云南野生早花象牙参叶片再生体系的建立

 以云南野生的早花象牙参叶片为外植体, 探讨了叶片的不同部位、植物生长调节剂组合、暗培养、水解酪蛋白和椰子汁对愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。结果表明: 叶片基部, 暗培养, 水解酪蛋白和椰子汁均有利于愈伤组织的诱导; 暗培养促进了不定芽的再生。适宜早花象牙参叶片愈伤组织形成的诱导培养基为MS + 6-BA 1.5 mg·L ^{- 1} +NAA 0.1 mg·L ^{- 1} +水解酪蛋白800 mg·L ^{- 1} +椰子汁50 mL ·L ^{- 1} , 再生培养基为MS + 6-BA 1.5 mg·L ^{- 1} +NAA 0.1 mg·L ^{- 1} , 增殖培养基为MS + 6-BA 0.6 mg·L ^{- 1} + NAA 0.1 mg·L ^{- 1} , 生根培养基为1/2MS +NAA 0.8 mg·L ^{- 1}。     

‘雪青’梨叶片高频再生体系的建立

 以‘雪青’梨叶片为外植体, MS为基本培养基, 培养温度(25 ±1) ℃, 光照强度2 000 lx,14 h /d, 继代周期30 d。在MS + 2,4-D 2 mg·L ^{- 1} + 6-BA 0.5 mg·L ^{- 1}培养基中, 外植体脱分化率达100% ,愈伤组织增殖倍数达12.05; 在MS + 6-BA 5 mg·L ^{- 1} + IAA 0.1 mg·L ^{- 1}中, 不定梢诱导率达100% , 在MS+ 6-BA 2 mg·L ^{- 1} + IAA 0.1 mg·L ^{- 1} +CH 100 mg·L ^{- 1}中, 1～6代不定梢平均繁殖系数达7; 在1 /2MS +IBA 2 mg·L ^{- 1} + 6-BA 0.5 mg·L ^{- 1} +AC 500 mg·L ^{- 1}中, 不定梢生根率达67.50%; 68株试管苗移栽到珍珠岩营养钵中, 30 d成活46株, 成活率为67.65 %。     

银条茎尖培养快繁及离体根状茎的诱导

 以银条‘二细一粗’品种为试材, 研究了蔗糖浓度、激素组合对茎尖培养和快速繁殖的影响及温度、光照、蔗糖浓度等因素对根状茎离体诱导的影响。结果表明: 茎尖培养较理想的培养基为MS + 蔗糖4 % + 6-BA 0.5 mg·L ^{- 1} + NAA 0.1 mg·L ^{- 1} , 成苗率可达74.0 %。茎尖增殖较适培养基为MS + 6-BA 3.0 mg·L ^{- 1} + NAA 0.5 mg·L ^{- 1} , 每个外植体平均可产生5.6 个芽。根状茎诱导以MS + 蔗糖10 % + 6-BA 510 mg·L ^{- 1}+ CCC 500 mg·L ^{- 1}培养基, 20 ℃全黑暗培养效果最好。     

连香树离体快繁初步研究

 连香树为我国珍稀濒危树种, 具有较高的经济价值和观赏价值。本文研究了3年生连香树(Cercidiphyllum japonicum Sieb. et Zucc. ) 带芽茎段的离体培养。筛选出最佳培养基: (1) 腋芽诱导培养基: MS +NAA 0.01 mg·L ^{- 1} ; (2) 丛生芽诱导培养基: MS +BA 1.0 mg·L ^{- 1} ; (3) 丛生芽增殖培养基:MS +BA 2.0 mg·L ^{- 1} + 2,4-D 0.01 mg·L ^{- 1} ; (4) 生根培养基: 1 /2MS + IBA 1.0 mg·L ^{- 1}。     

