家蚕丝素固定化果胶酶的研究

家蚕茧丝经高浓度氯化钙或碱溶液处理后,可制成不同形状的丝素,将这些丝素分别 胶酶通过吸附以及与戊二醛交联结合,制备了不同形状固定化酶,对固定化酶性质 的研究表明：丝素能有效地固定果胶酶;其最适ＰＨ值的为４．０,比游离酶提高０．５个单位;最适温度为６０℃,比游离酶提高了１０℃,改善了果胶酶的适应范围,同时还发现：在制备固定化酶时,戊二醛的浓度以０．２５％为好;酶浓度以３ｍｇ／Ｌ为宜。     

交联改性前后壳聚糖的纤维素酶固定效率研究

为了探讨交联改性前后壳聚糖的纤维素酶固定化效率,先将CTS季铵化,得到改性壳聚糖季铵盐(HACC),再以固定化酶量、最适温度、最适pH值和米氏常数等为指标,分析交联改性前后壳聚糖的纤维素酶固定化效率.结果为,改性壳聚糖作为载体提高了固定化酶的量,同时提高了固定化酶最适温度(P<0.05),最适pH值也有所增加(P>0.05),米氏常数分别为Km,改 =34.7 mg/L,普s=36.9 mg/L.得出结论,改性壳聚糖作为载体提高了纤维素酶的固定化效率.     

家蚕丝素固定化果胶酶的研究

家蚕茧丝经高浓度氯化钙或碱溶液处理后,可制成不同形状的丝素．将这些丝素分别与果胶酶通过吸附以及与戊二醛交联结合,制备了不同形状固定化酶．对固定化酶性质的研究表明：丝素能有效地固定果胶酶;其最适ｐＨ值为４．０,比游离酶提高了０．５个单位;最适温度为６０℃,比游离酶提高了１０℃,改善了果胶酶的适应范围．同时还发现：在制备固定化酶时,戊二醛的浓度以０．２５％为好;酶浓度以３ｍｇ／Ｌ为宜     

离子交换树脂固定化果胶酶条件的优化研究

 以离子交换树脂为载体、戊二醛为交联剂,对果胶酶进行固定化。研究了温度、pH值、时间、加酶量、戊二醛浓度、交联温度、交联时间对果胶酶固定化效果的影响。研究表明,最佳固定化条件为：温度40℃,pH 5.5,固定化6 h,加酶量0.75 mL,戊二醛交联浓度0.1%,交联温度4℃,交联时间4 h。在此条件下固定化果胶酶的酶活回收率达到80%以上。     

壳聚糖微球固定化木瓜蛋白酶的特性研究

研究了以壳聚糖微球为载体固定化木瓜蛋白酶的特性，包括其形态，外观和酶学性，结果表明：壳聚糖微球固定化木瓜蛋白酶是粒径分布范围较均匀的球形微粒，固定化酶的表现米氏常数K^appm(酷蛋白）为0.055%，是溶液酶的米氏常数Km的0．13倍，最适pH为8．0，pH稳定性在7．0左右，热稳定性在15－35℃范围内，操作半衰期为25d，该结果为壳聚糖微球固定化木瓜蛋白酶酶反应器的测试和研究提供了重要的参考价值。     

壳聚糖微球的制备及其固定化木瓜蛋白酶的研究

用来源丰富且廉价,并具有许多优良生物特性的壳聚糖为原料,以简单易行的服交联法制备壳聚糖微球,并对其性状进行和分析。结果表明：它复合了壳聚糖与高分子微球的功能,然后,以壳聚糖微球为载体,用吸附－交联的联合固定化方法制备固定化木瓜蛋白酶,并研究了木瓜蛋白酶的最佳固定化条件。结果显示：木瓜蛋白酶的最佳固定化条件是给酶量为１．９２ｍｇ／ｇ、４～８℃吸附１２ｈ,再用体积分数为０．５％的戊二醛溶于４～８℃交联     

以离子交换树脂为载体的果胶酶固定化研究

通过对广泛应用于工业上的10种吸附树脂和离子交换树脂进行果胶酶固定化载体的筛选,确定D311大孔弱碱性丙烯酸系阴离子交换树脂为固定化果胶酶的最佳载体,并对果胶酶进行固定化研究.在固定化温度为36℃、加酶量为0.8 mL/g树脂、固定化时间为5h、固定化pH值为5、戊二醛交联浓度为0.10％、戊二醛交联温度为8℃、戊二醛交联时间为6h的试验条件下,固定化酶活回收率达到了91.2％.     

