猪瘟母源抗体与初免抗体跟踪检测报告

在仔猪断奶时进行猪瘟的初次免疫是许多养猪场的习惯性做法,为了研究这一做法的实际效果,笔者在某大型种猪场选择了112头在3周龄断奶时的仔猪,抽取血清后用猪瘟抗体ELISA检测试剂盒进行抗体检测,之后分为2组进行了对比试验,试验组按照常规做法在3周龄时初免猪瘟疫苗,对比组则不进行猪瘟的免疫,在随后的第4周、5周、7周分别进行猪瘟抗体的测定,结果表明,仔猪在3周龄时进行猪瘟的初免并没有起到提高机体猪瘟免疫水平的作用;同时也发现高水平的猪瘟母源抗体在仔猪体内能维持较长时间,因此,可以适当推迟仔猪猪瘟的初免时间。     

噬菌体抗体库技术及其在水产养殖的应用前景

近十多年来,随着分子生物学(包括基因工程、蛋白质工程)的飞速发展及人们对生物免疫系统认识的不断深入,抗体技术已从细胞工程抗体(杂交瘤技术)进入了分子重组抗体即基因工程抗体时代.     

牙鲆免疫相关组织特征及抗体阳性细胞的免疫组化定位

应用抗牙鲆免疫球蛋白单克隆抗体(2D8、1H1)对牙鲆外周血系统、肾、脾、肝、胰、肠道组织中抗体阳性细胞进行了定位观察,并对其组织学特征进行了描述。两株单抗均能在外周血滴片和组织切片中成功地检测到抗体阳性细胞。外周血系统中的抗体阳性细胞主要为淋巴细胞,没有发现抗体阳性的巨噬细胞;牙鲆头肾中没有肾单位,肾小管、肾小球等主要存在于后肾中,脾脏和肾脏都含有巨噬细胞、粒细胞、淋巴细胞等免疫相关细胞,抗体阳性细胞存在方式也极为相似,成簇或单独分布于黑色素巨噬细胞中心和血管周围;牙鲆的胰组织镶嵌在肝上,形成肝胰脏,也参与免疫应答,抗体阳性细胞单个存在,分布于肝组织中,胰组织中没有发现抗体阳性细胞;肠道抗体阳性细胞主要存在于固有层中,有成簇存在现象,在上皮层也可见到单个存在的抗体阳性细胞。     

鲮生长激素的重组表达及其多克隆抗体的制备

IPTG诱导含有鲮（Cirrhinus molitorella）生长激素基因（growth hormone,GH）的工程菌M15（pQE30-GH）重组表达鲮生长激素蛋白。SDS-PAGE凝胶电泳结果表明,在24.5kDa处有1条重组表达鲮生长激素条带,经分离纯化、复性和浓缩后得到有活性的重组鲮生长激素蛋白。以复性浓缩后的重组鲮生长激素蛋白为抗原,采用改进的方法对新西兰大白兔进行皮下多点免疫注射,获得兔抗鲮生长激素多克隆抗体。经ELISA检测该免疫血清的滴度为12800。以该多抗为一抗,Western blotting可以检测到10ng的抗原量;并且在鲮垂体组织提取液中和血清中检测到一种能与该血清作用的大小约为21.5kDa的蛋白条带。说明该试验所制备的兔抗鲮生长激素多克隆抗体具有较好的免疫活性。     

动物源性食品安全检测技术探析

当前,在乡村振兴背景下,我国养殖业迅猛发展,动物源性食品供给量逐年提升,但随之而来的激素、抗生素、兽药、添加剂等安全问题层出不穷,因此做好动物源性食品安全检测极为重要。主要探究了动物源性食品安全检测技术,并以贵州地区兽药检测实践为例,总结食品安全检测技术应用措施,旨在为各界提供更加方便、高效且准确的检测方法。     

抗冻蛋白AFPⅢ的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备

采用基因重组技术将AFPⅢ基因与原核表达载体pET32a(+)连接,转化大肠杆菌BL21(DE3),通过PCR、单双酶切及测序鉴定构建结果.用IPTG诱导蛋白表达,将融合蛋白纯化后,免疫6-7周龄的小白鼠,制备AFPⅢ多克隆抗体,采用Western印迹法检验抗体特异性.通过酶联免疫吸附试验(ELISA)测定多克隆抗体滴度.成功地构建了AFPⅢ的原核表达载体,经在大肠杆菌中诱导表达、镍柱亲和层析纯化,得到较纯的相对分子质量约26 000 Da的融合蛋白,免疫小白鼠后得到多抗血清,Western印迹结果显示此多克隆抗体与AFPⅢ蛋白特异性结合.该试验为进一步研究AFPⅢ在转基因鱼中的定点表达以及作用机制奠定了基础.     

