麻栎组织培养外植体选择与灭菌方法

麻栎组织培养外植体选择与灭菌方法试验表明：以麻栎播种苗幼苗茎段和大树嫩枝作为外植体进行组培效果较好;播种苗幼苗茎段的最佳灭菌方法是：70%酒精30 s→无菌水洗3次→0.1%升汞2 min→无菌水洗3次;大树嫩枝的最佳灭菌方法是：70%酒精30 s→无菌水洗3次→0.1%升汞5 min→无菌水洗3次;幼苗茎段外植体和大树嫩枝外植体的最佳取材时间是4月,接种后的外植体污染率和死亡率低于其他月份,而芽的萌发率高于其他月份。     

红叶榆叶梅组织培养初步研究

本试验以红叶榆叶梅(Amygdalus triloba(Lindl.)Ricker)带芽茎段为外植体,分别采用75%酒精(15~60s),0.1%升汞(6~12min)进行消毒。对不同取材部位(顶芽以下1~9茎节),不同激素(6-BA,NAA,ZT)和浓度的培养基进行研究。结果表明:在0.1%升汞处理时间8min时,最适宜的75%酒精灭菌时间为45s;而在0.1%升汞处理10min时,污染率最低且存活率最高。茎段选择稍硬枝茎段(顶芽以下4~6茎节),具有较高的存活率和萌发率。6-BA1.0mg/L+NAA 0.15mg/L+ZT0.15mg/L的培养基中,萌发率达到35.83%,萌芽苗生长状况较优。建议使用稍硬枝茎段(顶芽以下4~6茎节)作为红叶榆叶梅组织培养的外植体,使用75%酒精45s+0.1%升汞10min作为红叶榆叶梅茎段的灭菌处理方式,选择6-BA1.0mg/L+NAA0.15mg/L+ZT0.15mg/L作为诱导培养的激素浓度。     

油茶不同外植体灭菌条件研究

以油茶种子、茎段为外植体,采用酒精、升汞、高锰酸钾3种灭菌剂,探讨不同处理对外植体污染和种子萌发的影响。结果表明,油茶茎段较好的灭菌方法:毛刷刷洗+75%酒精10~15 s+0.1%HgCl 10~15min,污染率最低为24.5%;新萌条较好的灭菌方法:75%酒精4~7 s+0.1%HgCl 5~6 min,污染率最低为14.3%;种子灭菌的条件:0.5%KMnO40~24 h+75%酒精3~15 min+0.1%HgCl 20~40 min(不剥壳去皮),75%酒精30 s+0.1%HgCl 8 min(剥壳去皮),这2种处理污染率均较低,种子发芽率相差不大。该结果为油茶再生体系的建立奠定基础。     

青榨槭外植体消毒方法初步研究

以青榨槭带芽茎段为外植体,研究了取材时间、消毒剂种类以及处理时间对外植体灭菌效果的影响。结果表明,0.1%、0.2%升汞处理5 min或7 min的污染率显著低于1%次氯酸钠处理20 min或30 min;75%酒精浸60 s后,用0.1%的升汞消毒7 min和0.2%的升汞消毒5 min或7 min的处理间没有显著差异,其中75%酒精浸60 s后用0.1%的升汞消毒7 min的消毒效果最好,外植体污染率和存活率分别为1.9%和90.4%。4月中旬至7月中旬取材的外植体污染率均低于5%,而存活率均达90%以上,为青榨槭茎段外植体取材的最佳时期。     

