金线莲的无菌播种和组织培养

金线莲蒴果进行无菌播种成熟期为40~60 d,播种培养基为1/2MS+AC1 g·L~(-1)+香蕉泥100 g·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1)+琼脂5 g·L~(-1)。增殖培养材料顶芽优于茎段,2个品种间增殖培养基激素最适浓度和配比存在差异。适合金线莲生根壮苗培养基为1/2MS+活性炭1 g·L~(-1)+香蕉泥200 g·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1)+琼脂5 g·L~(-1)。     

东亚唐棣增殖培养条件的优化

以东亚唐棣(Amelanchier asiatica)无菌试管苗为材料,研究了不同基本培养基、激素组合、蔗糖浓度以及琼脂浓度对东亚唐棣增殖的影响。结果表明:最为适合东亚唐棣增殖的培养基组合为MS+6-BA 1.00mg·L~(-1)+NAA 0.05mg·L~(-1)+IBA 0.10mg·L~(-1)+40g·L~(-1)蔗糖+8g·L~(-1)琼脂,增殖系数可达6.83,幼苗叶片生长舒展,苗高和茎的生长量也有了很大提高。试验结果将为东亚唐棣工厂化育苗提供技术指导。     

兰州百合不同外植体植物组织培养

本研究分别以兰州百合鳞茎、茎、叶为外植体,探究不同激素浓度的培养基、消毒方法对兰州百合快速繁殖的影响,筛选出诱导愈伤组织及丛生芽最佳培养基、最佳消毒方法,以及不同外植体的诱导效率。诱导愈伤组织及丛生芽最佳培养基为MS培养基加6-苄基腺嘌呤(6-BA)1.0mg·L~(-1)加2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)3.0mg·L~(-1)加蔗糖30g·L~(-1)加琼脂8g·L~(-1);生根培养基为MS加蔗糖30g·L~(-1)加琼脂6g·L~(-1)加α-萘乙酸(NAA)0.1mg·L~(-1);最佳消毒方法为75%酒精30s加0.1%升汞12min(中间换1次升汞溶液)加无菌水冲洗5～8次;不同外植体诱导效率大小顺序为鳞茎茎叶。     

紫叶稠李组织培养与快速繁殖

为建立紫叶稠李组织培养快速繁殖方法,对紫叶稠李重要种质材料的保存扩繁提供技术支持。本研究以紫叶稠李为材料,以MS培养基为基本培养基,通过不同种类和浓度的植物生长调节剂配比试验,筛选紫叶稠李快速繁殖与生根的最佳培养基组成。结果表明:紫叶稠李试管苗最佳增殖培养基为MS+2～3 mg·L~(-1) 6-BA+0.1 mg·L~(-1) NAA+30 g·L~(-1)蔗糖+8 g·L~(-1)琼脂,最佳生根培养基为1/2 MS+0.1 mg·L~(-1) IBA+30 g·L~(-1)蔗糖+8 g·L~(-1)琼脂,生根诱导20 d,生根率达90%。将生根的试管苗在室外进行炼苗后,移栽到营养钵中,成活率达到90%以上。     

不同培养条件对菜用大黄组培苗玻璃化的影响

为预防菜用大黄玻璃化苗的产生、提高组培苗的培养质量,以菜用大黄丛生芽为外植体,以1/2 MS为基本培养基,研究了蔗糖、琼脂、6-BA对菜用大黄组培苗玻璃化现象的影响,同时测定了玻璃化苗与正常苗的生理指标差异。结果表明:适于菜用大黄组培苗最大增殖及玻璃化率最小的培养基组合是添加30g·L~(-1)蔗糖+6g·L~(-1)琼脂+1.0mg·L~(-1) 6-BA+1.0mg·L~(-1) NAA的1/2 MS培养基;正常苗的可溶性糖和可溶性蛋白含量明显高于玻璃化苗,而玻璃化苗的组织含水量比正常苗的略高。     

