MALDI-TOF MS对河南地区鸡源沙门菌快速鉴定的研究

采集河南地区规模化种鸡场疑似沙门菌致死鸡胚和肝脏,共分离出41株沙门菌菌株;应用血清学、VITEK 2和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)方法对分离的41株沙门菌进行鉴定比较;3种方法均能鉴定出沙门菌,MALDI-TOF-MS方法能快速鉴定41株沙门菌,而且匹配度分值均大于2.300,表明鉴定结果的可信度很高。血清学鉴定的41株沙门菌血清型与MALDI-TOF-MS鉴定的沙门菌结果不一致,表明血清学分型结果和MALDI-TOF-MS分型结果没有相关性。MALDI-TOF-MS对鸡沙门菌的鉴定,操作快速简便、准确率高,为兽医微生物快速鉴定提供一种方法。     

江苏部分地区鸡胚源沙门氏菌的分离鉴定及耐药性分析

为调查江苏部分地区未出壳鸡死胚中沙门氏菌感染情况，试验通过细菌分离培养鉴定、MLST分型对来自13家种鸡场的2 433个未出壳的鸡死胚进行沙门氏菌分离鉴定，并通过药物敏感性试验确定分离株对不同药物的敏感程度和多重耐药性。结果显示：未出壳鸡死胚沙门氏菌感染率为3.00%，其中鸡白痢沙门氏菌占50.68%(37/73)、肠炎沙门氏菌占41.10%(30/73)，同时分离到少量海德尔堡沙门氏菌、科特布斯沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌，分别占4.11%(3/73)、1.40%(1/73)和2.74%(2/73)；鸡白痢沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、海德尔堡沙门氏菌、科特布斯沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌分别对应ST92、ST11、ST15、ST582和ST19型；分离株对萘啶酸、链霉素等耐药率较高，分别达86.30%(63/73)和82.19%(60/73)，对头孢他啶、厄他培南、氨曲南、阿米卡星表现为敏感，且存在多重耐药性，多重耐药菌株占71.23%(52/73)。结果表明：江苏省部分养鸡场存在一定程度的沙门氏菌感染，尤其是鸡白痢沙门氏菌和肠炎沙门氏菌，分离株耐药情况较为严重，需进一步规范抗菌药的使用。     

呼市地区鸡白痢沙门氏菌的菌型及其抗药性的调查

鸡白痢沙门氏菌流行很广,给养鸡业造成很大危害,尤其对种鸡更为严重,加之各地鸡场大量滥用药物,使此菌产生抗药性,增加了防治本病的困难。一九八七年初我们到呼市地区七个大中型种鸡场进行了鸡白痢沙门氏菌的菌型及其抗药性调查。在分离到的73株菌中,鉴定有12株鸡白痢沙门氏菌,并对此进行了试验研究,现报告如下。     

鸡源抗肠炎沙门氏菌益生菌的体外筛选

为了筛选对肠炎沙门氏菌具有抑制作用的益生菌,并对其耐酸、耐胆盐、表现疏水性及抗生素敏感性进行评价,试验采用平板倾注法分离,双层琼脂法初筛和牛津杯法复筛对肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)有颉颃作用的益生菌株,并进行生理生化试验和16S r DNA序列鉴定。结果表明:从健康鸡粪便中共分离出41株菌株,并从中筛选出有较强颉颃作用的菌株4株,其中W22菌株同时具有较强的耐酸、耐胆盐特性和较好的疏水性能,经形态、生理生化试验和16S rDNA序列鉴定确定其为卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)。说明从鸡粪中筛选得到了能有效抑制肠炎沙门氏菌的益生菌株,有望作为潜在的颉颃性饲用益生菌用于控制鸡的肠炎沙门氏菌感染。     

从病性鉴定标本分离出的沙门氏菌

作者于1976～1980年3月,5年之间在岩手县对41例家畜、家禽以下痢为主征的疾病进行了病性鉴定,对其中23例(56％)判定为沙门氏菌病。分离菌株数达161株,由鸡分离出鸡沙门氏菌和婴儿沙门氏菌;而由猪则分离出德尔比沙门氏菌,鼠伤寒沙门氏菌,利文斯通沙门氏菌及B群菌。另外从牛分离出鼠伤寒沙门氏菌及肠炎沙门氏菌,但前者占大半。从分得的沙门氏菌来看,由鸡及猪分离的菌株耐药性菌株的检出率低,其耐药型也为SM或TC单药耐药型。反之,由牛分离者全部菌株为耐药型,其耐药模型也多属多种药物耐药性,特别是AM-SA-TC三种药物耐药性菌检出的很多。     

