野生碧玉兰多倍体诱导及鉴定

以云南野生碧玉兰种子无菌萌发的试管苗为材料,采用浸泡法,在无菌条件下用不同浓度的秋水仙素溶液对碧玉兰丛生芽进行多倍体诱导,结果表明：以0.04%的秋水仙素处理72h效果最好,诱导变异率达60%,死亡率为30%,变异试管苗形态上表现为叶片变宽、叶色较深、叶面粗糙、部分叶尖开叉并有双脉、植株矮壮,且生长缓慢;经细胞学检测,二倍体碧玉兰染色体数目为40（2n=2x=40）,变异苗染色体数目大部分为80（2n=4x=80）;四倍体叶表皮气孔变大,单位面积内气孔数明显减少;通过RAPD分析,结果显示二倍体和四倍体在带型上存在差异。     

秋水仙素诱导乌拉尔甘草同源四倍体的研究

在组织培养条件下,用秋水仙素溶液浸泡乌拉尔甘草试管苗(2n=2X=16)茎尖进行同源四倍体诱导,比较了不同秋水仙素浓度和不同处理时间对存活率、变异率的影响,并对加倍植株的鉴定和纯合四倍体的分离方法进行了研究.结果表明,秋水仙素浓度为0.1%,浸泡时间为12h时,茎尖的存活率和变异率分别为52.3%和22.1%,诱导率较高,并通过保卫细胞和根尖染色体数目鉴定,成功获得了甘草同源四倍体(2n=4X=32),为开展甘草多倍体育种奠定了物质和技术基础.     

催眠睡茄的离体快繁及四倍体的诱导

以催眠睡茄腋芽为外植体建立快繁体系,利用秋水仙素进行催眠睡茄四倍体诱导,并将其与二倍体进行了初步的形态学和细胞学方面的比较.结果发现:催眠睡茄二倍体(2n=2x=48)最适增殖培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.05 mg/L,生根培养基为1/2 MS IBA 0.2 mg/L;四倍体(2n=4x=96)诱导率因秋水仙素浓度和处理时间的不同而异,其中用0.5%的秋水仙素对丛生芽浸泡处理48 h诱导率最高,诱导率可达13.79%.四倍体与二倍体相比:叶片明显变厚,颜色加深,叶片气孔及其保卫细胞大小增大,气孔密度减小,且保卫细胞内叶绿体数目增加.     

涪陵胭脂萝卜多倍体诱导研究

以不同浓度秋水仙素溶液处理胭脂萝卜幼苗茎尖生长点,通过苗期和成株期对诱变植株和正常二倍体植株进行形态学和细胞学鉴定,探讨四倍体胭脂萝卜的诱导方法与途径.结果表明,5种浓度秋水仙素都能诱变出四倍体胭脂萝卜,其中2 g/L秋水仙素诱变率最大,为33.3％.四倍体胭脂萝卜平均叶片厚度、叶长、株高、叶宽和开展度较二倍体分别增加32.4％、39.6％、39.8％、24％和31.7％,四倍体胭脂萝卜叶片单位视野内的气孔数目少于二倍体72.2％,但气孔的横径和纵径分别较二倍体大40.8％和30.7％.说明叶片厚度、叶长、株高、叶宽、开展度、气孔数目、气孔的横径和纵径等性状可以作为四倍体鉴定的重要特征,特别是气孔数目、气孔的横径和纵径可以作为快速鉴定四倍体与二倍体胭脂萝卜的重要指标.利用秋水仙素诱导是获得四倍体胭脂萝卜的有效途径之一.     

青檀多倍体诱导试验初报

为获得具有优良性状的青檀四倍体植株,以青檀幼苗为试验材料,通过秋水仙素浸泡生长点的方法,研究了不同秋水仙素浓度和处理时间对青檀染色体加倍的诱导效果。结果表明：以0.4％—0.8％秋水仙素处理72ｈ诱导效果最佳,变异率最高达34.2％。经流式细胞仪和茎尖染色体鉴定,初次镜检青檀四倍体植株染色体数目为2n＝4x＝36,成功获得了青檀四倍体植株。     

‘乐都紫皮大蒜’多倍体的诱导与鉴定

‘乐都紫皮大蒜’因其风味独特并具有高含量的碳水化合物,市场价值和开发利用前景广阔。利用多倍体诱导技术,可促进优良大蒜种质的创制。本研究通过秋水仙素浸泡‘乐都紫皮大蒜’的愈伤组织进行四倍体诱导,并利用流式细胞仪及农艺性状测定等方法进行鉴定。结果表明:在含有0.5 mg/L6-BA+1.5 mg/L2,4-D的B5培养基上培养大蒜愈伤组织的诱导率最高,愈伤组织长势最佳。以0.2%的秋水仙素浸渍4 h,愈伤组织的四倍体细胞诱导率最高,达39.42%。在此条件下,处理愈伤组织后诱导再生试管苗,愈伤组织存活率为54.44%,多倍体再生植株的诱导率为28.89%。与二倍体植株相比,四倍体试管苗的株高、叶长、叶宽、假茎长显著增加了183.44%、181.18%、133.33%和58.33%。本研究为培育大蒜新种质提供了技术方法与科学依据。     