郁金香器官离体培养再生小鳞茎的研究

 以4个郁金香品种‘凯氏奈丽斯’、‘风流寡妇’、‘检阅’和‘金色检阅’的叶、花茎、花托、子房、鳞片及腋芽等不同器官为外植体, 在MS + 2, 4-D 0.1 mg·L ^{- 1} , MS + 2, 4-D 0.5 mg·L ^{- 1} , MS +BA 1.0 mg·L ^{- 1} , MS +BA 5.0 mg·L ^{- 1} , MS +BA 2.0 mg·L ^{- 1} + IAA 0.5 mg·L ^{- 1} 5种培养基上进行离体培养。结果表明, 花托外植体直接诱导小鳞茎的频率最高, 在培养基MS + 2, 4-D 0.5 mg·L ^{- 1}上诱导率达56.7% , 平均每块外植体产生小鳞茎数达10.7个; 其次是花茎, 直接诱导小鳞茎的频率为33.3% , 平均每块外植体产生小鳞茎数达19.9个; 鳞片及鳞片中的腋芽诱导鳞茎较难且需时间较长; 叶和子房则未能诱导出小鳞茎。     

红千层的离体培养及快速繁殖

 研究了红千层离体快繁的若干影响因素。结果表明: 叶片在MS + 6-BA 115 mg·L ^{- 1}+NAA015 mg·L ^{- 1}中的愈伤组织诱导率43% , 并可直接从愈伤组织表面分化出不定芽, 分化率为69.2%; 腋芽启动培养基为MS + 6-BA 1～1.5 mg·L ^{- 1} + NAA 0.5 mg·L ^{- 1} , 萌动率为77%; 继代和增殖培养基为MS + 6-BA 1 mg·L ^{- 1} +NAA 0.25 mg·L ^{- 1} , 平均增殖系数为16.7; 生根壮苗培养基为1 /2MS +NAA 0.25 mg·L ^{- 1} , 生根率96.1%; 试管苗生根培养30～35 d移栽, 成活率最高可达90%以上。     

花烛体细胞胚胎发生及植株再生研究

 以花烛(Anthurium andraeanum Lind. ) 盆花品种无菌苗叶片、叶柄、根段为外植体, 对花烛体细胞胚胎发生及植株再生进行了研究, 建立了花烛体细胞胚胎发生体系。结果表明, 花烛叶片较其他外植体更适宜体细胞胚的诱导; 胚性愈伤组织及胚性结构诱导最适培养基为改良MS + 2, 4-D 2.0～3.0 mg·L ^{- 1} + KT 0.5 mg·L ^{- 1} +蔗糖2% +葡萄糖1% , pH 5.5, 暗培养40 d, 诱导率可达90.3%; 体胚发育适宜培养基为改良MS + 6-BA 0.5 mg·L ^{- 1} +蔗糖3% , 光强20 μmol·m ^-2 · s^-1 , 培养20 d后体胚萌发率达6219%; 萌发的体胚在发育培养基上继续培养30 d后均能发育成完整植株。对不同阶段培养材料的组织结构及超微结构的观察证明了花烛体胚发生过程。     

枣离体叶片高效再生植株的研究

 以‘黄骅冬枣’组培苗叶片为试材, 研究了叶片幼嫩程度、叶片来源、组培苗状态以及植物生长调节剂等对离体叶片诱导不定芽再生的影响, 并获得了完整的再生植株。结果表明, 以未生根组培苗中上部叶片再生效果较好; TDZ诱导叶片再生不定芽的效果显著优于BA; 离体叶片在MS + TDZ 1.0 mg·L ^{- 1} + IBA 0.1 mg·L ^{- 1}培养基中诱导培养28 d后, 转入MS + IBA 0.1 mg·L ^{- 1} + GA₃ 0.05 mg·L ^{- 1}培养基中二次培养, 叶片再生效果最好, 再生率可达92.45%。将叶片再生植株转入MS +BA 1.0 mg·L ^{- 1} + KT0.5 mg·L ^{- 1} + IBA 0.1 mg·L ^{- 1}培养基中继代增殖培养, 增殖系数达3.64。以1 /2MS + IAA 1.0 mg·L ^{- 1}培养基诱导生根, 生根率87.1%。生根苗大田移栽成活率达到57%。     

