河北省辣椒(Capsicum frutescens)主要出口基地辣椒病毒病毒源种类鉴定——1.Ⅰ—17、Ⅱ—44、Ⅲ—59和Ⅳ—34分离物的鉴定

从辣椒上分离到的Ⅰ—17、Ⅱ—44、Ⅲ—59、和Ⅳ—34四个病毒分离物,根据其病毒形态、大小、血清反应、蚜虫传毒特性、体外稳定性、寄主范围和症状特点,Ⅰ—17、Ⅱ—44和Ⅲ—59分离物鉴定为黄瓜花叶病毒(CMV)的三个不同分离物,Ⅳ—34鉴定为烟草花叶病毒(CMV)。CMVⅠ—17、Ⅱ—44和Ⅲ—59三个分离物的病毒形态为球状,直径约28nm,免疫琼脂双向扩散试验结果:它们与 CMV 有密切的亲缘关系,三个分离物均由棉蚜、桃蚜以非持久性方式传播;钝化温度:Ⅰ—17为55—60℃,Ⅱ—44为66—70℃,Ⅲ—59为60—65℃,三个分离物的稀释限点均为10~(-4)—10~(-5),体外保毒期均为5天;在辣椒、黄瓜、心叶烟和普通烟等寄主上引起系统花叶,在奎宁藜、豇豆、蚕豆等植物上引起局部枯斑,不侵染十字花科植物。Ⅰ—17、Ⅱ—44和Ⅲ—59三个分离物在心叶烟、黄花烟、普通烟、蚕豆、蕃茄、曼陀罗等寄主上的侵染性及症状反应不同,在不同辣椒(甜椒)品种上的症状反应也存在差异。TMVⅣ—34分离物病毒粒子形态为直杆状,大小约为300×18nm,免疫琼脂双向扩散试验表明它与烟草花叶病毒(TMV)存在亲缘关系;不能由蚜虫传毒,致死温度为95°—100℃,稀释限点为10~(-10)—10~(-11),体外保毒期2个月以上;在普通烟、毛叶烟、三生烟、辣椒、蕃茄等寄主上表现系统花叶,在心叶烟、曼陀罗、奎宁藜、黄色藜、枯斑三生烟等寄主上引起枯斑症状,不侵染黄瓜和蚕豆等植物。     

陕西秦椒病毒病害的鉴定

从228份秦椒(Capsicum annuum)罹病材料中鉴定出CMV、TMV、TEV和PVY等4种病毒。以CMV和TMV为主接种在田间辣椒上后,产生多种花叶。CMV、TEV和PVY可以通过桃蚜以非持久方式传播。TMV、TEV和PVY的粒子大小分别为292～300×15nm、728×13nm和730×11nm。TMV-RNA和TEV-RNA的分子量分别为2.06×10~6和3.16×10~6。TMV在辣椒上发生较早,从苗期开始为害,其后CMV和TMV的比例迅速上升,个别田块有TEV和PVY发生。到生长后期,CMV和TMV混合侵染现象加重。     

河北省马铃薯病毒鉴定研究初报

病毒病是马铃薯的重要病害之一，经４的疃调查和鉴定，明确了河北省马铃病毒病主要表现类型有花叶型、卷叶型、皱缩花叶型、束顶型和矮小株型５种。经指示植物、抗血清和化学鉴定，发现侵染我省马铃薯的病毒有：马铃薯普通花叶病毒（ＰＶＸ）、马铃薯重花叶病毒（ＰＶＹ）、马铃薯潜隐花病毒（ＰＶＳ）、马铃薯轻花叶病毒（ＰＶＡ）、马铃薯副皱缩花叶病毒（ＰＶＭ）、以铃薯卷叶病毒（ＰＬＲＶ）和马铃薯纺锤块茎类病毒（ＰＳＴＶ）     

辣椒病毒的酶联免疫吸附法检测

辣椒病毒的酶联免疫吸附法检测程秉铨，周俊，孙晓陆，肖英，彭湘儒，刘文朴（新疆农科院中心实验室，乌鲁木齐，８３００００）（乌鲁木齐市蔬菜研究所）酶联免疫吸附试验技术（ＥＬＩＳＡ）是７０年代发展起来的用于检测抗原或抗体的新方法。１９７１年由瑞典的Ｅｎｇｖ...     

