用ELISA检测蛋和雏鸡中的肠炎沙门氏菌

将以前用的快速检测环境样品中肠炎沙门氏菌（ＳＥ）的ＥＬＩＳＡ法，经改进后用于食物样品的检测。本实验选择夹心ＥＬＩＳＡ法，捕食阶段用亲和提纯的兔多克隆抗体，检测阶段用高特异单克隆抗体。除ＳＥ以外的３９种细菌，其中包括３２株沙门氏菌，均用ＥＬＩＳＡ法做了交叉试验，结果除ＳＥ外无反应性。将ＳＥ加于食物样品匀浆（雏鸡皮肤、肉和蛋）中测试ＥＬＩＳＡ法的敏感性，用ＥＬＩＳＡ法检测ＳＥ，在浓度为１０％（重量／体     

肠炎沙门氏菌快速检测方法的建立

利用针对肠炎沙门氏菌主要O因子抗原O9的3－47－26单克隆抗体建立了快速检测肠炎沙门氏菌的竞争ELISA方法（C－ELISA）。将被检样品与McAb作用，竞争性抑制了McAb与包被肠炎沙门氏菌的结合，同时，也减弱了酶标二抗与McAb的结合，以降低底物反应的颜色，从而达到检测样品的目的。试验结果表明，本方法只选择性地与肠炎沙门氏菌反应，而与其它沙门氏菌均不反应。通过与国标法对210份样品检测结果比较表明，竞争ELISA方法的敏感性和特异性分别为94．4％和97．7％，从而为肠炎沙门氏菌的检测提供了一种快速、敏感、特异的检测方法。     

检测肠炎沙门氏菌ELISA方法的建立与应用研究

从已建立的抗沙门氏茵单抗中筛选出适用于肠炎沙门氏菌ELISA检验的3—47—26单抗．采用筛选强阳性杂交瘤细胞株制备了高效价的3—47—26单抗．改进用辣根过氧化物酶标记高效价单抗的方法，进行了HRP标记单抗的免疫生物学特性的鉴定。确定了包被浓度和酶标抗体的工作浓度：HRP-3—47—26为1：100；LPS的包被浓度为400ng／mL。试验中采用LPS与多聚赖氨酸的结合，解决了包被过程中的解吸附作用，增强了包被的稳定性，同时也减少了假阳性反应，优化了包被过程。建立了检测肠炎沙门氏菌的抗原竞争ELISA方法，利用样品中的LPS抑制酶标抗体与包被的LPS结合，以降低底物反应的颜色从而达到检测的目的。通过对210份肠炎沙门氏菌感染鸡泄殖腔棉拭子、羽毛和组织样品先筛选后鉴定的方法进行检测具有明显的抑制作用，通过与国标法对大量的样品检测结果比较表明，竞争ELISA方法的检出率为18．09％；检出阳性样品36份，国标法检出率为17．14％；两者符合率为97．14％。竞争ELISA敏感性和特异性分别为94．4％和97．7‰从而为肠炎沙门氏菌的检测提供了一种敏感、特异的检测方法。     

单抗竞争ELISA检测猪沙门氏菌感染方法的建立与应用

以猪霍乱沙门氏菌作为包被抗原 ,利用沙门氏菌O7单克隆抗体酶结合物建立了竞争ELISA方法检测猪霍乱沙门氏菌抗体。经过研究确定抗原包被浓度为 2×1 0 8CFU/ml,血清检测稀释度为 1∶1 6,酶标抗体浓度为 1∶70 0 ,包被液为碳酸盐缓冲液 ( 0 .0 5MpH9.6)。应用单抗竞争ELISA和平板凝集试验 (PAT)同时对 5 0 6份血清进行猪霍乱抗体检测 ,PAT的检出率为 3 .60 % ,ELISA检出率为 5 .75 % ,两者符合率达 96.4%。试验结果表明 ,ELISA方法敏感性高 ,特异性强 ,稳定性和重复性好 ,操作简便。本方法的建立在猪群沙门氏菌感染的检疫、实验室诊断的标准化及流行病学调查方面具有应用价值。     

用单抗ELISA快速检测鱼粉沙门氏菌

用单抗ＥＬＩＳＡ快速检测鱼粉沙门氏菌顾炳泉李建高逢洁高以明（南通动植物检疫局）张如宽文其乙焦新安（扬州大学农学院）沙门氏菌是重要的人畜共患病病原体，是当今世界上引起动物疾病和人类食物中毒频率最高的致病菌之一。自１８８５年Ｓａｌｍｏｎ和Ｓｍｉｔｈ分离到...     

