假单孢菌毒素对黑松松针细胞防御酶系统影响

用不同浓度的假单孢菌Ⅱ型(Pseudomonassp.biotypeⅡ)毒素液处理黑松松针,按时间顺序测定与细胞防御酶系统有关的酶活性和可溶性蛋白含量的变化.结果表明:1)经原液和稀释5倍毒素液处理24 h的黑松松针的苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶活性均高于对照且达到最大值,此后原液处理的黑松松针酶活性有逐渐下降的趋势,稀释5倍处理的酶活性保持不变.2)经原液和稀释5倍的毒素液处理24 h的黑松松针超氧化物歧化酶(SOD)酶活性达到活性高峰,与对照值的差异显著.3)毒素使过氧化物酶(POD)活性有逐渐上升的趋势,稀释5倍和原液处理的毒素液对黑松松针POD活性的影响基本相同,在处理72 h内活性一直为升高状态.4)经毒素处理后黑松松针多酚氧化酶(PPO)活性增加,但稀释5倍的毒素诱导其活性较原液增加得快,活性高峰出现得早.5)可溶性蛋白含量:经毒素处理后黑松松针内可溶性蛋白含量较对照处理的含量有所增加.     

荧光假单孢菌的生防遗传改良

综述了荧光假单孢菌生物防治方面的分子生物学研究进展，提出了通过遗传工程手段进一步改良的可行途径。     

荧光假单孢杆菌防治小麦全蚀病的初步研究

应用从小麦根部分离到的荧光假单孢杆菌株hw-5,以不同的浓度采用种子包衣、菌悬液浸种和土壤浇灌3种方法处理种子,研究该菌株对小麦全蚀病的防治效果。结果表明:这3种方法处理过的小麦种子,在苗期均对小麦全蚀病表现出一定的抗性。     

荧光假单胞菌GcM5-1A胞外木质素过氧化物酶的初步纯化及性质研究

本文研究了松材线虫携带的荧光假单胞菌GcM5-1A的培养液经硫酸铵分级沉淀后,各组分中木质素过氧化物酶(LiP)的活性及各组分对黑松悬浮细胞的毒性;还对GcM5-1A菌株胞外LiP进行了初步纯化,并对纯化后的酶学性质进行了研究。结果表明:LiP活性主要出现在50%～70%沉淀组分中;0～20%沉淀组分和50%～70%沉淀组分对黑松悬浮细胞的毒性很强;GcM5-1A菌株培养液经硫酸铵分级沉淀以及DEAE-SepharoseFF两步纯化后,其LiP的比活力从0.81U/mg提高到21.30U/mg;其最适温度为35℃,最适pH为4.0;在15～35℃、pH6.0～9.0范围内,酶活力保持相对稳定;NH2OH·HCl和KCN对酶活力的抑制作用分别达到88%和57%,而NaN3对酶活力的抑制作用只有15%左右;吸收光谱显示该酶在406nm处有一个Soret峰,加入1mmol/LNa2S2O4后,吸光度出现了明显的下降,但Soret峰没有显著移动。     

几株尖孢镰刀菌的绿色荧光蛋白基因转化

利用PEG介导的原生质体转化方法,将绿色荧光蛋白基因转入到6株香蕉枯萎病菌和1株棉花枯萎病菌中。结果表明:转化子连续转接5代能够稳定遗传,荧光强度良好,PCR验证gfp基因已转入到菌株中,为后续研究香蕉枯萎病菌和棉花枯萎病菌的侵染、防治等提供可视化的检测和分析手段。     

荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)MF11对根结线虫病的防效评价

在根结线虫危害严重的番茄田块采集健康植株的根际,从中分离并筛选对根结线虫病具有防治作用的生防菌株.采用稀释分离法以及离体试验获得16株能显著杀灭南方根结线虫二龄线虫(J2)的菌株,其中菌株MF11对J2的致死率最高.基于生理生化分析、gyrB和16S rRNA基因碱基序列比对,确定菌株MF11为荧光假单胞菌(Pseud...     