辣椒抗病毒病研究现状概述

辣椒是当前生产中大面积栽培的主要蔬菜种类之一,在全国各地普遍栽培。20世纪70年代以来,由于品种交流范围扩大、交流速度加快以及耕作制度的限制,使得病毒病的传播进一步加快,病毒病由原来的次要病害逐渐上升成为辣椒的主要病害,危害逐年加重,严重影响了辣椒的产量和品质〔1,2〕。辣椒病毒病的毒源,从1923～1925年Ｄｏｌｉｔｔｅ证实黄瓜花叶病毒(ＣＭＶ)侵染辣椒以来,世界各国已分离到30余种病原病毒,其中最主要的是烟草花叶病毒(ＴＭＶ)、黄瓜花叶病毒(ＣＭＶ)、马铃薯Ｙ病毒(ＰＶＹ)、烟草蚀纹病毒(ＴＥＶ)、黄瓜绿斑花叶病毒(ＣＧＭＭ…     

“912”植物病毒钝化剂对辣椒病毒病的控制作用

1988-1991年在长江以南的湖南省衡阳市和长江以北的河北省7个县市对“912”植物病毒钝化剂进行了小区和田间示范试验,表明“912”对辣(甜)椒病毒病有明显的防病增产作用,处理区的发病率为25％～49.3％,病情指数为12.75～31;对照区的发病率为46.6～92％,病情指数为20.25～61,防效为39.82％～53.7％。对辣椒的株高、开花、挂果数有明显的促进作用,增产率为11.69％～18.3％。室内“912”测试表明“912”对烟草花叶病毒和黄瓜花叶病毒有体外钝化作用,降低植株体内的病毒浓度;不仅对辣(甜)椒病毒病和蕃茄病毒病有保护作用,而且对植株生长有促进作用,可以提高株高日增长量和叶绿素含量。     

北疆辣椒病毒病毒原类型初步鉴定

1989—1992年从乌鲁木齐、昌吉、阜康、石河子等地采得的98株病毒病株,初步归为5个类型。经寄主范围、体外抗性,传播途径测定,病毒颗粒形态观察及血清反应,初步确认此5个病毒类型分属于烟草花叶病毒类群,黄瓜花叶病毒类群、马铃薯X病毒类群、马铃薯Y病毒类群和蚕豆萎蔫病毒类群。     

保护地辣椒主要病害症状及综合防治技术

1主要病害症状保护地辣椒病害主要有:辣椒疫病、辣椒炭疽病、辣椒褐斑病、辣椒病毒病、辣椒灰霉病、辣椒细菌性病害等。1.l辣椒疫病苗期即可发病。茎基部呈暗绿色水渍状软腐或猝倒,即苗期猝倒病;成株期主要危害茎基部,初为水浸状,后环绕麦皮变黑褐色,病部明显溢缩,造成整株凋萎枯死,属毁灭性病害:后期也危害果实,呈暗绿色水浸状,软腐。病菌主要是病残体在土壤中带菌传染,随雨水传播蔓延。高温、高湿有利于发病,一般浇水后土壤湿度过大,发病迅速,种植过密,连年重茬发病较重。     

