费县养鸡场新城疫、禽流感H5亚型(Re-5株)抗体监测

本次检测费县某蛋鸡场血样30份,分离血清,通过微量血凝及血凝抑制试验(HI)进行新城疫、禽流感H5亚型(Re-5株)抗体监测。结果表明,该鸡场新城疫HI抗体效价≥5log2的占87%,新城疫免疫合格;而禽流感抗体效价≥5log2的占67%,禽流感H5亚型免疫失败,鸡场必须补免或重免禽流感H5亚型二联油乳剂灭活苗。     

不同ND抗体水平鸵鸟对NDV强毒的抵抗力试验

以不同新城疫（ND）HI抗体水平的5只鸵鸟进行新城疫病毒（NDV）感染试验，HI抗体效价(Log2)和3Log2以内的3只鸵鸟均表现ND的的典型症状的病变，4Log2的鸵鸟耐过NDV的侵袭，5Log2的鸵鸟未表现任何症状。这表明当鸵鸟的ND HI抗原体水平≤4Log2时应及时接种ND疫苗。     

进口法国种鸽新城疫病毒的分离和鉴定

用鸡成纤维细胞和鸡胚从30只进口法国种鸽中分离出一株病毒,细胞培养物的HA效价为3log2,尿囊液的HA效价为4log2,新城疫阳性血清能抑制这种血凝作用,HI效价均为7log2,禽流感阳性血清不能抑制这种血凝作用.通过透射电镜观察、毒力测定等最终确认,分离出的病毒为新城疫病毒.     

禽流感-新城疫重组二联活疫苗口服免疫试验

选择未接种禽流感-新城疫疫苗的黄腹角雉所产蛋,经孵化后,于10日龄选黄腹角雉15只,随机分成A、B、C 3组,每组5只,以点眼接种量的10、15、20羽份,直接口腔滴入禽流感-新城疫重组二联活疫苗rl-H5株口服免疫。分别于接种前1 d和3次接种后15 d经翅静脉采血,通过测定其禽流感和新城疫血凝抑制试验(HI)抗体滴度。结果表明,第2次接种20羽份剂量抗体效价达到峰值,新城疫和禽流感HI抗体均值分别为7.5 log2和5.5 log2。     

新城疫复合物疫苗对1日龄雏鸡免疫效果的研究

用新城疫病毒La Sota株作为复合物疫苗抗原,与新城疫特异性中和抗体混匀配制成4种不同比例的复合物疫苗,用1日龄普通雏鸡进行免疫效果对比试验。试验1~4组分别为免疫复合物疫苗1~4,试验5组免疫常规新城疫活苗,试验6组为空白对照组。免疫后3周采血测定HI抗体效价,同时用新城疫强毒北京株F48E9攻击。试验结果显示,试验1~6组HI抗体效价分别为3.2log2、3.1log2、3.3log2、3.2log2、3.1log2、2.9log2;攻毒后,试验1~6组鸡的死亡率分别为15%、20%、0%、35%、30%、50%。因此,新城疫病毒La Sota株与新城疫特异性抗体制备成复合物疫苗,能保持疫苗中抗原的免疫原性,并可减轻疫苗的毒副作用,提高疫苗的安全性,其免疫效果比常规活苗好。     

鸵鸟新城疫实验病理学研究

用鸡源新城疫(ND)强毒株F48E9和鸵鸟源新城疫强毒株O-XJ99-12,对不同免疫状态下2~4月龄鸵鸟进行动物试验。动物发病后经剖检、组织切片、病毒分离等方法证实:鸵鸟源和鸡源新域疫病毒(NDV)毒株,经静脉和黏膜感染非免疫鸵鸟,均可引起特征性的鸵鸟ND症状和病变,对鸡胚致病力强的NDV毒株,对非免疫鸵鸟的致病力也强;鸵鸟ND的免疫临界点,HI抗体效价最低为5log2。     

超剂量NDI系疫苗诱发鸡新城疫

江苏某县养鸡户饲养500只蛋鸡，60日龄用新城疫I系疫苗10倍量肌肉注射，第二天发现鸡群采食量明显下降，并有35只鸡死亡，第三天死亡154只，第四天共计死亡275只。症状：鸡群不吃不喝，精神萎靡、沉郁，病鸡腿翅麻痹卧地不起、排绿色稀便、歪脖、扭颈、转圈。剖检变化：十二脂肠有少量枣核状肿大、出血；盲肠扁桃体肿胀出血、心冠脂肪有出血点；泄殖腔粘膜有出血点，脑膜充血、出血。实验室检查：随机抽10只鸡血，分离血清，做鸡新城疫抗体监测，抗体效价平均为2．8log，确诊为新城疫。分析：免疫失败的原因，很可能用了过量的疫苗引起免疫…     

新城疫La Sota疫苗免疫剂量对免疫效果的影响探讨

近年新城疫(ND)的发病出现新特点,大多发生在免疫鸡群,表现亚临床症状或非典型症状,发病率较低,在10%～30%,病死率为15%～45%[1～3].目前普遍认为,鸡群HI抗体平均值在7～9 log2以上才能有效地防制非典型ND.     

