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相似文献
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1.
将火鸡疱疹病毒(HVT)接种于鸡胚成纤维细胞(CEF)后,用显微镜观察病变(CPE)达50%时添加等量的健康CEF,继续培养至CPE达80%时收获培养物,此时病毒蚀斑数最高。  相似文献   

2.
用鸡副嗜血杆菌国际标准株(HPG-A221.C6680分别接种1-10个家系的BWEL-SPF鸡6月龄鸡胚,观察攻毒后16-30小时鸡胚死亡的情况。结果,第5,7,8家系死亡率为100%,1,4,6家系死亡率为90%;2,3,9,10家第死亡率为80%。85%,10个家系HPG平均死亡率为90.5%。对照组(HWL-SPF鸡胚)平均死亡率为90%。  相似文献   

3.
在对EDS76-NE4株病毒进行血清学鉴定之后,于鸭胚(DE)、鸭胚成纤维细胞(DEF)、鸡胚(CE)、鸡胚成纤维细胞(CEF)和鸡胚肝细胞(CEL)上适应培养。结果表明,EDS76-NE4株病毒为鸡产蛋下降综合症病毒,该病毒能在DE、DEF、CEL上增殖,在DE上增殖,尿囊液的血凝价(HA)可达1∶20480─1∶327680倍。  相似文献   

4.
在对EDS76-NE4株病毒进行血清学鉴定之后,于鸭胚(DE)、鸭胚成纤维细胞(DEF)、鸡胚成纤维细胞(CEF)和鸡胚肝细胞(ECL)上适应培养。结果表明,EDS76-NE4株病毒为鸡产蛋下降综合症病毒,该病毒能在DE、DEF、CEL上增殖,在DE上增殖,尿囊液的血凝价(HA)可达1:20480-1:327680倍。  相似文献   

5.
本试验对鸡传染性法氏囊炎(IBD)二价细胞苗在鸡胚成纤维细胞(CEF)上培养所用条件进行了系统研究。对CEF的制作,抗生素的选用,血清的浓度,接毒时间,接毒量,收获时间等进行了测定,其最佳条件为:用0.25%的胰蛋白酶消化10分钟制得的CEF最好;在使用的PBS缓冲液中加入1000U/ml的庆大霉素可有效地防止污染;生长液用5%的小牛血清、维持液用1%的小牛血清最佳;接毒时间为生长24小时的CEF  相似文献   

6.
我们对国外引入的IBD弱毒疫苗进行了分离,复制和测定,该病毒可接种SPF鸡胚增殖,致难胚死亡,并产生IBD病变;在SPF鸡胚CFF上繁殖,产生CPE变化,并可被行异性IBD抗血清中和;琼脂扩散与IBD(+)血清有明显的沉淀线,因此说明所分离的毒株是IBD病毒,并测得其毒价为10^-6TCID50。  相似文献   

7.
试用兔肾原代细胞传代;增殖兔粘液瘤病毒,呈现典型CPE。粘液瘤病毒SG33株在兔肾细胞上连续传3代之后,就不产生CPE,在鸡胚上传3代再回归兔肾原代细胞,又呈现CPE。SG_(33)在鸡胚上不能产生明显痘斑。维持液pH值影响SG_(33)在兔肾原代细胞上形成CPE。  相似文献   

8.
用SPF鸡胚繁殖新城疫病毒(NDV)F46E9株(强毒)、LaSotaE4株(弱毒)、对病毒进行纯一提RNA。用1对均为27个碱基的引物进行RT-PCR,扩增出了2个毒株的融合蛋白裂解位点(Fc)基因。将Fc基因定向克隆人pUCLaFc,用EcoRI/Sal I双酶切法、PstI单酶切法、PCR法和核酸探针法对其进行了鉴定。将鉴定好的LaSotaE4Fc基因定向导入表达载体质粒pBV221,aqt  相似文献   

9.
BFF,rbGH对牛卵泡卵母细胞体外受精后发育的影响   总被引:12,自引:3,他引:9  
利用屠宰黄牛卵巢,对2~5mm卵泡卵母细胞的体外成熟(IVM)、体外受精(IVF)、受精卵的体外培养(IVC)进行了系列研究。结果表明,在成熟培养液中单独添加10%D0ECS(发情当天牛血清)获得了卵泡卵母细胞受精后较高的卵裂率(64.7%)、桑椹胚发育率(39.9%)和囊胚发育率(24.8%),说明在成熟培养液中单独添加D0ECS是可行的;在含10%D0ECS的成熟培养液中再添加10%或20%BFF(牛卵泡液),均能提高受精卵的卵裂率以及桑椹胚和囊胚的发育率,以添加20%BFF效果较好,其囊胚发育率(35.0%)显著高于对照组(24.8%,P<0.05);在卵泡卵母细胞成熟培养系统和受精卵共同培养系统中添加10μg/L重组牛生长因子(rbGH),虽对体外受精卵的卵裂率无显著影响(P>0.05),但能显著提高卵裂胚的囊胚发育率(P<0.05)  相似文献   

