野生花生对黄瓜花叶病毒CA株系抗性鉴定

鉴定的６１份野生花生材料对黄瓜花叶病副经毒ＣＡ株系（ＣＭＶ—ＣＡ）抗性差异表现明显，Ａ．ｇｌａｂｒａｔａＰＩ２６２８０１和Ａ．ｇｌａｂｒａｔａＰＩ２６２７９４两份材料表现免疫，Ａ．ｓｐＰＩ３３８４５４表现高抗。Ａ．ｇｌａｔｒａｔａ、Ａ．ｐｕｓｉｌｌａ、Ａ．ｒｉｇｖｎｉｉ、Ａ．ｐａｒａｇｕａｒｉｅｎｓｉｓ和Ａ．ｃａｒｄｅｎａｓｉｉ等５个种的材料对ＣＭＶ—ＣＡ抗性比Ａ．ｖｉｌｌｏｓａ、Ａ．ｍｏｎｔｉｅｏｌａ和Ａ．ａｐｐｒｅｓｓｉｐｉｌａ的材料要强。部分材料对ＣＭＶ—ＣＡ和花生矮化病毒Ｍｉ株系（ＰＳＶ一Ｍｉ）两种病毒具有相同的抗性。     

抗花生条纹病毒的花生种质鉴定

1982年美国佐治亚州首次发现花生条纹病毒(PStV)。PStV能以蚜虫、带毒率高的种子及其它寄主传毒。虽然曾有过PStv能使花生减产20％以上的报道,但该病对花生生产的潜在威胁目前尚无法预测。花生栽培种和其它种质系对PStV的抗性未见报道。鉴于花生区系和无毛区系有抗PMV的种质,因此对其部分种质进行了PStV抗性鉴定。     

花生品种(系)对黄瓜花叶病毒抗性鉴定

1994～1995年连续两年田间调查和1996～1998年3年田间小区鉴定结果：在山东烟台地区,鲁花11号、1－10、福早1号、白沙1016和鲁花10号5个花生品种对CMV田间抗性表明,鲁花11号和1－10平均发病率显著低于鲁花10号、福早1号和白沙1016。在武汉小区鉴定的36个花生品种（系）中,低抗的3份（鲁花11号、中花4号和鲁花14号）,低感的11份,其余材料为中感和高感,未发现中抗以上材料。     

花生品种(系)对黄瓜花叶病毒抗性鉴定

１９９４～１９９５年连续两年田间调查说明,鲁花１１号、１－ １０、福早１ 号、白沙１０１６ 和鲁花１０号５ 个花生品种对ＣＭＶ 田间抗性存在明显差异,在同等栽培条件下,鲁花１１ 号和１－ １０ 平均发病率显著低于鲁花１０ 号、福早１ 号和白沙１０１６。１９９６～１９９８ 年３年田间小区鉴定结果说明,在鉴定的３６ 个花生品种（系）中,发现鲁花１１号、中花４ 号和鲁花１４号３份材料对ＣＭＶ 表现低抗,１１份材料表现低感,其余材料为中感和高感,未发现中抗以上材料。     

花生条纹病毒在芝麻上流行研究初报

调查和试验结果说明：感染ＰＳｔＶ的花生是芝麻黄花叶病毒病主要初浸染源．桃蚜传毒效率最高，为３５％，豆蚜、大豆蚜和棉蚜传毒效率均很低．病害流行与蚜虫发生密切相关．供试的１０个芝麻栽培品种均不抗病，但存在一定成株期抗性。自花生条纹病毒（ＰＳｔＶ）感染的芝麻病株上收获的种子，种植后未发现病毒种传现象。     

