枯草芽孢杆菌发酵豆粕产蛋白酶活性的研究

采用枯草芽孢杆菌1389发酵豆粕,研究其所产的蛋白酶的活力。运用响应面分析法优化影响发酵的主要因素:接种量、初始pH值、发酵培养基浓度,采用多元二次回归方程拟和上述3因素与蛋白酶活力间的函数关系,确定了枯草芽孢杆菌发酵豆粕产蛋白酶的最佳发酵条件,为枯草芽孢杆菌发酵豆粕产大豆肽的研究提供了相应的工艺参数和一定的依据,有利于提高大豆肽的产率。     

不同位置土壤中枯草芽孢杆菌产蛋白酶活力的比较

从月季花下、草坪上及大树下采集土壤,然后对其进行分离得到枯草芽孢杆菌。通过对枯草芽苞杆菌利用酪蛋白培养基产蛋白酶能力的比较,发现月季花下土壤中分离得到的枯草芽孢杆菌产蛋白酶的能力最强。     

枯草芽孢杆菌JNB001蛋白酶特性的研究

为了解枯草芽孢杆菌JNB001发酵所产蛋白酶的特性,试验以蛋白酶活力为指标,研究了pH、温度等因素对酶促反应的影响,并通过水解度考察了粗酶液对各种动物蛋白的酶解效果。结果表明,酶反应最适pH为8.0,温度为45 ℃;粗酶液在pH 5.5~9.0的范围内较稳定,过碱则不利于酶液的保存。在45 ℃下热稳定性良好,超过50 ℃保温10 min后残余酶活已不足60%;金属离子Ca²⁺和Mg²⁺、还原剂DTT、表面活性剂Tween-80等能大幅度提高酶活力。而Fe²⁺、Cu²⁺、金属螯合剂EDTA、变性剂SDS等物质则会抑制蛋白酶活性;酶促反应的K_m为6.43 mg/mL,V_max为47.39 μg/min;针对不同蛋白底物,酶促反应较适pH为 7.0~9.0,温度为40~50 ℃。该粗酶液具有水解猪毛、猪蹄甲、脱毛牛皮、明胶等硬蛋白类物质的能力。上述试验结果可为枯草芽孢杆菌JNB001在病死畜禽无害化生物处理体系等方面的工业应用提供参考。     

枯草芽孢杆菌pgsA基因的克隆及序列分析

根据GenBank中已发表的枯草芽孢杆菌pgsA的基因序列,设计合成了一对能扩增1 225 bp基因片段的引物。以枯草芽孢杆菌染色体DNA为模板,经PCR扩增得到目的片断,然后将其克隆到pMD18-T载体上,经蓝白斑筛选和酶切鉴定选择阳性克隆进行序列测定。经DNA Star软件将其与Gen-Bank上的pgsA序列进行同源性比较,结果表明,核苷酸同源性均在90%以上,氨基酸同源性为94%以上。核苷酸序列系统进化树分析,发现该试验株与浙江株亲缘关系最近。经ProtScale软件分析表明,该基因所编码蛋白在靠近其N端存在一个跨膜区,为跨膜表达体系的建立和新型口服基因工程疫苗的研制奠定了一定的基础。     

枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶发酵条件的优化

通过单因素试验和正交优化试验,对枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶的发酵条件进行优化。通过单因素试验表明,枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶的最佳碳源、氮源、无机盐种类、碳源添加量、氮源添加量、发酵温度和初始pH值分别为麦芽糖、蛋白胨、氯化钙、麦芽糖添加量8%、蛋白胨添加量4%、发酵温度37℃、初始pH值7.0。在单因素试验的基础上进行正交优化试验得到了枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶最优发酵条件为:麦芽糖添加量8%、蛋白胨添加量8%、氯化钙添加量8 g/L、发酵温度37℃、初始pH值7.0。在最优发酵条件下,枯草芽孢杆菌所产的中性蛋白酶酶活为420.36 U/mL,比优化前98.36 U/mL提高了3倍。     

枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶的发酵条件优化

文章对一株枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶的发酵条件进行了优化,采用单因素试验和正交试验确定了最优发酵条件为装液量60 ml/250 ml,转速200 r/min,初始pH值6.9,发酵周期60 h,接种量4%,发酵温度37℃。通过发酵条件的优化,酶活提高了311.7%。     

枯草芽孢杆菌的研究进展

正近年来,抗生素类添加剂的滥用现象越来越严重,养殖户为了扩大畜禽养殖的经济利益不计后果地胡乱使用各种抗生素类饲料添加剂,随之带来的安全隐患逐渐显现出来并影响人类的健康,人们也逐渐意识到抗生素的使用所带来的一些负面影响。有研究表明,抗生素长期在动物生产中过量频繁应用,会破坏动物胃肠道正常菌群的平衡性,造成动物机体药物残留以及产生耐药性菌株等一系列隐性危害;因此,大力开发绿色、健康、无残留的替代品成为当前研究工作的重中之重。益生菌作为一种绿色     

