抗大片吸虫（Fg）的28－kDa水解酶单抗的建立及鉴定（摘要）

抗大片吸虫（Ｆｇ）的２８－ｋＤａ水解酶单抗的建立及鉴定（摘要）Ｆａｇｂｅｍｉ，Ｂ．Ｏ．用从大片吸虫Ｆｇ中提取的部分纯和完全纯的２８－ｋＤａ水解酶，高免ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，得到抗Ｆｇ的２８－ｋＤａ水解酶的单抗，我们利用ＦＡＳＴ－ＥＬＩＳＡ试验，免疫斑点试...     

禽腺病毒贵州分离株ＨＳ—１的核酸酶切分析与蛋白抗原鉴定

本研究利用１０％ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及Ｗestern-Blotting技术鉴定３株不同的减蛋综合征病毒（贵州株ＨＳ－１、南京分离毒ＧＣ２、国际标准毒ＡＶ－１２７）的蛋白抗原性，结果表明，３株毒的蛋白多肽分子量均在１０６－１２kＤ范围,一各条多肽的组成上略有差异；它们都具有两条相同的免疫原性多肽，分子量分别为１０６和１００ＫＤ。同时，运用ＥcoRⅠ,HindⅢ，ＰｓｔⅠ和ＳmaⅠ等５种限制性内切酶进行了酶切分析，证实３株ＥＤＳ病毒用ＰstⅠ和ＳmsⅠ酶切的片段大小及长度略有不同，而其它３种酶的酶切图谱完全相同。     

肝片吸虫分泌排泄抗原及主要多肽对动物模型的免疫保护

体外培养肝片中吸虫成虫，制备收集其分泌排泄抗原（ＥＳ抗原）。通过制备性ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳方法分离纯化分泌排泄抗原中免疫印迹信号最强的两种多肽－１８．６ＫＤ和１７．２ＫＤ多肽。用分泌排泄抗原和两种多肽分别对动物模型进行免疫保护性试验。大鼠和家兔经抗原免疫后，口服攻击新鲜活性肝片吸虫囊蚴，攻击感染的第６０天解剖动物，统计活虫数并计算减虫率。试验结果显示：肝片吸虫的ＥＳ抗原和１８．６ＫＤ及１７．２     

牦牛肝片吸虫分泌排泄抗原的生化特性和免疫印迹分析

肝片吸虫的分泌排泄抗原（ＥＳ抗原）在诊断及诱导机体产生抗体方面具有重要作用。本文对寄生于牦牛的肝片吸虫ＥＳ抗原的蛋白质组成及其生化特性进行了分析。ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳显示ＥＳ抗原共有９条带，主要由１２－２６ＫＤ的小分子量蛋白质组成；糖蛋白及脂蛋白染色后发现ＥＳ抗原中糖蛋白极少，而含有较多的脂蛋白；等电聚焦电泳结果显示ＥＳ抗原有２２条带，几乎全部是酸性蛋白，ｐＩ主要集中在４．２５～５．２５范围内；双向电泳共检出３０个多肽，主要分布在ｐＩ４．５～７．０之间；免疫印迹分析结果表明：ＥＳ抗原中分子量为１６．２ＫＤ～１８．６ＫＤ的蛋白质是主要的抗原成分，其中１７．２ＫＤ多肽具有最强的免疫原性。     

肝片吸虫成虫抗原蛋白组分的研究

应用十二烷基磺酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）电泳转移和固相免疫酶测定相结合的酶联免疫印溃技术（ＥＴＩＢ）首次分析了牛肝片吸虫成虫抗原白组分，结果显示：牛肝片吸虫成虫抗原分离出４４条带，经ＥＴＩＢ分析，抗原与阳性血清反应显示１８条带，其中主带有４条，分子量分别为３５、８０、９２和９４ＫＤ。上述蛋白组分有较强的反应性，可用作肝片吸虫的诊断抗原。     

表达大肠杆菌肠毒素ST1-LTB融合蛋白双价基因工程菌株的构建

重组菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）经ＩＰＴＧ诱导后,其表达产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＥＬＩＳＡ检测,结果表明重组菌株可以高效表达大肠杆菌肠毒素ＳＴ１－ＬＴＢ 融合蛋白,该融合蛋白占菌体总蛋白的３３．２１％ ,而且已失去天然ＳＴ１肠毒素生物毒性。用从ＩＰＴＧ 诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原免疫小鼠,结果免疫小鼠至少能抵抗１．５ＭＬＤ 的大肠杆菌强毒株Ｃ８３９０２（Ｋ８８ａｃ,ＳＴ＋ ,ＬＴ＋ ）的攻击。用提取的包涵体免疫家兔后,采集的血清能够中和天然ＳＴ１肠毒素的毒性。这表明构建的工程菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）可以作为预防幼畜大肠杆菌性腹泻基因工程菌苗的候选株     