不同鸡新城疫疫苗免疫鸡血清HI抗体的测定

将试验鸡分成3个试验组和1个对照组。A组鸡接种鸡新城疫系疫苗,B组鸡接种油乳剂灭活苗,C组鸡接种鸡新城疫系疫苗,并在接种疫苗后第3、4、5、6、7、9、11、13、15、20、25d采取各组鸡血并分离血清,检测HI抗体。结果表明,接种系疫苗的组,HI抗体效价均值从4.67log2上升到10log2,接种后第5d开始上升,接种后第11d达到峰值,持续6d保持高滴度抗体水平。接种系疫苗的组,HI抗体效价均值从4.67log2上升到7log2,接种后第4d开始上升,接种后第9d达到峰值。接种油乳剂灭活苗的组,HI抗体效价均值从4.67log2上升到9.33log2,接种后第5d开始上升,接种后第11d达到峰值,持续16d保持高滴度抗体水平。系疫苗HI抗体效价上升快,效价高,较适合于紧急接种,油乳剂灭活苗HI抗体效价可在高水平维持较长时间,较适合于预防接种。     

鸵鸟新城疫的诊治

我县黄花塘镇某鸵鸟养殖场现有鸵鸟 80只 ,其中成年鸟46只 ,4月龄左右的幼鸟 34只。近日有 5只 4月龄左右的鸵鸟发病 ,病程达 5ｄ ,其中 1只死亡。 2 0 0 1年 1 2月 1 5日到我站就诊 ,现报告如下 :1　发病情况及临床症状2 0 0 1年 1 2月 1 0日 ,发现有 1只 4月龄的鸵鸟精神沉郁 ,食欲减少。喉头有大量分泌物 ,呼吸时发出“罗音” ,病鸟不断甩头 ,眼睛流泪 ,病程 5ｄ。陆续有 5只发病 ,死亡 1只。用庆大霉素、土霉素等抗生素治疗 ,并无好转。2　剖检病变病死鸵鸟心脏有出血点 ;肝、脾有出血斑点 ;腺胃乳头肿大、出血 ;肌胃角质层易脱落 ,角质…     

沂南县某蛋鸡场新城疫、禽流感H5亚型（Re-5株）抗体水平的监测

新城疫、禽流感作为危害养禽业的主要传染病,通过其抗体水平监测,分析免疫状态,对鸡群合理饲养,确保养鸡业健康发展。本次检测沂南县某蛋鸡场血样50份,分离血清,通过微量血凝及血凝抑制试验(HI)进行新城疫、禽流感H5亚型(Re-5株)抗体水平监测。试验结果表明,新城疫平均HI抗体效价为9.4 log 2,禽流感H5亚型(Re-5株)平均HI效价为7.64 log 2,说明整场免疫合格,但鸡群需要补种禽流感H5亚型二联油乳剂灭活苗。     

重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗免疫效果评估

2017年7月,农业部决定对全国家禽开展H7亚型流感免疫。为评价重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)对家禽的安全性及免疫效果,2017年10—12月以田间试验方式,常规养殖肉鸡(江村黄鸡)、樱桃谷白鸭、黑棕鹅各120只。按程序免疫:肉鸡9日龄首免(剂量0.3 mL),30日龄二免(剂量0.5 mL);樱桃谷白鸭15日龄首免(剂量1 mL);黑棕鹅15日龄首免(剂量1 mL)、50日龄二免(剂量1.5 mL)。定期采集血清测定抗体效价直至出栏,并每日观察禽群临床表现。试验结果显示:鸡首免后21 d,H5亚型HI抗体效价为4.2 log2,抗体合格率均小于70%,H7亚型HI抗体效价为7.5 log2,抗体合格率均大于70%;二免后H5和H7亚型HI抗体效价均大于8 log2,抗体合格率均大于70%。鸭首免后21 d,H5亚型HI抗体效价为5.1 log2,抗体合格率均大于70%,H7亚型HI抗体效价为5.6 log2,抗体合格率均大于70%,出栏前(47日龄)H5和H7亚型HI抗体效价均大于6 log2,抗体合格率均大于70%。鹅首免后21 d,H5亚型HI抗体效价为3.9 log2,抗体合格率均小于70%,H7亚型HI抗体效价为5.2 log2,抗体合格率均大于70%;二免后H5和H7亚型HI抗体效价均大于7 log2,抗体合格率均大于70%。通过临床观察,未发现该疫苗有严重免疫副反应。试验结果表明,该二价灭活疫苗安全有效,但对于生长周期超过70 d天的家禽,应免疫两次。     

