苹果离体叶片高效再生不定芽技术研究

苹果不同品种叶片再生不定芽能力不同,嘎拉再生能力最强,其次是乔纳金,富士最难再生。用继代培养３ 年以上、当代培养３０ ～５０ ｄ 的试管苗,取顶部第２ ～４ 叶位幼嫩叶片,远轴面向下接触培养基,再生效率高。诱导叶片再生不定芽适宜培养基为ＭＳ＋ ＴＤＺ１．０ ｍｇ·ｌ－ １（ 富士、乔纳金）或ＢＡ５ ．０ ｍｇ·ｌ－ １ ＋ ＮＡＡ０ ．１ ～０．２ ｍｇ·ｌ－ １ ＋ 蔗糖３５ ．０ ｇ·ｌ－ １ ＋ 琼脂６ ．２ ｇ·ｌ－ １（ 嘎拉） 。     

影响苹果离体培养叶片分化不定芽的因素

影响苹果离体培养叶片分化不定芽的因素丁爱萍，王洪范（中国农业科学院果树研究所，辽宁兴城１２５１００）果树具有童期长和基因高度杂合两大特点，使其传统的有性杂交育种成效较低。生物技术的应用为果树育种开辟了新途径。利用转基因技术已获得近百种植物的转基因植株...     

苹果离体叶片植株再生研究进展

对影响苹果离体叶片植株再生的主要因子,包括基因型、叶片来源和接种方式、培养基及其添加物、黑暗培养等研究进展进行了综述,并提出了存在问题及今后发展方向。     

影响苹果离体叶片再生的因素分析

综述了影响苹果离体叶片再生的因素，内因主要包括基因型，外植体类型和外植体的发育状态；外因主要是添加的激素种类，浓度和配比，以胶培养条件。同时阐明了愈伤组织和不定芽诱导，产生的途径。     

苹果新品种'鲁丽'离体叶片高效不定芽再生体系的建立

以早熟苹果优良新品种'鲁丽'无菌苗的离体叶片的外植体为试材,采用离体组织培养方法,研究了植物生长调节物质及碳源对叶片高效不定芽再生的影响,以期获得诱导'鲁丽'叶片高效不定芽再生的适宜培养基组成.结果 表明:不依赖于植物生长调节物质的组成,碳源D-山梨醇相比蔗糖明显提高不定芽再生率和平均单位叶片不定芽数.在相同碳源条件下,不定芽再生率和单位叶片不定芽数均表现为塞苯隆(TDZ)高于6-苄基氨基嘌呤(BA),但TDZ和BA之间没有达到差异显著水平;TDZ及BA不同浓度间差异不显著.诱导不定梢绿苗生根,除了较高浓度1.0 mg·L-1 IBA处理外,基本培养基1/4MS比1/2MS显著提高不定梢生根率;在基本培养基1/4MS上,生长素物质吲哚乙酸(IAA)比吲哚丁酸(IBA)显著提高生根率和单株生根数.在基本培养基1/2MS上,IAA和IBA的生根率和单株生根数均差异不显著.IAA比IBA诱导生根速度快,IAA诱导的不定根从绿苗茎横切面直接产生,没有愈伤产生,最高生根率为80.8％,平均单株生根数为4.2条.     

寒富苹果叶片离体再生及四倍体诱导

为建立寒富苹果高效的离体再生体系和多倍体诱导体系,以试管苗叶片为外植体,研究了培养基中激素对寒富叶片再生芽的影响及适宜的四倍体诱导方法。结果表明,当培养基中BA质量浓度为0.5mg/L时,再生频率最高达35.7%;当培养基中BA质量浓度为2.5mg/L时,再生频率超过90%,平均再生芽数在4以上。在培养基中附加1.0mg/LTDZ,再生频率达100%,平均再生芽数达19.47。以附加15、30、60、120mg/L秋水仙素的液体再生培养基处理叶片5d,各个质量浓度处理均诱导出四倍体植株,诱变率在5.3%～22.2%之间;寒富苹果叶片在附加50mg/L秋水仙素固体再生培养基上处理5d亦获得了四倍体植株。研究结果表明寒富苹果叶片具有极强的不定芽再生能力,叶片再生过程中进行秋水仙素处理是获得其四倍体的一个有效途径。     

红将军苹果离体叶片高频再生体系研究

以中熟红富士品种红将军组培苗的叶片为试材,研究了离体叶片诱导再生不定芽过程中不同激素种类与组合、暗处理时间、取叶部位等因素对再生率的影响。结果表明,试管苗继代培养3～4代,当代培养25～30d,取顶部嫩叶3～4枚,剪除叶片边缘,将剪切的叶片中部以近轴面接触在最佳诱导分化培养基上:MS+TDZ1.0mg/L+IAA0.5mg/L+蔗糖30g/L,培养基pH值5.8,黑暗培养10d后,转入光照培养条件下,再生频率达100%,再生芽数平均4.6个。叶片再生不定芽分化后15～20d转接到苹果继代培养基MS+BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L上,当不定芽长度约2cm时再转接到1/2MS+IBA0.5mg/L+NAA0.5mg/L+Ac0.5g/L+蔗糖2%的生根培养基上,光培养15d后,生根率可达86.0%。     

