蜂胶黄酮作为PPV灭活疫苗佐剂活性的研究

为研究蜂胶黄酮不同使用方法对豚鼠体液免疫和细胞免疫的影响,选取99只豚鼠用于试验研究,其中24只用于检验PPV疫苗的安全性,其余75只随机分成5组,分别为蜂胶黄酮佐剂PPV疫苗处理组(PFA)、油佐剂(OA) PPV疫苗+口服蜂胶黄酮处理组(OA-PFApo)、油佐剂(OA) PPV疫苗+肌注蜂胶黄酮处理组(OA-PFAim)、油佐剂PPV疫苗处理组(OA)和生理盐水对照组(CK)。结果表明:与油佐剂PPV疫苗组相比,蜂胶黄酮可以提高豚鼠细胞免疫和早期体液免疫; OA-PFAim组豚鼠体液免疫和细胞免疫均显著增强,而OA-PFApo组豚鼠早期体液免疫效果显著增强。综上,蜂胶黄酮可以直接作为一种PPV疫苗佐剂使用。     

蛹虫草基质多糖的急性毒性及亚慢性毒性研究

以急性毒性试验和亚慢性毒性试验研究蛹虫草基质多糖(Cordyceps militaris stroma polysaccharides,CMSP)的安全性,急性毒性试验采用ICR小鼠120只,随机分成6组,设空白对照组和不同剂量CMSP试验组(750、1 500、3 000、6 000、12 000 mg/kg)。亚慢性毒性试验采用SD大鼠80只,随机分成4组,设空白对照组和低、中、高3个剂量CMSP试验组(150、300、600 mg/kg)。结果表明,在14 d的观察中,急性毒性试验中各组小鼠未出现中毒症状和死亡情况,且灌胃剂量超过10 000 mg/kg。亚慢性毒性试验中,试验各组与空白对照组在体重增加、摄食量、血液指标、血液生化指标、尿常规、脏器指数及组织病理相比无明显差异,由此可知,CMSP实际为无毒物,且对大鼠未观察到有害作用水平为600 mg/(kg·d)。     

速康解毒口服液对小白鼠的急性毒性试验和亚慢性毒性试验

通过小白鼠急性毒性试验和亚慢性毒性试验评价"速康解毒口服液"治疗动物疯草中毒的安全性。选取40只小白鼠,随机分为5组,按200、400、800、1 600mg/kg剂量1次性灌胃给药,观察中毒症状,记录死亡数并计算半数致死量(LD50);另取20只小白鼠,随机分为2组,给药组以最大质量浓度(1.0g/mL)、最大容积(0.8mL)1次性灌胃受试药物,对照组用等体积生理盐水,给药后连续观察7d,测定最大给药量;再取80只小白鼠,随机分成药物处理高、中、低剂量组和对照组,药物组按3 200、1 600和800mg/kg剂量灌胃给药,连续30d,对照组用9g/L生理盐水,称量小白鼠体质量、检测血常规指标、血液生化指标、脏器系数及组织病理变化情况。结果表明,急性毒性试验各剂量组均无小白鼠死亡,无法计算LD50,经口给药的最大剂量为40.0g/kg,表明该受试物无毒;亚慢性毒性试验中,药物处理组小白鼠血常规、血液生化指标和脏器系数与对照组相比无显著差异(P0.05),观察实质器官无异常病变。提示临床合理使用"速康解毒口服液"不会对靶动物产生毒性作用。     

