用同种免疫方法测定猪品种差异的研究

为深入进行种质研究寻找新的途径,在用异种免疫方法的基础上~[14],设计了同种免疫的试验。用二花脸、梅山、枫泾、姜曲海、长白猪的血清分别免疫了二花脸、梅山和长白猪。应用免疫电泳进行交叉血清反应。结果表明,不同品种和不同类群猪的血清可直接通过免疫电泳加以区别。不同品种血清抗原的结构组成有显著差异。 将计算免疫相关系数的方法应用于免疫电泳试验结果的分析,计算结果表明:太湖猪不同类群间的同种免疫相关系数最大;太湖猪与姜曲海之间次之;长白猪与姜曲海、太湖猪之间最小。这为目前太湖猪归并的合理性提供了新的科学依据。     

猪血清蛋白质多态性与品种分类的研究

本文根据所测定的二花脸、梅山、枫泾、金华、姜曲海和长白猪的4个血清蛋白质系统——前白蛋白(Pa~A,Pa~B)、转铁蛋白(Tf~A,Tf~B,Tf~C)、铜蓝蛋白(CP~A,CP~B,CP~C)和淀粉酶(Am~A,Am~B,Am~C,Am~Y)的基因频率,估算了各品种间遗传距离和品种内平均基因多样度;并对各品种的4个血清蛋白位点的等位基因类型及分布特点进行了分析;进一步考证了我国猪种的起源与分化以及我国部分地方猪种的遗传结构和类缘关系;亦较系统地探讨了太湖猪不同类群的亲缘关系。     

中国地方猪种生长激素基因HhaI酶切片段多态特征研究

采用ＰＣＲ－ＲＦＬＰｓ技术分析了８个中国地方猪种和４个国外猪品种生长激素基因位点的多态特性。中国地方猪种包括有：“太湖猪”、“姜曲海”和“民猪”国外独品种分别是是“皮特兰猪”、“长白猪”。     

猪线粒体DNA D-loop PCR-RFLP分析

对太湖猪（二花脸）、大约克猪、北京黑猪、五指山猪、香猪、长白猪、杜洛克猪以及太湖猪与7个品种猪的正反交杂交家系线粒体DNAD－loopPCR－RFLP分析,发现猪的线粒体DNAD－loop约为1500bp,长白猪及部分大约克猪与其他猪品种在AccⅠ酶切位点存在多态性;太湖猪、大约克猪的正反交后代的线粒体DNAD－loop在AccⅠ酶切位点存在多态性,其遗传方式遵循母系遗传特性。     

4个猪种H-FABP基因5'-上游区和第二内含子的遗传变异

利用PCR-RFLP技术(限制性内切酶采用HaeⅢ,HinfⅠ,MspⅠ)检测了杜洛克、长白、大约克、湖北白猪等4个猪品种共计161头猪H-FABP基因位点的遗传变异。结果在4个猪品种H-FABP基因5’-上游区验证了HinfⅠ-RFLP,在该位点上,杜洛克猪和长白猪的基因型分布相似,二者与湖北白猪、大白猪之间的差异达到显著水平,湖北白猪与大白猪的基因型分布差异达到极显著水平;在4个猪品种H-FABP基因第二内含子验证了HaeⅢ-RFLP和MspⅠ-RFLP,在HaeⅢ-RFLP位点上,杜洛克猪、长白猪、湖北白猪3个品种的基因型分布差异不显著,大白猪与上述3个品种的基因型分布存在极显著差异;在MspⅠ-RFLP位点上,长白猪、湖北白猪、大白猪的基因型分布差异不显著,三者与杜洛克猪之间的差异达显著水平。     

蓝塘猪和长白猪leptin和leptin受体基因表达的变化

用实时荧光定量PCR方法研究了蓝塘猪和长白猪1、27、90、150和180日龄阶段脂肪组织中leptin基因mRNA和下丘脑中leptin受体基因mRNA的变化,并对2个品种不同生长阶段血液中leptin含量的变化规律进行了探讨。结果表明:(1)蓝塘猪180日龄时皮下脂肪中leptin基因表达量显著高于其它各阶段,而与长白猪相比,蓝塘猪除1日龄低于长白猪外,其它各个阶段均高于长白猪,180日龄两者差异极显著;长白猪各阶段间差异不显著;(2)蓝塘猪180日龄时下丘脑中leptin受体基因的表达量显著高于其它各阶段,长白猪180日龄时最高,且显著高于1日龄和27日龄,蓝塘猪与长白猪1日龄时差异显著;(3)蓝塘猪血清中leptin浓度各阶段均高于长白猪,两品种均是150日龄时最高,蓝塘猪150日龄显著高于27日龄和180日龄,长白猪各阶段差异不显著。     

