磺胺二甲氧嘧啶钠在斑点叉尾鮰体内的残留及其消除规律

在(19±1)℃水温下,以200mg/kg的剂量对斑点叉尾鮰单次口灌磺胺二甲氧嘧啶钠(SDM-Na),采用HPLC方法研究了SDM-Na在斑点叉尾鮰体内的残留及消除规律。研究结果表明,本试验的回收率在79%~93%之间,最低检测限为0.01μg/g,日间和日内精密度(RSD)均小于5%。血浆中药物代谢符合二室模型,模型为C=36.68e^-0.14t+18.12e^-0.05t-54.8e^-0.33t。主要药代动力学参数为:分布半衰期为4.85h,药峰时间为5.38h,峰值浓度为21.42μg/mL。肌肉中的药物含量在4h达到最大值17.93μg/g,肝脏中的药物含量在8h达到最大值10.43μg/g,肾脏中的药物含量在8h达到最大值11.61μg/g。在停药120h时血液、肌肉、肝脏、肾脏组织中的含量均低于国家残留标准(100μg/kg)。在本试验条件下,斑点叉尾鮰的的建议休药期应大于5d。     

7种中草药对斑点叉尾鮰生理生化指标的影响

[目的]为7种中草药在水产养殖业中的合理使用提供理论依据。[方法]以斑点叉尾鮰（Ictalurus punctatus）为研究对象,考察了射干、杜仲、贯众、白芍、甘草、虎杖和栀子7种中草药对生理生化指标的影响。[结果]中草药能提高血清和脾脏抗氧化能力,降低肝胰脏抗氧化能力。射干能显著提高头肾SOD和CAT活力。贯众、杜仲、栀子和虎杖能显著提高肌肉SOD和CAT活力。贯众显著降低血清LZM活力,射干显著提高肝胰脏和头肾LZM活力,虎杖显著降低头肾LZM活力,栀子和甘草显著提高鳃LZM活力,贯众、杜仲和虎杖显著提高肌肉LZM活力。贯众、甘草和虎杖降低AST活力,白芍显著提高AST活力。贯众、杜仲、栀子和甘草降低肝胰脏ALT活力。射干、栀子和甘草显著提高白细胞吞噬能力。[结论]7种中草药对斑点叉尾鮰生理生化指标有不同程度的影响。     

三种复方中草药对斑点叉尾鮰部分生化指标的影响

为研究复方中草药“鱼欢”、“肝泰乐”、“三黄粉”对斑点叉尾鮰生化指标的影响,将以上3种中草药按5g／kg饵料的比例加到饵料中,连续喂食斑点叉尾鮰7d后取样,测定血液和组织中的生化指标。结果表明：3种复方中草药均能提高血清和脾脏的SOD／MDA和cAz孙佃A比值,提高血清和脾脏的抗氧化能力;3种复方中草药均能降低头肾的SOD／MDA和CAT／MDA比值,降低其抗氧化能力。“肝泰乐”和“鱼欢”能提高鮰的抗氧化能力,“三黄粉”和“鱼欢”能提高肌肉的抗氧化能力。3种复方中草药能降低肝胰脏中AST和ALT的活力。“肝泰乐”显著降低肝胰脏的LZM活力,“鱼欢”显著降低头肾的LZM活力,而“三黄粉”则显著提高肌肉的LZM活力。3种复方中草药均能提高血液的白细胞吞噬能力,降低肝胰脏的AST和ALT活力。     

斑点叉尾鮰血液学指标研究

对斑点叉尾鮰的血液学各项指标进行测定的结果表明,与健康组对比,患病组除嗜碱性粒细胞及平均HGB浓度略有升高外,其他数据都降低。健康组红细胞数为2.54×1012个/L,患病组为2.28×1012个/L,患病组红细胞数显著降低(P<0.05);健康组白细胞数为224.99×109个/L,患病组为116.20×109个/L,两者存在极显著差异(P<0.01);健康组红细胞压积为42.30%,患病组为37.26%,两者存在极显著差异(P<0.01);健康组血小板总数(血栓细胞)为24.67×109个/L,患病组为2.60×109个/L,两者存在极显著差异(P<0.01)。血清总蛋白和球蛋白含量升高,白蛋白含量降低,其中患病组白蛋白和球蛋白的改变与健康组相比有显著差异(P<0.05)。     