牛轮状病毒灭活疫苗的免疫原性研究

制备了牛轮状病毒甲醛灭活疫苗,以小鼠和兔子为模型检测其免疫原性。将本室分离鉴定的牛轮状病毒野毒株（CHLY株）在恒河猴肾细胞系（MA-104）上增殖,制备病毒抗原液。当病毒的感染力达到10^6 TCID50／mL以上时,甲醛灭活,并分别制备油乳佐剂疫苗和铝胶佐剂疫苗,然后免疫试验动物,检测疫苗的免疫原性。小鼠免疫试验结果表明,第2次免疫后所有免疫组均产生了高水平IgC抗体,与对照组差异极显著（P〈0．01）,油乳佐剂疫苗与铝胶佐剂疫苗免疫效果差异不显著（P〉0．05）;兔免疫试验中,免疫组母兔产下仔兔血清中含有高水平的牛轮状病毒特异性抗体,与对照组差异极显著（P〈0．01）。试验表明制备的牛轮状病毒甲醛灭活疫苗具有较好的免疫原性,免疫后可显著提高体内特异性抗体水平。     

不同佐剂制备的鸡坦布苏病毒灭活疫苗免疫效果比较

以不同材料为佐剂制备坦布苏病毒灭活疫苗,用ELISA方法检测免疫鸡不同时间抗体产生的情况,以选择最佳制苗佐剂。取40只1月龄SPF鸡,随机分成8组,以不同的佐剂组合制备疫苗,免疫7个组(包括白油组、白油+IL-2组、铝胶组、铝胶+IL-2组、蜂胶组、蜂胶+IL-2组、IL-2组),另设不免疫对照1个组,分别于免疫前及免疫后1周、2周、3周和4周采血,用已建立的ELISA方法检测血清中的ELISA抗体,比较不同佐剂灭活疫苗的免疫效果。结果表明:以白油+IL-2作为佐剂组的灭活疫苗效果最好,产生的抗体水平优于其他各组,免疫后3周ELISA抗体可达到1∶800以上,是较理想的制备坦布苏病毒灭活疫苗的佐剂。     

不同佐剂制备的鸡坦布苏病毒灭活疫苗免疫效果比较

以不同材料为佐剂制备坦布苏病毒灭活疫苗,用ELISA方法检测免疫鸡不同时间抗体产生的情况,以选择最佳制苗佐剂。取40只1月龄SPF鸡,随机分成8组,以不同的佐剂组合制备疫苗,免疫7个组(包括白油组、白油+IL-2组、铝胶组、铝胶+IL-2组、蜂胶组、蜂胶+IL-2组、IL-2组),另设不免疫对照1个组,分别于免疫前及免疫后1周、2周、3周和4周采血,用已建立的ELISA方法检测血清中的ELISA抗体,比较不同佐剂灭活疫苗的免疫效果。结果表明:以白油+IL-2作为佐剂组的灭活疫苗效果最好,产生的抗体水平优于其他各组,免疫后3周ELISA抗体可达到1∶800以上,是较理想的制备坦布苏病毒灭活疫苗的佐剂。     

硫酸化香菇多糖对新城疫疫苗免疫效果的影响

试验Ⅰ:免疫应答试验:取450只雏鸡随机均分为9组,在14日龄用新城疫Ⅳ系疫苗免疫,同时分别肌肉注射高、低剂量的3种硫酸化香菇多糖(sLNT_1、sLNT_2、sLNT_3)和香菇多糖(LNT)。分别于首免前和首免后连续6周检测血清HI抗体效价和外周血T淋巴细胞增殖的动态变化。试验Ⅱ:免疫保护试验:取350只雏鸡随机均分为7组,除非免疫组外其余组用新城疫Ⅳ系疫苗免疫,同时3个sLNT组和LNT组分别注射sLNT_1、sLNT_2、sLNT_3和LNT。于免疫后第21天,除无佐剂对照组第2组外各组鸡均肌肉注射NDV强毒攻毒,观察保护效果,并分别于攻毒前和攻毒后第3、6、9、12和15天测定血清HI抗体效价和外周血T淋巴细胞增殖的动态变化。结果表明:3种sLNT在首免后28 d内比LNT显著提高血清抗体效价最高2个滴度(高剂量的效果优于低剂量),促进淋巴细胞增殖(低剂量的效果强于高剂量);攻毒鸡发病率和死亡率降低,保护率提高最多达17.5%,加速攻毒后血清抗体生成和T淋巴细胞增殖,病鸡最快可以在攻毒后6 d恢复正常。综合评价以sLNT_2的效果最好。揭示:硫酸化修饰能显著提高LNT的免疫增强活性,增强新城疫疫苗的...     

