花生生产必须严控黄曲霉污染

黄曲霉毒素是黄曲霉菌侵染花生、玉米等作物后产生的有毒代谢物,目前已知的重要致癌物之一。由于种植者和加工者对黄曲霉毒素污染的危害性重视不够,致使我国出口花生出现黄曲霉毒素超标问题,退货现象时有发生,已成为我国花生生产和出口的重要问题和难题之一。研究表明,黄曲霉毒     

花生收获前黄曲霉污染调查

于１９９７年夏季在花生收获前,采集了福建省花生主产区的漳浦,同时,晋江,惠安,福清等县的田间花生果荚样品。从这些样品中分离了１７３个黄曲霉菌株,并测定其产毒性,产毒菌株率为６２．４％,其中高毒菌株率为４．６％。各生产市,县的花生籽粒在收获前均受到黄曲霉不同程度的感染,田间平均感染率为６．１％,惠安,晋江两县较重,田间感染率分别为８．６％和８．５％。花生田土壤中的黄曲霉菌量为１００－２２００个／ｇ。     

黄曲霉侵染前后花生过氧化物酶与过氧化氢酶活性变化的研究

采用分光光度法对黄曲霉侵染前后两种花生籽仁中过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性进行测定。试验结果表明,接种8h后两花生品种POD活性明显提高,并表现出明显的活性高峰,之后POD活性逐渐下降,24h后POD活性变化幅度较小,两花生品种间的POD活性相差较大;接种后随时间的延长CAT活性降低,24h后趋于稳定,两花生品种CAT活性相差较大。两种酶之间的变化无明显的同步性,两花生品种中两种酶的活性变化趋势也不尽相同。     

花生品种抗黄曲霉毒素的研究

采用高产毒的黄曲霉孢子接种花生仁，测定接种后种子感染率和黄曲霉毒素的含量，对８５３份花生种质资源进行了筛选鉴定。鉴定出７０１，７０２，超小粒１号和超小粒２号４个抗抗黄曲霉素的花生品种，其接种感染率３年平均依次为１３．３％，１４．１％，１６．１／％和１３．７％，对照种桂花１４号４年平均为９５．２％。     

花生抗黄曲霉品种的鉴定研究

以桂花17、桂花20、桂花22、桂花100、广西农家种、汕油21、汕油27、汕油71、汕油523、粤油58、粤油79、湛油30、湛秋48等13个品种的花生(Arachis hypogaea L.)种子为试验材料，对其固有的抗性物质及黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)含量进行了测定，结果发现，不同品种之间存在差异，在测定的13个花生品种中，湛秋48、桂花22、粤油58表现为相对抗性品种，湛油30、汕油523、桂花100表现为相对易感品种．     

花生黄曲霉毒素污染与控制

花生是最容易受黄曲霉毒素污染的粮油作物之一,花生黄曲霉毒素污染防控是一项世界性难题。介绍了花生黄曲霉毒素污染现状与特点,分析了黄曲霉毒素侵染途径和影响因素,并从品种培育、土壤处理、田间管理、收获、干燥、贮藏以及产毒后去除等方面探讨了花生黄曲霉毒素防控技术措施。     

贮藏花生种子茉莉酸甲酯处理与黄曲霉污染关系的研究

以花生(Arachis hypogaea L．)汕油523、粤油79、湛油30为试验材料，在干燥器中分别用LiCl、MgCl2饱和溶液使隔层储存的种子的含水量(质量分数)分别降至2．82％、4．96％，用1mmol／L的茉莉酸甲酯处理后开放式贮存3个月，接种黄曲霉孢子并测定蛋白酶抑制剂(proteinase inhibitor，PI)、脂肪氧化酶(1ipoxygenase，LOX)和苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase，PAL)的活性。结果表明茉莉酸甲酯处理后提高了PI、LOX和PAL活性．不同含水量有相似的结果．     

花生黄曲霉生长预测模型的研究

通过对分离自花生的黄曲霉LYYSS03-3在不同温度(15-35℃)、不同相对湿度(水活度分别为0.5,0.7,0.9)下的菌落生长特性进行检测,采用Boltzmann和Logistic 模型对黄曲霉的生长曲线进行拟合,结果表明,在适宜温湿度阶段,花生黄曲霉的生长曲线更适合用Boltzmann模型拟合.     