应用RT-PCR方法检测菠萝凋萎病病毒

菠萝凋萎病(mealybug wilt of pineapple)主要由菠萝凋萎病病毒(pineapple mealybug wilt-associated viruses,PMWaVs)所引起,是菠萝生产中最严重的病毒性病害之一。为了快速准确检测菠萝植株是否带有凋萎病病毒,本文采用一步法RT-PCR方法对无刺卡因、巴厘的大田苗及组培苗进行了PMWaV-1,2,3检测。结果表明,在所检测的大田菠萝苗中,PMWaV-1的检出率达到100%,而PMWaV-2,3的检出率则根据品种及取样点不同而各有不同。巴厘种组培苗中PMWaV-1,2,3的检出率分别为90%、50%、75%,表明用这一检测方法可以从菠萝植株中快速检测出凋萎病毒病。     

花生条纹病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达

用内切酶Ｂａｍ ＨＩ和ＥｃｏＲＩ将ｐＧＥＭ－ ＳｔＶ 含有的约１１Ｋｂ 大小的ＰＳｔＶ－ ｃｐ 基因切下定向插入到表达质粒ｐＢＶ２２０ 的启动子ＰＲ、ＰＬ的下游,构建了该基因的原核表达载体ｐＢＶ－ ＳｔＶ。ＳＤＳ－ ＰＡＧＥ凝胶电泳结果表明：ＰＳｔＶ－ ｃｐ 基因在大肠杆菌ＤＨ５α中经温度（４０℃）诱导后,可特异地表达３３ｋＤ蛋白。     

花生条纹病毒侵染对花生叶片内过氧化物酶活性及其同工酶的影响

研究表明，花生健康植株苗期叶片内的过氧化物酶（ＰＯＤ）相当稳定；接种条纹病毒后ＰＯＤ活性显著提高，两周内出现两个酶活性高峰，第一个酶活性高峰主要是由接种时造成的机械损伤所致；而第二个酶活性高峰与ＰＳｔＶ的侵染直接有关。第二个酶活性高峰出现的同时，ＰＯＤ同工酶谱发生了明显变化，原有的１条迁移率为０．３８的谱带变弱消失，而出现了４条清晰的新带     

开封地区花生病毒病及流行规律研究

1988—1991四年调查说明,花生矮化病毒(PSV.)引起普通花叶病害,花生条纹病毒(PStV)引起轻斑驳病害是开封花生两种主要病毒病。PSV通过花生种传,测定自花生普通花叶病株收集近4000粒种子,PSV种传率0.025％。刺槐花叶树是花生上PSV另一个初浸染源。PSV开封刺槐分离物(R_3、R_4)在鉴别寄主上反应和血清学性质上和PSV-Mi相一致,但引起花生病害症状较PSV—Mi轻。开封市农科所一带刺槐花叶病树率平均30.7％。四年病害流行程度差异显著。1988和1991年花生生长季雨量少,蚜虫发生量大,分别为PSV严重和中度流行年。1989和1990年雨水较多,蚜虫发生少,病害显著减轻。     

十省（区）大豆病毒毒源分析

采自５省（区）大豆病毒病样本６１份，经汁液接种鉴别寄主鉴定以及免疫双扩散测定，大豆花叶病毒（ＳＭＶ）单独侵染的样本３９份，黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）单独侵染的样本１２份，ＳＭＶ和ＣＭＶ复合侵染的有７份。从１０省（区）获得的大豆病毒病种子传毒率为２．７０％－１４．６８％，生物测定和血清学测定（免疫双扩散或ＥＬＩＳＡ）的种传样本４４个均为ＳＭＶ。选择各地有代表性的ＳＭＶ典型症状分离物，在电镜下观察粒子长度     

河北省藁城花生病毒病的RT-PCR检测及外壳蛋白基因序列分析

采用RT-PCR技术对采自河北省农林科学研究院粮油作物研究所藁城堤上试验基地的12份花生叶片样品进行花生病毒病的检测,结果表明:从表现花叶和矮化症状的10份样品中检测到花生条纹病毒(peanut stripe virus,PStV),检出率高达90%,未检测到花生矮化病毒和黄瓜花叶病毒;对其中2个PStV分离物cp基因序列分析的结果表明,该cp全长864 bp。这两个分离物与已报道的PStV其他株系的cp核苷酸序列相似性分别为94.4%~99.2%和94.7%~99.7%,氨基酸相似性分别为95.5%~99.7%和95.8%~100.0%。PStV cp核苷酸序列构建的系统进化树中,这两个分离物与中国大陆其它分离物及美国分离物亲缘关系较近,而与中国台湾、泰国和越南分离物亲缘关系较远。     