红掌‘香妃’组织培养与快繁技术

以红掌‘香妃’茎尖为外植体,进行‘香妃’组培快繁技术研究。结果表明,茎尖的最佳消毒方法为0.1%Hg Cl_2处理20 min,污染率可降低到71.7%;初代培养基为MS+30 g·L~(-1)蔗糖,萌发率可达90.0%;不定芽最适继代增殖培养基为MS+1.0 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA+30 g·L~(-1)蔗糖,增殖系数达3.47,芽苗生长健壮;生根培养以1/2 MS+0.4 mg·L~(-1)NAA+20 g·L~(-1)蔗糖为最佳培养基,生根率可达100%,根系发达。     

彩色马蹄莲'卡格丽'组织培养及快繁技术

以彩色马蹄莲‘卡格丽’球茎为外植体,探讨其组织培养技术。结果表明,经75%酒精处理1 min,再用0.1%HgCl_2消毒20 min,可建立彩色马蹄莲‘卡格丽’无菌体系。培养基优化试验表明,‘卡格丽’最适继代培养基为:MS+1.5 mg·L~(-1)6-BA+0.2 mg·L~(-1)NAA+30 g·L~(-1)蔗糖;最适生根培养基为:1/2MS+0.6 mg·L~(-1)NAA+0.2 g·L~(-1)活性炭+15 g·L~(-1)蔗糖。     

过山蕨组织培养技术研究

为建立过山蕨组培工厂化育苗技术体系,本试验以其可育叶为外植体,以GGB途径进行增殖扩繁,开展了组织培养的深入研究。结果表明:过山蕨可育叶诱导形成GGB的最佳培养基为1/2MS+琼脂6g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+BA 0.1g·L~(-1)+NAA 0.5g·L~(-1)+AC 0.5g·L~(-1);GGB增殖的最佳培养基为1/2MS+琼脂6g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+BA 0.1g·L~(-1)+NAA 0.3g·L~(-1)+AC 0.3g·L~(-1);GGB形成孢子体及完整植株的最佳培养基为1/2MS+琼脂6g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+IBA 0.05g·L~(-1)+AC 0.3g·L~(-1);试管苗移栽28d后,成活率在98%以上。     

甜椒无菌苗培养条件的优化

以茄门甜椒种子为试材,对无菌苗培养前的种子消毒剂种类及不同消毒时间、浓度等的消毒效果进行了比较研究;对影响无菌苗生长的培养基配方、pH值及生长时间等因素进行了探讨。结果表明,甜椒无菌苗的最佳消毒流程和生长条件为:55℃无菌水浸种15 min,室温静置4~5 h,用10%NaClO消毒30 min,无菌水冲洗3次,接种至1/2MS培养基+15 g/L蔗糖+7.5 g/L琼脂,pH值为5.8,(25±1)℃,子叶长出6~10 d左右,即可作为转基因用无菌苗。     

东方百合遗传转化组培体系的建立

为建立高效稳定的基因转化受体系统,以东方百合"西伯利亚"(Lilium orienta l"Siberia")无菌苗叶片和鳞片叶为外植体,使用不同种类和浓度的生长素与细胞分裂素、蔗糖、抗生素筛选等方法进行了不定芽的诱导分化、试管苗小鳞茎诱导及生根等研究。结果表明:鳞片诱导最佳分化培养基为MS+KT2.0+NAA0.2mg·L~(-1),试管苗小鳞茎诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT2.0 mg·L~(-1)+NAA0.2 mg·L~(-1)+75g·L~(-1)蔗糖,试管苗叶片分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA0.1 mg·L~(-1),试管苗鳞片叶分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+2,4-D 0.2 mg·L~(-1)。生根培养基为1/2MS+NAA0.2 mg·L~(-1)。抗生素敏感性试验表明,百合叶片的卡那霉素选择压为100 mg·L~(-1),鳞片叶为120 mg·L~(-1)。     

油菜无菌苗最佳生长条件的探讨

以甘蓝型油菜种子作为试验材料,对无菌苗培养前的种子消毒剂种类及不同消毒时间、浓度等的消毒效果进行了比较研究;对影响无菌苗生长的培养基配方、pH值及生长时间等因素进行了探讨。结果表明:油菜无菌苗的最佳生长条件为:70%酒精表面消毒1~2 min后,用15%H2O2消毒35 min,无菌水冲洗3~5次,无菌水浸泡种4~15 h,接种至1/2 MS培养基 20 g/L蔗糖 7.5 g/L琼脂,pH值为5.8,25℃,生长4~6 d即可作为转基因用无菌苗。     