桂花离体培养与快速繁殖技术的初步研究

 以桂花(Osmanthus fragrans Lour. ) 胚和新梢茎段为外植体进行了离体培养与快速繁殖研究,筛选出最适培养基——— (1) 胚萌发: MS +BA 1.00 mg·L ^{- 1} +蔗糖3%; ( 2) 新梢茎段启动培养: LMc +KT 8.00 mg·L ^{- 1}+NAA 0.10 mg·L ^{- 1} +蔗糖3%; ( 3) 继代增殖培养: LMc + TDZ 0.50 mg·L ^{- 1} +NAA0.10 mg·L ^{- 1} +蔗糖3%; (4) 生根培养: 1/2MS +NAA 2.00 mg·L ^{- 1} +蔗糖3%。采用腐殖质土为栽培基质, 移栽成活率可达80%以上。     

小菊悬浮细胞培养与植株再生研究

 以小菊‘七月红’品种为试材, 进行了细胞悬浮培养及植株再生诱导的探讨。结果表明, MS+ 1.0 mg·L ^-1 2, 4-D + 0.2 mg·L ^-1 6-BA培养基适合从试管苗茎段有效诱导生长迅速、质地疏松的愈伤组织。获得的愈伤组织在MS + 0.5 mg·L ^{- 1} 2, 4-D + 0.2 mg·L ^{- 1} 6-BA液体培养基中振荡培养, 建立细胞悬浮培养体系。悬浮细胞的生长曲线呈上升的半抛物线型, 细胞生长大致分缓慢生长期(0～2 d) 、对数生长期(2～10 d) 和停滞期(10 d以后) ; 随着悬浮细胞生长, 培养液pH值迅速下降。悬浮细胞固液双层培养表明, 在培养基MS + 0.2 mg·L ^{- 1} KT + 0.2 mg·L ^{- 1} 2, 4-D上植板率最高; 4℃低温2 h处理能促进悬浮细胞生长, 提高植板率; 随着继代次数增加植板率呈下降趋势。培养1个月后, 形成了直径约0.2 cm的愈伤组织, 将其转到MS + 2 mg·L ^-1 6-BA + 0.1 mg·L ^{- 1} NAA培养基后, 继代4次, 分化后出芽; 分化芽在培养基MS + 0.5 mg·L ^-1 NAA上诱导生根, 形成小植株。     

黄瓜游离小孢子培养诱导成胚和植株再生

 以10个不同基因型黄瓜为试材进行游离小孢子培养,通过对成胚条件的系统研究,从‘7447’和‘Poinsett97’中获得了子叶形胚和再生植株。研究结果表明：基因型和小孢子发育时期是限制黄瓜游离小孢子成胚的关键因子。不同品种间胚状体产量差异显著,每皿产胚1.5～33.4个。单核靠边期是进行黄瓜游离小孢子培养的最佳时期。低温预处理有利于胚状体的诱导,4 ℃预处理2～4 d为宜,以处理2 d时胚状体产量最高。外源激素在诱导胚状体时并非必需,但低浓度的外源激素（0.5 mg·L^-1 2,4－D、0.2 mg·L^-1 6－BA）更能促进小孢子成胚。NLN和B5两种基础培养基在诱导胚状体上无显著差异。子叶形胚易分化成苗,而其它类型的胚状体不能获得再生植株。     