辣椒品种益都红苗期抗源筛选技术研究

辣椒病毒病和疫病是辣椒生产栽培中的一种常发病害,也是一种世界性病害。辣椒疫病是由Phytophthora capisici引起的一种病害,引起辣椒病毒病的毒源种类至少有八种,其中烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus,TMV）是主要毒源之一。辣椒“益都红”是传统的山东地方栽培品种,占全省干制辣椒栽培面积的40％以上。本试验采用苗期人工接种方法．对“益都红”品种的抗病毒病和疫病能力进行早期鉴定。结果表明“益都红”干制椒单株对疫病和TMV的抗性分别表现为五种或六种类型,同时抗疫病和TMV的双抗单株分为五类,并且群体中双感的单株比双抗的高出17．6个百分点。本实验旨在筛选出辣椒抗病材料,以期为抗病育种找出抗源及准确、快速的鉴定筛选方法。为筛选大量选种材料创造条件。     

山东省辣椒主要病毒种类的分子检测与鉴定

【目的】鉴定山东省辣椒上的主要病毒种类,明确该地区辣椒上的主要病毒病原。【方法】2014—2015年,在山东省临沂、日照、青岛、烟台、潍坊、淄博、济宁、菏泽、聊城、德州共10个市(区)采集253份疑似感病的辣椒植株叶片,提取叶片总RNA和总DNA,利用双生病毒的通用引物(PA/PB)、马铃薯卷叶病毒属通用引物(POL-F/POL-R)及已报道侵染辣椒的主要病毒的检测引物对样品进行PCR、RT-PCR分子检测与鉴定,将扩增得到的目的条带经凝胶回收试剂盒回收纯化后连接到pMD18-T载体上,再送至公司进行克隆测序。分别将所得的PMMoV、PeVYV和BWYV序列在NCBI上利用BLAST进行检索,利用DNAStar软件中的Megalign将所得序列与Gen Bank中已登录的世界各地有代表性的序列进行同源性比对,利用软件MEGA 5.05的Clustal W法进行多序列比对分析以及邻接法(neighbor-joining,NJ)构建系统进化树,系统进化树中各分支置信度(Bootstrap)进行1 000次重复分析。【结果】PMMoV、CMV总检出率分别为61.66%、60.08%;TMGMV、BBWV-2、BWYV、TMV发生也比较普遍,检出率为41.90%、34.78%、33.20%和24.90%;PCV-2、ToMV、TYLCV、PVY、MABYV、PeVYV、PCV-1、ChiVMV、AMV发生侵染现象较少,检出率分别为11.86%、9.88%、9.09%、6.72%、5.53%、3.56%、3.16%、0.79%和0.40%;未检测到Ca CV、PSV、Chi RSV、TSWV和To MMV。通过对病毒复合侵染现象进行分析发现,病毒复合侵染率高达89.92%,其中3种病毒复合侵染现象最多,所占比例达28.63%,4种病毒复合侵染率为25.00%,2种病毒复合侵染率为21.77%,5种病毒复合侵染率为13.31%,一个辣椒样品最多可同时感染6种病毒,侵染率为1.21%;对山东省10个地区的辣椒病毒检测,结果表明在辣椒上检出病毒种类最多的为临沂、济宁,检测到12种病毒,其次是烟台、聊城,检测到11种病毒,潍坊、菏泽检测到9种病毒,青岛、德州检测到8种病毒,日照检测到7种病毒,淄博检测到6种病毒,日照地区辣椒病毒复合侵染率最高,为100%,菏泽地区复合侵染率最低,为69.23%。分别根据PMMoV的部分CP基因序列、PeVYV部分Rd Rp、CP、MP基因序列以及BWYV部分CP、MP基因序列构建系统发育树,结果表明本研究PMMoV山东分离物SD60与中国贵州分离物的亲缘关系最近,PeVYV山东分离物SDRZ31-1与意大利IT83分离物的亲缘关系最近,BWYV山东分离物SD与韩国分离物LS的亲缘关系最近。【结论】在山东省采集的253份辣椒样品可被15种病毒侵染,PMMoV、CMV为主要病毒种类;在山东新检测到的病毒有MABYV、PeVYV、BWYV、PCV-1和PCV-2;明确了山东省主要辣椒产区病毒病发生情况以及病毒种类的主次关系。     

