犬DEA1.1血型抗原保存的研究

本试验采用甘油化冻存红细胞及醛化固定红细胞的方法探索适合犬DEA1.1血型抗原保存方法,用3%、6%、10%、20%、30%和40%(w/v)浓度的甘油溶液保存犬DEA1.1血型红细胞,分快速冻存、程序降温两组处理,并对甘油化红细胞进行溶血情况、回收率、物理性状、保存期及抗原效价的测定;用0.25%、0.5%戊二醛,1.5%、3%甲醛和0.5%、1%多聚甲醛分别固定犬DEA1.1血型红细胞,检测犬红细胞醛化稳定性,以及醛化红细胞与新鲜红细胞DEA1.1血型抗原效价符合率。结果显示,30%浓度甘油程序降温组去甘油化后红细胞溶血率、细胞破损率最低,回收率最高且物理性状新鲜红细胞相似,抗原性与新鲜红细胞符合率可达93%,保存期可达12个月;用戊二醛醛化固定120 d的红细胞稳定性及犬DEA1.1抗原的敏感性不变,抗原滴度与新鲜红细胞的符合率可达到100%。表明30%浓度甘油的程序降温冻存与0.25%～0.5%戊二醛醛化固定都能较好保存犬DEA1.1抗原性。     

犬DEA1.1血型抗体间接Dot-ELISA检测方法建立

为了建立一个更为简单和敏感的方法,以作为不使用试剂红细胞检测犬DEA1.1血型抗体的替代方法,从犬DEA1.1阳性红细胞中分离出细胞膜。将携带DEA1.1阳性抗原的膜置于硝酸纤维素膜上,加入初级抗体和辣根过氧化物酶标记的二级抗体,采用TMB显色试剂盒检测。对照试验采用凝聚胺抗球蛋白试验检测DEA1.1抗体。用DEA1.1阳性和阴性血型抗原检测Dot-ELISA的灵敏度、稳定性和特异性。用158只犬的血清样本检测Dot-ELISA的准确性。结果显示,Dot-ELISA方法比凝聚胺抗球蛋白试验灵敏8倍以上。即使细胞膜反复冻融20次,其抗原稳定性也不受影响,并且可在-20℃时长期稳定保存。在对158只犬血清检测的过程中,该方法展现了与凝聚胺抗球蛋白试验较高的相关性。表明本研究成功建立了犬DEA1.1血型抗体Dot-ELISA检测方法,并且方法稳定、灵敏、无需试剂红细胞,可以作为输血前传统抗体检测的一种有效替代方法。     

犬DEA1.1血型抗体间接ELISA检测方法的建立

为探求减少宠物临床中犬因血型错配发生的输血反应,本试验以DEA1.1阳性红细胞膜作为抗原建立能检测DEA1.1抗体的间接ELISA方法。试验以犬DEA1.1血型为主要研究对象,提取犬红细胞膜,以DEA1.1阳性红细胞膜作为抗原,用醛化技术包被抗原,优化间接ELISA反应条件。结果显示,最佳固定剂为浓度0.062 5%和0.125%的戊二醛,最佳抗原包被量为4～8μg/孔,最佳封闭液为5%的脱脂奶粉,最佳温度为37℃,最适反应时间为90 min。与间接抗球蛋白试验相比,优化后的间接ELISA法有更高的灵敏性,本试验建立的间接ELISA方法可以对犬DEA1.1血型抗体进行高通量检测。     

犬红细胞抗原1.1血型多克隆抗体的制备与鉴定

为了制备犬红细胞抗原1.1(DEA1.1)血型多克隆抗血清,用犬血型快速检测卡分别鉴定DEA1.1阳性犬和DEA1.1阴性犬,用DEA1.1阳性犬完整红细胞免疫DEA1.1阴性犬。多次免疫后采集阴性犬血清,用抗球蛋白血凝试验验证多抗血清的符合率。结果显示,制备的多抗血清与商品化的多抗血清符合率为98%。抗球蛋白试验检测抗体血凝效价为211。试验表明,制备的犬血型DEA1.1多克隆抗体能达到血型鉴定的要求,能满足国内犬临床输血中DEA1.1血型检测的要求。     

