樱花组培快繁体系建立及优化的研究

通过研究不同灭菌时间对3种樱花外植体成活率的影响、不同6-BA和NAA浓度对樱花芽诱导和增殖的影响、IBA和活性炭对樱花生根的影响,以及不同移栽基质对樱花组培苗成活率的影响,建立樱花组培快繁体系。结果表明,3种樱花外植体用10% NaClO表面消毒10 min、以MS为基本培养基、诱导和增殖培养添加6-BA 1.0 mg·L^-1和NAA 0.2 mg·L^-1为最优外源激素浓度;增殖培养基中添加活性炭1 g·L^-1,可显著提高樱花增殖系数;生根培养基用1/2MS+IBA 1.0 mg·L^-1+AC 1.0 g·L^-1+3%蔗糖+0.7%琼脂(pH值5.8),生根率最高达到93%,在移栽基质(泥炭土:蛭石:珍珠岩3:1:1)中樱花组培苗成活率最高可达84%。     

白花除虫菊高效再生体系的建立

【目的】筛选出适宜白花除虫菊外植体的消毒方法、外植体诱导、继代培养及生根培养阶段适宜的培养基配方，建立白花除虫菊高效再生体系。【方法】以白花除虫菊尚未张开的花蕾作为再生体系的外植体材料，花蕾经过灭菌消毒以后，采用MS固体培养基，比较不同种类植物生长调节剂浓度配比对白花除虫菊花蕾诱导出芽、增殖及生根等关键环节的影响。【结果】白花除虫菊花蕾外植体最适宜的消毒条件为75%酒精处理30 s后用0.10%氯化汞溶液消毒10 min，之后用15%次氯酸溶液处理15 min；白花除虫菊花蕾诱导芽的最适培养基为MS+2.0 mg·L^-16-BA+0.5 mg·L^-1TDZ+0.2 mg·L^-1IBA；白花除虫菊芽增殖的最适培养基为MS+1.0 mg·L^-16-BA+0.1 mg·L^-1TDZ+0.1 mg·L^-1IBA；白花除虫菊生根的最适培养基为MS+0.1 mg·L^-1IAA+0.1 mg·L^-1IBA；炼苗移栽的最适基质为...     

唐古特瑞香愈伤组织培养与再生体系建立

以唐古特瑞香幼嫩叶片为材料,进行愈伤组织诱导与植株再生试验,以期建立唐古特瑞香再生体系,为其无性系的快速繁殖奠定基础。将幼嫩叶片进行表面灭菌后接种于初代培养基中,初代培养时,存在褐化现象,愈伤诱导前需进行除褐培养,除褐后的外植体经愈伤诱导、不定芽分化、增殖培养、生根培养和幼苗出瓶移栽的试验过程,筛选出了最佳培养方案。除褐培养基以MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+PVP 200 mg·L^-1效果较好,在此培养基上连续转移3次后褐变消失。愈伤诱导培养基为MS+6-BA 3.0 mg·L^-1+2,4-D 2.0 mgL^-1,诱导率95.5%;芽苗分化培养基为MS+ZT 2.0 mg·L^-1+TDZ 0.1 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1,分化率93.2%,平均芽数为8.66条;不定芽增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+IBA 0.3 mg·L^-1,增殖倍数为12.21,平均苗高4.81 cm;生根培养基为1/2 MS+NAA 0.5 mg·L^-1,生根数平均为3.83条,生根率为88.72%以上;组培苗移栽于珍珠岩中生长良好,成活率达90%以上。本研究初步建立了唐古特瑞香再生体系,为其无性繁殖奠定了理论基础。     

白花悬钩子的叶片组培快繁与植株再生研究

为获得一套完整高效的白花悬钩子(Rubus leucanthus Hance)组培快繁技术体系,以叶片为外植体,系统研究了外植体不同灭菌时间、不同植物激素配比及浓度对愈伤组织诱导及丛生芽分化、增殖和生根的影响,并进行了组培苗移栽。结果表明：最佳的外植体灭菌方式为2%NaClO溶液2 min+0.1%HgCl₂溶液5 min,实现了污染率最低(23.33%)、存活率最高(73.33%);最佳的丛生芽分化诱导培养基为MS+3.0 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 KT+0.5 mg·L^-1 NAA,愈伤组织诱导率为100%,芽诱导率为93.33%;6-BA与KT对增殖系数有显著影响,最佳的继代增殖培养基为MS+2.5 mg·L^-1 6-BA+1.5 mg·L^-1 KT+0.4 mg·L^-1 NAA,培养20 d的增殖系数达7.84;最适的生根培养基为1/2MS+1.0 mg·L^-1 IBA,生根率为10...     