鸡沙门氏菌脉冲场凝胶电泳分型研究

为应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)从分子水平上对禽源沙门氏菌之间的差别进行分析和研究,本研究采用自动微生物鉴定仪对12株疑似鼠伤寒沙门氏菌和15株疑似鸡白痢沙门氏菌进行了鉴定.以限制性核酸内切酶Xba I对其全基因组DNA进行酶切、PFGE分型,Info Quest FP聚类分析软件对电泳结果进行分析.结果显示,共鉴定出11株鼠伤寒沙门氏菌、1株圣保罗沙门氏菌、6株阿姆斯特丹沙门氏菌、5株亚拉巴马沙门氏菌、1株鸡白痢沙门氏菌、2株纽波特沙门氏菌和2株肠炎沙门氏菌,一共分为12个PFGE型.实验结果表明,江苏地区存在有不常见的沙门氏菌血清型,同种血清型之间的基因型差别较小(相似值为0.85～1),不同血清型之间差别较大(相似值为0.45～0.70).PFGE能从分子水平上对禽源沙门氏菌的基因组DNA进行分型.     

宽裂解谱禽源沙门氏菌噬菌体的筛选及其裂解性能分析

为了筛选宽裂解谱禽源沙门氏菌噬菌体并分析其裂解性能,本试验首先对分离自不同年份、不同地区、不同宿主来源的238株禽源沙门氏菌(C01～C238株)进行药物敏感性检测和血清型鉴定,筛选出耐药率大于60.00%的抗生素;然后采用双层平板法测定50株沙门氏菌噬菌体(NP01～NP50)对238株禽源沙门氏菌的裂解谱并统计裂解率;最后选择裂解率最高的噬菌体,进一步统计其对筛选到的抗生素耐药的沙门氏菌菌株的裂解率及对不同分离年份、分离地区、宿主来源及血清型的沙门氏菌菌株的裂解率。结果表明：238株沙门氏菌对青霉素、阿莫西林、红霉素、利福平、复方新诺明的耐药率较高,均大于60.00%;其中对红霉素的耐药率最高,为88.24%;对头孢噻肟、氧氟沙星、庆大霉素、四环素的敏感率较高,为64.71%～86.13%。在238株被检沙门氏菌中,肠炎沙门氏菌有128株,鸡白痢沙门氏菌有95株,鼠伤寒沙门氏菌有6株,伤寒沙门氏菌有2株,甲型副伤寒沙门氏菌有1株,未定型沙门氏菌有6株。在50株沙门氏菌噬菌体中,有14株对238株沙门氏菌的裂解率在80.00%以上,有17株裂解率在20.00%以下;NP17的裂解率最...     

江苏徐州市鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析

[目的]调查徐州地区鸡白痢沙门氏菌的耐药性。[方法]从徐州不同地区分离鉴定了19株鸡白痢沙门氏菌,并对19株鸡白痢沙门氏菌分离株进行了药敏试验。[结果]该地区鸡白痢沙门氏菌的多重耐药率为94.7%,多重耐药谱为PG-MY-DOX-TET-AMP的菌株百分比为42.1%,对青霉素和林可霉素耐药率为100%,而对氨苄西林、四环素和新霉素耐药率在50%以上,对头孢唑啉和强力霉素耐药率为40%~50%,对头孢氨苄和复方新诺明耐药率为20%~30%,对氟苯尼考、阿米卡星和环丙沙星未出现耐药菌株,对氟苯尼考和头孢曲松高敏菌株在80%以上。[结论]徐州地区鸡白痢沙门氏菌的多重耐药情况比较严重。     

动物源性沙门氏菌的耐药性分析及氟苯尼考类耐药基因的鉴定

为了解动物沙门氏菌的流行情况和药物敏感性及氟苯尼考耐药株的耐药基因分布,本试验对临床上疑似患沙门氏菌病的病料进行病原分离和细菌的多重PCR鉴定;采用K-B法测定分离株对23种抗菌药物的敏感性;选择氟苯尼考耐药菌株扩增floR、fexA、fexB、cfr和pexA基因。结果显示,共鉴定出61株沙门氏菌,其中肠炎沙门氏菌10株,鸡白痢沙门氏菌12株,鼠伤寒沙门氏菌39株。所有菌株对青霉素、红霉素、万古霉素耐药,90.16%对6种及6种以上抗菌药耐药。floR基因广泛存在于鼠伤寒沙门氏菌氟苯尼考耐药菌株中(8/12,66.67%),未发现其他耐药基因。研究结果表明鼠伤寒沙门氏菌是鹅源分离株中的优势血清型;floR基因主要介导沙门氏菌对氟苯尼考耐药性,但可能还存在其他机制。     