饥饿胁迫对斑点叉尾鲴血液生理生化指标的影响

为了探究饥饿对斑点叉尾鲴血液生理生化指标的影响,于(21±1)℃条件下,在室内水族箱中对斑点叉尾鮰进行为期5周的饥饿试验,分别在饥饿的第0、1、2、3、4周取样并测定其生理生化指标.结果显示,斑点叉尾鮰血液中的红细胞数和红细胞压积分别在饥饿2周和4周内显著下降(P＜0.05);而白细胞数和红细胞沉降率分别在饥饿1周与2周内显著增加(P＜0.01);血清中血糖对饥饿特别敏感,在饥饿的1～3周内显著下降(P＜0.01),此后1周变化不明显(P＞0.05);血清中总胆固醇、甘油三酯含量在饥饿3周后均显著降低(P＜0.01);饥饿使血清总蛋白和白蛋白浓度呈现先增加后降低的趋势;饥饿对血清氯离子和钙离子浓度没有显著性影响,而碱性磷酸酶活性在饥饿1周显著增加(P＜0.05)、谷丙转氨酶活性在饥饿1～2周有非常显著的下降(P＜0.01).总的试验结果显示,饥饿对斑点叉尾鮰大部分的血液生理生化指标有显著性影响.     

溶氧对斑点叉尾鮰免疫机能及抗病力的影响

[目的]研究溶氧水平对斑点叉尾鮰免疫机能及抗病力的影响。[方法]设置4个溶氧水平：（2.01±0.26）、（4.17±0.53）、（6.32±0.59）、（8.86±1.01）mg/L,分别记作A、B、C、D组,饲养斑点叉尾鮰,于饲养试验开始后的0、7、14、28、56d取样观察外周血白细胞数（WBC）、白细胞吞噬百分比（PP）和吞噬指数（PI）、溶菌酶活力、补体C3和C4水平、皮质醇及血糖水平,并观察小瓜虫感染后上述指标的变化及累计死亡率。[结果]饲养试验最后,WBC、PP、PI均以A组最低;饲养试验期间,A组溶菌酶活力、皮质醇水平和血糖水平先升后降,补体C3、C4含量显著降低;除血糖外,各组所有指标均在感染前期升高,后期显著降低;A组免疫指标在感染后期最低,同时累计死亡率最高。[结论]慢性低氧胁迫降低了斑点叉尾鮰的免疫机能及对小瓜虫的抗病力。     

小鼠血清抗磺胺二甲氧嘧啶抗体的研制

将磺胺二甲氧嘧啶(SDM)与载体牛甲状腺球蛋白(BTG)偶联,构建SDM完全抗原SDM-BTG。用SDM-BTG免疫小鼠,诱导小鼠产生血清抗SDM抗体。ELISA检测表明:SDM-BTG免疫小鼠所产生的多克隆抗体与SDM-BSA包被抗原的结合有较强的特异性和较高的亲和力。     

斑点叉尾鮰血清免疫球蛋白纯化及其结构分析

通过饱和硫酸铵分步盐析结合柱层析纯化温和气单胞菌免疫的斑点叉尾鮰血清免疫球蛋白(Ig)，结果表明，斑点叉尾鮰血清Ig主要分布在35％～55％的硫酸铵沉淀区间；而在Sepharose-4B凝胶柱和DEAE-52阴离子交换柱层析纯化的Ig均出现在第1个蛋白质峰。SDS—PAGE分析表明，纯化后的血清Ig纯度提高。通过变性还原、变性非还原和非变性非还原3种条件下的免疫印迹(Westernblot)试验对血清Ig的结构进行初步分析，发现SDS变性还原条件下血清Ig重链分子量为72kD，轻链有3条，其分子量分别为21kD、23．5kD和26kD；在变性非还原条件下血清Ig则出现多种结构形式，主要条带的分子量分别为760kD、525kD、330kD和230kD；而在非变性非还原条件下Ig仅出现一种结构形式，分子量约为870kD。     

水库斑点叉尾鮰网箱微孔增氧高效养殖试验

为了充分挖掘网箱养殖的生产潜力,提高养殖效益,改善养殖水体环境,减少病害发生,将微孔增氧技术运用于斑点叉尾鮰网箱养殖中,试验结果表明:成活率比对照组提高8.54个百分点;产量比对照组提高33.4 kg/m2;纯收益比对照增加231.8元/m2。     