马铃薯X病毒的RT-PCR和IC-RT-PCR检测

马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)是侵染马铃薯重要病毒之一,通常引起花叶症状,在田间常与其他病毒混合感染导致马铃薯的毁灭性减产。PVX尚无有效的药剂可以防治,加强对PVX的快速检测是一个亟待解决的课题。本研究应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)技术检测马铃薯X病毒。结果表明:IC-RT-PCR方法可检测出稀释至1.0×10-3的粗汁液中的病毒;RT-PCR方法可从稀释至1.0×10-4的总RNA中扩增出特异的目的条带。这两种方法均具有较高的检测灵敏度,均可用于马铃薯X病毒的检测。     

文心兰2种主要病毒的快速检测及其组培脱毒方法

利用感染了建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒的文心兰叶片,建立同步检测文心兰2种病毒的双重RT-PCR方法,该方法可一次性扩增出2种病毒的DNA条带,最低可检测到相当于1μg的带毒叶片。同时采用花梗组织培养脱毒并结合培养基添加病毒A的脱毒方法,对感染2种病毒的文心兰进行外植体脱毒试验,获得文心兰组培苗脱毒方法。用建立的双重RT-PCR检测脱毒效果,脱毒率为75.3%。     

我国木薯花叶病毒病的发生危害及其病原鉴定

为明确国内木薯花叶病毒病(cassava mosaic virus disease)的危害情况、田间症状及其病原类型,本研究于2018—2019年调查了该病在国内的分布情况、症状特征及种质来源等数据,采集了8省(区)19地的384份样品,利用特异性引物检测2种木薯花叶病毒侵染引起的症状类型,并通过序列比对明确其病原特点...     

马铃薯S病毒的RT-PCR检测

根据马铃薯S病毒(PVS)的外壳蛋白基因序列,设计合成了一对寡核苷酸引物。以感染PVS的马铃薯组织和健康的组织为材料,对提取植物总RNA的两种方法进行了比较,并对总RNA的提取方法进行改进,获得了纯度较高,完整性较好的总RNA。以此为模板,进行cDNA合成及PCR扩增,从感病组织扩增得到一段长度约642bp的特异PCR扩增产物,与理论设计的外壳蛋白基因大小一致,而健康组织无此扩增产物。从而建立了检测PVS快速灵敏简便的新方法,在基因水平上为PVS的检测提供了新手段。     

一种快速同步检测小麦黄花叶病毒和中国小麦花叶病毒的方法

针对小麦黄花叶病毒(WYMV)和中国小麦花叶病毒(CWMV)在症状、传播途径、发生规律等方面高度相似、难以用常规手段鉴定的问题,根据两种病毒基因序列的异同点设计了三条引物CWWY-R2、CW1-F2和WY1-F2,以植物总RNA为模板、CWWY-R2为引物反转录合成cDNA.通过优化建立了一种同步检测两种病毒的反应体系:cDNA1.6 μL,引物(10 μmol·L-1)各0.4 μL,10×PCR Buffer(不合Mg2+)2μL,dNTPs(10 mmol·L-1 each)0.4 μL,Taq DNA聚合酶(5U·μL-1)0.8μL,MgCl2(25 mmol·L-1)0.8μL,ddH2O 13.2 μL,合计20 μL; PCR反应条件:94 ℃预变性5 min,94℃ 50 s,50℃50 s,72℃90 s,共30个循环,72℃延伸10 min.WYMV和CWMV的PCR扩增预期目的片段分别为508和918 bp.利用该方法对江苏高邮、扬州和大丰的样本进行检测,它们分别为WYMV、WYMV、CWMV单一侵染,证明该方法准确性较高,可用于两种病害同步检测.