10.
ELISA检测鸡传染性贫血病病毒抗体中的非特异性反应问题   总被引:2,自引:0,他引:2  
为了监测CSIROSPF鸡群,经常用商业ELISA试剂盒检测鸡群的抗鸡传染性贫血病毒(CAV)抗体。近来发现个别鸡群的阳性率达18.2%,占总数的2.7%。但后来采血发现大部分可疑鸡都为阴性,可见前面的结果存在假阳性。  相似文献   

11.
从疑似IBD病鸡的法氏囊组织中分离到1株ARV   总被引:5,自引:2,他引:3  
从暴发类似传染性法氏囊病(IBD)的江苏省某鸡场采集病鸡法氏囊组织制成组织悬液,接种鸡胚卵黄囊,部分鸡胚3~5d死亡,部分鸡胚不死亡但有病变。用感染胚卵黄囊和绒尿膜混合物,接种鸡胚成纤维细胞(CEF),盲传3代后,发现以合胞体为特征的细胞病变(CPE)。感染细胞做超薄切片电镜观察,可见细胞浆内病毒粒子呈整齐的晶格状排列。用免疫沉淀法提取病毒抽提核酸,经SDS-PAGE电泳,可见规律排列的10条带,呈3-3-1-3排列。与禽呼肠孤病毒(ARV)参考毒株S1133株的核酸谱带的数目和位置相同。血清学试验与ARV呈阳性反应,与传染性法氏囊病病毒(IBDV)呈阴性反应。证明分离病毒为ARV  相似文献   

12.
产蛋下降综合征(EDS-76)病毒DNA探针的制备及应用研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
用纯化的产蛋下降综合征(EDS-76)病毒(H91毒株)悬液提取的核酸,经琼脂糖凝胶电泳只出现1条分子量较大、背景清晰的核酸带。用BamHI酶消化产生4个片段,大小分别为17kb、10kb、4.0kb和2.0kb。将其中的2.0kb片段克隆进pUC18DNA载体中,重组质粒DNA用digoxigenin标记作为DNA探针,在dotblot中该探针不与鹅胚尿囊液核酸抽提物、马立克氏病病毒(MDV)DNA、鸡传染性贫血病毒(CAV)DNA、SPF鸡基因组DNA等核酸反应,只与3株EDS病毒(EDS标准毒株AV-127、EDSH91毒株和从健康鹅体中分离的EDSY81毒株)DNA呈阳性反应。人工感染产蛋母鸡和雏鸡后24h即可用该探针从泄殖腔棉拭子样品中检测出EDS病毒DNA,在感染后35h仍能从部分感染鸡样品中检出。对部分探针检测阳性鸡的泄殖腔棉拭子样品用SPF鸡胚分离病毒,并用HA和HI试验检测分离病毒的特异性;在感染过程中,同时检测了血清中HI抗体的消长情况。结果表明,人工感染鸡排毒至少可以维持2个月左右,而且血清中HI抗体即使很高,也不能阻止感染鸡的排毒。  相似文献   

13.
作者建立了两种抗原捕捉酶联免疫吸附试验方法(多抗和单抗AC-ELISA),用于滴定用不同宿主系统增殖的传染性氏囊毒病,这些宿主系统包括BGM-70传代细胞系。鸡胚成纤维细胞和鸡法氏囊,两种检测方法都有较高的特异性,但是多克隆AC-ELISA比单克AC-ELISA更加敏感(P〈0.05),结果还表明,滴定IBDV抗原的常规方法(细胞培养物和鸡胚)比多抗AC-ELISA更敏感。  相似文献   