马铃薯高效染色体加倍方法建立与抗寒资源创制

利用不同秋水仙素处理浓度、处理方式、处理时间对马铃薯试管苗茎段进行处理,研究了不同处理组合对试管苗成活率和加倍效率的影响,筛选获得了马铃薯染色体加倍优化处理组合。结果表明, 0.1%秋水仙素浓度在120转min^–1的条件下处理马铃薯试管苗茎段3 d的加倍效率最高,该处理方法结合摇床转动处理,使秋水仙素与处理茎段接触更充分,较其他马铃薯染色体加倍技术具有加倍率更高、加倍时间更短且操作简便等优点,为马铃薯倍性操作提供了高效方法。同时,加倍的种间杂种材料农艺性状与原始二倍体相比,加倍获得的四倍体材料在植株株高、茎粗、花瓣大小及花粉粒大小等方面均有明显增强,且抗寒能力和二倍体种间杂种相当,较普通马铃薯栽培种显著增强,可为马铃薯栽培种的抗寒遗传改良提供良好的材料基础。     

人工诱变芦荟多倍体的初步研究

以秋水仙索为诱变剂，利用茎段浸泡和秋水仙素培养基2种方法对库拉索芦荟进行诱变，结果表明，茎段浸泡秋水仙素法诱导四倍体葡萄的效果优于秋水仙素培养基法，0．2％的秋水仙素处理4d变异效果最好，诱变率达到最高值41.5％。变异株叶片肥厚，叶色深绿，叶片表皮气孔保卫细胞中叶绿体数增多。     

不结球白菜同源四倍体苏州青的诱导鉴定

为获得高产优质的不结球白菜四倍体苏州青,本研究使用浓度分别为0.1%,0.2%及0.3%的秋水仙素溶液,点滴处理二倍体苏州青幼苗植株的子叶生长点,进行5次处理后,通过形态学和细胞学方法筛选鉴定四倍体苏州青植株,并比较二、四倍体苏州青的农艺性状及品质差异。结果表明：秋水仙素浓度为0.2%时加倍效果最好。形态解剖学鉴定结果表明：四倍体在株型、叶片、花、种荚、种子大小都有较明显的变大趋势;四倍体植株叶片气孔较二倍体变大,气孔密度变小;同时四倍体植株花粉粒比二倍体更膨大,更不规则;细胞学鉴定结果表示,四倍体植株染色体数为40条,二倍体植株为20条;通过流式细胞仪鉴定,四倍体植株荧光强度约为二倍体的2倍。通过品质比较分析,结果显示四倍体苏州青的各项生理指标含量较于二倍体均有不同。通过农艺性状比较,单株质量、叶宽、叶厚都有一定程度的增加。本研究利用秋水仙素操作技术,抑制有丝分裂后期纺锤丝的形成,实现染色体加倍,创制不结球白菜新种质,为选育四倍体不结球白菜提供理论基础和种质资源。     

秋水仙素诱导黄芩多倍体的初步研究

以浓度为0.01%,0.05%,0.1%,0.2%,0.5%的秋水仙素浸泡黄芩种子24、48、72 h和96 h,统计种子发芽率;此外,在黄芩愈伤组织诱导培养基中分别加入浓度为5、10 mg/L和15mg/L的秋水仙素,进行黄芩多倍体的诱导.种子发芽和诱导愈伤形成芽后,取二者幼芽分别固定和制片观察,统计秋水仙素诱导黄芩产生的多倍体细胞率.结果表明:0.01%浓度的秋水仙素处理(24、48、72 h)黄芩种子,随着时间的延长,种子发芽率提高;当浓度高于0.05%时,种子发芽率降低,但规律不明显.染色体压片观察表明,以浓度0.1%秋水仙素浸泡处理黄芩种子24h的多倍体细胞诱导率最高,可选49.2%;培养基中添加秋水仙素能够明显促进愈伤组织和芽的形成,但多倍体细胞诱导率仅为9.7%.以上结果表明,种子浸泡或培养基添加秋水仙素均能诱导黄芩根尖或愈伤产生多倍体细胞,但要获得纯合的四倍体或多倍体植株,还有待进一步深入研究.     