远离大棚辣椒的主要病害

危害大棚辣椒（甜椒）的主要病害有病毒病、疫病、细菌性斑点病、白粉病和炭疽病等。     

基于小RNA深度测序技术鉴定侵染广东辣椒的病毒种类

【目的】病毒病是广东省辣椒生产上主要病害之一,田间病株率一般为5%—30%,严重时可达100%。本研究旨在探明危害广东辣椒的病毒种类,为辣椒病毒病的防控提供理论依据。【方法】2013—2016年,从广东省广州、佛山、惠州、江门、梅州、湛江、茂名和韶关8市辣椒主要种植区采集疑似病毒病辣椒样品125份,分别提取每份辣椒病样总RNA,对从茂名、梅州、韶关3市采集的病样按地点和症状混合成7份混合病样进行小RNA深度测序分析,根据小RNA深度测序分析结果,对每种病毒分别根据小RNA深度测序拼接的基因片段序列和GenBank数据库中与该拼接序列同源性最高的病毒基因组序列保守区设计2对特异性引物,以小RNA深度测序的病样RNA为模板进行RT-PCR扩增,根据扩增效果对引物进行筛选,进一步应用筛选出的引物,对采集于广东省的125份辣椒病样分别进行RT-PCR检测,根据检测结果明确危害广东辣椒的病毒种类。【结果】从采集于广东省8市的辣椒主要种植区的125份病样中检测到14种病毒,按照检出率从高到低依次为辣椒轻斑驳病毒（Pepper mild mottle virus,PMMoV）(44.0%）、甜椒内源RNA病毒（Bell pepper endornavirus,BPEV）（32.8%）、烟草轻型绿花叶病毒（Tobacco mild green mosaic virus,TMGMV）（31.2%）、辣椒脉斑驳病毒（Chilli veinal mottle virus,ChiVMV）（29.6%）、辣椒黄脉病毒1（Pepper vein yellow virus 1,PeVYV-1）（26.4%）、甜椒斑驳病毒（Pepper veinal mottle virus,PVMV）（25.6%）、黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus,CMV）（18.4%）、辣椒环斑病毒（Chilli ringspot virus,ChiRSV）（16.8%）、辣椒黄脉病毒6（Pepper vein yellow virus 6,PeVYV-6）（16.8%）、马铃薯 Y 病毒（Potato virus Y,PVY）（15.2%）、辣椒褪绿病毒（Capsicum chlorosis virus,CaCV）（14.4%）、蚕豆萎蔫病毒2号（Broad bean wilt virus 2,BBWV-2）（9.6%）、辣椒隐症病毒1（Pepper cryptic virus 1,PCV1）（8.8%）、烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus,TMV）（4.0%）。其中,PMMoV、BPEV、TMGMV、ChiVMV、PeVYV-1和PVMV 6种病毒的检出率在25%以上,但PMMoV、ChiVMV和PVMV分布广泛,PMMoV除了茂名外,ChiVMV除了韶关外,其他7市辣椒产区均有分布;PVMV广泛分布于8市辣椒产区,根据检出率和分布范围,得出PMMoV、ChiVMV和PVMV是危害广东辣椒的优势病毒。同时发现,广东辣椒上多种病毒复合侵染现象普遍,在本研究125份病样中病毒复合侵染率达到88.0%,其中2种、3种、4种、5种、6种、7种和8种病毒复合侵染检出率分别为28.0%、25.6%、12.0%、9.6%、6.4%、1.6%和2.4%,由此可知,2种和3种病毒复合侵染是主要侵染形式。【结论】危害广东辣椒的病毒有14种,其中PMMoV、ChiVMV和PVMV为优势病毒,且复合侵染普遍,2种和3种病毒复合侵染是主要侵染形式。     

辣椒叶脉斑驳病毒研究进展

综述辣椒叶脉斑驳病毒(ChiVMV)的生物学特性、基因组、检测方法等方面的研究进展,并针对国内外当前研究中存在的问题作了相关讨论和展望。