枯草芽孢杆菌的培养

细菌固体培养具有对设备条件要求低、耗能低、细菌繁殖量高的特点。枯草芽孢杆菌作为微生物饲料添加剂具有广泛的应用价值。本实验通过计数细菌的繁殖数量 ,探讨了最适于枯草芽孢杆菌生长的固体培养基的组成和收获时间。1　材料1 .1　菌种　枯草芽孢杆菌菌种购自中国普通微生物菌种保藏管理中心。1 .2　培养基　营养琼脂培养基、营养肉汤培养基、固体培养基 ,全都自行制做。2　方法2 .1　菌种培养　将芽孢杆菌菌种在无菌条件下接种于营养琼脂培养基斜面上 ,然后在恒温箱内 37℃培养 2 4 h,即可见到一层白色圆整、边缘光滑的枯草芽孢杆菌菌落…     

一株枯草芽孢杆菌的分离鉴定及抑菌活性分析

为了对兔源枯草芽孢杆菌进行生化特性及抑菌活性的分析鉴定,试验将1株枯草芽孢杆菌进行扩大培养后,革兰氏染色,镜检,利用PCR技术扩增16S rRNA序列;测序后构建系统进化树,分析遗传变异特性,借助生化管分析生理生化特性,并进行体外抑菌活性分析。结果表明:该菌株为产芽孢的革兰氏阳性菌,在系统进化树中与枯草芽孢杆菌聚为一簇,同源性高达99%,对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌具有一定抑菌活性。     

高产蛋白酶枯草芽孢杆菌JNB001产酶条件的优化

为了进一步提高枯草芽孢杆菌JNB001产蛋白酶的能力,试验利用单因素及正交试验从起始pH、发酵温度、接种量、装液量、菌龄等方面对产酶条件进行优化。结果表明,最佳培养条件为:起始pH 7.0;发酵温度35℃;接种量7%;装液量35mL/250mL;菌龄18h;发酵时间36h。菌株JNB001经优化发酵条件后,测定其蛋白酶活力可高达371.66U/mL。该试验结果为无害化生物处理罐的优化设计等后续应用研究奠定了基础。     

枯草芽孢杆菌发酵的优化

抗生素作为饲料添加剂,在畜禽防疫方面虽起到积极的作用,但近10多年来由于科学水平的提高,国外饲料业和饲养业中很多人反对用抗菌素做饲料添加,这是因为抗菌素在预防性应用时,其化学残留污染肉、蛋、奶;另外,抗菌素会抑制和杀死肠道内的有益菌群,造成肠道正常菌群生态失调,导致疫病的发生,出现二重感染,有害于人畜健康.鉴于此,国内外专家学者对研究开发微生态制剂用于畜禽养殖日趋关注,从而也促进了这一产业的迅猛发展,国内用于制作微生态添加剂的主要是一些芽孢菌类和乳酸菌类,但长期以来生产成本一直居高不下,对企业的发展造成了障碍,本文阐述了如何通过对枯草芽孢菌发酵过程进行优化,来降低生产成本.     

鲈鱼枯草芽孢杆菌的分离及16S rDNA基因分析

为了鉴定从健康鲈鱼中分离纯化的一株细菌的种属,采用细菌培养特征、生化鉴定和16S rDNA基因序列分析的方法进行试验。结果表明:该菌为革兰氏阳性杆菌,有鞭毛,能运动;能利用葡萄糖、木糖、阿拉伯木聚糖、果糖、甘露醇、柠檬酸盐等,不能利用麦芽糖和丙酸盐,不形成吲哚;16S rDNA基因大小为1 462 bp,GenBank登录号为KP289263,菌株与枯草芽孢杆菌亲缘关系最近,同源性达到99%,因此确定该菌为枯草芽孢杆菌。     

枯草芽孢杆菌的分离筛选

本文基于从秸秆垛底层土壤中分离枯草芽孢杆菌的目的,为发酵秸秆提供菌株,从陕西杨凌农村秸秆垛中采取底层土样并进行分离。分离出11株菌,经过形态特征、生理生化特征等方法从中分离初步鉴定了3株疑似菌株。经对液态发酵条件的优化,对3株疑似菌进行液态发酵试验,以粗蛋白和粗纤维含量为标准,筛选出一株发酵效果最好的菌株b-1进行了16SrDNA序列分析,最终鉴定b-1菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),其同源性≥99%。     