广西地区鸡源沙门氏菌的分离鉴定及耐药状况研究

为了解广西地区临床病鸡中沙门氏菌的流行情况以及沙门氏菌对常用抗菌药物的耐药状况,本研究对2014年—2015年送检的121只疑似沙门氏菌感染病鸡进行细菌的分离鉴定以及耐药性研究。结果共分离到49株沙门氏菌,包括4种血清型,其中鸡白痢沙门氏菌(S.pullorum)41株、鸡伤寒沙门氏菌(S.gallinarum)4株、鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)3株和肯塔基沙门氏菌(S.kentucky)1株。分离株对磺胺异恶唑耐药率最高,达93.9%,其次为复方新诺明、萘啶酸、阿莫西林和氨苄西林,多重耐药菌株占93.7%,分离株最多可耐10种抗生素。结果表明,自广西地区送检的病鸡中分离到的沙门氏菌以鸡白痢沙门氏菌为优势血清型,鸡源沙门氏菌的多重耐药问题比较严重。     

鸡白痢沙门氏菌病原的分离鉴定及耐药性分析

为鉴定新疆某些地区鸡白痢沙门氏菌主要流行株的流行现状和耐药情况,本研究采用平板凝集试验方法对有发病史的种鸡场进行现场检测,被检的750只鸡中,发现78例疑似鸡白痢沙门氏菌感染,运用沙门氏菌鉴别培养基、组织病理学观察和PCR方法进行确诊,并进行药敏试验。结果显示,疑似的78例鸡白痢沙门氏菌中有69例符合鸡白痢沙门氏菌的生化特性和病理学特点,PCR成功扩增出invA基因,分离率为9.2%,血清型诊断为D1型;其中分离菌对万古霉素和新霉素耐药性最高,耐药率分别为100.0%和81.2%,而对头孢曲松、克拉维酸和多黏菌素的敏感率达60.0%以上。本研究为养殖户和兽医工作者在净化鸡白痢沙门氏菌及临床用药方面提供参考。     

饲料中沙门氏菌的检测

本实验通过常规分离培养鉴定技术,对某饲料厂随机抽取的30份鱼粉样品进行了沙门氏菌的分离鉴定;结果从这些份样品中分离到四株沙门氏菌菌株,分别为鼠伤寒沙门氏菌2株,鸭沙门氏菌1株,肠炎沙门氏菌1株,阳性率为13.3%。     

浦东部分地区散养禽鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定与药敏试验

从浦东地区唐镇、合庆等镇散养禽中分离到2株鸡白痢沙门氏菌疑似菌株，经过病理解剖观察、细菌分离和生化鉴定，该疑似菌株被确诊为鸡白痢沙门氏菌。经药敏试验结果显示，2株鸡白痢沙门氏菌均表现为对卡那霉素、庆大霉素、环丙沙星和氟苯尼考产生了较强的耐药性，但对四环素、复方磺胺、氨苄青霉素、磺胺异噁唑较敏感，这为本地区鸡白痢的防控提供了依据。     

鸡源致病性沙门氏菌的分离鉴定及血清型和药物敏感性分析

为了解当前广西鸡源致病性沙门氏菌的优势流行菌株及耐药情况,掌握其最新流行特点,本试验采集疑似病鸡的组织病料,对沙门氏菌进行增菌和分离培养,运用VITEK System ATB Expression法ID 32E肠杆菌鉴定试剂条对分离菌株进行生化试验鉴定,应用玻片凝集试验进行血清型鉴定,采用ATB VET药敏试剂条对30种肠杆菌抗菌药物进行药物敏感性试验。结果显示,从310份疑似鸡病料中分离鉴定出34株致病性沙门氏菌;这些分离菌株中有A群1株、C2群1株、B群15株和D群14株,另有3株未定型,其中以B群鼠伤寒沙门氏菌和D群鸡白痢沙门氏菌为优势菌株;34株分离株均对美洛培南、亚胺培南、大观霉素和安普霉素敏感,对氯霉素、卡那霉素、庆大霉素的耐药率小于10%,对阿莫西林、链霉素、氟甲喹、噁喹酸、磺胺甲噁唑、四环素和呋喃妥因耐药率介于50%和90%之间,而对青霉素、苯唑西林、夫西地酸、利福平和甲硝唑的耐药率达到100%,并且存在多重耐药现象。结果表明,鸡源致病性沙门氏菌的流行菌株具有一定的地域性,当前广西以鼠伤寒沙门氏菌和鸡白痢沙门氏菌为主,流行菌株耐药性严重,应高度关注。     