日本红枫组织培养技术研究

对日本红枫茎段组织培养过程中的外植体灭菌、启动培养、增殖培养和生根培养等进行了研究。结果表明:日本红枫外植体经1.0%次氯酸钠灭菌4 min后,成活率达到最高,为78.9%;以MS为基本培养基筛选出适宜日本红枫的启动培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1);在MS培养基中附加0.005 mg·L~(-1)TDZ时,可获得最佳的增殖效果,最佳的生根培养基为1/2MS+IBA 0.2 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂5g·L~(-1),生根率可达97.8%。幼苗经炼苗后移栽,成活率在90%以上。     

长筒花试管开花诱导影响因素

以苦苣苔科忌寒苣苔属长筒花(Achimenes‘Kim blue’)试管苗为试验材料,探究了植物生长调节剂种类及质量浓度、无机盐质量分数、不同碳源和琼脂质量浓度对其试管开花诱导的影响。结果表明:花芽诱导培养基中不宜添加细胞分裂素,添加适宜质量浓度生长素NAA与IBA即能诱导开花;增大培养基中P、K元素质量分数有利于花芽诱导;适宜的开花诱导培养基为MS(KNO_3+KH_2PO_4)+NAA0.1 mg·L~(-1)+IBA0.1 mg·L~(-1)+PP_(333)0.05mg·L~(-1),添加蔗糖40 g·L~(-1)+琼脂4 g·L~(-1)。     

辣木快速繁殖体系

研究通过对辣木种子消毒方法、增殖阶段6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)浓度、生根阶段吲哚丁酸(IBA)浓度、移栽炼苗时间进行筛选,确定辣木种子适宜的消毒方法为75%的酒精浸泡30s后用1%NaClO消毒15 min;增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+30g/L蔗糖+7.0g/L琼脂(pH5.8);生根培养基为1/2 MS+0.4mg/L IBA+30g/L蔗糖+7.0g/L琼脂(pH5.8);移栽时炼苗6d较适宜。由此建立了辣木快速繁殖体系,为规模化生产辣木提供参考。     

山药组培快繁技术条件的优化

以‘明淮2号’山药为试验材料,进行山药快繁技术条件的优化研究。结果表明:初代培养的外植体以中部带芽茎段为好。最好的消毒方法是用70%的酒精浸泡10s,0.1%HgCl_2浸泡10min,污染率为15.0%,死亡率为6.7%。初代培养基为:MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+NAA0.05mg·L~(-1)+PVP100mg·L~(-1)+VC 500mg·L~(-1)+AC0.5g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1),2周后转入相同配方的固体培养基中,褐化率为36.7%,诱导率为81.7%。增殖培养基为:MS+6-BA2.0mg·L~(-1)+KT1.0mg·L~(-1)+NAA0.05mg·L~(-1)+PP_(333)0.05mg·L~(-1)+琼脂粉4.0g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1),30d后增殖系数为2.97。生根培养基为:1/2MS+NAA0.3mg·L~(-1)+IBA0.2mg·L~(-1)+AC1.0g·L~(-1)+琼脂粉4.5g·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),30d生根率达91.3%。组培苗炼苗2周,取出用多菌灵浸泡后移栽到草炭土穴盘中,成活率达70%以上。     

文心兰离体培养技术研究

应用植物离体培养技术研究文心兰增殖技术。结果表明:文心兰原球茎增殖的最佳培养基为MS+6-BA4mg·L~(-1)+NAA0.4mg·L~(-1)+活性炭1.5g·L~(-1)+蔗糖20.0g·L~(-1);最佳的幼苗分化培养基是1/2MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+NAA0.5mg·L~(-1)+蔗糖20.0g·L~(-1)+琼脂10.0g·L~(-1)为佳;最佳的壮苗培养基以1/2MS+NAA1.0mg·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1)+活性炭2.0 g·L~(-1)+黄瓜汁10%为佳。     