鸡新城疫诊断抗原制备方法的研究

将疑似新城疫病料无菌采集后进行RT-PCR鉴定,将阳性病料研磨后接种SPF鸡胚,收获的阳性尿囊液进行血凝试验(HA)及血凝抑制试验(HI)检测病毒效价,病毒效价达到2~7~2~8,病毒凝集效价达到10log2。使用10%蔗糖溶液及18-25k Da透析袋对阳性尿囊液进行浓缩,浓缩至原体积的1/5;10%福尔马林灭活诊断抗原,经过6h后灭活达100%;诊断抗原效价测定:血凝效价为2~(10);血凝抑制效价为10log2。利用制备的鸡新城疫诊断抗原和鸡新城疫标准诊断抗原与鸡新城疫标准检测抗体进行血凝试验(HA)与血凝抑制试验(HI),对比结果:鸡新城疫诊断抗原病毒效价为2~(10),高于鸡新城疫标准诊断抗原的2~9,鸡新城疫诊断抗原凝集效价为10log2,等同于鸡新城疫标准诊断抗原,证明所制备鸡新城疫诊断抗原符合要求,可以应用到生产实践中。     

新城疫病毒HI抗体效价与流行株感染排毒之间的相关性

为了分析免疫鸡群中新城疫强毒感染流行的原因,明确抗体效价与流行株感染排毒率之间的关系,本研究以LaSota为抗原制备新城疫灭活疫苗,并以0.02mL和0.4mL的量分别免疫3周龄的SPF鸡10只。免疫后7、14、21d分别测定免疫鸡血清中的抗体HI效价。免疫后21d以基因Ⅶd亚型新城疫流行株JS5/05进行攻毒,攻毒后每天观察试验鸡的临床症状,并于攻毒后3、5、7d采集试验鸡的喉气管与泄殖腔棉拭样品进行病毒分离,结果显示,免疫3周后0.02mL和0.4mL疫苗免疫组鸡的血清HI抗体平均效价分别为5.4log2和8.2log2;0.02mL免疫组在攻毒后的排毒率达到100%,且排毒时间较长,而0.4mL免疫组在攻毒后的排毒率明显降低,且排毒时间较短。上述结果表明新城疫抗体效价与流行株感染排毒率之间存在明显的负相关。     

四种雉鸡新城疫疫苗免疫抗体消长规律的研究

用新城疫活疫苗(La Sota株)和新城疫、传染性支气管炎二联灭活疫苗免疫动物园圈养的孔雀、七彩山鸡、原鸡和白冠长尾雉4种雉鸡,于免疫前及免疫后14、21、35、90、150、210、280d分别采血检测血清中新城疫血凝抑制(HI)抗体。结果表明,孔雀免疫接种新城疫疫苗后14d就能产生较高效价HI抗体,35d抗体效价达高峰;七彩山鸡、原鸡、白冠长尾雉免疫接种新城疫疫苗后14d也能产生较高效价抗体,21d抗体水平达高峰,至免疫接种后90d抗体效价逐渐降低。整个试验过程中,孔雀产生的HI抗体效价最高,并且整齐度好,维持时间最长,至免疫接种后280d抗体效价仍能维持在7.5log2;白冠长尾雉产生HI抗体效价次之,到免疫接种后280d仍维持在6.67log2;七彩山鸡和原鸡抗体下降较快,到免疫接种后280d分别下降到5.67log和4.71log2。     

合肥野生动物园5种雉鸡接种新城疫疫苗后抗体水平测定

选择成年白冠长尾雉5只,白腹锦鸡5只,白鹇3只,红腹锦鸡3只和孔雀11只,同时用L系弱毒冻干苗和新城疫油乳剂灭活疫苗进行免疫接种,通过血凝抑制试验(HI)测定其抗体滴度.结果表明,在免疫接种后26 d,白冠长尾雉抗体效价为9.8log2,白腹锦鸡为8.0log2,白鹇为8.0log2,红腹锦鸡为10.7log2;孔雀在免疫后接种0、8、15、20、25 d,抗体水平分别为3.8log2、5.0log2、6.2log2、7.5log2及8.2log2.     