新型促生长疫苗SSTR对肉鸭生长性能的影响

选用0日龄樱桃谷肉鸭90只,随机分为3组。试验组分别于0日龄和14日龄颈部皮下注射SSTR疫苗,正对照组和负对照组同期同部位分别注射同剂量乳化佐剂和生理盐水。本实验结果表明:SSTR疫苗能促进肉鸭生长,并有提高饲料转化率的作用。     

马尾藻多糖佐剂对猪PRRS疫苗免疫效果影响的研究

分别以马尾藻多糖的不同剂量与猪PRRS灭活抗原配制成完全佐剂疫苗,免疫5组非猪PRRSV免疫猪,并于首免的第0、20、40、50d采血,测定其体液免疫和细胞免疫水平。结果表明：（1）各马尾藻多糖佐剂组T淋巴细胞转化率（61.4%、65.0%、63.4%）均高于空白组1（52.8%）及普通佐剂疫苗组（59.6%）,各马尾藻多糖佐剂组与空白对照组间差异显著（P〈0.05）;（2）各马尾藻多糖佐剂组的T淋巴细胞亚群数量均高于空白组和普通佐剂疫苗组,其中以CD3的数量差异最明显（P〈0.05）,但马尾藻多糖组与普通佐剂疫苗组的CD8和NK细胞亚群的测定值差异不显著;（3）间接ELISA法测定各马尾藻多糖佐剂组血清中抗体的活性（0.631、1.015、0.688）均高于两对照组（0.518、0.568）,其中100mg/头份马尾藻多糖佐剂组与对照组间的差异显著（P〈0.05）。可见,以马尾藻多糖作为佐剂即可以提高体液免疫水平,又能增强细胞免疫功能,其中100mg/头份马尾藻多糖剂量的总体免疫效果最佳。     

有机锗对雏鸡免疫器官发育的影响

本试验通过对给父母代蛋鸡饲喂在定剂量Ｇｅ－１３２,获取富锗种蛋并孵化出雏鸡,取１８０只富锗雏鸡和１３５只普通雏鸡随机分成４组和２组,采取饲料中添加Ｇｅ－１３２和ＭＤ疫苗接种处理。     

5％甲氨基阿维菌素苯甲酸盐水分散粒剂的毒性研究

[目的]检测5%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐水分散粒剂的急性毒性。[方法]按《农药登记毒理学试验方法》(GB15670-1995)5%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐水分散粒剂进行大鼠急性经口、急性经皮、急性吸入毒性试验和家兔眼刺激、急性皮肤刺激试验以及豚鼠皮肤变态反应试验。[结果]5%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐水分散粒剂急性经口、经皮、吸入毒性试验结果均为低毒,对家兔眼黏膜大多有刺激作用,对家兔皮肤无刺激作用,均未引起豚鼠皮肤过敏反应。[结论]为评价5%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐水分散粒剂的急性毒性提供了毒理学依据。     

抗白色念球菌的复方"克清甲"软膏毒性研究

[目的]考察抗白色念球菌的复方＂克清甲＂软膏经皮给药及入眼对试验动物的安全性。[方法]采用健康家兔进行皮肤急性毒性试验、皮肤及眼刺激试验,用健康豚鼠进行主动皮肤过敏试验,并观察。[结果]复方＂克清甲＂软膏未产生急性毒性反应和眼刺激反应;对于家兔完整皮肤,单次和多次经皮给药均无刺激性,对破损皮肤有轻度刺激反应,但除去药物后这种刺激性消失;对健康豚鼠完整及破损皮肤均无致敏性。[结论]复方＂克清甲＂软膏是一种安全的外用制剂。     