14.
用传染性支气管炎病毒(IBV)H120、H52、M41、ARK、澳大利亚T株、野外分离株RS、RY及鸡新城疫病毒(NDV)、鸡传染性法氏囊病毒(IBDV),鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)、减蛋综合症病毒(EDSV)等分别接种9日龄SPF鸡胚,37℃孵育48小时后,将其尿囊液离心,沉淀用PBS悬浮,涂片,用抗IBV单抗MC作一抗、进行间接荧光抗体检测。结果:H12O、H52、M41“ARK、T株及RS、RY均显阳性,而NDV、IBDV、ILTV、EDSV均为阴性。结果表明、用此法检测鸡胚尿囊液中IBV.具有快速、敏感、特异的优点。  相似文献   

15.
用提纯的鸭肝炎病毒(DHV)免疫家兔制备高免血清,常规方法提取IgG,与1%葡萄球菌A蛋白(SPA)阳性菌悬液混合,以PH7.20.2mol/LPBS作缓冲液,制成鸭病毒性肝炎(DVH)SPA协同凝集试验(SPA-CoA)诊断试剂,同时制备阴性对照试剂。用SPA-CoA检测人工感染致死的雏鸭肝脏、含DHV强毒的鸭胚液、适应鸡胚的疫苗毒鸡胚尿囊毒的检出率均为100%。用SPA-CoA检测强毒时,样品  相似文献   

16.
腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定   总被引:28,自引:8,他引:28  
从1997年在辽宁省大连市某鸡场发生的一种以腺胃肿大为特征的鸡的传染病病例中收集腺胃组织(D971)接种SPF鸡胚,传至13代,具有规律性死亡和典型胚胎病变特征,EID50为10-6.48/0.2ml。D971毒株感染SPF鸡胚尿囊液经负染电镜观察,可见直径为80~120nm,有囊膜和纤突的冠状病毒粒子。D971毒株经卵磷脂酶C处理后能凝集鸡红细胞,并能特异的被D971多抗所抑制。用反转录聚合酶链反应获得了D971毒株免原(S1)基因cDNA,经1%琼脂糖凝胶电泳可见1.7kb的特征性条带。用D971毒株接种SPF鸡,能引起与自然病例相似的病理变化,并分离到病毒。用D971毒株可直接感染SPF鸡胚成纤维细胞。结果证实从腺胃病变型IB鸡群中分离的D971毒株是冠状病毒科IBV成员。  相似文献   

17.
对采自云南省楚雄彝族自治州楚雄,双柏,婉安,元谋4县(市)的387份鸡血清进行新城疫(ND),禽霍乱(FC)、鸡白痢(SP)、鸡马立克氏病(MD)鸡痘(FP),鸡腺病毒病(CELD),鸡白血病(ALD),鸡传染性支气管炎(IB)、鸡传染性喉气管炎(ILT)、鸡传染性鼻炎(IC)、禽脑脊髓炎(AE)共11种病的血清学调查,查出除ALD外的10种病,其阳性率分别为37.21%、9.83%、10.34%  相似文献   

18.
用醋酸缓冲液和40%饱和硫酸铵边续沉淀法从绵羊棘球囊液(SHCF)中得到部分纯化抗原(SPPCF),并从中分离了抗原A和抗原B,分别用单克隆抗体反向间接血凝试验(M-RPHA)、单克隆抗体双扩散试验(M-DD)和酶联免疫吸附试验(ELISA)进行了鉴别,表明自制的三株单克隆抗体(McAb)均识别SHCF、SHCF、SPPCF及抗原B,而不识别抗原A;用ELISA对阳、阴性血清检测,SPPCF、抗原  相似文献   

19.
用禽网状内皮组织增生病病毒(REV)感染SPF鸡胚次代成纤维细胞涂片为抗原,建立了检测REV抗体的间接免疫荧光法(IFA)。确定了待检血清稀释度1:64和兔抗鸡IgG荧光抗体的稀释度1:32的工作浓度。应用该IFA方法对人工感染REV的20只30日龄SPF鸡进行了检测,接种后4天时均呈阴性反应,7天时8只鸡呈阳性反应,14天20只全部呈阳性的反应。通过对NDV、IBDV、ALV、MDV、CIAV、  相似文献   

20.
提高鸡马立克氏病活疫苗蚀斑计数准确性的几点体会   总被引:1,自引:0,他引:1  
提高鸡马立克氏病活疫苗蚀斑计数准确性的几点体会张勇强,侯军(南京药械厂南京,210012)鸡马立克氏病火鸡疤疹病毒活疫苗是利用火鸡疱疹病毒(HVT)在鸡胚成纤维细胞(CEF)上培养,产生细胞病变(CPE)形成蚀斑单位)(PFU)这一指标进行出厂羽份的...  相似文献   

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