内皮糖萼损伤对黄芪多糖调控微血管内皮细胞分泌生物活性物质的影响

[目的]了解内皮糖萼在中药多糖调控微血管内皮细胞(microvascular endothelial cells,MVECs)分泌生物活性物质中的作用.[方法]采用酶消化法体外分离、培养大鼠空肠黏膜MVECs;以肝素酶Ⅲ处理去除MVECs部分内皮糖萼,及黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)溶液干预后,采取细胞培养液,采用生化试剂盒法检测一氧化氮(nitric oxide,NO)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量,采用ELISA法检测白介素6(interleukin 6,IL-6)的含量.[结果]APS处理使NO含量和SOD活性一定程度的升高,IL-6的含量显著下降;肝素酶Ⅲ部分去除内皮糖萼后,APS诱导的NO、SOD和IL-6分泌量变化均被显著减弱.[结论]内皮糖萼的受损,显著影响APS对大鼠空肠黏膜MVECs分泌NO、SOD和IL-6功能的调控.     

金丝桃苷对SLT-Ⅱ e诱导大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌PGI2、TXA2及PAF的影响

通过检测金丝桃苷对SLT-Ⅱe诱导的大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌前列环素(PGI2)、血栓素(TXA2)及血小板活化因子(PAF)的影响,探索中药复方有效成分金丝桃苷对仔猪水肿病的疗效机制。将培养的肠黏膜微血管内皮细胞分为阴性对照组、阳性对照组、不同质量浓度金丝桃苷处理组等6个组,采用ELISA法测定了培养3,6,9和12 h时细胞上清液中PGI2、TXA2及PAF质量浓度的变化。结果表明,不同质量浓度金丝桃苷处理组对SLT-Ⅱe诱导肠黏膜微血管内皮细胞过量分泌PG12、PAF无明显的抑制作用;1和5μg／mL质量浓度金丝桃苷处理组对SLT-Ⅱe诱导肠黏膜微血管内皮细胞TXA2的分泌具有明显的下调作用。南此可见,金丝桃苷通过抑制SLT-Ⅱe诱导肠黏膜微血管内皮细胞TXA2的过量分泌,阻止血小板聚集,避免微血栓形成,以达到治疗疾病的目的;金丝桃苷保护大鼠肠黏膜微血管内皮细胞损伤的模型剂量为1和5μg／mL。     

槲皮素对SLT-Ⅱe诱导的大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌PGI2、TXA2及PAF的影响

将大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分为对照组(SLT-Ⅱe浓度为0μg/mL)、SLT-Ⅱe处理组(SLT-Ⅱe浓度为10μg/mL)、试验1组(SLT-Ⅱe浓度:10μg/mL 槲皮素浓度:1μg/mL)、试验2组(SLT-Ⅱe浓度:10μg/mL 槲皮素浓度:5μg/mL)、试验3组(SLT-Ⅱe浓度:10μg/mL 槲皮素浓度:10μg/mL)、试验4组(SLT-Ⅱe浓度:0μg/mL 槲皮素浓度:10μg/mL)等6组,采用ELISA法研究不同浓度的槲皮素对SLT-Ⅱe诱导肠黏膜微血管内皮细胞分泌PGI2、TXA2及PAF的影响。结果表明:10μg/mL槲皮素对SLT-Ⅱe诱导的大鼠肠黏膜微血管内皮细胞分泌PGI2、TXA2及PAF具有不同程度的下调作用;槲皮素保护大鼠肠黏膜微血管内皮细胞损伤的模型剂量为10μg/mL。     

LPS和LT对体外大鼠肠粘膜微血管内皮细胞的影响

将大鼠肠粘膜微血管内皮细胞分为空白对照组、BSA对照组、LPS1组、LPS2组、LT 1组和LT 2组6个组,分别用维持培养液,含50μg/mL BSA、1或10μg/mL LPS、10或50μg/mL LT的培养液静置培养12 h,研究不同浓度LPS和LT对体外大鼠肠粘膜微血管内皮细胞形态及NO分泌量的影响,并确定LPS和LT致大鼠肠粘膜微血管内皮细胞损伤的模型剂量。结果表明,LPS可使细胞长宽比增大,间隙变宽,而LT可使细胞肿大,排列紊乱;各浓度的LPS和LT均能引起肠粘膜微血管内皮细胞的NO分泌量升高,但1μg/mL LPS与50μg/mL LT的作用更明显;LPS和LT致大鼠肠粘膜微血管内皮细胞损伤的模型剂量分别是1和50μg/mL。     