楸树优良品种‘朝霞’增殖及生根培养的研究

以‘朝霞’楸带腋芽的茎段为试验材料,通过正交试验设计,研究基本培养基、植物生长调节剂成分及含量对不定芽增殖及生根的影响。结果表明,继代培养阶段,基本培养基类型是影响增殖系数的主要因素,不定芽增殖最佳培养基为:DKW+6-BA1.6mg·L^-1+NAA0.01mg·L^-1,增殖系数高达3.1。生根培养阶段,经极差分析和方差分析得知生根率最高的培养基为WPM+NAA0.1mg·L^-1,生根率高达97%,添加物活性炭对根数的增加有抑制作用,‘朝霞’楸最适生根培养基为WPM+NAA0.1mg·L^-1+活性炭0g·L^-1。本研究旨在筛选楸树优良品种‘朝霞’楸不定芽增殖和生根培养基,为建立‘朝霞’楸再生体系提供技术支持。     

美洲黑杨杂交良种‘鲁林9号杨’离体再生体系的建立

以‘鲁林9号杨’无菌叶片与叶柄作为外植体,建立‘鲁林9号杨’的离体再生体系。结果表明,叶片诱导不定芽的最佳培养基为1/2 MS+0.3 mg·L^-16-BA+0.15 mg·L^-1NAA,诱导出芽率为100%,平均出芽数为10.83个;叶柄诱导不定芽的最佳培养基为1/2 MS+0.5 mg·L^-16-BA+0.1 mg·L^-1NAA,诱导出芽率为94%,平均出芽数为5.67个;不定芽生根的最佳培养基为1/2MS+0.15 mg·L^-1IBA+0.03 mg·L^-1NAA,其生根率为95.2%,平均每株生根5条。组培苗炼苗移栽成活率达95%。该研究旨在建立‘鲁林9号杨’的离体再生体系,为‘鲁林9号杨’品种遗传改良和分子生物学研究等提供试验基础,为培育高品质、速生、高抗的杨树新品种奠定理论基础。     

紫萼组织培养技术

试验以紫萼(Hosta ventricosa)的幼嫩花序为起始材料,研究其组织培养方法。结果表明:2%次氯酸钠溶液灭菌14 min为最佳灭菌方式;最适合的诱导培养基为MS+6-BA 4 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1。将诱导的健康芽转至6-BA 4 mg·L^-1、NAA 0.5 mg·L^-1和2,4-D 0.25 mg·L^-1的增殖培养基中,伸长倍率为3.5,增殖倍率为3.9。将健康不定芽转至生根培养基,以1/2 MS+ABT 0.5 mg·L^-1为佳,在此培养基上可形成粗壮健康的白色根,长度2~9 cm,数量4~6根。将完整植株转移至园土∶泥炭∶珍珠岩体积比为1∶3∶1的基质中炼苗2个月,成活率达97%以上,可地栽。     

山桐子离体培养植株再生

以种子和叶片为外植体,研究了离体条件下外植体类型及植物生长调节剂对山桐子器官发生和植株再生的影响。结果表明:种子为诱导愈伤组织的适宜外植体; 在MS+1.0 mg·L^-16-BA +1.0 mg·L^-1 NAA +3%蔗糖+0.6%琼脂的培养基上,愈伤诱导率达96.8%; 继代培养在MS+0.08 mg·L^-1 TDZ + 1.5 mg·L^-16-BA +0.05 mg·L^-1 NAA 培养基上能成功的诱导芽的分化,诱导率达48.3%以上; 芽增殖的适宜培养基为1/2MS +0.03 mg·L^-1 TDZ +2.0 mg·L^-16-BA +0.1 mg·L^-1 NAA +3%蔗糖+0.6%琼脂,增殖系数为4.83; 在1/2MS+ 0.5 mg·L^-1 IBA +2%蔗糖+0.6%琼脂培养基上,无根苗生根率达88%。     

双片苣苔的离体培养

以珍稀植物双片苣苔（Didymostigma obtusum）叶片和叶柄为外植体,以MS为基本培养基,研究了外植体的消毒方式,不同生长调节剂及其组合对不定芽诱导及生根的影响,探讨不同光照、pH、叶片放置方式等因素对不定芽诱导的影响。结果表明:适量的链霉素有利于外植体消毒,叶片诱导不定芽发生的适宜培养基为MS+2.0 μmol·L^-1 TDZ+0.2 μmol·L^-1 NAA,叶柄诱导不定芽发生的适宜培养基为MS+2.0 μmol·L^-1 TDZ+1.0 μmol·L^-1 BA,pH为5.6~6.0,叶背面朝下接种有利于叶片不定芽的诱导发生,适当增强光照有利于芽苗的生长;适宜生根培养基为1/2MS+2 μmol·L^-1 IBA+2 μmol·L^-1 NAA,生根率达100%,根系生长较好;试管苗移栽到腐殖质和黄泥（2∶1）的混合基质中,置于半荫温室中,成活率达100%。     