鸡肠炎沙门氏菌感染症

鸡肠炎沙门氏菌感染症赵德明王彩虹（中国农业大学,北京１０００９４）鸡肠炎沙门氏菌不但能引起肉鸡和蛋鸡的发病,造成严重的经济损失,而且是人食物中毒的主要病原菌之一［１,２３,４３］。日、美等发达国家发生的食物中毒事件中４０％～８０％是由禽沙门氏菌引起的...     

肠炎沙门氏菌SEFA基因表达和间接ELISA检测方法的初步建立

为了给临床检测肠炎沙门氏菌的感染和血清学调查提供一种切实可行的方法,本研究根据肠炎沙门氏菌SEF14菌毛操纵子亚单位sefA基因序列设计一对引物,利用PCR技术从国内标准株CMCC(B)50336中扩增sefA基因,并按预定的阅读框插入表达载体pET22b+中,获得重组质粒pET-sefA,限制性内切酶结合琼脂糖凝胶电泳分析和序列测定结果表明,该序列大小为498bp,与已发表的sefA结构编码序列完全一致。重组质粒pETsefA转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)并能获得高效诱导表达,通过对菌体裂解上清液SDS-PAGE和western blot分析鉴定,该重组菌可以表达大小为15.2ku的可溶性重组蛋白rSEFA。纯化的rSEFA免疫小鼠所得高免血清以及标准株CMCC(B)50336感染小鼠后所获阳性血清,均能识别标准株肠炎沙门氏菌SEF14菌毛蛋白以及纯化的重组蛋白rSEFA,结果表明明体外表达的rSEFA蛋白有较好的免疫原性和反应原性。而基于rSEFA介导的间接ELISA有较好的特异性,对肠炎沙门氏菌特异性抗体检测有潜在的应用前景。     

雏鸡和鸡蛋肠炎沙门氏菌的检测与控制研究进展

雏鸡和鸡蛋肠炎沙门氏菌的检测与控制研究进展邸怀忠杜秀珍（山西省原平农业学校０３４１００）８０年代中期，美国人肠炎沙门氏菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌａｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓ：ＳＥ）病患病率的大幅度上升，引起了人们对潜在的传染源的关注。流行病学的调查研究证实，鸡...     

肠炎沙门菌SEF14菌毛的抽提、纯化及生物学活性检测

试验从肠炎沙门菌国内标准株50336中抽提和纯化SEF14菌毛,并制备SEF14蛋白鼠源高免血清.结果发现,肠炎沙门菌在CFA培养液中,静止培养50 h左右,SEF14菌毛表达量相对较多,在机械高速匀浆后,经进一步的透析纯化,得到较纯的SEF14菌毛蛋白,蛋白大小和相关报道一致,约14 ku左右.Westem-blotting检测发现纯化的重组蛋白rSEFA(体外表达的SEF14菌毛主要亚单位蛋白SEFA)免疫小鼠得到的高免血清能识别标准株肠炎沙门菌SEF14菌毛蛋白以及纯化的重组蛋白rSEFA,说明体外抽提的SEF14菌毛蛋白和体外表达的rSEFA蛋白同样具有较好的免疫原性和反应原性.     

肠炎沙门氏菌及其毒素灭活研究

用过滤除菌和超声波裂解的方法提取肠炎沙门氏菌内毒素和外毒素,分别接种番鸭、小白鼠、雏鸡,并用不同浓度的甲醛和不同温度进行细菌和毒素的灭活试验。结果表明,普通肉汤培养24h肠炎沙门氏菌产生内毒素,不产生外毒素。以菌悬液总量的0.1%加入甲醛作用48h或60℃作用120min,均可灭活肠炎沙门氏菌及其毒素。     

肠炎沙门氏菌感染及其检测方法研究进展

该文主要介绍了宿主对肠炎沙门氏菌(SE)的防御能力、SE感染与宿主细胞的关系、SE在禽类中多呈隐性感染的原因分析,并对当前SE检测方法的研究进展作了一综述.     

