宁夏玉泉营地区葡萄卷叶病田间自然发病调查及检测

对宁夏玉泉营地区葡萄圃内的50多个品种和砧木的卷叶病自然发病情况进行调查研究,结果表明在美洲种群、东亚种群中没有发现卷叶病症状;欧亚种群的品种卷叶病症状比例最高,且程度严重;具有欧亚血统的欧美杂种、欧山山葡萄杂种均有表现卷叶病的品种,但发病率、严重度低于欧亚种.欧亚种中,以鲜食品种为主的东方品种比以酿酒品种为主的西欧和黑海品种卷叶病发病率低.检测结果表明不同酿酒品种带毒率有差异.     

葡萄卷叶病研究及问题

葡萄卷叶病是葡萄生产上重要的病毒病。引起这一病害的病毒,统称葡萄卷叶病毒(Grapevine leaf-roll virus,GLRV)。现在看来引起本病的病毒,不止一个,是比较复杂的。本病18世纪中叶在欧洲已有记述,19世纪意大利西西里人的蜡叶标本里也有类似此症的材料(Martelli,1986)。至今本病在世界各葡萄产区分布甚广。欧、美主要酿酒葡萄品种几乎普遍有此病的发生。日本的无味果葡萄亦认为与卷叶病毒关系密切。我国近年葡萄卷叶病发生亦较多,虽尚无详细损失资料,估计一般损失约在5～15%。作者等调查(1986～1988),如玫瑰香(抚顺)、贝塔、汉普(沈阳)、龙眼(沈阳、北镇)、伊豆锦(熊岳)、巨峰(沈阳、北镇、朝阳)均有卷叶病发生,发病率约为5～75%。     

葡萄扇叶病和卷叶病的研究现况

葡萄病毒病是葡萄病害中认识较迟而危害最大的病害之一。近年逐渐受到人们的重视,公认的葡萄病毒病约20余种,其中以葡萄扇叶病和卷叶病发生最为普遍。 一、葡萄扇叶病 扇叶病原系欧亚种葡萄(Vitis vinifera)上的一个古老病害,19世纪初叶已有记     

葡萄卷叶病的防治

葡萄卷叶病由葡萄卷叶病毒侵染引起。该病危害重,可造成葡萄减产20%～50％。     

葡萄卷叶病的研究进展

葡萄卷叶病(Grapevine leafroll disease)是葡萄上的一种重要的病毒病，现已研究表明，引起该病的病毒不止一种，目前国际上承认的已有5种(GLRaⅥ-Ⅲ)，其中葡萄卷叶伴随病毒Ⅲ（GLRaⅤ-Ⅲ）是最主要的一种，它分布最广，造成的经济损失最大，而且也是这几种病毒中唯一具有自然介体的病毒。本文根据生产实际，系统阐述了目前关于葡萄卷叶病毒病原、检测和脱毒技术的研究进展。     

剑麻紫色卷叶病田间调查和其传病因子的分析

对湛江农垦成龄和幼龄剑麻紫色卷叶病田间调查发现,一般抗病苗与普通苗发病率为18％～33％,之间无显著差异,而高抗病苗能有效对抗紫色卷叶病(发病率近0);列联表分析表明剑麻的抗病、发病、死亡等现象不是相互独立的随机事件,存在未知关联;根据田间剑麻种植布局,每株周围剑麻分为直接接触和非直接接触两类,调查发现直接接触生病剑麻数量水平决定了发病率高低(相关系数为0.976),每增加一株病麻,剑麻发病率提高13.6％,而非直接接触生病剑麻数对发病率的影响呈弥散状,说明直接接触传染是紫色卷叶病扩散的重要因素;无论是单块成龄或幼龄剑麻田,还是二者合并,紫色卷叶病发病率分布都存在不发病和高发病2个峰,推测存在2种以上的因子影响剑麻发病,为此提出抗病因子和非抗病因子2个因子共同决定剑麻紫色卷叶病的双因子模型,这2类因子的相互作用决定了剑麻染病、恢复、再染病、再恢复的循环,能够解释目前紫色卷叶病表现.     

葡萄卷叶病对酿酒葡萄品种产量、品质的影响

通过对酿酒葡萄病株与健株在叶绿素含量、光合速率、经济产量、品质等方面的比较结果表明葡萄感染卷叶病后,其叶片中的叶绿素含量、光合速率都明显低于健康品种,株产比对照减少近4倍左右,同时病株浆果含糖量偏低,而酸度上升,直接影响了酿酒葡萄的品质.     

葡萄卷叶病对酿酒葡萄品种产量、品质的影响

通过对酿酒葡萄病株与健株在叶绿素含量，光合速率，经济产量，品质等方面的比较结果表明；葡萄感染卷叶病后，其叶片中的叶绿素含量，光合速率都明显低于健康品种，株产比对照减少近4倍左右，同时病株浆果含糖果偏低，而酸度上升，直接影响了酿酒葡萄的品质。     

冬种马铃薯卷叶病田间调查及RT-PCR检测技术研究

对惠州市冬种马铃薯卷叶病发病情况进行调查研究,建立了马铃薯卷叶病毒(PLRV)RT-PCR检测技术。结果表明,马铃薯卷叶病发病率为3.0%～29.7%。比较LiCl、异硫氰酸胍和试剂盒3种方法提取马铃薯卷叶病毒总RNA,以异硫氰酸胍和试剂盒提取效果较好,LiCl次之;根据卷叶病毒外壳蛋白基因序列设计引物,从感染马铃薯卷叶病毒的马铃薯叶片中提取出病毒RNA,合成cDNA并运用RT-PCR技术进行体外扩增,得到一条长度约336bp的特异PCR扩增产物,与理论设计的外壳蛋白基因大小一致,而健康叶片RNA扩增未得到任何产物。应用RT-PCR技术对马铃薯试管苗和种薯进行了卷叶病毒检测。     