无核葡萄与中国野生葡萄杂种的胚挽救技术研究

 通过无核葡萄与中国野生葡萄杂交, 获得了4个杂交组合的后代植株, 确定了各杂交组合取胚珠培养的最佳时期。1Flame ×山葡萄; 2红宝石×爱莫无核; 3红宝石×北醇; 4爱莫无核×山葡萄在授粉后45 d取样培养效果较佳; 5长穗无核白×山葡萄授粉后30 d; 6无核白自交在授粉后35 d培养效果较佳。以NitSchs为基本培养基, 附加0.5 mg·L ^{- 1} 6-BA + 0.5 mg·L^-1 GA₃ + 2.5 mg·L ^{- 1} IBA + 0.1 mg·L^-1ZT, 适合于1、3、5号杂交组合; 而0.5 mg·L^-1 6-BA + 0.5 mg·L^-1 GA₃ + 2.0 mg·L^-1 IBA + 0.1 mg·L^-1ZT适合2、4、6号杂交组合; 胚萌发培养基为2.0 mg·L^-1 IBA + 1.0 mg·L^-1 6-BA +0.2 mg·L^-1 GA₃ , 适合1、2、3、5、6号杂交组合, 而爱莫×山葡萄在1.5 mg·L ^{- 1} IBA + 1.0 mg·L^-1 6-BA + 0.2 mg·L^-1 GA₃培养基上表现较佳, 生根培养基为1 /2MS基本培养基添加0.15 mg·L^-1 IBA + 0.02 mg·L^-1 6-BA, 它适合1号与5号组合, 0.10 mg·L^-1 IBA + 0.02 mg·L^-1 6-BA适合4号与6号组合。     

银杏幼胚离体培养再生植株的研究

 以佛手银杏幼胚为外植体, 研究了不同大小幼胚在不同培养条件下, 愈伤组织和胚状体的诱导发育情况。结果表明: 大于3 mm的幼胚, 在MK +NAA 1.0 mg·L ^{- 1} +BA 1.0 mg·L ^{- 1}培养基上胚状体诱导率最高, 达到53.6% , 最多的一块愈伤组织形成多达38个胚状体。暗培养不利于胚状体的发生。在MK培养基上添加10%椰汁对胚状体的生长发育有很好的促进作用, 有34.5%生长成苗。     

地菍离体培养植株再生及其栽培试验

地菍叶片离体培养研究结果表明: 诱导愈伤组织最佳的培养基为MS + 1 mg·L^-1 2, 4-D + 0.2mg·L^-1 6-BA + 5%蔗糖+ 0.6%琼脂和MS + 2 mg·L^-1 2, 4-D + 0.2 mg·L^-1 6-BA + 5%蔗糖+ 0.6%琼脂; 丛生芽分化增殖最佳培养基为MS + 2 mg·L^-1 6-BA + 0.3 mg·L^-1 NAA + 5%蔗糖+ 0.6%琼脂; 生根最佳培养基为1/2MS + 1.5 mg·L^-1NAA + 0.5 mg·L^-1 2, 4-D + 5%蔗糖+ 0. 6%琼脂和MS + 0.5 mg·L^-1 6-BA + 2mg·L ^-1 NAA + 5%蔗糖+ 0.6%琼脂。栽培观赏研究表明: 盆栽最佳温度为28～32℃; 最佳基质为泥炭土+蛭石(2 ∶1) 和腐殖土+蛭石(2 ∶1) ; 坪栽最佳肥料配比为N ∶P ∶K = 114 ∶112 ∶1, 最佳土壤为腐殖土。     

酿酒葡萄‘神索’体胚发生及再生体系遗传稳定性分析

 以酿酒葡萄‘神索’未成熟合子胚为外植体, 通过植物生长调节剂、光照、温度等因素的控制, 研究了葡萄体胚的产生、保存及植株再生。结果表明, 以NN为基本培养基, 诱导胚性愈伤组织的适宜植物生长调节剂水平是1.0 mg·L ^{- 1} 2,4-D; 诱导体胚的生长调节剂水平是1.0 mg·L ^-1 NAA + 0.5 mg·L ^{- 1} BA, 体胚诱导率为37.5%; 5℃微光条件, 适宜体胚的保存; 体胚成熟及植株再生的植物生长调节剂水平是0.05 mg·L ^{- 1} NAA + 0.5 mg·L ^{- 1} BA, 成苗率为42.1%。利用流式细胞仪并结合染色体计数对体胚及再生植株细胞核DNA含量及染色体鉴定表明, 体胚细胞染色体存在一定的变异, 而体胚再生植株倍性稳定, 细胞核DNA含量及染色体数与供体母株一致。     