松材线虫及携带细菌对黑松复合的侵染

从不同松树上分离松材线虫、拟松材线虫、滑刃线虫和小杆线虫,并从松材线虫和小杆线虫体上分离细菌,将线虫无菌化处理后与从线虫体上分离到的荧光假单胞杆菌、产气肠杆菌混合接种无菌黑松苗和愈伤组织。结果表明,单独接种无菌线虫或细菌不能使黑松致病,无菌松材线虫、无菌拟松材线虫只有与有毒性的荧光假单胞杆菌混合接种时才能使黑松无菌苗和愈伤组织发病,细菌通过线虫携带在树体内传播扩散,使松树致病。研究进一步证明了线虫和细菌在松材线虫病致病过程中起协同作用。     

松材线虫病的病理学研究进展

综述了松材线虫病早期症状的研究进展，同时，对线虫侵入后病树的生理学、组织学和病理学变化过程进行了概括。     

西日本松材线虫病生态地理分布图式的研究

本文对西日本98个地域,21个生态因子,采用灰色聚类和模糊聚类的分析方法,研究了松材线虫病(Bursaphelenchus xylophilus)在西日本的生态地理分布图式。其结果将西日本识别为最适宜、适宜、比较适宜、一般适宜、不适宜、最不适宜6类分布环境类型,并给出了分布图。     

松树枯萎病枝条内的寄生虫和微生物群落

对松树枯萎病枝条内的寄生虫和微生物群落进行分离研究,结果发现枯萎松枝条内有大量的寄生虫和微生物,主要是线虫、原虫、真菌和细菌。经形态观察,线虫为松材线虫（Bursaphelenchus xylophilus （Steiner and Btihrer）Nikle）、拟松材线虫（B．mucronatus Mamiya and Enda）和小杆线虫（Rhabditida sp．）;原虫为一种纤毛虫（Paramoecium sp．）;真菌是长喙壳孢（Ceratocystis Ell．et Hals）;细菌主要是假单胞杆菌（Pseudomanus sp．）和芽孢杆菌（Bacillus sp．）。     

云南省不同地区松墨天牛生活史比较研究

为防治松墨天牛和预防松材线虫病,采用林间观察法、查迹调查法和木材解剖法,在12个观测点比较研究云南省不同地区松墨天牛的生活史。松墨天牛在云南省各地1年发生1代,幼虫5龄,以3～4龄幼虫在木质部越冬。成虫期3月下旬至7月上旬,卵期4月中旬至7月中旬,皮下幼虫期4月下旬至10月中旬,木质部幼虫期7月下旬至次年6月中旬。7月下旬至10月中旬是皮下幼虫陆续蛀入木质部时期,蛹期3月上旬至6月下旬。松墨天牛在云南省各地的发育进程不尽相同,主要受气温因素的制约,从滇西南向滇东北方向依次推迟。每年12月至次年1月是伐除虫害木的最佳时期。     

侧耳杀线虫特性研究现状和应用于防治松材线虫病的前景

综述了侧耳的生物学特性和侧耳对线虫的毒杀特性 ,简述了松树材线虫病在中国的发生危害与处理松材线虫病木的方法 ,指出了现有处理方法的缺陷、原因。依据作者的初步试验 ,首次提出了将侧耳引入松材线虫病死木的设想 ,认为侧耳的生态习性、强烈的杀线虫活性、对病木中细菌的融解能力、以及线虫对侧耳的营养性和侧耳对松树立木的安全性 ,将有助于应用侧耳有效处理松材线虫病死木的成功     

松材线虫抗逆态基因Bx-DAF6鉴定及基因沉默

为探究松材线虫抗逆态幼虫形成的分子机理,本文对抗逆态基因daf-6进行了鉴定和基因沉默研究。应用BLAST比对技术,在松材线虫基因组数据中鉴定得到秀丽线虫daf-6的同源基因,命名为Bx-DAF6。应用PCR技术进行Bx-DAF6完整蛋白编码区(CDS)扩增。采用RNAi技术进行Bx-DAF6沉默,分析该基因的沉默对松材线虫抗逆态幼虫形成的影响。PCR扩增得到CDS区全长2 700 bp,Bx-DAF6编码的蛋白质具有固醇传感结构域。Bx-DAF6沉默抑制了2龄幼虫转变为抗逆态幼虫,表明Bx-DAF6在2龄幼虫转变为抗逆态幼虫生理过程中起正向调控作用。      

松材线虫病致病机理的研究进展

从病理生理学和与病害相关的微生物2个方面论述了松材线虫病致病机理的研究进展；从6个方面对病理生理学进行了阐述，包括水分代谢、活性氧代谢、苯丙烷类代谢、酶、毒素和激素，并指出了该领域今后的研究方向。     

中国松材线虫病的发生现状及治理对策

松材线虫Bursaphelenchus xylophilus(Sterneret Buhrer)Nickle是中国重要的外来入侵种,由它引起的松材线虫病对中国森林构成严重威胁,它对林业将产生重要的影响,包括经济、环境/生态和社会的影响。笔者对中国松材线虫病的发生和发展现状进行了概述,并结合中国在松材线虫病控制方面的实践,提出考虑从五个方面即法律和法规方面,国家体制和机制方面,科学研究与科技支撑方面,技术推广应用方面和科学普及与公众教育方面来考虑中国松材线虫病管理策略问题。