葡萄卷叶病防治

酿酒葡萄蛇龙珠，从引种栽植至今已有100多年的历史，由于在苗木繁育过程中多为扦插式营养繁殖，造成该品种种性严重退化，病毒病发生严重。葡萄卷叶病就是病毒病的一种。由于该病前期症状不明显，至8月份开始症状逐渐表现为叶片下卷、叶肉变红，严重地影响了叶片的光合作用。     

葡萄叶片中过氧化物酶同工酶与卷叶病的关系

通过对过氧化物酶活性测定结果表明：葡萄叶片中过氧化物酶活性与葡萄卷叶病有一定的关系。植株感病后，其体内过氧化物酶活性增强，其中抗病类型的过氧化物酶活性高于感病品种。同工酶谱分析表明：感病后，不同抗病品种的酶带数均增加，而感病品种各植株间过氧化物酶同工酶的变化与植株外部症状有差异，后期表现为病情越重，酶带数减少。     

葡萄卷叶病的防治

葡萄卷叶病由葡萄卷叶病毒侵染引起，该病危害重，可造成葡萄减产20％～50％。一、病害识别 叶片向下翻卷，果穗小，着色浅。由于品种、环境的不同，卷叶上呈现淡红色斑点，或脉间淡红色，或脉间褪绿等变色症状。     

葡萄卷叶病的研究进展

葡萄卷叶病(Grapevine leafroll disease)是葡萄上的一种重要的病毒病,现已研究表明,引起该病的病毒不止一种,目前国际上承认的已有5种(GLRaVI-III),其中葡萄卷叶伴随病毒III(GLRaV-III)是最主要的一种,它分布最广,造成的经济损失最大,而且也是这几种病毒中唯一具有自然介体的病毒.本文根据生产实际,系统阐述了目前关于葡萄卷叶病毒病原、检测和脱毒技术的研究进展.     

葡萄卷叶伴随病毒Ⅲ基因的克隆及序列分析

根据葡萄卷叶伴随病毒Ⅲ美国分离物的ＧＬＲａＶ－３ＣＰ基因序列,设计并合成了１对该病毒的ＰＣＲ引物,利用ＩＣ－ＲＴ－ＰＣＲ成功地检查到合适大小的ＰＣＲ产物;同时将ＰＣＲ产物克隆到中间载体ＰＧＥＭ－３Ｚｆ,转化大肠杆菌ＤＨ５α菌株,筛选阳性克隆。通过双酶切以及序列分析表明,扩增样品与美国分离物的同源性为９４．１％。     

葡萄卷叶病毒RT-PCR检测技术研究

以葡萄叶片和皮层为材料,对植物总RNA和dsRNA提取方法进行了研究,从中筛选出了提取葡萄总RNA和dsRNA的适合方法。建立了GLRaV RT-PCR的有效体系,在有效体系基础上,通过研究RT-PCR主要成分对RT-PCR的影响,确立了GLRaVRT-PCR的优化体系。     

葡萄叶片中过氧化物酶同工酶与卷叶病的关系

通过对过氧化物酶活性测定结果表明葡萄叶片中过氧化物酶活性与葡萄卷叶病有一定的关系.植株感病后,其体内过氧化物酶活性增强,其中抗病类型的过氧化物酶活性高于感病品种.同工酶谱分析表明感病后,不同抗病品种的酶带数均增加,而感病品种各植株间过氧化物酶同工酶的变化与植株外部症状有差异,后期表现为病情越重,酶带数减少.     

葡萄卷叶病毒主要检测技术比较

葡萄卷叶病(GLRaV)是葡萄上的一种重要病毒病害。本文主要阐述了该病的病原、分布及近些年来各种检测技术在该病检测中的应用情况,分析了各种检测技术的优势和不足及如何在该病检测中对各种方法做合理的搭配应用,优势互补,提高效率。     

葡萄卷叶病毒RT-PCR检测技术研究

以葡萄叶片和皮层为材料,对植物总RNA和dsRNA提取方法进行了研究,从中筛选出了提取葡萄总RNA和dsRNA的适合方法. 建立了GLRaV Ⅲ RT-PCR的有效体系,在有效体系基础上,通过研究RT-PCR主要成分对RT-PCR的影响,确立了GLRaV RT-PCR的优化体系.     

IC-RT-PCR检测葡萄卷叶病毒Ⅲ的研究

结合ELISA和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的特点,引入了另外一种方法,即免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)对葡萄卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)进行了检测。从免疫捕捉病毒、释放RNA到反转录成cDNA,最后扩增出了约300bp的预期目的片段。为了进一步明确PCR扩增的特异性,将PCR产物连接到pGEM-T载体上,转化大肠杆菌E.coliJM109菌株,通过蓝白斑筛选,获得重组质粒,提取质粒DNA,经酶切对重组质粒进行鉴定,结果得到了含有目的片段的重组质粒。由此证明,IC-RT-PCR检测GLRaV-3结果准确可靠。最重要的是它弥补了ELISA易出现假阴性、假阳性以及RT-PCR提取RNA难等的缺点,不失为病毒检测的新型方法。     

青海省马铃薯卷叶病毒的RT-PCR法检测

根据马铃薯卷叶病毒（PLRV）外壳蛋白基因的保守序列设计了一对寡聚核苷酸引物,从田间自然感染PLRV的马铃薯病株中提取病毒总RNA,用反转录-聚合酶链式反应扩增出符合设计大小240bp的特异性产物,而对照没有任何扩增产物。建立了快速、准确检验PLRV的分子检测方法,为青海省马铃薯生产中卷叶病毒的检测和防治提供了有效手段。