敌百虫对斑点叉尾鮰的急性毒性试验

[目的]了解敌百虫对斑点叉尾鮰的急性毒性情况。[方法]以健康斑点叉尾鮰鱼种为试材,平均体重46.7 g,敌百虫设6个浓度梯度(0.1、0.4、0.8、1.2、2.4和3.2 mg/L),在室内常温静水条件下,对斑点叉尾鮰进行急性毒性正交试验。[结果]敌百虫对斑点叉尾鮰的24、48、72、96 h的半致死浓度分别为1.6、1.1、0.8、0.7 mg/L;安全浓度0.07 mg/L。敌百虫毒性强,使用时必须等毒性消失后才能放鱼苗;不同鱼类对敌百虫敏感性有差异很大,斑点叉尾鮰对敌百虫非常敏感,浓度为0.8 mg/L时已有将近50%的鱼死亡,而未死亡的鱼也表现出不同的中毒症状;大剂量使用不仅会出现残留、阻碍鱼类生长,而且还会污染水质。[结论]建议生产上敌百虫与其他药物轮用,使用时须等毒性消失后使用。     

提高冻藏鮰鱼片解冻品质的研究

研究抗冻剂浸渍对-18℃,-30℃和-50℃ 3种冻藏温度的鮰鱼片解冻后的品质和蛋白质变性的影响。结果表明：添加抗冻剂降低了解冻鮰鱼片的pH值,减少解冻后水分流失,维持较低的K值和挥发性盐基氮含量,保持解冻鱼片较好的品质;降低TBARS值,缓解脂肪氧化;保持较高的盐溶蛋白含量和Ca²⁺-ATP 酶活性,减轻解冻鮰鱼片蛋白质冷冻变性的程度。     

斑点叉尾鮰肠败血症PCR诊断方法的建立

为了建立快速、敏感的聚合酶链式反应(PCR)诊断斑点叉尾鮰Ictalurus punctatus的肠败血症技术,作者根据NCBI公布的鮰爱德华氏细菌序列,设计了一对特异性诊断引物CM3/CM4,对鮰爱德华氏细菌特异基因片段进行PCR扩增试验,PCR反应条件的优化以及不同检测材料的比较,同时测试了该方法的特异性和敏感性,并对广西4个市县临床样品进行了检测.结果表明:用该引物可以扩增到与预计大小相符的276 bp鮰爱德华氏菌特异性片段;PCR反应与Ⅰ型荧光假单胞菌、点状产气单胞菌点状亚种、鳗弧菌、温和气单胞菌、肠型点状产气单胞菌、柱状黄杆菌、嗜水气单胞菌、河弧菌、迟缓爱德华氏菌及海豚链球菌无交叉反应;用该PCR法可以检测出病鱼脑、肝、肾及脾中的病原菌,检测的最低细菌数为12个,且病鱼内脏组织、菌落及菌液均可直接用于该PCR扩增;临床菌株检测结果与基于菌株16S rRNA基因序列系统进化分析和生化鉴定结果一致.因此,本试验中所建立的PCR检测方法在斑点叉尾鮰肠败血症的诊断和防治方面具有较好的应用前景.     

不同水温下盐酸氯苯胍在斑点叉尾鮰血浆的药代动力学研究

研究不同水温(18、28 ℃)条件下盐酸氯苯胍(robenidine hydrochloride,ROBH)在斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)血浆的药代动力学特征。以20 mg·kg^-1体质量剂量的盐酸氯苯胍单次口灌斑点叉尾鮰,采用高效液相色谱-串联质谱法测定血浆中盐酸氯苯胍的浓度,内标法定量,并采用3p97药代动力学软件计算药代动力学参数、开展模型分析。结果表明,在不同水温条件下盐酸氯苯胍在斑点叉尾鮰血浆的药时曲线均符合二室模型特征,动力学方程分别为C_{18 ℃}=4.17e^-0.01t+2.48e^-0.008t-6.65e^-0.05t和C_{28 ℃}=7.69e^-0.02t+0.13e^-0.01t+-7.82e^-0.27t。血浆中盐酸氯苯胍达峰时间T_peak 分别为42.36和10.03 h,峰浓度值C_max分别为3.51和5.76 μg·mL^-1,表观分布容积V/F(c)分别为3.79和2.78 L·kg^-1,分布相的一级速率常数α分别为0.248和0.222 h^-1,消除相的一级速率常数β分别为0.006和0.007 h^-1,吸收半衰期T_1/2(ka)分别为14.67和2.54 h,消除半衰期T_1/2(β) 分别为85.52和58.63 h,中央室向周边室转运的一级速率常数K₁₂分别为0.000 2和0.000 2 h^-1,周边室向中央室转运的一级速率常数K₂₁分别为0.009和0.01 h^-1,药-时曲线下面积分别为554.18和326.74 μg·mL^-1·h^-1。研究结果表明,盐酸氯苯胍在斑点叉尾鮰体血浆的吸收、分布和消除受水温的影响显著,高水温条件下盐酸氯苯胍的达峰时间短,峰浓度值约是低水温时的2倍,水温对血药曲线下面积的影响较大,对肾清除率影响不大。研究结果为盐酸氯苯胍在斑点叉尾鮰养殖过程中不同季节的合理使用提供一定理论依据。     