紫茎泽兰透皮剂的制备工艺优化及其临床杀螨效果观察

以紫茎泽兰杀螨活性主成分紫茎泽兰素A(9-羰基-10,11-去氢泽兰酮,euptox A)提取率为考查指标,对影响提取率的乙醇体积分数、料液比、提取时间、提取次数等因素在单因素试验的基础上进行正交试验优选,确定紫茎泽兰乙醇最佳提取工艺为:加20倍量(体积质量比)的95%乙醇,回流提取3次,每次1 h。将以最佳提取工艺条件提取的紫茎泽兰乙醇提取液制成加或不加氮酮的杀螨透皮剂,进行家兔皮肤的急性毒性试验和刺激性试验。结果表明,家兔完整皮肤和破损皮肤在给药72 h后没有出现急性毒性反应和刺激性。另开展临床杀螨治疗效果试验,将30只痒螨兔和26只疥螨兔分别分成6组,A、B、C、D组分别以加氮酮紫茎泽兰生药含量1.0 g·mL^-1、0.5 g·mL^-1和不加氮酮生药含量为1.0 g·mL^-1、0.5 g·mL^-1的杀螨液涂擦处理,E组为阳性对照组,注射伊维菌素0.2 mg,F组为空白对照组,涂擦0.9%生理盐水。试验结果表明,不论痒螨组还是疥螨组,杀螨效果最好的都是加氮酮高剂量组(A组)。     

复方阿莫西林纳米乳制剂的安全性评价

通过急性毒性试验、皮肤刺激性试验和细胞毒性试验,对复方阿莫西林纳米乳(AMX-LH-NE)进行体内外安全性评价.结果表明,AMX-LH-NE毒性低,无法测出其半数致死量,小鼠的最大耐受量倍数为426倍;无论是单次给药,还是多次给药,AMX-LH-NE对完整皮肤和破损皮肤均无明显刺激性;AMX-LH-NE为10～150 mg.L-1时,对乳腺上皮细胞的生长和形态无明显影响,其毒性分级属于0或1级,即对乳腺上皮细胞无毒性作用.     

牛心朴子生物碱原药毒理检验

按照《农药登记毒理学试验方法》(GB15670-1995)对牛心朴子生物碱原药进行急性经口、经皮毒性试验、皮肤刺激试验、眼刺激试验和致敏试验。该受试物对大鼠经口LD50雄性为>5 000 mg/kg,雌性为>5 000mg/kg;对大鼠经皮LD50雄性为>2 000 mg/kg,雌性为>2 000 mg/kg;对试验兔急性皮肤刺激、眼刺激平均刺激指数均为0;对豚鼠致敏试验致敏率为33.33%。因此,该受试物急性经口、经皮均属低毒性,皮肤刺激、眼睛刺激试验为无刺激性,致敏试验属中度弱致敏物。     

氰戊菊酯的毒性研究

氰戊菊酯是第一个非三碳环骨架的拟除虫菊酯。在本研究中,对大、小鼠的经口LD_(50)分别为215mg/kg和93.33mg/kg,具中等毒性。其中毒症状与α-CN拟除虫菊酯的Ⅱ型(CS型)症状(不安、流涎、抽搐和后肢姿态异常)相符合。对大鼠的蓄积系数为6.8,无明显的蓄积毒性。其5％的水乳剂对眼和皮肤不呈现通常的刺激征象(红肿等),但对皮肤可出现一种感觉神经过敏的刺激反应。对小鼠骨髓细胞微核试验呈阴性结果。     

农用矿物油混配毒死蜱和阿维菌素的急性毒性分析

[目的]对农用矿物油混配毒死蜱和阿维菌素进行毒性分析,为中毒防治提供依据。[方法]产品样品来源于广东省昆虫研究所,根据中国人民共和国国家标准GB 15670-1995《农药登记毒理学试验方法》进行试验,试验使用SPF级SD大鼠,用于经口、经皮毒性试验,每组10只,雌雄各半;新西兰白兔,用于眼刺激和皮肤刺激试验,每试验4只;FMMU白化豚鼠,用于致敏试验,每组13~20只。[结果]矿物油农药属低毒产品,矿物油与毒死蜱和阿维菌素混配后,不会增加混配剂的毒性。[结论]矿物油可作为农药混配剂用于农药开发,矿物油毒性低,在生产与使用过程中发生中毒,可考虑对混配剂进行解毒。     