弓形虫病免疫的研究：弓形虫排泄分泌抗原制备及其对怀孕母羊免疫效…

弓形虫ＧＪＳ株速殖子通过传代细胞（ＢＨＫ－２１）培养，制备排泄分泌抗原（Ｅ／ＳＡ），蛋白含量为２．０９５ｍｇ／ｍｌ；ＳＤＳ－ＰＡＧＥ凝胶电泳分析显示２１条区带，分子量在１８～１２０ＫＤ，其中６８ＫＤ为主带，次带７条。用Ｅ／ＳＡ与佐剂（Ｍ－２０６）制备Ｅ／ＳＡ疫苗，对３０只（２公，２８母）弓形虫血检抗体阴性，混群自然交配５０天的适龄健康绵羊随机分组进行免疫，间隔２０天再加强免疫１次。第１组于混群后８     

热磁处理对牛乳中酶活力及蛋白组成的影响

中国黑白花奶牛混合鲜乳，高速离心脱脂后以５０～１００℃加热或磁化１５分仲，测定乳中三种酶活力，并采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ观察乳蛋白组成变化，结果表明：经７Ｏ℃以上热处理后牛乳中碱性磷酸酶（ＡＫＰ）基本失活，乳过氧化物酶（ＬＰ）和纤溶蛋白酶（Ｐｌａｓｍｉｎ）相对较稳定，需８０℃以上加热，磁化处理对乳中酶活力影响不一致，脱脂乳经磁化后三种酶活力稍有提高，磁化底物使纤溶蛋白酶活力增加６０％以上。磁化处理对乳３０℃保温２０小时后滴定酸度影响不显著。牛乳中白细胞内ＡＫＰ比活力为０．０２４单位／毫克蛋白，ＬＰ比活力为５．５６单位／毫克蛋白，极显著低于乳中酶的比活力，表明它们不是乳中ＡＫＰ和ＬＰ的主要来源。乳蛋白ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明，８０℃以上加热使乳牛α－乳清蛋白、β－乳球蛋白发生部分聚合，并对酪蛋白（ＣＳＮ）产生一定影响。磁化后乳中ＣＳＮ同热处理后乳ＣＳＮ电泳特性有相似之处，可能ＣＳＮ空间结构发生了变化。     

鸡肝脏β—羟—β—甲戊二酸单酰辅酶A还原酶的提纯和性质

采用超速离心、热变性处理、硫酸铵沉淀和亲和层析方法，从鸡肝脏中分离提纯了β－羟－β－甲戊二酸单酰辅酶Ａ（ＨＭＧ－ＣｏＡ）还原酶。提纯倍数为２０９倍，比活力１８８．５Ｕ／ｍｇ，Ｋｍ值１．８×１０－４ｍｏｌ／Ｌ。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得分子量为３．２×１０４。温度对该酶活性影响较大，３７℃时活性最高。最适反应ｐＨ为７．２。甘氨酸在１０ｍｍｏｌ／Ｌ浓度以上时对该酶呈现明显抑制作用，ｌ－组氨酸、ｌ－精氨酸则无明显抑制作用。Ｚｎ２＋、Ｍｇ２＋、Ｃｕ２＋离子对该酶有明显抑制作用，Ｚｎ２＋在１．５ｍｍｏｌ／Ｌ、Ｃｕ２＋和Ｍｇ２＋在２．０ｍｍｏｌ／Ｌ浓度以上时抑制作用明显。中药山楂（ＣＨＳ）和决明子（ＣＨＺ）的水煎液对酶的抑制作用明显     

东毕吸虫抗原特异性的研究──土耳其斯坦东毕吸虫成虫抗原SDS-PAGE分析

为了探明东毕吸虫成虫可溶性抗原的多肽组分,供今后在免疫诊断和防治东毕吸虫的应用,本试验应用ＳＤＳ－ ＰＡＧＥ首次对绒山羊体内寄生的土耳其斯坦东毕吸虫成虫可溶性抗原的多肽组分进行了分析。结果表明该抗原有１７ 条多肽带,其分子量范围２５～９３ＫＤ．其中主带７ 条,分别为２９、３０、３８、４０、６７、７８、９１ＫＤ。本试验初步阐明了土耳其斯坦东毕吸虫成虫抗原的多肽组分,为进一步对该病免疫诊断用抗原的分离、纯化,提高抗原的敏感性和特异性奠定了基础