罗非鱼和斑点叉尾鮰血清IgM的纯化及兔抗血清的制备

为深入了解罗非鱼和斑点叉尾鮰免疫机理及建立相关免疫检测方法,采用rProtein A Sepharose亲和层析一步法纯化罗非鱼和斑点叉尾鮰血清免疫球蛋白（IgM）,并制备其兔抗血清.结果表明,rProtein A Sepharose亲和层析法可以较好地分离获得高纯度的罗非鱼和斑点叉尾鮰血清IgM,通过SDS-PAGE电泳检测,发现罗非鱼血清IgM重链和轻链分子量分别为88.0、21.0 kDa,斑点叉尾鮰血清IgM重链分子量为101.0 kDa.以纯化的罗非鱼和斑点叉尾鮰血清IgM为抗原,制备其兔抗血清,间接ELISA检测其效价分别为1∶32000和1∶16000;Western blotting检测分析,发现罗非鱼和斑点叉尾鮰的兔抗血清分别在88.0和101.0 kDa附近各出现1条反应条带,说明其兔抗血清具有免疫活性.     

饲粮中添加铬对雄性小鼠血清生化特性的影响

选择刚离乳的雄性KM小鼠 4 0只 ,随机分为 4组 ,每组 10只 ,饲养 2 8d。在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各组小鼠的每千克饲粮中分别添加 0、2、10、5 0mg的吡啶羧酸铬 ,研究铬对小鼠的总蛋白、球蛋白、白蛋白、葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯、尿素 7种血液生化指标的影响。试验结果显示 :添加 5 0mg吡啶羧酸铬的第Ⅳ组小鼠血清总蛋白、球蛋白、白蛋白显著低于第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组 (P <0 0 5 ) ;葡萄糖、甘油三酯显著高于其他三组 (P <0 0 5 ) ;胆固醇、尿素无显著差异。在第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组中 ,添加 0、2、10mg的吡啶羧酸铬后降低了血清中尿素的含量 (P <0 0 5 ) ,对其他血清生化指标方面无显著影响。     

斑点叉尾(鱼回)血清免疫球蛋白纯化及其结构分析

通过饱和硫酸铵分步盐析结合柱层析纯化温和气单胞菌免疫的斑点叉尾(鱼回)血清免疫球蛋白(Ig),结果表明,斑点叉尾(鱼回)血清Ig主要分布在35%～55%的硫酸铵沉淀区间;而在Sepharose-4B凝胶柱和DEAE-52阴离子交换柱层析纯化的Ig均出现在第1个蛋白质峰.SDS-PAGE分析表明,纯化后的血清Ig纯度提高.通过变性还原、变性非还原和非变性非还原3种条件下的免疫印迹(Western blot)试验对血清Ig的结构进行初步分析,发现SDS变性还原条件下血清Ig重链分子量为72 kD,轻链有3条,其分子量分别为21 kD、23.5 kD和26 kD;在变性非还原条件下血清Ig则出现多种结构形式,主要条带的分子量分别为760 kD、525 kD、330 kD和230 kD;而在非变性非还原条件下Ig仅出现一种结构形式,分子量约为870 kD.     

斑点叉尾鮰柱形病病原的分离鉴定及药敏试验

从网箱患柱形病的斑点叉尾鮰病灶中分离到一株细菌(YZ130310),经回归感染试验证实其具有高度致死性.经形态学观察、生理生化特性和16S rRNA基因序列分析鉴定,其主要特征为:革兰氏阴性,菌体细长、两端钝圆、弯曲或直的杆状,菌落浅黄色,边缘不整齐呈根须状;氧化酶、过氧化氢酶阳性,分解酪素和明胶,不分解纤维素、几丁质、酪氨酸、七叶灵和淀粉,硝酸盐还原阳性,吲哚和葡萄糖产气阴性.菌株的16S rRNA基因序列分析结果表明,菌株YZ130310与GenBank上登录的柱状黄杆菌(Flavobacterium Columnare)ATCC 49512株的16S rRNA序列同源性最高,其相似性达99.6％;在基于16S rRNA基因序列构建的系统发育树中,菌株YZ130310与柱状黄杆菌(AY095342)聚为一支.综合形态及生理生化特点和分子生物学的分类鉴定结果,菌株YZ130310可鉴定为柱状黄杆菌(F Columnare).16种抗菌药物的敏感性试验结果表明,菌株YZ130310对头孢哌酮等7种药物敏感,对阿米卡星和氧氟沙星2种药物中度敏感,对头孢氨苄等7种药物存在不同程度的耐药性.     