黄芪多糖对卵白蛋白致敏大鼠皮肤内微血管及肥大细胞的影响

以皮下注射卵白蛋白(OVA)致敏的大鼠为模型,用甲苯胺蓝染色法和CD34免疫组化法,研究黄芪多糖粉针剂对大鼠皮肤组织内肥大细胞与微血管的影响。结果显示:皮下注射OVA刺激后,大鼠皮肤内CD34+微血管与肥大细胞密度分别从33.6和77.2个/mm2升高至67.2和180.0个/mm2,肥大细胞出现脱颗粒现象,且多聚集在微血管周围;黄芪多糖(APS)对OVA诱导的CD34+微血管与肥大细胞密度升高有显著下调作用,分别降至39.7和99.7个/mm2;且显著降低肥大细胞的脱颗粒现象。结果表明,通过下调微血管内皮细胞表面CD34的表达、减少肥大细胞在微血管旁的聚集与脱颗粒,从而抑制炎性细胞与微血管内皮细胞的黏附可能是黄芪多糖(APS)发挥抗炎作用的机制之一。     

黄芪多糖对犬血清免疫球蛋白、IFN-γ水平及分泌型IgA表达的影响

旨在研究黄芪多糖对犬血清中免疫球蛋白和γ干扰素水平及分泌型IgA表达的影响。将18只1岁龄健康比格犬随机分为3组,每组6只,分别为对照组、低剂量组(基础日粮+以生药计w=1%的黄芪多糖)和高剂量组(基础日粮+以生药计w=2%的黄芪多糖),试验期14d。在第0、7、14天采集血清,用ELISA法检测血清中免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)及γ干扰素(IFN-γ)水平。第14天时,全部犬解剖,采集十二指肠、空肠中段和回肠,用RT-qPCR法检测IgA mRNA相对表达量,免疫组化法(IHC)检测肠黏膜SIgA蛋白的表达情况。结果显示,与对照组相比,黄芪多糖组犬血清中IgA、IgG、IgM和IFN-γ水平显著升高,犬肠黏膜SIgA蛋白表达量显著升高。表明黄芪多糖能显著提高犬血清中IgA、IgG、IgM和IFN-γ水平,促进犬小肠IgAmRNA和SIgA蛋白表达,提高机体免疫力。     

大鼠心肌膜、肺、肠黏膜微血管内皮细胞静息膜电位的检测

比较大鼠心肌膜、肺、肠黏膜微血管内皮细胞静息膜电位,为内皮细胞电生理特性研究提供数据。用植块法培养大鼠心肌膜、肺、肠黏膜微血管内皮细胞,采用膜片钳放大器全细胞记录模式,分别测定3种细胞的静息膜电位。结果表明:心肌膜微血管内皮细胞的静息膜电位为(-24±4)mV;肺微血管内皮细胞的静息膜电位为(-27±6)mV;肠黏膜微血管内皮细胞静息膜电位为(-18±4)mV。3种不同组织来源的微血管内皮细胞在静息膜电位上存在异质性。     