噬菌体对鸡肠炎沙门氏菌的防治研究

肠炎沙门氏菌是全球食源性疾病暴发的主要病原菌之一,可引起禽类发病死亡,造成巨大的经济损失.噬菌体是一种细菌病毒,具有严格的宿主特异性.在耐药菌日益增长、抗生素使用受限的情况下,可考虑将噬菌体作为消除病原体的替抗药物.因此,文章就噬菌体对肠炎沙门氏菌的防控及其应用前景展开综述,同时为其他耐药菌的治疗防控提供新的策略.     

实验性肠炎沙门氏菌病鸭口服中草药制剂后体内抗氧化酶活性和脂质过氧化物的变化

7日龄仙湖3号雏鸭人工感染肠炎沙门氏菌，发病后于饮水中加入中草药煎液。分别于攻毒后15、39、63、87h颈静脉采血，取血清，后捕杀，取肺脏制成肺组织匀浆液，测定血清和肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量。结果攻毒后未进行治疗组鸭体内的SOD活性明显降低，MDA含量明显升高，抗生素治疗组鸭只体内的SOD活性比中草药治疗组显著降低，说明药物在治疗感染的同时也影响了机体内自由基的活动。而中草药在调节机体内环境平衡方面具有一定的优势，且对雏鸭无不良影响。     

肠炎沙门氏菌污染饲料对鸡蛋安全的影响

本研究选用160只60周龄白来航蛋鸡,随机分为4组,分别一次性采食30g添加了0、4.7×102、4.7×105、4.7×108cfu肠炎沙门氏菌(SE)的饲料,然后用特异性PCR法对试验鸡所产鸡蛋的不同部位进行SE检测,并观察记录生产性能。结果显示,对照组鸡蛋各部位均为阴性,试验组的蛋壳、壳膜、蛋黄、蛋白均能检测到SE,且随染菌量的增大,检出率增高。当摄入108cfu的SE时,会降低产蛋率,但对鸡蛋的表观性状没有显著影响,成为危害人类健康的潜在隐患。     

中草药对肠炎沙门氏菌的体外抑菌试验

用定量分析的方法探讨单味及多味复方中草药的药理活性,为临床应用提供理论依据.用2倍稀释法测定13种中草药对肠炎沙门氏菌的体外MIC;将13种中药两两组合后测定MIC,依据结果组成8个复方,测定它们及5个中药方剂的MIC.结果单味中草药对肠炎沙门氏菌的MIC在15.6～500 g/L之间;78种两味中药组合的MIC在15.6～500 g/L之间,少数组合有拮抗作用;13种3～10味中药组合MIC在15.6～250 g/L之间,大部分组合表现协同作用,显示出中药配伍优势.     

禽肠炎沙门菌外膜蛋白OMPX基因的克隆及其在乳酸乳球菌中的表达

以禽肠炎沙门菌基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增得到外膜蛋白OMPX基因片段,并将其克隆到乳酸乳球菌表达载体pMG36e中,构建重组质粒pMG36e-OMPX。将重组质粒电转入乳酸乳球菌MG1614,得到重组基因工程乳酸乳球菌,在GM17培养基中培养12h后,经SDS-PAGE分析显示表达的蛋白约为16 000,与预期相符,经Western-blot检测表明,表达的蛋白具有良好的反应特异性。     

加工工艺参数对杀灭肉鸡饲料中沙门氏菌的影响

本试验目的是研究调质温度、时间和水分对杀灭肉鸡饲料中沙门氏菌数量级的影响,建立调质工艺杀灭饲料中沙门氏菌的数量级与温度、时间和水分等工艺参数间关系的数学模型,优化出杀灭饲料中4个数量级沙门氏菌的调质工艺参数。在实验室条件下,采用3因子3水平Box-Behnken模型的响应面设计。温度水平为60、80、100℃;时间水平为20、160、300s;水分水平为5%、10%、15%。温度越高,时间越久,水分越大,调质工艺杀灭饲料中的沙门氏菌的数量级越大。最大效应值为6.51,最小效应值为0.38,获得了相应的数学模型,研究还得到10组可以杀灭4个数量级沙门氏菌的调质工艺参数。这说明响应面设计可以应用于颗粒饲料加工过程中调质工艺参数的优化。试验结果表明,当调质温度为100℃,时间20s时,水分最少为13.78%;调质时间20s,水分15%时,温度最少应为95.2℃,这在实际肉鸡颗粒饲料加工中是可行的。