七月酥梨离体叶片诱导不定芽的研究

以七月酥梨试管苗为试材,探讨了培养基种类、生长调节剂种类及浓度、暗培养天数对叶片再生的影响。结果表明,七月酥梨离体叶片适宜横切3刀后远轴面接触培养基上进行接种,最适宜培养基是:NN69培养基+6-BA 5.0 mg/L+IBA 0.3 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂5.0 g/L,接种后需要暗培养3周。     

马缨杜鹃离体叶片高效再生不定芽及其组织细胞学研究

以马缨杜鹃(Rhododendron delavayi var. delavayi)试管苗叶片为材料,采用噻苯隆(TDZ)或玉米素(ZT)结合NAA诱导离体叶片再生植株,并对再生过程进行形态学和组织细胞学观察。结果表明,TDZ诱导马缨杜鹃离体叶片发生不定芽的作用强于ZT,WPM+TDZ 0.08 mg·L^-1+NAA 0.01 mg·L^-1是马缨杜鹃离体叶片再生不定芽的最佳培养基,芽的分化率和分化数量分别为83.33%和4.29个;其再生方式为器官直接发生,且属于多起源,再生过程依次经历细胞增殖、细胞脱分化、细胞再分化、不定芽原基形成与发育4个关键阶段。     

影响苹果叶片不定芽再生的几个因素

影响苹果叶片不定芽再生的几个因素孙清荣（山东省果树研究所泰安２７１０００）１９８５年Ｈｏｒｓｃｈ等首创叶盘法，采用烟草叶片切块进行基因转移，获得了转基因植株。本文研究了除叶片切块之外的另３种切伤方法及两种不同放置方式对叶片不定芽再生的影响，同时比较了...     

虎尾兰叶片的离体再生不定芽

虎尾兰为多年生观叶植物,具有较高的观赏价值.但其一般为单生株,不易分株繁殖,难以满足人们需求.通过对虎尾兰进行组培快繁,实现其规模化生产,可满足花卉市场需求.     

苹果离体叶片再生体系两步培养法的研究

通过对苹果离体叶片两步再生法的研究,建立了乔纳金苹果试管苗的叶片再生体系。试验表明,2, 4-D能促进愈伤组织的形成和增殖,影响外植体脱分化和再分化的趋向。BA影响外植体形成愈伤组织的能力,对不定芽再生具有显著影响。IAA对愈伤组织的形成几乎无影响,但对再生不定芽的生长影响较大。诱导愈伤组织的培养基为MS+BA 1 0mg·L-1 +IAA 0 2mg·L-1 +2, 4 -D 0 8mg·L-1时诱导率可达100%;分化不定芽的培养基为MS+BA4 0mg·L-1 +IAA0 2mg·L-1时最高分化率也达 100%。暗培养 1月左右即可得到再分化的不定芽。     

磨盘柿离体叶片愈伤组织发生及不定芽诱导

研究了培养基种类、植物生长调节剂配比、叶片不同部位及培养条件对磨盘柿离体叶片愈伤组织发生及不定芽再生的影响。适宜磨盘柿叶片再生的基本培养基为改良MS(1／2 N),生长调节剂为ZT 4.0~6.0 mg/L或TDZ 1.0mg／L与IAA 0.1 mg／L组合,不宜用BA和高浓度的NAA;ZT和TDZ促进叶片再生的方式不同,前者利于直接再生,后者需降低细胞分裂素浓度,二次诱导使芽点生长成苗;叶片接种后暗培养2~3周再生效率高;叶片不同部位中以叶基部最易再生,其次为叶中部,叶尖最差。     

香玲核桃离体叶片再生体系的建立

为解决核桃种质资源的实验室保存及转基因研究等问题,研究了暗培养时间、叶片放置方式及不同浓度激素组合(BA、NAA、TDZ)对香玲核桃叶片再生的影响。试验结果表明,最适宜的暗培养时间为14d;近轴面放置效果最好;不同组合的激素配比对叶片再生不定芽能力不同,最适宜香玲核桃叶片再生的培养基为:MS+BA0.5mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+TDZ1.0mg·L-1+sucrose30g·L-1+agar6g·L-1,在该培养基上,离体叶片不定芽再生率达60%,每叶片平均再生不定芽数超过1.1个。筛选得到了香玲核桃离体叶片的最适分化及生根培养基,对离体再生培养条件进行优化,为香玲核桃的种质资源保存及遗传转化研究奠定了基础。     

