特性等方面的试验,确定采用灭菌蒸馏水(DW)前增菌、肠道菌增菌肉汤(EE)增菌、显色培养基(X--αGlcA)分离培养、再以API20E生化系统鉴定的方法为检出该菌的理想方法。     

我国高羊茅抗旱耐热鉴定研究进展

本文从生物学鉴定、生理生化鉴定、光合性能鉴定、分子辅助鉴定等4个方面对我国高羊茅抗旱耐热性能鉴定进行综述,旨在为高羊茅抗性鉴定提供参考。