禽流感-新城疫二联重组活疫苗(rLH5-6株)对产蛋鸡群免疫效果观察

本试验通过禽流感(AI)-新城疫(ND)二联重组活疫苗(r LH5-6株)以不同的免疫途径和免疫剂量单独使用以及分别和重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(Re-6株+Re-7株)、鸡新城疫灭活疫苗联合使用,免疫产蛋鸡群,定期采样监测禽流感(H5-6株)及新城疫抗体效价,根据各试验组免疫抗体效价、持续时间及免疫抗体合格率,评价禽流感-新城疫二联重组活疫苗的免疫效果,确定加强免疫的时间间隔及适宜的免疫程序。试验结果表明,单独使用禽-新二联重组活疫苗免疫产蛋鸡群和单独使用禽流感二价灭活疫苗相比,禽流感HI平均抗体效价低(仅在3log2左右),但仍能产生有效的保护,新城疫平均抗体效价可达6~8log2,70%以上的免疫抗体合格率能维持2个月左右。禽-新二联重组活疫苗与禽流感二价灭活疫苗联合使用,和单独使用禽流感二价灭活疫苗相比,禽流感HI平均抗体效价有所提高,且维持时间较长,70%以上的免疫抗体合格率至少维持6个月,新城疫HI平均抗体效价稍低于单独使用禽-新二联重组活疫苗的平均抗体效价。禽-新二联重组活疫苗与新城疫灭活疫苗联合使用,和单独使用新城疫灭活疫苗相比,导致新城疫HI平均抗体有所降低,且70%以上的免疫抗体合格率仅能维持6个月左右,禽流感HI平均抗体效价与单独使用禽-新二联重组活疫苗相比,没有明显差异。禽-新二联重组活疫苗肌注免疫的效果优于饮水免疫,而不同免疫剂量,在免疫效果上没有明显差异。建议,对于产蛋鸡群,单独使用禽流感-新城疫二联重组活疫苗时,可每间隔2个月按说明书剂量进行一次饮水或肌注加强免疫,单独使用禽流感二价灭活疫苗时,可每间隔4个月按说明书剂量进行一次肌注加强免疫;对于产蛋鸡群禽流感免疫,禽-新二联重组活疫苗可联合使用禽流感二价灭活疫苗,每间隔6个月用禽流感二价灭活疫苗按说明书剂量进行一次加强免疫,期间每间隔2个月再单独使用禽-新二联重组活疫苗按说明书剂量进行一次饮水或肌注加强免疫;对于产蛋鸡群新城疫免疫,新城疫灭活疫苗不宜和禽-新二联重组活疫苗联合使用。     

一例鸡新城疫病毒和大肠杆菌混合感染的诊断

解剖5只送检的临床发病鸡及病死鸡,发现4只剖检鸡均有腺胃乳头出血、直肠和泄殖腔出血,喉头有大量粘液等病变,2只鸡的气囊出现混浊.采集病料,处理后接种10日龄SPF鸡胚,发现鸡胚在48h左右死亡,收集死亡鸡胚的尿囊液,用1%的鸡红细胞进行血凝试验(HA),结果HA效价为27左右,进一步用新城疫阳性标准血清进行血凝抑制试验(HI),实验表明HI为阳性;对肝脏病料中进行细菌分离培养,结果 18h后麦康凯琼脂平板上,长出红色的菌落群,经生化鉴定为埃希氏大肠杆菌.由此可断定,该鸡群混合感染了新城疫病毒和大肠杆菌.     

禽霍乱禽霍乱、新城疫二联灭活疫苗免疫攻毒试验与HI试验的平行关系研究

对8批禽霍乱、新城疫二联灭活疫苗进行新城疫组分的效力检验,在检测新城疫血凝抑制效价(HI)的同时,进行新城疫病毒强毒攻击试验,旨在寻找抗攻毒保护与HI抗体效价之间的平行关系。结果表明:免疫剂量与HI抗体效价和攻毒保护率呈正相关,免疫40、20、10、5μL剂量组攻毒保护率和HI抗体效价分别为94.9%(75/79)、5.2 log_2,87.5%(70/80)、4.4 log_2,29.1%(23/79)、2.7 log_2,11.4%(9/79)、2.1 log_2;对照组攻毒保护率为0(0/10),HI抗体效价≤2.0 log_2;新城疫HI抗体效价与攻毒保护率也呈正相关,当HI3.0 log_2,攻毒保护率为4.1%;HI=3.0 log_2,攻毒保护率为22.9%;HI=4.0 log_2,攻毒保护率为87.7%;HI=5.0 log_2,攻毒保护率为94.4%;HI=6.0 log_2,攻毒保护率为100%。本研究为制定疫苗质量标准中新城疫病毒株的效力检验方法和标准提供实验室理论依据。     

非典型新城疫的综合诊断试验

本试验对某蛋鸡场疑似患非典型新城疫的鸡进行了病理学、血清学及病原学综合诊断。诊断结果表明:鸡群表现有呼吸道症状、消化道症状及产蛋性能下降的非典型新城疫的基本症状;剖检病变胃肠道及呼吸道出血性卡他性炎症,卵泡充血、出血,输卵管萎缩等均符合新城疫的病变特征;病毒性脑炎、淋巴组织坏死是具有证病意义的新城疫组织病变;结合发病前后HI抗体检测结果及新城疫的病毒分离鉴定,综合判定该鸡群所患疾病为非典型新城疫。