黑龙江省一 、二积温区水稻花药培养条件优化

为提高黑龙江省第一、二积温带水稻花药培养效率,促进该技术在粳稻新品种选育中的应用,以五优稻2号及黑龙江省第一、二积温区骨干亲本的F1、F2为材料,对提高花培效率的几个关键环节如取材标准、关键时期培养基配方和培养条件等进行了方法改良。结果表明:取穗以叶枕距、颖壳颜色和花药长度等多重因素为标准;适用于以五优稻2号为亲本的诱导培养基配方为进口N6+凝胶3.6g·L-1+蔗糖60g·L-1+2,4-D2mg·L~(-1);分化培养基配方为MS+KT 2mg·L~(-1)+IAA 1mg·L~(-1)+蔗糖30g·L-1+琼脂4g·L-1,同时辅以16h光照;生根培养基中加入3～6mg·L~(-1)多效唑,可以壮苗促分蘖,提高移栽成活率。     

冬青的组织培养与快速繁殖技术

以冬青的新梢茎段为外植体进行了离体培养与快速繁殖研究。筛选出适宜的诱导、增殖及生根培养基。结果表明:适宜的启动培养基为MS 6-BA0.5 mg·L~(-1) GA31.0 mg·L~(-1) 蔗糖3%和MS 6-BA1.0 mg·L~(-1) NAA0.05 mg·L~(-1) 蔗糖3%;适宜继代增殖培养基为MS 6- BA0.5～1.0 mg·L~(-1) NAA0.05 mg·L~(-1) 蔗糖3%;最适宜生根培养基为:1/2MS NAA0.4 mg·L~(- 1) 2.5%蔗糖。上述培养基均添加0.6%琼脂,pH5.8。培养温度为25±2℃,光照强度为2000 lx,光照时间12h/d。采用混合基质作栽培基质。移栽成活率可达80%。     

串珠石斛组培快繁技术

[目的]探讨串珠石斛再生体系及快繁技术,为其规模化生产提供技术支持。[方法]以成熟度为80%的未开裂串珠石斛蒴果种子为外植体,对诱导种子萌发、原球茎增殖和分化、生根壮苗及组培苗移栽等步骤进行优化。[结果]串珠石斛种子萌发及诱导原球茎最适培养基为:1/2MS+6.5 g·L~(-1)琼脂+25 g·L~(-1)蔗糖+1.0 g·L~(-1)活性炭+1.0 g·L~(-1)蛋白胨+1.5 mg·L~(-1) 6-BA+0.5 mg·L~(-1) NAA;接种30～40 d对比发现,对原球茎增殖和分化有明显促进作用的继代培养基为:MS+6.5 g·L~(-1)琼脂+25 g·L~(-1)蔗糖+1.0g·L~(-1)活性炭+2.0 mg·L~(-1) 6-BA+40 g·L~(-1)马铃薯;最佳生根壮苗培养基为:MS+6.5 g·L~(-1)琼脂+25 g·L~(-1)蔗糖+1.0 g·L~(-1)活性炭+45 g·L~(-1)香蕉,生根率可达93.2%。[结论]以蒴果种子为外植体,可以建立串珠石斛高效快繁技术体系。     

独角石斛组培快繁技术

[目的]探讨独角石斛组织培养及快繁技术,为其规模化生产提供技术支持。[方法]以独角石斛侧芽作为外植体,应用正交试验等方法,对不定芽诱导、增殖、壮苗生根培养及组培苗移栽等进行优化。[结果]独角石斛侧芽可诱导出不定芽,以MS+2.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.1 mg·L~(-1) NAA+30 g·L~(-1)蔗糖+7.5 g·L~(-1)琼脂为培养基,不定芽诱导效果最好;丛生芽最适继代增殖培养基为:MS+2.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.5 mg·L~(-1) KT+0.4 mg·L~(-1) NAA+30 g·L~(-1)蔗糖+7.5 g·L~(-1)琼脂,增殖系数达4.78;丛生芽最适生根培养基为:1/2 MS+0.4 mg·L~(-1) NAA+0.5 mg·L~(-1) IBA+0.5 g·L~(-1) AC+50 g·L~(-1)土豆+50 g·L~(-1)香蕉泥+20 g·L~(-1)蔗糖+7.0 g·L~(-1)卡拉胶,生根率达100%,苗生长健壮;组培苗经15 d炼苗后移栽到水苔基质中,45 d后成活率达90.5%。[结论]通过侧芽直接诱导不定芽,可以建立独角石斛高效快繁技术体系。