白头翁汤中总多糖对微血管内皮细胞糖萼糖链表达的影响

[目的]研究白头翁汤中总多糖对微血管内皮细胞(microvascular endothelial cells,MVECs)糖萼糖链的影响.[方法]体外培养猪小肠黏膜MVECs,以50μg/mL白头翁汤中总多糖刺激48 h后,利用凝集素荧光技术检测刀豆凝集素(concanavalin A,Con A)、麦胚凝集素(wheat germ agglutinin,WGA)、双花扁豆凝集素(dolichos bifows agglutinin,DBA)、荆豆凝集素(ulex europaeus agglutinin Ⅰ,UEA Ⅰ)、花生凝集素(peanut agglutinin,PNA)、雪花莲凝集素(galanthus nivalis lectin,GNL)、番茄凝集素(lycopersicon esculentum lectin,LEL)受体糖链的表达.[结果]正常情况下猪小肠黏膜MVECs WGA、LEL、Con A和GNL四种凝集素荧光染色呈强阳性,DBA和PNA荧光染色呈弱阳性,UEA Ⅰ荧光染色呈阴性;白头翁汤中总多糖能显著提高WGA和LEL荧光染色的强度.[结论]白头翁汤中总多糖能上调猪小肠黏膜MVECs表达N-乙酰氨基葡萄糖.     

清热中药对大鼠肺及其微血管内皮细胞磷酸二酯酶活性的影响

采用组织贴块法培养分离大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC),以高效液相色谱(HPLC)检测环核苷酸(cAMP)在酶反应前后磷酸二酯酶(PDE)的变化计算PDE活性,并分析药物对其影响,为研究PMVEC特异性PDE抑制剂和清热药作用机理积累资料。结果显示:分离培养经CD31鉴定的PMVEC,其酶量在5~20μL范围内与PDE活性存在良好的线性关系(r=0.9929);17味入肺经清热药均对肺组织cAMP-PDE酶活性有不同程度的抑制作用,其中黄芩、黄药子、青蒿抑制率较高,对肺组织酶分别为:75.37%,72%,61.26%,对PMVEC分别为:66.1%,63.54%,59.39%,结果提示以cAMP-PDE活性为指标,有望筛选出其特异性PDE抑制剂,并揭示入肺经清热药的作用机制。     

一氧化氮供体型药物抗肿瘤作用的研究进展

肿瘤已经成为当今社会的重大健康问题,作为抗肿瘤药物的一氧化氮（NO）供体型药物在这方面引人注目。一些NO供体药物已被证明具有良好的抗癌活性,显示出其应用潜力和价值。通过控制NO在适当的部位释放并杀死肿瘤细胞,实现药物的靶向性,是NO供体类药物治疗癌症的一个新领域和重要的发展方向。本文将综述NO供体型药物在抗肿瘤领域的研究进展,以及简要介绍新型NO供体纳米材料。     

一氧化氮薰蒸对延长草莓货架期的影响

 草莓属高档水果,但采后货架期短,严重影响草莓的品质和价值。为此开展了不同浓度一氧化氮（NO）,不同处理时间对延长草莓货架期的影响研究。结果显示,一氧化氮对延长草莓货架期具有显著作用,具体为：一氧化氮（下同）浓度5～10μL/L,处理2h对延长货架期效果最显著。同时对结果在商业上的应用也进行了探讨。     

一氧化氮合成酶抑制剂对宰后成熟过程中牦牛肉品质的影响

【目的】研究一氧化氮对宰后牦牛肉品质的影响,为牦牛肉品质改善提供理论依据。【方法】以3—5岁去势甘南牦牛肉为材料,取其背最长肌,剔除筋膜、脂肪等,切成大小均匀的薄片(8 cm×8 cm),用20 G针均匀穿刺,分别采用去离子水(对照组)和1、10、100 mmol·L^-1一氧化氮合成酶(NOS)抑制剂(N-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐)在4℃条件下1﹕1(V/m)浸泡肉样1 d,然后在4℃条件下成熟,测定成熟期间(0、1、3、5和7 d)NOS活性与一氧化氮含量、肌原纤维小片化指数(MFI)、总巯基含量、羰基含量、pH、色度等指标。【结果】NOS抑制剂处理后的牦牛背最长肌NOS活性和一氧化氮含量显著降低,成熟第7天时,处理组的NOS活性分别比对照组低30.9%、43.6%、74.7%,一氧化氮含量分别比对照组低4.7%、12.5%、21.5%。处理后的牦牛肉pH显著降低,第7天时,处理组分别比对照组低0.8%、5.7%、15.2%,其中10和100 mmol·L^-1 NOS抑制剂处理组显著低于对照组。处理显著降低了牦牛肉羰基含量,成熟第7天时,...     