秋水仙碱诱导侧柏多倍体的研究初报

为探求诱导侧柏多倍体的最优化条件,此试验以侧柏种子为材料,选取秋水仙碱浓度、温度、处理方式以及光照情况四个影响因素,采用正交试验设计,进行多倍体诱导。试验结果表明,采用直接浸泡法,在秋水仙碱浓度为0.3%、温度为25℃、无光的条件下,经过72h后多倍体的诱导率可达92.7%。此研究结果可为尚未展开的侧柏多倍体育种研究提供良好的技术基础和借鉴     

Effect of Colohicine Treatment on the Growth and Variation of Siraitia grosvnorii Callus

[Objective] This study was to screen out a suitable colchicine treatment method for generating variation in calli of Siraitia grosvnorii. [Methods]Different concentrations of colchicine and treatment time were set to investigate the optimal callus induction conditions for Siraitia grosvnorii(Swingle) C. Jeffrey. [Results]With the increase of colchicine concentration and time,the calli died more and more seriously. The induction rate of mutated cells( polyploidy) was ascended along with the increase of treatment time and colchicine within a certain range. However,when the colchicine concentration exceeded a specific amount,the polyploidy induction rate was decreased. Treatment with0. 5 g /L colchicine for 48 h showed the best effect on polyploidy induction while the least damage on callus tissue. In comparison with the normal material,the mutated plants showed bigger leaves and slower growth,while the stomata did not change remarkably. By chromosomal analysis,the mutated material was preliminarily identified as polyploid. [Conclusions]Treatment with 0. 5 g /L colchicine for 48 h could well induce the generation of diploidy materials.     

白魔芋多倍体诱导研究初报

采用种子浸泡法和根状茎顶芽滴液法进行白魔芋多倍体诱导，比较了不同秋水仙素浓度和不同处理时间对出苗率和变异率的影响。结果表明，滴液法对材料的毒害性更小，经同一浓度秋水仙素溶液处理后出苗率和植株形态变异率均高于种子浸泡法，但诱变加倍的效果不如浸泡法。实验中获得一株纯合四倍体植株，由0.20%秋水仙素溶液处理种子48h诱变得到。     

剪秋罗种子催芽及秋水仙碱诱导多倍体研究

为了解决剪秋罗种子发芽率不高的问题,以剪秋罗种子为试验材料,比较种子新旧、播种基质以及不同浓度赤霉素(GA3)对剪秋罗种子发芽势和发芽率的影响,并在此基础上利用不同浓度秋水仙碱和不同时间处理剪秋罗萌动种子诱导多倍体。通过形态鉴定、气孔鉴定以及细胞学鉴定变异植株。结果表明：存放1年的剪秋罗种子发芽指标均优于当年新种子,当年种子可能具有初生休眠特性。以150 mg/L的GA3预处理存放1年的剪秋罗种子24 h并播种于培养皿中能获得最高的发芽势(76.33%)和最高的发芽率(85.33%)。经过秋水仙碱处理的种子普遍存活率低,但每个处理浓度下都获得了变异植株,秋水仙碱浓度0.1%为筛选出的最适诱导浓度。变异植株表现出了与对照植株在形态上、气孔分析上和细胞学检测上的差异。经鉴定,初选出1株多倍体。研究为培育剪秋罗多倍体新品种探索出了一条新的育种途径。     

百合鳞茎形成的生理生化研究

为研究建立高效稳定的百合鳞茎形成体系,以自繁的东方百合(Lilium Oriental Hybrid)品种‘索蚌’为材料,研究SOD、POD、CAT 3种抗氧化酶的活性变化以及可溶性蛋白和可溶性糖含量变化对百合鳞茎发生过程中的生理生化机制。结果表明,在百合鳞茎发生发育过程中,SOD与POD活性升高,而CAT酶活性的变化与SOD、POD活性变化趋势正好相反;可溶性蛋白累积和可溶性糖变化与百合鳞茎形成密切相关。因此,在百合鳞茎形成过程中,SOD、POD、CAT酶活性变化与鳞茎诱导及其发育密切相关,其中SOD、POD酶在百合鳞茎形成的过程中起着主导作用;可溶性糖和可溶性蛋白质累积变化为百合鳞茎形成提供物质和能量基础。     