鸡蛋抗体治疗病鳖的初探

从病鳖分离得到的不同气单胞菌,制备四联菌苗,免疫母鸡,取鸡血清抗体效价为１：３２０时的鸡蛋,制马鸡蛋抗体制剂,治疗病鳖,治愈率为３６．６％     

动物源性食品中磺胺类药物残留检测技术研究进展

磺胺类药物是一类使用广泛的广谱抗菌药,价格低廉、高效、性质稳定。但不当使用会造成其在动物组织中离集,通过食物链传递,最终危害人的健康文章对动物源性食品中磺胺类药物残留检测前处理和检测方法进行了综述     

卵黄抗体及其在水产养殖病害防治中的研究进展

卵黄抗体(IgY)是一种存在于卵黄中的免疫球蛋白,具有性质稳定、安全高效、绿色环保、不产生耐药性等特点,在水产养殖病害防治领域具有广泛应用前景。文章介绍了卵黄抗体的分子结构、理化性质和作用机制以及卵黄抗体在水产动物疾病防治中的研究现状和应用前景,以期为今后卵黄抗体在水产养殖的基础研究和应用提供参考。     

赤点石斑鱼神经坏死病毒主衣壳重组蛋白多克隆抗体的制备

把赤点石斑鱼（Epinephelus akaara）神经坏死病毒（RGNNV）主衣壳蛋白（MCP）基因的重组表达质粒载体pRSETA-MCP转化至大肠杆菌（Estherichia coli）BL21（DE3）,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE显示表达的重组蛋白主要以不可溶的包涵体形式存在,分子量约44.5kD。通过Ni-NTA-Agarose亲和层析柱纯化,经分析纯度达90%,之后免疫新西兰兔制备抗血清,ELISA效价达1：12800以上。Western-blot分析结果显示,该血清与表达的重组蛋白有较强反应,说明通过原核表达的重组蛋白具有良好的免疫原性。     

鸡抗鸭源大肠杆菌卵黄抗体的研制

用鸭源大肠杆菌125号菌株制成的灭活油佐剂苗、蜂胶苗及无佐剂菌苗作为免疫原,免疫经产蛋鸡,定期收集鸡蛋,用氯仿提取卵黄抗体,采用试管凝集法检测抗体效价。结果表明:油佐剂灭活苗的抗体维持时间较长,在免疫后60d还能保持较高水平,其峰值达到1∶24。蜂胶灭活疫苗的抗体产生速度比较快,消失也较快,其峰值达到1∶12,40d后抗体基本上消失。不加佐剂的灭活菌苗抗体产生速度较快,10d达到峰值1∶16,然后呈逐渐下降趋势,免疫40d后波动较小。结果,油佐剂灭活菌苗免疫后产生的抗体效价及持续时间高于无佐剂灭活苗和蜂胶苗的抗体效价。     

应用间接荧光抗体技术检测林蛙嗜水气单胞菌

以感染嗜水气单胞菌的林蛙各组织脏器为抗原,以热灭活的嗜水气单胞菌为免疫原,免疫家兔制备兔抗嗜水气单胞菌血清为第一抗体,用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗兔IgG作为二抗,建立了间接荧光抗体试验方法.分别采用2.5%戊二醛5 min、甲醇10 min、冷丙酮1 h 3种固定方法固定抗原,然后滴加不同稀释倍数的兔抗嗜水气单胞菌血清、羊抗兔IgG-FITC,于荧光显微镜下观察.结果表明,2.5%戊二醛固定腹水5 min,兔抗血清抗体效价为 1:80,荧光二抗的最佳稀释倍数为1:4000.     