阳丰甜柿组织培养外植体的选择与灭菌

为给阳丰甜柿的无性繁殖提供参考,采用不同灭菌方法处理完全甜柿阳丰的不同外植体,对外植体类型、树龄、取材时间及灭菌处理等对灭菌效果的影响进行研究。结果表明:以1年生阳丰甜柿当年生枝条的带皮腋芽作为外植体进行组织培养效果最好,生长速度快,而休眠芽在剥去5片鳞片后组培效果也较好,但后期生长速度较慢。当年生枝条的带皮腋芽的最佳灭菌方法是:75%酒精处理30 s,0.1%升汞处理15 min;剥掉5片鳞片后的休眠芽茎尖最佳灭菌方法:75%酒精处理1 min,5%次氯酸钠处理15 min,0.1%升汞处理20 min。带皮腋芽最佳取材时间是6月,接种后外植体的污染率和死亡率显著低于它取材时间,而芽的萌发率显著高于其它月份。阳丰组织培养的最佳外植体为6月份的带皮腋芽,最佳灭菌方法为先用75%的酒精处理30 s,再用0.1%的升汞处理15 min。     

垂盆草组培快繁技术研究

垂盆草(Sedum sarmentosum Bunge)组培快繁技术的研究结果表明:不同外植体中,茎段灭菌时间以8min最好,成活率达到80%;叶片以6min最好,成活率达到70%,而叶柄以6min效果最好,成活率达到55%。不同类型外植体(茎、叶柄、叶片)均能诱导产生愈伤组织,其中,茎的诱导分化能力最强,叶柄次之,叶片最弱。茎的诱导率为85.2%,显著高于叶柄和叶的诱导率,是最佳的组织培养外植体。无菌外植体芽诱导的最佳培养基配方为:MS 6-BA1.5mg.L-1 NAA0.5mg.L-1 CM100mg.L-1。最适继代培养基配方为MS 6-BA1.5mg.L-1 NAA0.2mg.L-1。生根培养基则以1/2MS NAA1.00为佳。     

红金银花组织培养外植体灭菌的研究

在单因素预试验的基础上,采用正交试验设计,筛选出了植物组织培养中红金银花外植体最佳灭菌方法,总结出外植体的类型、酒精浸泡时间、升汞质量分数、升汞浸泡时间等对红金银花外植体的污染程度及成活率均有显著影响。采用L8(4×24)正交试验表明,对红金银花外植体先用75%的酒精消毒30 s,再配合0.2%的升汞溶液处理5 m in,能达到理想的灭菌效果。     

降低彩色马蹄莲初代培养污染率的研究

研究以黄色马蹄莲球茎为外植体,采用杀菌剂预处理和培养基中附加抗生素等方法,以降低初代培养污染率,结果表明:使用浓度3g/L50%多菌灵可湿性粉剂浸泡黄色马蹄莲球茎24～36h,而后用70%酒精漂洗15s,再用0.1%升汞浸泡20min进行外植体的处理,可以明显提高初生代的无菌率达83.33%～90.00%,与常规灭菌相比降低污染率38%～45%;而在培养基中附加青霉素20mg/L+制霉菌素20mg/L的处理,初代无菌率可达93.33%,与常规灭菌比较污染率降低了48.3%,比用杀菌剂的处理污染率降低了3.33%～10.00%。     

显脉金花茶无菌体系建立及增殖培养研究

以显脉金花茶幼嫩带芽茎段作为外植体,开展外植体灭菌、启动培养及增殖培育试验,结果表明:3月采集的外植体最易灭菌,其最佳灭菌方案为先用75%酒精浸泡20 s后用0.1%升汞浸泡9 min;最佳启动培养基配方为WPM+6-BA 7 mg.L-1+NAA 0.25 mg.L-1;最佳增殖培养基配方为:改良WPM(NO3-∶NH4+=2∶1)+6-BA 5 mg.L-1+NAA 0.05 mg.L-1。     

光皮树优良无性系组织培养的无菌体系建立

以光皮树优良无性系的嫩枝茎段为试验材料,研究不同时期的外植体、灭菌处理与植物激素对接种污染率和无菌外植体得率的影响。结果表明,秋季带顶芽的嫩茎为接种培养的适宜外植体,外植体最佳消毒方法为75%酒精浸泡10 s后,用2~3滴吐温80的0.1%升汞溶液消毒7~9 min。试验获得了光皮树适宜的初代培养基:MS+6-BA 2.0 mg.L-1+NAA 0.05 mg.L-1+PVP 300 mg.L-1+蔗糖30 g.L-1。