满园香梨叶片不定芽的诱导

采用正交试验设计研究了不同基本培养基、TDZ、生长素种类及其浓度4个因素组合对满园香梨(Pyrusus鄄suriensisMaxim.cv.Manyuanxiang)离体叶片不定芽再生的影响。结果表明,基本培养基的种类是影响叶片不定芽再生最重要的因素,其次是生长素的种类。通过叶片不定芽再生频率和平均每叶再生不定芽数分析表明,NN69+TDZ3.0mg/L+IAA0.2mg/L为满园香梨叶片不定芽发生的最佳培养基组合,在该培养基组合上,满园香梨叶片再生率和平均再生芽数分别达到了74.8%和4.40。同一叶片的基部和顶端比中部更有利于不定芽的再生。     

梨离体叶片诱导不定芽的研究

初步探讨了梨的两个品种（冀蜜、丰水）试管无性系叶片碎片诱导不定芽再生过程中几个因素的影响,明确了分别以Ｎ６、ＮＮ６９、ＭＳ为基本培养基附加ＴＤＺ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＣＨ２５０ｍｇ／Ｌ及培养条件对其再生不定芽的影响。在ＮＮ６９基本培养基上获得了最佳效果,先期暗培养对再生有促进作用。     

甜樱桃砧木离体叶片愈伤组织诱导及不定芽再生

叶片再生效率的高低直接影响目的基因转化的成功率,为建立稳定、高效的樱桃不定芽离体再生体系,以30～40d苗龄的甜樱桃砧木ZY-1的组培继代苗为试材,取上部幼嫩叶片或不含腋芽的茎段,分别从培养基生长调节剂配比、接种材料类型、叶片接种部位、接种方式以及培养条件等方面进行了不定芽再生技术研究。结果表明,培养基中添加7.0mg/L的6-BA与0.5～1.0mg/L的IBA配比时不定芽再生率和出芽数均较高,TDZ和NAA不适于诱导ZY-1叶片再生不定芽;接种继代苗茎段比叶片再生率高;接种叶片以选择嫩叶横切2刀、远轴面向下接触培养基的方式为好;叶片不同部位处理以带叶柄的基部叶块最易再生;叶片接种后在25℃室温条件下,先暗培养3周再照光,利于不定芽的再生。     

秋福红树莓叶片离体再生植株研究

以红树莓品种秋福(Rubus L.cv.Autumn Bliss)离体叶片为外植体,研究适合其再生植株的叶片部位、放置方式、植物生长调节剂以及暗培养时间等条件。结果表明,叶片外植体接种于MS+TDZ2.00mg/L+IAA0.10mg/L的培养基,暗培养2～3周转移至正常光照下培养效果最好,愈伤组织形成率、不定芽再生率和外植体不定芽数分别为100.00%、95.83%和(5.57±0.27)个。将再生芽接种于1/2MS+IBA0.10mg/L的培养基中,35d后生根率达100.00%。再生植株炼苗后移栽,30d时成活率达97.30%,成功地建立了红树莓叶片的离体再生体系。     

甜樱桃矮化砧木RUS-25离体叶片再生植株技术研究

利用甜樱桃矮化砧木RUS-25无菌试管苗的叶片作外植体,进行离体叶片再生植株研究,结果表明,培养条件、激素种类和配比均影响不定芽的再生,最适宜的激素配比为MS 6-BA2.0mg/L IBA0.5mg/L NAA0.2mg/L,不定芽诱导率为90.3%。     

外源抗坏血酸对离体苹果叶片衰老的影响

 以苹果(Malus domestica Borkh. ) 品种‘嘎拉’秋梢成熟叶片为试材, 在5 mmol·L ^{- 1}抗坏血酸(AsA) 培养条件下, 研究了外源AsA 对离体苹果叶片衰老过程( 0 ～72 h) 中抗坏血酸—谷胱甘肽(AsA - GSH) 循环各组分和AsA合成关键酶L - 半乳糖酸- 1, 4 - 内酯脱氢酶(GalLDH) 的影响。结果表明, 外源AsA部分抑制了离体苹果叶片衰老过程中膜脂过氧化, 降低了H2O2含量, 但对表示膜损伤的相对膜透性影响不大。对AsA - GSH循环各组分来说, 外源AsA维持了叶片衰老过程中抗坏血酸过氧化物酶(APX) 和脱氢抗坏血酸还原酶(DAHR) 的高活性, 部分抑制了单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR) 活性的下降, 同时降低了GSH的氧化程度, 从而提高了AsA含量和再生能力。外源AsA 在衰老前期抑制了GalLDH活性, 降低了AsA的合成能力, 而后期维持了GalLDH的高活性。