Effects of different selenium sources and levels on serum biochemical parameters and tissue selenium retention in rats

A total of 54 femaleWistar rats were allotted to nine treatments by weight and fed basal diet or diets containing Se of 0.05, 0.10, 0.15, or 0.20 mg·kg⁻¹ diet provided with either Se yeast or sodium selenite for 10 days. The results showed the following: (1) Selenium yeast had better effects compared with sodium selenite on increasing serum superoxide dismutase activities (P<0.05). Addition of Se yeast or sodium selenite increased the activities of serum gluthathione peroxidase (P<0.01); (2) According to slope ratio assay, the bioavailability of Se from Se yeast was 132.1%, 205.7%, 140.0%, and 107.2% of that from sodium selenite when glutathione peroxidase activities and Se contents in serum, kidney, and liver were used as indicators. It is concluded that Se from Se yeast has higher bioavailability than Se from sodium selenite.     

钠和氯对生长蛋鸭生产性能和血液生化指标的影响

试验采用单因素随机区组设计的方法,选择28日龄蛋鸭150只,平均体重为(0.50±0.01)kg,随机均分成6个处理组,在玉米-豆粕型日粮中添加氯化钠分别为0.0%、0.16%、0.24%、0.32%、0.48%、0.96%组成6种试验日粮。每个处理5个重复,每个重复5只鸭,3层笼养。旨在通过钠和氯对生长蛋鸭生产性能和血液生化指标的影响来确定生长蛋鸭对钠和氯的需要量。结果表明,玉米-豆粕型日粮中不添加氯化钠会对蛋鸭的终重、日增重和饲料转变化率产生极显著影响(P<0.01),而氯化钠添加量过高,尤其是氯化钠添加量为0.96%时,生长蛋鸭的生产性能下降,其终重、日采食量和日增重与中间4个处理组有显著差异(P<0.05)。当饲粮中氯化钠含量为0.24%～0.32%时,蛋鸭的各项生产性能指标最佳,最有利于鸭的生长。各处理间T3、T4、皮质醇和总抗氧化能力均有先升高后降低的趋势,处理Ⅰ(添加0%氯化钠)T4、皮质醇和总抗氧化能力水平极显著低于其他处理(P<0.01)。各处理间血清总蛋白、白蛋白和肌酐无显著性差异(P>0.05),处理Ⅰ组的血清尿素氮和尿酸含量极显著高于其他处理组(P<0.01)。结论表明,在本试验笼养条件下,采用玉米豆粕型日粮(含钠0.037%、氯0.047%、钾0.71%),添加氯化钠0.24%,使其日粮钠和氯的含量分别为0.131%和0.193%,可满足5～11周龄生长鸭的需要。     

湖北宜都斑点叉尾鮰微卫星遗传多样性分析

以湖北省宜都市的斑点叉尾鮰为研究对象,利用8个微卫星位点IpCG0033、IpCG0035、IpCG0040、IpCG0041、IpCG0043、IpCG0051、IpCG0054、IpCG0057的引物进行了遗传分析,统计分析了等位基因数、杂合度、平均多态信息含量等遗传参数,并检测了群体符合Hardy-Weinberg平衡的状况。结果显示:8个微卫星标记位点在群体中共检测到47个等位基因,观测等位基因数在3~8个,平均有效等位基因数为4.254 8个,群体观测杂合度为0.787 3,期望杂合度为0.728 2,平均多态信息含量(PIC)为0.692 0,达到高度多态(PIC>0.5),8个位点中有4个(IpCG0033、IpCG0041、IpCG0054、IpCG0057)处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),另外4个处于不平衡状态(P<0.05)。结果表明我国湖北省宜都市养殖的斑点叉尾鮰目前仍具有较高的遗传多样性,遗传信息丰富,遗传变异大,可以作为良好的育种材料。