口蹄疫146S对乳鼠心肌膜微血管内皮细胞分泌IL-6的影响

研究口蹄疫146S病毒粒子抗原（FMDV146S）对乳鼠心肌膜微血管内皮细胞（RMMVECs）分泌IL-6的影响,为解决现有口蹄疫疫苗的不足提供数据。体外培养乳鼠心肌膜微血管内皮细胞,用ELISA方法检测FMDV146S处理后细胞上清液中IL-6浓度。乳鼠心肌膜微血管内皮细胞（RMMVECs）在正常状态下低水平分泌IL-6;FMDV146S刺激后IL-6的分泌量显著增加,且呈剂量和时间依赖性,在刺激24h后分泌量达到峰值。MVECs在FMDV146S诱导的免疫与炎症反应中起着重要作用。     

一氧化氮对拟南芥气孔运动的影响

利用外源一氧化氮供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)处理、表皮条检测的方法研究了外源NO(nitric oxide)对拟南芥(Arabidopsis thaliana)气孔运动的影响。结果表明,随着外源NO浓度的增大,气孔关闭的效应也逐渐增大。但该效应可被c-PTIO逆转。此外,就内源NO在光、暗调控的气孔运动中的作用进行了讨论。     

贵州香猪睾丸发育中雌激素受体和一氧化氮合酶的表达

为探明香猪睾丸发育过程中雌激素受体(ERα,ERβ)和一氧化氮合酶(NOS)蛋白的表达情况,手术取出30日龄、40日龄、50日龄、70日龄、90日龄和110日龄贵州香猪右侧睾丸,采用免疫组织化学方法检测了睾丸组织中ERα、ERβ和上皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白的表达量。结果表明:ERα只在睾丸输出小管上皮细胞胞核中表达,且30~50日龄时表达率显著高于70~110日龄(P0.05)。ERβ在睾丸生精小管细胞胞质中的表达率先随日龄增加而升高,50日龄达到最高(P0.05),随后降低;在输出小管上皮细胞和管周细胞核中的表达率无显著变化;在附睾中表达率在30~50日龄时无显著差异,70~110日龄随年龄增长表达率显著升高(P0.05)。eNOS在生精小管细胞中先随日龄增加表达率增大,30日龄时表达率最低(P0.05),50日龄表达率最高(P0.05),随后逐渐减少。     

Effect of Nitric Oxide on the Interaction Between Mitochondrial Malate Dehydrogenase and Citrate Synthase

Mitochondrial malate dehydrogenase （mMDH） and citrate synthase （CS） are sequential enzymes in Krebs cycle. mMDH, CS and the complex between mMDH and CS （mMDH＋CS） were treated with nitric oxide solution. The roles of notric oxide （NO） on the secondary structures and the interactions between mMDH and CS were studied using circular diehroism （CD） and Fourier transform surface plasmon resonance （FT-SPR）, respectivley. The effects of NO on the activities of mMDH, CS and mMDH＋CS were also studied. And the regulations by NO on mMDH and CS were simulated by PyMOL software. The results of SPR conifrmed that strong interaction between mMDH and CS existed and NO could signiifcantly regulate the interaction between the two enzymes. NO reduced the mass percents ofα-helix and increased that of random in mMDH, CS and mMDH＋CS. NO increased the activities of CS and mMDH＋CS, and inhibited the activity of mMDH. Graphic simulation indicated that covalent bond was formed between NO and Asn242 in active site of CS. However, there was no direct bond between NO and mMDH. The increase in activity of mMDH＋CS complex depended mostly on the interaction between NO and CS. All the results suggested that the regulations by NO on the activity and interaction between mMDH and CS were accord with the changes in mMDH, CS and mMDH＋CS caused by NO.     

Baicalin Induces IFN-α/β and IFN-γ Expressions in Cultured Mouse Pulmonary Microvascular Endothelial Cells

We studied the effect of baicalin,an extract from Radix Scutellariae (a traditional Chinese medicine) in inducing mouse pulmonary microvascular endothelial cells (MPMVECs) to produce interferons (IFNs)...