花生种子的黄曲霉抗性物质成分和基因研究进展

为花生黄曲霉的抗性研究和建立快速有效的鉴定方法提供参考,对花生种子的白藜露醇、脂肪氧化酶、苯丙氨酸解氨酶、胰蛋白酶抑制剂、几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶等黄曲霉抗性物质、膜质过氧化反应、种皮超微结构和抗性成分及抗黄曲霉基因进行了综述,同时对花生抗黄曲霉成分和基因研究进行了展望.     

荣莉酸甲酯对贮藏花生种子黄曲霉抗性的影响

花生Arachis hypogaea种子(汕油523、粤油79、湛油30)在干燥器中分别用LiCl、MgCl2饱和溶液隔层储存1个月后,种子的含水量(w)分别降至2.82%、4.96%,用1 mmol/L茉莉酸甲酯(MJ)处理这些种子,开放式贮存6个月,然后接种黄曲霉孢子并培养9 d,测定种子黄曲霉毒素B1质量分数及几丁质外切酶、几丁质内切酶和β-1,3葡聚糖苷酶的活性.发现MJ处理后可降低黄曲霉毒素B1质量分数,同时,通过提高几丁质外切酶、几丁质内切酶活性来提高花生种子对黄曲霉的抗性.但对β-1,3-葡聚糖苷酶活性无影响.     

花生种子中芪化物的合成与抗黄曲霉菌产毒的相关性研究

以花生种子为试材,采用孢子浓度为l×l 06(个/ml)的黄曲霉菌接种花生种子,对抗产毒和易产毒品种间4种主要芪化物(resveratrol,ε-viniferin,δ-viniferin,pterostilbene)合成变化,相关抗性酶活性(PAL、POD、PPO)进行了比较,探讨了不同品种间芪化物的合成与抗黄曲霉菌产毒之间的相关性.结果表明:花生种子芪化物的合成速度与抗产毒有关.在接种黄曲霉菌第3天时,抗产毒品种黔花生3号4种芪化物含量达到峰值,含量为47.37 μg/g,为对照的54倍;易产毒品种花育22号芪化物含量仅5.5 μg/g;抗产毒品种芪化物含量和相关抗性酶(PAL、POD、PPO)活性都高于易产毒品种;在16个考察的花生品种中,发现了4个芪化物含量较高,病情指数和黄曲霉毒素含量相对较低的花生品种;相关分析发现,不同花生品种芪化物含量与病情指数、黄曲霉毒素B1和黄曲霉毒素总量呈极显著负相关,相关系数(r)分别为-0.789、-0.851、-0.850.因此,花生接种第3天时的芪化物含量可作为筛选和培育花生抗产毒品种的重要化学指标.     

荧光定量PCR技术检测花生种皮抗黄曲霉基因表达强度

依据已获得的基因芯片和cDNA研究结果,筛选上调表达并且表达差异系数在5.0以上的花生种皮基因序列设计引物,采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR法对上述基因进行相对定量分析,以验证基因芯片研究结果并为分离黄曲霉抗性相关基因奠定基础。结果表明:荧光定量PCR的结果与基因芯片的结果高度一致,目的基因在感病和抗病品种之间差异显著,其中BE87、AW03在抗病品种中相对表达量较高,可能在抵御黄曲霉侵染过程中发挥重要作用。     

MJ·干旱·黄曲霉菌处理对花生种子发育过程中PI·PAC活性的影响

用1.0和0.1 mmol/L茉莉酸甲酯(MJ)处理花生结荚早期植株,结果表明:在不利条件(干旱、接种黄曲霉菌)下,不同浓度的MJ能诱导蛋白酶抑制剂(PI)活性的升高,且高浓度MJ处理比低浓度处理效果好。对苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的影响与PI活性相似,但是MJ诱导PAL活性的长期效果不明显。     