大白菜、青花菜和叶用芥菜体细胞杂交种形态学与细胞学特性鉴定

 为拓宽十字花科蔬菜育种种质资源,以大白菜（Brassica campestris L. ssp. pekinensis）、青花菜（B. oleracea L. var. varitalica）和叶用芥菜（B. juncea L. Czern）的子叶、下胚轴为材料,分离、纯化原生质体,采用40% 聚乙二醇（Polyethylene glycol,PEG）融合法进行原生质体融合。融合细胞在附加0.2 mg · L^-1 2,4-D + 0.5 mg · L^-1 6-BA + 0.1 mg · L^-1 NAA + 0.1 mg · L^-1 激动素（kinetin）的改良K8p培养基中液体培养,当细胞分裂至8 ~ 10细胞期时,将分裂的细胞包埋于0.15%琼脂糖,然后在添加0.3 mol · L^-1蔗糖和2 mg · L^-1 6-BA + 2 mg · L^-1 玉米素（zeatin）+ 1 mg · L^-1 NAA + 0.5 mg · L^-1 kinetin的Kao培养基中诱导愈伤组织。将培养获得的936个愈伤组织转到3种不定芽诱导培养基MS + 5 mg ? L-1 zeatin + 2 mg · L^-1 IAA;MS + 2 mg · L^-1 zeatin + 2 mg · L^-1 IAA;MS + 0.5 mg · L^-1 6-BA + 0.5 mg · L^-1 NAA上诱导芽分化,当芽长3 cm左右时,转到1/2 MS + 0.2 mg · L^-1 NAA的生根培养基上诱导生根,共获得了96株再生植株,对其进行形态学、细胞学和分子生物学鉴定。形态学观察显示再生植株表型变化大,包括3个亲本的中间型或两个亲本的中间型;PCR技术鉴定结果显示96株杂种植株中93株为细胞质雄性不育特性;染色体计数显示,再生的植株染色体数变化范围广（2n = 38 ~ 64）,但未发现染色体数总和与3种融合亲本染色体数总数（2n = 74）相一致的个体。基因组原位杂交（Genomic in situ hybridization,GISH）和扩增片段长度多态性（Amplified fragment length polymorphism,AFLP）分析结果表明,再生植株基因组中分别检测出大白菜、青花菜、叶用芥菜的DNA片段,证实了大白菜、青花菜、叶用芥菜种间体细胞杂交种的真实性。     

光叶子花茎段愈伤组织的诱导及其植株再生的研究

 研究了光叶子花(Bougainvillea glabra Choisy) 茎段愈伤组织的诱导及植株再生。结果表明:愈伤组织诱导以MS +BA 3.0 mg·L ^-1 + 2,4-D 0.2 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1培养基最好, 茎段愈伤组织的诱导率和分化率分别达78.2%和25.6%。不定芽的产生有两种类型: 直接从茎段基部诱导产生不定芽和茎段基部形成大块愈伤组织后再从愈伤组织上分化出不定芽。丛生苗诱导以MS +BA 2.0 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1为培养基, 增殖倍数可达5.4, 当培养基中BA 3.0 mg·L^-1和2,4-D 0.5～1.0 mg·L^-1时再生植株会出现叶片变异现象。MS+ BA 0.2 mg·L^-1 + GA₃ 0.5 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1培养基对有效苗培养具有较好的效果; 生根诱导以MS +NAA 3.0 mg·L^-1培养基诱导率最高, 为88.3%。