原核表达的兔出血症病毒衣壳蛋白对兔的免疫保护效果

 为了检验大肠杆菌表达的兔出血症病毒（RHDV）衣壳蛋白（VP60）对兔的免疫保护效果，将34只清洁兔随机分成3组：单用免疫佐剂对照组（8只）、单用重组VP60组（8只）和重组VP60加免疫佐剂组（18只），分别经皮下注射，VP60的免疫剂量为每只每次400 μg，免疫2次，间隔7 d。在第2次免疫7 d后，VP60加免疫佐剂组的兔血清抗体水平显著高于单用VP60免疫组（ELISA 1∶64 000 对比1∶4 000 / HI 1∶128 对比1∶16），表明免疫佐剂可明显加速重组VP60诱导抗体产生的进程，用RHDV NJ85强毒攻击，免疫佐剂对照组与单用VP60免疫组的实验兔均全部死亡（8/8和8/8），VP60加免疫佐剂组均全部存活，保护率为100%（18/18）。用RHDV血凝试验（HA）检测，死亡兔的肝脏组织液HA效价大于1∶512，而存活兔的肝脏组织液HA效价小于1∶2，肝脏组织触（涂）片检查和细菌培养均为阴性，证明病死兔系RHDV感染所致。用RHD重组亚单位疫苗在养兔场进行800只兔的田间免疫试验，安全有效，没有出现不良反应。对重组菌进行冻存、复苏、培养、诱导表达和质粒酶切分析，证明VP60基因在宿主菌内保持稳定。     

2种化学型迷迭香精油安全性分析

马鞭草烯酮型和1,8-桉叶油型2种化学型迷迭香(Rosmarinus officinalis L.)精油目前已有广泛的应用,但有若干精油成分疑存在安全性问题.本研究分别从急性经口毒性试验,急性皮肤刺激试验、多次皮肤刺激试验、眼刺激试验几个方面对其毒理和刺激性进行分析.以等比浓度灌胃法测定2种化学型精油对小鼠的急性毒性,采用改良寇氏法计算2种化学型精油对小鼠的半数致死量(LD50),实验结果表明,1,8-桉叶油型和马鞭草烯酮型迷迭香的LD50分别为7 220.35和8 088.24 mg·kg-1,LD50的95%可信限分别为5 172.53～8 124.41 mg·kg-1和6 982.70～9 842.84 mg·kg-1.马鞭草烯酮型和1,8-桉叶油型2种化学型迷迭香精油,在急性皮肤刺激试验中前者浓度在2.3%时,属于轻度刺激性,后者浓度在100%时属于中度刺激性;多次皮肤试验中,前者浓度在2.3%时属于轻度刺激性,后者浓度在40%时属于轻度刺激性.且相同浓度下前者刺激性要明显大于后者;眼刺激试验在50%的精油浓度范围内,2种化学型迷迭香精油强度显示为无刺激性.     

病毒性出血症疫苗免疫剂量对幼兔血清抗体效价的影响

选择35、40和45日龄的新西兰家兔各30只,每种日龄兔随机均分为5组,其中对照组注射生理盐水,4个试验组分别注射4种剂量(1 m l、2 m l、3 m l、4 m l)的兔病毒性出血症疫苗,分别于免疫前及免疫后1~7周内每周采血测定血清抗体效价的动态变化。结果表明:各日龄兔的2 m l、3 m l、4 m l剂量组的抗体上升速度和有效抗体维持时间均显著大于同日龄的1 m l剂量组;35日龄兔的2 m l、3 m l、4 m l剂量组的抗体峰值显著高于1 m l剂量组。提示35日龄兔注射剂量2 m l为最佳免疫程序。