阳丰甜柿组织培养再生体系的建立

以阳丰甜柿(Diospyros kaki cv.Youhou)的带腋芽茎段为外植体,研究了植物生长调节剂及其浓度配比对其腋芽的诱导、增殖及生根的影响。结果表明,带芽茎段接种在1/2MS+1.0 mg·L^-1ZT+0.1 mg·L^-1IAA培养基培养4周后,腋芽诱导率为77.8%。将萌发的腋芽切成带芽茎段或单株转到1/2MS+1.0 mg·L^-1ZT+2.0 mg·L^-12ip+0.1 mg·L^-1IAA培养基继代培养,最高增殖系数可达4.1。在增殖培养中长至3 cm以上的芽转入1/2MS+0.75 mg·L^-1IBA的生根培养基中暗培养7 d后,转入光下培养30 d,生根率可达73.3%,平均生根数为3.6。该研究建立了阳丰甜柿离体再生体系,为其规模化生产提供了技术平台。     

火焰南天竹组培快繁体系的探讨

以观赏灌木火焰南天竹幼嫩茎尖为研究对象,研究不同灭菌时间对成活率及污染率的影响,以及不同培养基和激素浓度对不定芽诱导、增殖和生根的影响。试验表明,在无菌环境下,用70%酒精消毒5 s,再用10%NaClO灭菌12 min的灭菌效果最佳;最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+IBA 0.1 mg·L^-1+AC 1.0 g·L^-1,最高诱导率为87%;最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+IAA 0.1 mg·L^-1L +AC 1.0 g·L^-1,增殖系数最高可达5.29;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg·L^-1 +AC 4.0 mg·L^-1,生根率最高可达98%。将火焰南天竹组培苗移入泥炭土∶蛭石∶珍珠岩为8∶1∶1的混合基质中成活率较高,最高可达94%,且组培苗长势良好。     

茶用菊花‘金丝皇菊’的组培快繁技术研究

为了建立茶用菊花‘金丝皇菊’快繁体系，以‘金丝皇菊’当年生茎段为外植体，研究外植体的消毒、诱导培养、生根壮苗、炼苗移栽及苗圃管理，建立一套适合‘金丝皇菊’的组培快繁技术体系。结果表明：‘金丝皇菊’初代培养的最佳表面消毒条件为15%次氯酸钠消毒20 min；最佳诱导培养基为MS+2.0 mg·L^-16-BA+0.3 mg·L^-1NAA；最佳生根培养基为1/2MS+0.5 mg·L^-16-BA+0.1 mg·L^-1NAA+0.4%活性炭，接种28 d后平均生根数可达17条，生根率100%；炼苗时间为1.5 d左右较为合适。初步构建‘金丝皇菊’组培快繁技术体系，为‘金丝皇菊’的优质高效产业化栽培用苗与种苗脱毒提供了技术支持。     

非洲菊单倍体移栽苗培育的关键技术

以非洲菊(Gerbera hybrida)单倍体组培繁殖苗为材料，研究培养基、炼苗时间和基质对非洲菊单倍体生根和移栽的影响。结果表明: 生根前的增殖培养基对后期的生根培养影响显著，增殖培养基为MS 改良培养液 + KT 0.15 mg·L?1，生根培养基为1/2MS +IBA 0.6 mg·L?1 + NAA 0.1 mg·L?1，是生根苗培育的最佳培养基组合。室内培养20 d后，移入大棚炼苗4 d，再在V_腐植土∶V_红土∶V_珍珠岩= 4∶1∶0.5的混合基质中培育的移栽苗，其炼苗成活率和移栽成活率最高。     

‘凤丹’牡丹组织培养研究

以‘凤丹’牡丹芽为材料,对其外植体消毒、褐化防治、组培苗扩繁和生根技术进行研究。结果表明:用75% 酒精消毒30 s,0.1% 升汞消毒8 min消毒效果最佳,外植体的污染率和成活率分别为32.31%和64.32%;其最适初代诱导和继代增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1和MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+PIC (毒莠定,Picloram) 1.0 mg·L^-1,增殖系数为4.84;生根培养基为1/2MS+CaCl₂ 220 mg·L^-1+IBA 3.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1,生根率为74.30%;低温结合3 mg·L^-1硝酸银培养可使褐化率降至29.15%。     