阴离子交换树脂固定化果胶酶及其酶学性质的研究

以阴离子交换树脂为载体，戊二醛为交联剂，对果胶酶进行先吸附后交联的固定化，研究吸附温度、吸附pH值、吸附时间、加酶量、戊二醛浓度、交联温度、交联时间对果胶酶固定化效果的影响，同时对固定化果胶酶的特性进行了研究。研究表明，最佳固定化条件为：温度40℃，pH5．5，固定化6h，加酶量0．75mL／g树脂（浓度为1％酶液），戊二醛交联浓度0．1％，交联温度4℃，交联时间4h。酶学特性研究表明，固定化果胶酶在最适温度60℃，最适pH4．0下具有较好的操作稳定性。     

海藻酸钠与MOFs复合材料固定化果胶酶的研究

主要制备海藻酸钠与MOFs复合材料(Alg-HKUST-1)微球进行果胶酶的固定化,将海藻酸钠以注射的方式加入到含有Cu²⁺的溶液中,通过金属离子诱导自组装,制备了海藻酸钠与MOFs复合材料,其中MOFs颗粒分布均匀,嵌入在复合材料的表面上。复合材料的形状是通过控制相应的水凝胶形状来控制的。通过利用扫描电镜、FT-IR等技术分别对微球的表观及性质进行了分析。果胶酶的固定化试验主要考察了底物浓度、pH、温度、时间等对果胶酶的影响。将游离果胶酶和固定化果胶酶酶学性质进行比较,主要结论是酶的最佳催化条件为自由酶pH=3.0,固定化酶pH=3.5;自由酶的反应温度为40℃,固定化酶的反应温度为50℃;最佳反应时间为60 min。酶经过载体固定化后,其储存稳定性有所提高。     

壳聚糖固定化胰蛋白酶研究

以自制的壳聚糖为载体,以戊二醛为交联剂,制备了壳聚糖固定化胰蛋白酶。经测定该酶活性回收率达到72.7%,操作半衰期为12 d,表观米氏常数为5.88 mg/ml,最适pH值为8.0,最适温度为40℃;与游离胰蛋白酶相比,酶的耐热性和操作半衰期有明显提高,但表观米氏常数也略有增大。     

黑曲霉乳糖酶固定化前后酶学性质比较研究

[目的]为低乳糖乳制品的工业化生产提供技术支持。[方法]以阳离子交换树脂D151为载体,采用吸附交联法对黑曲霉乳糖酶进行固定化,进而研究了固定化乳糖酶的酶学特性。[结果]固定化乳糖酶和游离酶的最适温度分别为60和70℃。在低于50℃的条件下对固定化乳糖酶和游离酶进行保温处理,酶活力没有损失;在高于50℃的条件下对固定化乳糖酶和游离酶进行保温处理,其酶活力呈现下降趋势,且固定化乳糖酶的活力下降更为迅速。固定化乳糖酶和游离酶的最适pH值分别为4．5和4．0,其pH值稳定范围分别为2．5—4．5和5．0～7．0。pH=6．5时,固定化乳糖酶和游离酶的活力分别为其最适pH值下的87．5％和3．8％。固定化乳糖酶和游离酶的半衰期分剐为24和9d。[结论]在牛奶的天然pH值下,固定化乳糖酶比游离酶更适用。     

商品果胶酶(Aspergillus niger)的催化动力学研究

研究了商品果胶酶的催化动力学特性.结果表明:果胶酶的最适pH为3.8,最适温度为50℃,酶在pH 3.4~4.2区域较稳定,在pH>4.5与pH<3.0下很快失活;酶在50℃以内具有较好的热稳定性,温度升高,酶的热稳定性下降,65℃下热变性2 h,酶活力降低80%.酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得果胶酶水解果胶的米氏常数Km=(5.16±0.13)mg/mL,最大反应速度Vmax=(2.73±0.02)μg/(mL.min).Na+和K+对酶活力没有任何效应,0.1mmol/L Ca2+可使酶活力提高22.8%,5.0 mmol/L Zn2+对果胶酶活力的抑制达到17.4%,Mg2+、Mn2、Co2+、Hg2+和Ag+对果胶酶活力影响不大,Cu2+和Fe3+对果胶酶活力影响较大,浓度为5.0 mmol/L时,对果胶酶的抑制可分别达到88.9%和100%.     

