均匀设计法优化彩色马蹄莲品种的RAPD-PCR反应体系

以7个彩色马蹄莲品种为研究对象,以品种Prafait DNA为模板,采用均匀设计法对影响彩色马蹄莲RAPD-PCR反应的4因素(模板DNA浓度、引物浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度)在3个水平上进行U12(34)优化试验。结果表明:最佳的彩色马蹄莲RAPD-PCR的反应体系为:20μL体系中含有25ng的模板DNA,0.125mmol/L dNTPs,1.5mmol/L Mg2+,1×buffer反应缓冲液,0.55mmol/L引物,1.0U的Taq DNA聚合酶。     

基于均匀设计法优化土沉香的组培再生体系研究

以带有腋芽的幼嫩土沉香茎段为外植体,运用DPS数据处理系统,通过均匀设计法筛选诱导土沉香茎段从出芽到生根整个再生体系的适宜培养基。结果表明:适宜土沉香茎段腋芽萌发的培养基为7/10MS+6-BA 0.35mg/L+NAA 0.01mg/L,诱导率为93.33%;适宜土沉香出芽增殖的培养基为7/10MS+KT 1.27mg/L+NAA 0.2mg/L,增殖倍数为3.53;适宜土沉香茎段生根的培养基为7/10MS+6-BA 0.02mg/L+IBA 1.23mg/L+CM 25mL/L,诱导率为33.33%。该试验优化了土沉香茎段再生体系的培养条件,为其快速繁殖的推广及遗传转化体系的建立提供了基础支持。     

超声波-微波协同法提取分蘖葱头有机硫化合物的工艺优化及其组分分析

以分蘖葱头为试材,采用超声波-微波协同法提取有机硫化合物,进行分蘖葱头有机硫化合物工艺优化试验,并利用气相色谱-质谱联用仪对提取物组分进行分离鉴定,以期为进一步研究和开发分蘖葱头功能组分提供参考依据。结果表明:最佳提取工艺为微波温度55℃、料液比1∶8 g·mL^-1、协同时间6 min、搅拌转速300 r·min^-1、超声波功率500 W,该条件下有机硫化合物得率为0.2771%±0.0023%。该条件得到15种有机硫化合物,含量较高的是噻吩类39.0678%±0.0043%,其次是三硫化合物14.1570%±0.0071%和硫醚类7.3872%±0.0052%,其中含量相对较高的有机硫化合物为2,4-二甲基噻吩、3,5-二乙基-1,2,4-三硫杂环戊烷、二烯丙基二硫醚。     

不同处理条件下1-MCP对金冠苹果呼吸强度和品质的影响

以金冠苹果为试材,1-MCP处理后,研究了采收期、处理时间、处理温度和处理时期对果实采后呼吸强度和品质的影响。结果表明,1-MCP处理显著降低了果实的呼吸强度,延迟了果实呼吸高峰的出现,与对照果实相比,1-MCP很好地保持了果实的风味和品质。不同采收期、处理时间的长短、处理温度和处理时期均对1-MCP的作用效果有影响,在这些因素中,采后处理时期对1-MCP作用效果的影响最大。     

应用Box-Behnken组合设计优化金针菇粗多糖提取条件

研究了提取温度、提取时间、料液比、pH和提取次数对金针菇水溶性粗多糖提取率的影响。单因素试验结果表明,pH和提取次数的影响作用较弱,二因素的适宜水平分别为7和1次;而提取温度、提取时间和料液比的影响较显著。采用Box—Behnken组合设计进一步考察3个因子对金针菇粗多糖提取率的影响。试验结果表明,对金针菇粗多糖提取率影响大小依次为：料液比〉提取时间〉提取温度;所确定的最优提取条件为：提取温度87℃,提取时间2h,料液比1：20,在此条件下金针菇粗多糖提取率为1．38％。     

Using folic acid-modified polyethylenimine-SPIO nanoparticles for PD-L1 siRNA delivery to target gastric cancer

AIM: To synthesis and characterize a multi-functional siRNA delivery agent with effective therapeutic effects and MR-tracing ability for programmed death ligand-1 (PD-L1) positive gastric cancer SGC-7901 cell line. METHODS: The characterization, binding ability, cytotoxicity, transfection efficiency and cellular internalization of the polyplex were determined. The PD-L1 knockdown effect was analyzed, and cytokines secreted by cocultured T cells were measured.RESULTS: We developed folic acid (FA)-PEG-SS-PEI-SPION as siRNA delivery agent for PD-L1 knockdown. At N/P ratio of 10, the FA-PEG-SS-PEI-SPION bound PD-L1 siRNA to form polyplex in a diameter of (116.7±2.5) nm with zeta potential of (9.14±0.80) mV. Transfection efficiency of the targeted polyplex was (95.06±0.44)%, compared with (93.87±1.05)% of the untargeted polyplex. Mean fluorescence intensity of the targeted polyplex was 1 892.67±81.51, significantly higher than 1 324.33±186.58 of the untargeted. The cellular magnetic resonance (MR) imaging showed the polyplex also acted as T₂ weighted contrast agent for cancer MR imaging. The relative mRNA level of PD-L1 in polymer/siRNA-2 treatment group was (9.07±0.79)%. Decreased protein expression of PD-L1 was showed by Western blot. The secretion levels of IFN-γ and TNF-α in cocultured T cells increased, while that of IL-10 decreased. CONCLUSION: Our findings highlighted the potential of the multifunctional theranostic nanoparticles for effective targeting PD-L1 knockdown therapy and MR imaging diagnosis in gastric cancers.     