巨犬1.1米高 世界第一

<正>《扬子晚报》消息美国亚利桑那州有只名叫"大乔治"的大丹狗,才4岁大身高就将近110厘米,脚掌甚至比人的拳头还大,远远望去常让人误     

犬血型系统研究进展

输血疗法在兽医临床的使用范围和数量不断扩大,已经发展成为一种抢救重症犬和治疗病犬的重要手段。输血疗法可以迅速补充患病犬的循环血量和体液量,维持血压,起到补血、止血、解毒、提高机体耐受力的作用。犬输血疗法在提供生命保障的同时,也会带来危险与伤害,异体输血时,血型不符可能产生输血反应,严重时可以致死患犬。论文主要对犬血型的发现历程和命名、不同血型之间的差异和生化特性以及各种犬血型输血时可能出现的反应进行综述,探讨临床上如何对犬进行安全、有效输血以及当前存在问题,最后对DEA1.1血型频率研究现状以及犬血型检测方法进行介绍。     

犬的血型与输血疗法

1 犬的血型 通过直接或间接凝集反应以及溶血反应,人们逐渐认识了犬的各种红细胞抗原.到目前为止,已报道的犬血型有红细胞抗原(DEA)1.1(A1)、红细胞抗原1.2(A2)、红细胞抗原3(B)、红细胞抗原4(C)、红细胞抗原5(D)、红细胞抗原6(F)、红细胞抗原7(Fr)和红细胞抗原8(He).     

犬肿瘤抗原和单克隆抗体的研究

肿瘤是人类及犬主要死亡原因之一,在有的地区死亡病例的三分之一为恶性肿瘤所致。肿瘤抗原比较弱,有的肿瘤可能很难检测到肿瘤特异性抗原,所以研究难度比较大。虽然,有些研究者利用肿瘤抗原研究制备出特异性单克隆抗体,但研究成果不太理想。利用免疫耐受法,选择性地杀死非肿 瘤抗原刺激活化的淋巴细胞。经过多次处理后,使小鼠失去对正常组织的反应能力,从而使抗原性较弱的肿瘤抗原产生阳性反应,出现有反应性的 Ｂ淋巴细胞。经过与 Ｓ Ｐ２／０ 细胞融合和筛选,成功地得到犬肿瘤特异性单克隆抗体。     

种公牛血型基本特性的研究

在畜牧生产中,为了记录牛的亲缘关系,美国、丹麦、法国等许多国家把血型作为家畜系谱内容之一进行鉴定和登记。例如法国每年进行近万次种公牛血型的分析登记,并鉴定其家系与亲本产奶品质的遗传性能。日本黑白花奶牛登记协会把对日本黑白花奶牛种公牛的血型检查做为登记的一项内容,不经血型鉴定国家不承认其为种牛和优良品种。在国内尚未见有关种公牛血型特性的研究报道。我们对黑龙江省家畜繁育指导站种公牛群体进     

犬吸入抗原性变态反应

吸入抗原性变态反应又称特异性或吸入变态性皮炎 ,它是一种与遗传及反应素 (主要是 Ig E)有关的自发变态反应的慢性进行性皮肤病。该病在临床上并不多见 ,笔者 1997年 8月遇一体重约 15kg的 2 0月龄黑白花牛头犬 (母 )患此病。1　症状患犬全身瘙痒 ,眼周、胸腹部 ,尤其是腋下及     

犬链球菌保护性抗原的鉴定

为克隆、表达犬链球菌(S.canis)保护性抗原基因,并对其表达产物进行免疫原性分析.本研究以Lambda ZAP Ⅱ载体构建了S.canis的3 kb～8 kb随机基因组文库,通过S.canis阳性血清筛选和质粒拯救,获得一株阳性克隆重组质粒并进行了序列测定.通过BLAST分析并与GenBank中登录的相近基因序列比较发现,该基因为S.canis的1个保护性抗原(SPASc)基因,该基因与兽疫链球菌和产脓链球菌的保护性抗原及马链球菌M蛋白基因具有一定的同源性.根据该序列设计特异性引物,经PCR扩增、克隆并进行了SPASc基因的原核表达.用纯化SPASc重组蛋白免疫兔制备的血清对小鼠具有保护性作用.     