嗜碱菌AL-103果胶酶酶学性质的研究

研究了嗜碱菌AL-103果胶酶酶学性质。经硫酸铵盐析和缓冲液透析,获得粗酶,该酶最适反应温度60℃,最适作用pH6,40℃保温10min酶活基本不损失,在pH7．0～10．5范围内酶蛋白稳定：Li^＋、Ca^2＋和Mg^2＋对酶有激活作用,AL^3＋有抑制作用,Co^2＋、Pb^2＋、Fe^3＋、Mn^2＋和Hg^2＋有强烈抑制作用。     

壳聚糖对栓菌属漆酶固定化条件的研究

为了掌握固定化漆酶对苹果酚类化合物生物催化的特异性,以白腐菌漆酶为试材,采用分光光度法手段,首次对壳聚糖固定化的白腐菌漆酶的特性进行了研究。以儿茶素作为标准底物检验催化活性,实验结果如下:用壳聚糖固定化漆酶,单因素实验表明戊二醛(交联剂)的最适浓度5%,交联时间8h,最适pH为5.5,最适酶浓度1U/ml,固定化酶的最适温度为55℃;最适反应条件固定化漆酶的重复使用次数实验表明,经壳聚糖固定化的漆酶重复使用6次,相对酶活仍能保持70%以上。这为苹果加工中漆酶催化混合酚类化合物转化工艺的确定提供了依据。     

黑曲霉液态发酵桔子皮生产果胶酶的研究

以桔子皮为主要原料,对黑曲霉5L发酵罐液态发酵产果胶酶工艺进行研究。优化后的发酵工艺为：初始发酵培养基含桔皮粉1.42%(w/v),补料培养基含桔皮粉8.50%(w/v);装料量3L,通气量200L/h,转速500r/min,温度28℃,维持DO不低于30%,发酵至24h后开始以40mL/h的速度进行补料,补料总量为1L。在此条件下,果胶酶活力最高为263.9U/mL,较摇瓶发酵提高了98.7%。结果表明,可以利用黑曲霉液态发酵桔子皮生产果胶酶,拓展农产品副产物综合利用途径,减少资源浪费及环境污染,增加果胶酶产品供给。     

印楝素/羧甲基壳聚糖/磷酸化壳聚糖纳米粒子的制备、性能与表征

为了克服壳聚糖只能溶于酸性水溶液的局限,对壳聚糖进行了化学修饰,通过引入磷酸基官能团,合成了可溶于中性水的壳聚糖衍生物磷酸化壳聚糖。以磷酸化壳聚糖和羧甲基壳聚糖为基材,用聚电解质复合法制备了印楝素/羧甲基壳聚糖/磷酸化壳聚糖纳米粒子水分散制剂。测试结果表明,纳米粒子的平均粒径为200~300 nm,纳米粒子对印楝素的负载率最大可达43.5%。     

高效产果胶酶的黑曲霉菌种的诱变及筛选（摘要）

[目的]以原有保藏菌株经诱变并筛选出高产果胶酶的黑曲霉菌种。[方法]涂布平板法选取透明圈和菌落直径较大者作为出发菌株。采用紫外线进行菌种诱变,选择致死率在70%～80%范围内的诱变后菌株进行初筛和复筛。经透明圈检测和摇瓶发酵酶活检测确定其最高酶活和培养时间。[结果]D1-4菌种在适宜培养基中培养96h酶活性最高,达141.13U/ml,比出发菌株酶活提高了1倍。[结论]诱变菌株D1-4有较强分泌果胶酶的能力。