枯草芽孢杆菌不同饲喂方式对肉鸡的影响

<正>肉鸡是我国养殖业的重要组成部分,在当前高密度养殖模式下,肉鸡免疫力和抗病力有所降低,对肉鸡的健康水平和生产力造成不利影响。传统的养殖模式主要利用抗生素来预防和治疗各种疾病。但抗生素的超量使用和滥用会导致药物残留及耐药菌株的产生,因此开发合理、有效的替抗产品对肉鸡健康养殖至关重要。     

枯草芽孢杆菌CP6抗真菌活性物质的分离纯化

枯草芽孢杆菌CP6是从宜州市南蛇山土壤中分离获得的一株可分泌抗真菌活性物质的拮抗细菌,经测定表明该菌对家蚕绿僵病原菌生长有抑制作用。为了获得其抗真菌活性物质,本研究利用甲醇抽提、离子交换层析、分子筛层析及RP-HPLC对该菌株产生的抗真菌活性物质进行分离纯化,最佳色谱条件为:乙腈:0.1%三氟乙酸水溶液=22:78(v/v),分离得到一个抗真菌活性物质组分,经UPLC验证为单一峰,即为单一活性组分。     

枯草芽孢杆菌抑菌成分研究进展

枯草芽孢杆菌因其分布广泛和对环境无公害,在农业、工业、医药卫生等行业有着广泛的应用。近年来,国内外对枯草芽孢杆菌进行了探索,其菌体在新型抑菌生物制剂中有所应用,但以其分泌的抑菌成分作为原材料的抑菌制剂目前还处在理论阶段。本文主要从四方面对枯草芽孢杆菌抑菌成分进行综述,分别为抑菌成分的分类、抑菌机制、未来可能的应用和提取方法的优化。同时,为了使枯草芽孢杆菌抑菌成分能广泛应用于食品防腐技术、食品杀菌技术等多个方面,生产大剂量、高纯度的抑菌成分成为亟待解决的问题,这需要进一步提高抑菌成分的纯度与产量的相关研究。最后,为枯草芽孢杆菌抑菌成分的未来探索提供了可行的方向。     

枯草芽孢杆菌源抗生素研究进展

枯草芽孢杆菌为革兰阳性菌,其基因组结构复杂,能产生多种抗生素,主要包括肽类物质和非肽类物质。肽类物质可分为两类,一类由核糖体途径合成,另一类由非核糖体途径合成;非肽类物质包括聚酮化合物、氨基糖和磷脂。论文介绍了已知的枯草芽孢杆菌抗生素的结构和生物合成过程,给出一些抗生素的调控途径。概述了枯草芽孢杆菌抗生素除抗菌活性以外其他的生物学活性,为枯草芽孢杆菌抗生素的研究提供参考。     

枯草芽孢杆菌细菌素研究进展

枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）是“Generally regarded as safe”(GRAS)级别益生菌种,在医药、食品、农业、畜牧业、水环境改善等方面用途很广。文章介绍了B. subtilis由核糖体合成的多肽（Bacteriocins,细菌素）的研究进展,包括其分类、结构特征、作用机理和抑菌谱,对基因组组成和Bacteriocins基因簇结构特征进行了简介,并对B. subtilis及其Bacteriocins的进一步开发利用进行了展望,为相关科研工作者提供参考依据。     

枯草芽孢杆菌B43对香蕉枯萎病菌抑菌活性及其活性成分分析

为明确拮抗菌枯草芽孢杆菌B43菌株拮抗香蕉枯萎病菌4号小种(Fusarium oxysporum f.sp. cubense race 4,FOC-4)的能力及其抑菌活性物质的性质,本研究采用平板对峙法进行抑菌谱试验;酸沉淀、有机溶剂萃取法提取B43菌株中的抑菌活性物质并作稳定性测定;根据脂肽类抗生素合成相关基因序列对B43基因组进行PCR扩增检测,运用LC-MS对粗提物作成分分析。结果表明,B43菌株对21种植物病原真菌均有较好的抑菌活性;酸沉淀法粗提物具有较好的耐热及耐紫外线特性,但不耐强酸强碱;通过特异性引物PCR检测,B43菌株基因组中含有srfAB、ituA、ituB、ituD、fenD、yndJ、sfp、mycB、lpa-14或fenB等脂肽类合成相关基因;LC-MS分析发现粗提物中含有Surfactin、Iturin、Mycosubtilin、Bacillomycin和Fengycin 5类脂肽类抗生素的同系物24种。枯草芽孢杆菌B43菌株抑菌谱广,其发酵液酸沉淀粗提物对FOC-4具有良好的抑菌活性以及较好的稳定性,本研究不仅检测推断出粗提物中含有多种脂肽类抗生素及其同系物,且于菌株基因组中扩增出多种脂肽抗生素基因,说明该菌株可能能够产生多种脂肽类抗生素。B43菌株与已报道的多数拮抗FOC-4的芽孢杆菌菌株相比,效果好、活性物质种类更多,因此具有良好的生物农药开发应用前景。