黄曲霉和寄生曲霉pksA基因部分序列的同源性分析

比较寄生曲霉和黄曲霉pksA基因部分序列同源性。方法:采用RT-PCR从寄生曲霉AS3.4407和黄曲霉菌AS3.4409中克隆得到pksA基因部分序列,经克隆后测序。结果:通过比对分析发现该两株菌pksA基因同源性可达98.0%。     

花生采前茉莉酸甲酯处理对成熟种子黄曲霉抗性的影响

以花生湛秋48和粤油5号为试验材料,在荚果发育初期用茉莉酸甲酯(Methyl jasmonate,MJ)处理,再进行干旱处理,并于干旱处理2周后接种黄曲霉菌。取成熟种子测定几丁质外切酶、几丁质内切酶、β-1,3葡聚糖苷酶和苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine ammonia-lyase,PAL)活性。结果表明,MJ能诱导几丁质外切酶、几丁质内切酶、β-1,3葡聚糖苷酶和PAL活性,从而增强花生种子抗黄曲霉的侵染能力;不同花生品种对MJ诱导的敏感性不同,湛秋48比粤油5号敏感。     

吡咯伯克霍尔德菌WY6-5产二甲基二硫对储藏期花生黄曲霉及毒素的抑制作用

【目的】验证吡咯伯克霍尔德菌（Burkholderia pyrrocinia）WY6-5的抑菌作用,评价其对储藏期花生黄曲霉（Aspergillus flavus）及毒素的防治效果,分析抑菌作用机制,鉴定活性物质,并检测其最低抑菌浓度,为储藏期真菌病害及毒素的防控提供新材料。【方法】采用非接触培养皿对扣培养法,检测菌株WY6-5对黄曲霉的抑制效果,添加活性炭,验证挥发性物质的抑菌作用;密闭储藏环境,检测WY6-5产二甲基二硫对花生黄曲霉及毒素的抑制效果;收集处理后的花生籽粒,锇酸固定,并进行扫描电镜观察,检测黄曲霉细胞显微结构变化,通过透射电镜观察,检测黄曲霉细胞内部结构的显微差异;购买活性物质标准品,梯度稀释,与黄曲霉菌丝和孢子对扣培养,分析最低抑菌浓度。【结果】吡咯伯克霍尔德菌WY6-5分离自茶园根际土壤,可产生挥发性物质二甲基二硫,并高效抑制黄曲霉的生长,抑菌率达95%以上;同时,在高水活度（a_w）条件下,WY6-5还可抑制储藏期花生黄曲霉和毒素污染;两种水活度下,对照组中发病率高达100%,黄曲霉毒素总含量分别为399.32 μg?kg ^-1（a_w 0.859）和3 143.19 μg?kg ^-1（a_w 0.923）;WY6-5添加组,花生黄曲霉发病率降为2%（a_w 0.859）与21%（a_w 0.923）,毒素含量降为4.86 μg?kg ^-1（a_w 0.859）和121.37 μg?kg ^-1（a_w 0.923）,与对照组相比,对毒素的抑制率达98.78%和96.14%。扫描电镜观察显示,WY6-5产生的挥发性气体能抑制黄曲霉孢子的萌发,透射电镜显示,黄曲霉细胞结构未呈现明显损伤。挥发性物质二甲基二硫抑菌作用明显,对黄曲霉菌丝生长的最低抑菌浓度为100 μL?L ^-1(物质体积/培养体积),对孢子萌发的最低抑菌浓度为50 μL?L ^-1(物质体积/培养体积)。【结论】吡咯伯克霍尔德菌WY6-5可产生高效抑菌挥发物二甲基二硫,在低浓度下即可完全抑制黄曲霉菌丝生长和孢子萌发,并能抑制储藏期花生黄曲霉的侵染和黄曲霉毒素的产生,为储藏期真菌病害及毒素的防控提供了新型生物材料。