新疆伊宁市两种不同结构日光温室优化设计

在2009～2010、2010～2011年冬季,研究比较了新疆伊宁市2种不同结构日光温室地温、气温、湿度等环境因子的变化,以期为提高伊宁市日光温室冬季生产的综合利用能力提供理论依据。结果表明:伊犁州育苗中心2号优化设计温室性能优于原建1号温室,2号温室内测试期间最低气温为5℃,最高气温31.5℃,地温5、10、15、20cm分别平均提高5.6、4.36、3.04、2.05℃,相对湿度平均降低11.49%。试验测试充分验证了优化设计后的日光温室性能优于原建温室。     

培养条件对羊肚菌菌丝生长的影响

报告了分离自沈阳天柱山的羊肚菌(Morchelta．sp.)Sn-1菌株的菌丝生长条件的研究结果。该菌株的最佳碳氮源为葡萄糖和硝酸铵；最适生长温度为24℃：最适的pH为7．5；光照培养不利于菌丝生长。正交实验结果表明，在碳源、氮源、温度和pH这4个主要因素中，影响最大的是温度因子；影响强调的顺序为温度、氮源、碳源和pH；最佳的组合为葡萄糖25g／L、硝酸铵2．0g／L、温度24℃、pH7．5。     

利用CRISPR/Cas9敲除葡萄VviPDS1基因的研究

选择葡萄八氢番茄红素脱氢酶(Phytoene desaturase)基因VviPDS1为靶标,利用CRISPR/Cas9系统构建基因敲除载体,瞬时转化葡萄叶片原生质体,检测到不同类型的突变。通过农杆菌介导转化‘无核白’葡萄胚性愈伤组织,筛选获得卡那霉素抗性植株71株。经PCR鉴定,其中53株为阳性植株,阳性率为74.64%。测序结果表明,共有20株在靶点发生不同类型的突变,编辑效率为37.74%;其中9株产生了双等位基因突变。对其进行氨基酸序列预测,在第202位氨基酸之后发生了不同程度的变异。利用CRISPR/Cas9系统敲除VviPDS1获得的突变体植株呈现整体矮化,其叶片出现不同程度白化。表明CRISPR/Cas9系统可以通过细胞中的瞬时或稳定表达进行基因编辑,可以实现在葡萄编辑植株中产生纯合敲除。     

西瓜转基因抗病毒病新材料BH-1

西瓜新材料BH-1,是导入了西瓜花叶病毒(WMV)外壳蛋白基因、小西葫芦黄化花叶病毒(ZYMV)复制酶基因、黄瓜花叶病毒(CMV)复制酶基因的转基因新材料。经温室及大田抗病毒病鉴定表明其抗性达中抗以上水平,是我国第1个通过转基因获得的抗病毒病西瓜新材料。     

应用CRISPR/Cas9体系对番茄PSY 1基因的定点编辑

基于NCBI数据库提供的番茄八氢番茄红素合成酶基因(PSY 1)全长,并根据基因序列中PAM(proto adjacent motif)的位置设计特异性sg RNA,构建CRISPR/Cas9 Level 1、Level 2载体;将设计好的载体转化农杆菌,继而转染番茄子叶,利用PCR产物测序法检测sg RNA在番茄基因组中的敲除效率。结果表明,36个转基因植株中有22个PSY 1基因目标区出现不同数目的碱基缺失、增加或互换,初步估计基因敲除效率为61%。本试验在番茄中初步建立了CRISPR/Cas9介导的基因敲除技术,该技术能够稳定的在番茄中实现基因敲除。     

雄性不育松散型花椰菜新品种京松1号的选育

京松1号是以细胞质雄性不育系CMS060为母本,自交系1028-1为父本配制而成的松散型花椰菜一代杂种。中晚熟,从定植至收获秋季85d(天)左右,春季65d(天)左右。植株生长势强,花球白、松散,花梗浅绿,单球质量1.5kg以上。营养品质好,富含矿物营养和硫代葡萄糖苷。每667m2产量3100kg左右。适合北京及周边地区春、秋季露地栽培。