黄鳝性逆转研究进展

概述了黄鳝性逆转与体长、体重、产卵、性腺蛋白、血清蛋白、H-Y抗原、内源激素及外源激素的关系;分析了性逆转过程中,性腺发育的季节变化、性周期血清中游离氨基酸的变化;阐述了基因表达与性逆转关系的最新研究进展以及环境因子对性逆转的影响,为从事性逆转控制及繁殖工作提供重要的参考资料。     

鸡粪源性大肠杆菌耐药性分析

大肠杆菌是严重危害人畜健康的致病菌,为了解鸡粪源性大肠杆菌的耐药情况,通过药物敏感性试验和耐药基因检测,对170株鸡粪源性大肠杆菌进行耐药分析,结果表明,大肠杆菌分离株分别对13种抗生素产生不同程度的耐药性,其中对氨苄西林的耐药性最高,且存在多重耐药情况。实验通过药敏试验讨论了大肠杆菌的耐药情况,为禽大肠杆菌疾病的合理用药提供参考。     

牙鲆迟钝爱德华氏菌血清型及荧光抗体检验

以迟钝爱德华氏菌的代表菌株(HC010907-1)为免疫原,制备免疫血清,对分离于牙鲆鱼的130株迟钝爱德华氏菌进行了血清型检定,结果表明:供试的130株迟钝爱德华氏菌均为同种血清型;同时以此免疫血清为第一抗体,以标准羊抗兔IgG荧光抗体为第二抗体,进行了荧光抗体技术检验迟钝爱德华氏菌的可行性试验,表明亦具有较强的特异性。     

猪源性链球菌的耐药性分析

猪链球菌病是养猪场的一种常发病，近几年此病有上升的趋势，许多猪场的哺乳仔猪和断奶仔猪不同程度地感染链球菌，发病率和死亡率均较高，少数育肥猪和种猪则以关节炎型为主，虽然死亡率不高，但是影响生产性能。目前，对于猪链球菌病的防治主要是以注射自家灭活苗以及应用青霉素类、头孢类抗生素、氨基糖苷类、林可胺类、大环内酯类以及喹诺酮类药物。通过对猪链球菌体外抑菌试验．为研究链球菌的耐药性做了铺垫，并为进一步消除耐药性打下了基础。     

水产品中生物胺的研究进展

杂交瘤-单克隆抗体技术由Koehler和Milstein创建于1975年。20世纪80年代初在世界各国兴起单克隆抗体研究热潮，现在每年都有大量有关单克隆抗体的研究报道，单克隆抗体已从初期的探索性研究进入大量开发、应用阶段。Siwicki等制备了抗金鱼免疫球蛋白单克隆抗体并用于抗体分泌细胞定位和免疫水平监测，Lin和Dickeison等应用单克隆抗体分析小瓜虫保护性抗原并进行了被动免疫实验，Austin和Cartwright等建立了以单抗为核心的水产病原快速检测方法。     

传染性胰腺坏死病毒VP2COE蛋白单克隆抗体的制备及与初步应用

为制备抗IPNV VP2蛋白的单克隆抗体,对其基本特性进行鉴定并进行初步应用。实验利用Ni-NTA亲和层析纯化的IPNV VP2 COE重组蛋白作为免疫原,免疫8周龄的雌性BALB/c小鼠,经3次免疫后,将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合。采用间接ELISA和有限稀释法筛选杂交瘤细胞,共得到2株能稳定分泌特异性抗体的阳性细胞株,分别命名为5G10和5F3,亚类鉴定均为IgG1亚类。2株杂交瘤细胞的染色体数目在75～120之间。间接ELISA检测5G10和5F3细胞培养上清的效价分别为1∶105、1∶102,腹水效价分别为1∶108、1∶104。Western-blotting和间接免疫荧光鉴定结果显示,2株单抗均能特异性地识别IPNV。间接ELISA表明,2株单抗不与IHNV、VHSV、SVCV、HRV等病毒反应,说明获得的单抗具有高度的特异性。相加ELISA实验结果显示,2株单克隆抗体分别识别IPNV VP2蛋白上不同的抗原位点。应用间接免疫荧光方法对临床确定为患有IPN虹鳟肝组织进行检测,结果证实该2株单克隆抗体可用于后续实验。     

卵黄抗体在水产养殖病害防治及水产品保鲜中的应用研究进展

正2012年,水产养殖产量占世界水产品总产量(养殖和捕捞)的比例,由2000年的25.7%升至42.2%,水产养殖业完全可以与捕捞业相媲美[1]。自改革开放以来,我国水产养殖业高速发展举世瞩目,是世界唯一渔业养殖产量超过捕捞产量的国家,也是世界第一水产养殖大国[2]。2012年我国水产养殖产量占全球总产量的47.4%[3],是食物供给     

动物源性食品安全监管存在的问题及建议

食品安全问题成为社会关注的焦点。文章分析了动物源性食品安全监管存在的问题,提出了如何加强动物源性食品安全监管的建议。