Polyploidization and early screening of Rhododendron hybrids

Polyploid induction represents a useful tool for breeders of floral crops as larger flowers, longer flowering period and deeper colors can be achieved through chromosome doubling. This study aimed at testing the efficiency of colchicine and oryzalin in inducing polyploidy in three Rhododendroncultivars grown in vitro. The chemicals were used in two concentrations with 24 h and 48 h treatment durations. The survival of the plants was better in colchicine than in oryzalin solutions. The higher concentration of both chemical skilled more plantlets. The treatment duration in oryzalin did not affect the survival, but 48 h in colchicine was more destructive than 24 h. The low survival rate may not be a disadvantage, if the treatment induces desired ploidy. The ploidy levels were screened with flow cytometry. Oryzalin was more efficient than cochicine in inducing polyploidy, the treatment duration and the concentration did not have significant effects as main factors. The biggest proportion of solid tetraploids (18.2% of the survived plants) was obtained from the 24 h treatment in 0.005% oryzalin. Immediately after the treatment the polyploids grew very slowly, whereas most of the unaffected diploids were vigorous from the very beginning. More mixoploids than solid tetraploids were obtained in all treatments. Most of the mixoploids retained their chimerism, one third shifted todiploidy and one single plant to tetraploidy. This revised version was published online in July 2006 with corrections to the Cover Date.     

利用灰色关联分析法选择适宜转蓝色基因的百合品种

通过测定不同百合品种的花青素和黄酮醇的成分组成及含量,测量其液泡pH值,确定适宜转蓝色基因的百合品种。首先外部观察选择花色为粉色至紫红色的10个百合品种,用高效液相色谱（HPLC）分析花瓣中花色素和黄酮醇的组成和含量,pH计测量液泡pH值,利用灰色关联分析法对供试品种的测量指标进行综合评价。结果表明：供试品种中的花青素为矢车菊素,黄酮醇为山奈酚和槲皮素;最终选择花瓣中矢车菊色素含量少,黄酮醇含量高,液泡pH值高的OT杂种百合‘罗宾娜’和东方百合‘贝尼尼’为适宜转蓝色基因品种。     

墨兰多倍体的离体诱导和鉴定

以墨兰‘企剑白墨’的根状茎为材料,研究了秋水仙素处理对墨兰根状茎生长和多倍体诱导的影响。结果表明,秋水仙素对根状茎有严重的毒害致死作用,在试验浓度和时间范围内,随着秋水仙素浓度的升高或处理时间的延长,根状茎存活率明显降低。秋水仙素能诱导‘企剑白墨’根状茎的染色体加倍,但不同浓度和时间处理的染色体加倍效率不一样。只在0.01%×3 d处理下诱导出四倍体,诱导率为11.11%,其余处理诱导出二、四混倍体,诱导率在0～19.44%之间。四倍体根状茎比二倍体粗壮,顶端更圆,再生出的四倍体植株株型紧凑,叶片质地变硬,根明显增粗。     

秋水仙素诱导蚕豆及玉米根尖细胞染色体变异的研究

为进一步了解秋水仙素对农作物根尖细胞染色体畸变的遗传毒害效应,以地方品种敏感型绿皮小粒蚕豆和饲用玉米为材料,研究不同浓度秋水仙素（0、0.01%、0.05%、0.10%、0.15%、0.20%）及不同培养时间（24、48、72h）对2种作物染色体的畸变影响。结果表明：秋水仙素能诱发根尖膨大,当秋水仙素浓度为0.20%处理24h,蚕豆根尖膨大率100%;秋水仙素浓度为0.20%处理72h,玉米根尖膨大率65.8%;适当浓度秋水仙素（0.01%、0.05%）可促进蚕豆和玉米根尖细胞的有丝分裂,当浓度≥0.10%,反而抑制蚕豆和玉米细胞分裂。在染色体畸变类型中,微核最多,其次是染色体断片,最少是染色体桥。秋水仙素浓度0.20%,处理时间72h,蚕豆畸变率和玉米畸变率均最高,分别为11.92%和7.25%;秋水仙素浓度0.10%,处理时间72h,蚕豆染色体加倍指数最高为7.97%;秋水仙素浓度0.20%,处理时间24h,玉米细胞加倍指数最高为4.64%。     

In vitro induction and morphological characteristics of octoploid plants in Pogostemon cablin

This paper describes an efficient colchicine-mediated technique for in vitro induction of octoploids in Pogostemon cablin and its confirmation by flow cytometry and chromosome numbers. The highest octoploid induction ratio was obtained by 0.05% colchicine treatment for 72 h. The chromosome number of octoploid seedlings was 2n = 8x = 128. Colchicine-induced tetraploids and octoploids planted in soil remained stable after 6 months. There were 31 lines of octoploid plants obtained. The leaf characteristics of P. cablin tetraploids and octoploids were compared. The larger leaves and stomata of transplants can be used to identify putative octoploids in P. cablin. Most octoploid lines exhibited higher patchoulic alcohol contents than the controls after 6 months of cultivation. Our results demonstrated that polyploidy induction can be beneficial in improving the medicinal value of P. cablin.