2001杨组培再生体系建立

以2001杨的春季新发嫩枝茎段、叶柄、叶片为外植体,尝试在MS和WPM基本培养基中添加多种组合激素,探索不定芽诱导、丛生芽伸长和生根最优条件,建立组织培养与植株再生系统。结果表明:MS培养基的诱导分化效果比WPM好;在MS+TDZ 0.025 mg·L^-1+6-BA 0.05 mg·L^-1+NAA 0.05 mg·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1的培养基上,不定芽诱导分化效果最好,茎段和叶柄诱导分化率可达90%,叶片诱导分化率 60%;丛生芽转入MS+KT 0.25 mg·L^-1+GA3 1.00 mg·L^-1+果糖30.00 g·L^-1的培养基中茎伸长效果最佳;每个叶片外植体诱导茎伸长的芽平均达6.4个,芽数量最多;不定芽在1/2MS+IAA 0.02 mg·L^-1+IBA 0.02 mg·L^-1+AC 3.00 g·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1培养基上形成的根条数多,生根率达90%。     

板栗成熟胚再生体系的建立与优化

研究了外植体消毒方法、植物生长调节剂组合对胚萌发和生长的影响。以迁西板栗主栽品种‘燕山早丰’成熟胚为试验材料,采用L₉(3⁴)试验设计对增殖培养基进行筛选。结果表明,二次消毒处理可以有效抑制污染,污染率最低为16.67%。胚萌发和生长最佳基本培养基为WPM+6-BA 1.0 mg·L^-1,萌发率最高达到95.00%,胚萌发苗最高为59.65 mm。不定芽诱导的最适培养基为:MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+IBA 0.1 mg·L^-1。芽诱导率最高为92.50%。最适增殖培养基为GD+ZT 2.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1,增殖系数最大为3.91。     

手参愈伤组织培养及植株再生

以手参为对象,研究了外植体和植物生长调节剂对愈伤组织诱导,以及植物生长调节剂对不定芽分化及生根的影响,初步建立了其组织培养再生体系。结果表明,以茎尖外植体愈伤组织诱导率最高,在MS附加0.5 mg·L^-1 NAA的培养基上,诱导率可达60%;愈伤组织在MS附加0.1 mg·L^-1 NAA培养基上增殖效果较好;不定芽分化诱导以MS附加0.1 mg·L^-1 TDZ最高,可达53.3%,在MS附加0.1 mg·L^-1 TDZ和0.1 mg·L^-1 NAA的培养基更适合芽的增殖和生长;生根诱导以1/2MS培养基附加0.5 mg·L^-1的NAA的诱导率最高,可达30.6%。     

一叶萩组培快繁技术

采用不用浓度激素配比对一叶萩组培快繁进行研究果表明,一叶萩最适外植体为茎段,接种成活率为96%,最佳初代培养基为6-BA 0.50 mg·L^-1+IBA 0.20 mg·L^-1;最佳增殖培养基为6-BA 0.50 mg·L^-1+IAA 0.20 mg·L^-1+GA₃0.10 mg·L^-1,增殖系数达8.7;生根率最高的培养基为1/2MS+NAA 0.10 mg·L^-1,培养30 d左右,生根率达88%,平均根长1.7 cm;最佳移栽基质是蛭石,成活率达90%。     

优异党参种质“凤党”离体繁殖技术

以“凤党”优株种子离体培养的无菌苗茎段为外植体，研究植物生长调节剂对其愈伤组织诱导及再分化的影响。结果表明，愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.5 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 6-BA，芽分化的最适培养基为MS+0.1 mg·L^-1 NAA+0.5 mg·L^-16-BA，生根的最适培养基为1/2 MS+0.2 mg·L^-1 NAA+0.2 mg·L^-1 IBA，愈伤组织诱导率、芽分化率及生根率分别可达91%、100%和97%。建立的离体再生植株快速繁殖体系，为“凤党”优异种质推广利用和工厂化育苗奠定了基础。     

裂叶马兰无性系建立的研究

为保护野生资源、满足栽培对种苗的需求,以裂叶马兰的嫩茎为外植体,进行愈伤组织诱导与分化、不定芽生根、试管苗生根继代增殖的研究,以及试管苗移栽和定植的研究,建立起裂叶马兰的无性系。结果表明:MS+蔗糖35 g·L-1+6-BA0.5mg·L-1+2,4-D2.5 mg·L-1是嫩茎愈伤组织诱导培养和继代增殖培养的适宜培养基;MS+蔗糖30 g·L-1+AgN031.0 mg·L-1+GA31.0mg·L-1+ZT1.6 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1是愈伤组织分化培养的适宜培养基;1/2MS+蔗糖20 g·L-1+NAA 0.6 mg·L-1是不定芽生根培养和试管苗生根继代增殖培养的适宜培养基;试管苗移栽成活率为95.9%;定植成活率98.0%。定植成活的试管苗保持了野生裂叶马兰的所有植物学性状。