犬新孢子虫抗原的研究进展

犬新孢子虫是专门寄生于细胞内的复顶门原生动物寄生虫。犬新孢子虫病给养牛业造成了严重的经济损失,全球已有很多国家检测有新孢子虫病,该病主要的传播方式是胎盘传播和接触传播。目前尚无有效的治疗药物和疫苗来控制该病的发生和发展,疫苗的研究是当前研究新孢子虫病的热点问题,而抗原的研究是研究犬新孢子虫病疫苗的基础。目前国内外研究主要集中在表面抗原、微线抗原及致密颗粒抗原,现综述如下。     

健康犬的生理生化值

一、犬生理生化值的研究意义 犬的生理生化值是判断犬只健康的重要依据.关于犬的血液生理生化值,不同版本书籍提供的数据各有差异,给判断犬只是否患病造成了不必要的影响.为了提高犬病诊治的能力,并给同行们提供一些参考数据,笔者对不同品种的健康犬进行了部分生理生化指标的测定.     

健康犬的生理生化值

犬的生理生化值是判断犬只健康的重要依据。关于犬的血液生理生化值．不同版本书籍提供的数据各有差异，给判断犬只是否患病造成了不必要的影响。为了提高犬病诊治的能力，并给同行们提供一些参考数据．笔者对不同品种的健康犬进行了部分生理生化指标的测定。     

多头绦虫抗原特性研究

采用等电聚集电泳（ＩＥＦ）技术,对自然感染绵羊的脑多头蚴的头节可溶性抗原、囊壁可溶性抗原和囊液抗原进行了分析,ＩＥＦ后,考马斯亮蓝Ｒ－２５０染色,扫描,结果表明,头节可溶性抗原共出现了４９个吸收峰,Ｐ＾１范围４．０４－９．９１,主吸收峰９个,其Ｐ＾Ｉ值分别为８．２３、８．０２、７．７６、７．５２、６．８５、６．５４、５．６８、５．０８和４．２３,所含蛋白总量占上样蛋白总量的９９．５％。囊壁可溶性可     

多头绦虫抗原特性的研究

用羊脑多头蚴囊液和囊壁粗抗原以１２ｍｇ／只的免疫剂量与等体积的白油－－司班佐化，分３次免疫羊。于第３次免疫后１４ｄ，经口攻击感染多绦虫卵２５００枚，攻击后２２５ｄ，剖杀检查免疫效果。结果囊壁抗原免疫组羊只全获保护，囊液粗抗原免疫组羊只（３／４）获保护，另１只间脑中有直径０．６ｃｍ钙化的多头蚴病灶，其间为干酷样物质。而感染对照组羊脑中均有多头蚴寄生，其中１只羊脑中有３个多头蚴包囊，致使羊的脑组织极度     

犬传染性肝炎病毒的形态发生学及抗原定位研究

应用免疫金电子显微镜技术研究了犬传染性肝炎病毒(ICHV)在犬肾传代细胞内的增殖过程及其病毒抗原在感染细胞内外的定位.结果显示:(1)吸附在细胞膜表面的病毒粒子,主要通过细胞吞饮作用侵入细胞,而吸附在微绒毛膜表面的病毒粒子则可直接“渗入”细胞;(2)在病毒感染不同时用的细胞核内观察到均质型、微粒型、颗粒型、副晶格型、病毒包涵体型及致密型等6种类型包涵体,其中前5种能被免疫金标记,它们是尚未形成病毒粒子的抗原蛋白、病毒装配后剩余的抗原蛋白或ICHV的病毒粒子结晶,致密型包涵体未被免疫金标记,可能是病毒DNA;(3)感染细胞内出现的某些特殊结构均不具有病毒抗原性,其中纤维样结构和管状结构在病毒增殖过程中起支持作用.