河南地区猪圆环病毒Ⅱ型抗体血清学调查

应用酶联免疫吸附试验(ELISA),测定了河南省1886份血清样本,对不同地区、年龄和品种猪的血清学数据进行了综合分析。结果为36个猪场中34个PCV-2血清抗体呈阳性；对不同年龄的猪群,1年龄PCV-2血清抗体阳性率为52.75％,2年龄为45.84％,3年龄39.03％,4年龄为1.67％,5年龄为0；土杂猪PCV-2血清抗体阳性率52.54％,与长白猪51.31％差别不大,但明显高于大约克和杜洛克；以上结果表明PCV-2在猪群中的感染非常普遍,不同年龄及不同品种猪对PCV-2的易感性不同。PCV-2的感染可明显降低猪群对疫苗的免疫应答。     

猪线粒体DNAW D—loop PCR—RFLP分析

对太湖猪（二花脸）,大约克猪,北京黑猪,五指山猪,香猪,长白猪,杜洛克猪以及太湖猪与７个品种猪的正反交杂交家系线粒体ＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ ＰＣＲ－ＲＦＬＰ分析,发现猪的线粒体ＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ约为１５００ｂｐ,长白猪及部分大约克猪与其他猪品种在ＡｃｃⅠ酶切位点存在多态性,太湖猪,大约克猪的正反交后代的线粒体ＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ在ＡｃｃⅠ 酶切位点存在多态性,其遗传方式遵循母系遗传特性。     

通城猪肉质较其他猪种细嫩

肌纤维的横截面积、直径与密度等在猪品种间具有较明显的差异。通城猪肌纤维横截面积小于梅山猪、大白猪和长白猪；而单位面积肌纤维密度大于以上3个品种，且肌内脂肪含量较高，介于3．5％～4，5％之间。而肌纤维越细，密度越大，肌内脂肪含量越高，肉质越细嫩。因此通城猪肉质较国内外其他猪种细嫩．     

哈维氏弧菌灭活疫苗在养殖大黄鱼中的应用与评价

将分离自大黄鱼Pseudosciaena crocea的病原菌GYC1108-1,在体积分数为0.5%的福尔马林溶液中灭活24 h,制成灭活全菌苗（细菌含量为6×109cfu/mL）;用该灭活菌苗分别免疫小白鼠和大黄鱼,并检测小白鼠和大黄鱼血清中抗体效价及疫苗对鱼体的免疫保护力。结果表明：小白鼠经注射疫苗后28 d,血清中抗体效价最高达1∶4 000,大黄鱼经注射和浸泡免疫后,血清中最高抗体效价分别为1∶1 280和1∶320,免疫保护率分别为75%和65%;抗GYC1108-1的抗体与不同种属细菌间存在着交叉反应,其分类地位越近,交叉反应也越大;用研制的疫苗开展大黄鱼生产性免疫预防试验,受免疫组鱼存活率有较大提高,分别为85%和86%,而未免疫组鱼存活率仅有70%,表明疫苗可有效防治养殖大黄鱼细菌性病害。     

Prepro-orexin基因多样性与猪产仔数的相关性

为了研究Prepro-orexin基因多样性与繁殖性能的关系,确立其在分子标记育种中的应用价值。采用PCR-RFLP法分析猪Prepro-orexin基因第62位多态性位点在二花脸、香猪、淮猪和姜曲海猪4个品种中的多样性,并分析其不同基因型对二花脸猪产仔数的影响。结果表明,二花脸和香猪分别检出三种基因型,姜曲海猪有两种基因型,而淮猪只有一种基因型。各等位基因频率和基因型频率在不同品种间存在显著差异;二花脸猪不同基因型群体间产仔数差异不显著,说明该基因多样性对产仔数的影响不显著。     

Prepro-orexin基因多样性与猪产仔数的相关性

为了研究Prepro-orexin基因多样性与繁殖性能的关系，确立其在分子标记育种中的应用价值。本研究采用PCR-RFLP法分析猪Prepro-orexin基因第62位多态性位点在二花脸、香猪、淮猪和姜曲海猪4个品种中的多样性，并分析其不同基因型对二花脸猪产仔数的影响。结果表明，二花脸和香猪分别检出三种基因型，姜曲海猪有两种基因型，而淮猪只有一种基因型。各等位基因频率和基因型频率在不同品种间存在显著差异；二花脸猪不同基因型群体间产仔数差异不显著，说明该基因多样性对产仔数的影响不显著     

中国地方猪种ESR基因PvuⅡ多态性及其与产仔数关系的研究

试验采用PCR-RFLPs方法,研究了中国成华猪、内江猪和太湖猪3个地方品种ESR基因的多态性及其与产仔数间的关系。结果表明,成华猪、内江猪和太湖猪的B等位基因频率分别为0 6389、0 6613和0 6855。在3个猪品种中,除成华猪只检测到AB、BB两种基因型外,在内江猪和太湖猪中都检测到了AA、AB和BB3种基因型。对3个品种不同基因型个体间产仔数的比较研究表明,不同ESR基因型的个体其产仔数存在一定的差异,各品种无论头胎还是经产,总体表现为BB基因型的产仔数高于AB型和AA型个体,而AB型又高于AA型个体。其中,太湖猪BB型个体头胎产活仔数(NBA)(11 13头)显著高于AB型个体(9 42头)(P<0 05)。证明B基因是对提高产仔数有利的基因。同时还分析了ESR基因PvuⅡ-RFLP的应用前景及其存在的问题。     

猪POU1F1基因第三内含子MspⅠ酶切片段多态特征的研究

采用PCR-RFLPs技术,以MspⅠ为内切酶,检测猪POU1F1基因中片段为2.1 kb的第三内含子中的多态位点1.68 kb(C等位基因)和0.85/0.83 kb(D等位基因),分析各多态位点在长白猪、杜洛克猪、小梅山猪、香猪、姜曲海猪5个品种群中的分布,并通过χ2检验比较这5个猪种间的基因型差异.χ2适合性检验结果表明MspⅠ酶切突变位点的3种基因型在5个品种中分布差异均极显著(P<0.01).中国地方品种小梅山猪、姜曲海猪等位基因C的比例很高,中国地方品种香猪等位基因C的比例则比较高,国外品种长白猪、杜洛克猪等位基因C的比例很低.     

免疫应激对不同品种仔猪免疫功能的影响

[目的]探讨免疫应激对莱芜猪、鲁莱猪及大约克夏断奶仔猪免疫功能的影响。[方法]分别选用12头体重为（13．6±0．5）kg的莱芜猪、鲁莱猪和大约克夏猪,采用2x3因子设计：免疫应激（注射LPS或生理盐水）,品种类型（莱芜猪、鲁莱猪和大约克夏猪）。试验第1天,分别给每品种中的6头猪注射200μg／kg·BW的LPS,其余6头注射生理盐水作为对照,并进行猪瘟疫苗接种。注射LPS后的第2、7和14天,采血测定其淋巴细胞转化率;注射LPS前1天、注射LPS后第7天和第14天,测定其猪瘟抗体水平。【结果]猪在LPS刺激后的第2天．其淋巴细胞转化率显著高于生理盐水组（P〈0．01）,莱芜猪的淋巴细胞转化率显著高于大约克夏猪（P〈0．05）;免疫应激对不同品种仔猪的猪瘟抗体水平无差异性影响。[结论】LPS能够有效刺激不同品种猪的细胞免疫机能,并且不同品种仔猪免疫应签能力有差异,     

Genome-wide detection for runs of homozygosity analysis in three pig breeds from Chinese Taihu Basin and Landrace pigs by SLAF-seq data

Erhualian (E), Meishan (MS) and Mi (MI) pigs are excellent indigenous pig breeds in Chinese Taihu Basin, which have made great contributions to the genetic improvement of commercial pigs. Investigation of the genetic structure and inbreeding level of the 3 pig breeds is of great significance for the sustainable breeding of commercial pigs. The length and number of runs of homozygosity (ROH) as well as the frequency of genomes covered by ROH can be used as indicators to evaluate the level of inbreeding and the origin of the population. In this study, the ROH characteristics of E, MS, MI and Landrace (L) pigs were analyzed by SLAF-seq data, and the inbreeding coefficient based on ROH (F_ROH) was calculated. In addition, we have identified candidate genes in the genomic regions associated with ROH. A total of 10568 ROH were detected in 116 individuals of 4 pig breeds. The analysis showed that there were significant differences in genetic structure between 3 Taihu Basin pig breeds and L, and the genetic structure of E and MI was similar. The results of F_ROH showed that the inbreeding level of MS was the highest (0.25±0.07), while E and MI were lower than L. Compared with the other 3 pig populations, MS showed a higher frequency of long ROH (>5 Mb), indicating higher inbreeding in MS in recent generations. A large number of candidate genes related to reproductive traits are located in the genomic regions with a high frequency of ROH, and these genes are expected to be used as candidate genes in marker-assisted selection (MAS) breeding programs. Our findings can provide theoretical support for genetic conservation and genetic improvement of 3 pig breeds in Chinese Taihu Basin.     

猪PGC1基因多态性与肉质性状的相关性分析

通过PCR-RFLP方法,检测外来品种大约克猪和江苏地方品种梅山猪、二花脸猪、姜曲海猪以及培育品种苏钟猪共144头,结果表明PGC1基因第8外显子序列经Alu I酶切后存在AA、AT和TT 3种基因型,其中大约克猪中AA基因型占优势,A等位基因频率为0.7,而江苏地方品种猪中,TT占绝对优势。分析PGC1基因型与肉质性状相关发现,AA基因型猪的肉色L、失水率均极显著低于TT基因型(P<0.01);TT基因型猪的蒸煮损失、剪切力和肌纤维直径均极显著低于AA基因型(P<0.01)。