大雁、斑头雁和天鹅源沙门氏菌血清及脉冲场凝胶电泳分型研究

为了解大雁、斑头雁及天鹅源沙门氏菌流行特征和脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型,本研究对33株沙门氏菌进行血清型鉴定,采用PFGE对其进行基因分型,并用BioNumerics 6.6软件进行聚类分析。鉴定出丙型副伤寒沙门氏菌6株、汤卜逊沙门氏菌19株、乙型副伤寒沙门氏菌1株、伊鲁木沙门氏菌1株、奥斯陆沙门氏菌1株、5株未定型。PFGE聚类分型共分为16个型别,其相似度为53.7%~100.0%,且大多数菌株与人源菌株相似度超过80%。结果表明,大雁、斑头雁及天鹅源沙门氏菌相同血清型PFGE带型高度相似,可能来自同一克隆株,不同血清型PFGE带型差别较大。     

我国部分地区鸡、猪源沙门氏菌血清型与耐药性比较

本研究将2012—2017年分离自山东等6省份的194株鸡源和89株猪源沙门氏菌进行了血清型鉴定和9大类13种药物的药敏试验。血清型鉴定结果显示:鸡源沙门氏菌血清型以肠炎(59.69%)、婴儿(13.61%)和鸡白痢(8.90%)为主,猪源沙门氏菌血清型以鼠伤寒(58.43%)、肠炎(12.36%)、印第安纳(11.24%)和德尔卑(7.87%)为主,两者优势血清型差异极显著(P0.01)。最小抑菌浓度(MIC)分布结果显示:沙门氏菌对氨苄西林、头孢噻呋、庆大霉素、大观霉素、四环素、多西环素、氟苯尼考、磺胺甲基异噁唑、复方新诺明、恩诺沙星和氧氟沙星耐药的问题较为突出,对黏菌素E的耐药率相对较低;猪源菌株比鸡源菌株耐药严重,对11种药物的耐药率均高于鸡源菌株。2种来源的分离菌株对阿莫西林/克拉维酸钾、头孢噻呋、庆大霉素、大观霉素、四环素、多西环素、氟苯尼考、恩诺沙星、氧氟沙星的耐药率差异均极显著(P0.01),对黏菌素E的耐药率差异显著(P0.05);猪源分离菌株的耐药问题较欧盟国家突出,与鸡源菌株5耐以上的菌株比例差异极显著(P0.01)。肠炎和鼠伤寒沙门氏菌对阿莫西林/克拉维酸、庆大霉素、大观霉素、四环素、氟苯尼考、磺胺异噁唑和黏菌素E的耐药率差异极显著(P0.01),对氨苄西林耐药率差异显著(P0.05)。不同年份间沙门氏菌分离株对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻呋、庆大霉素、大观霉素、四环素、氟苯尼考、复方新诺明、恩诺沙星和黏菌素E的耐药率差异极显著(P0.01),对多西环素和氧氟沙星耐药率差异显著(P0.05)。结果表明:肠炎、鼠伤寒分别是我国部分地区鸡、猪源沙门氏菌的优势血清型;沙门氏菌耐药性与动物来源、血清型和分离年份相关,且鸡、猪源沙门氏菌耐药情况比欧盟国家严重。     

某规模化种鸡场沙门菌流行病学调查和耐药性分析

试验旨在调查国内某规模化种鸡场沙门菌流行状况,为种鸡场沙门菌净化提供基础资料。1 744份样品被采集进行沙门菌分离、血清型鉴定、耐药性分析及脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法亚分型。结果显示:168株沙门菌被分离鉴定,分离率为9.63%,其中肠炎沙门菌有157株,为优势血清型(93.45%);抗生素耐药性试验表明,多重耐药现象较为严重,耐药种类在三种以上的肠炎沙门菌株有130株(77.38%);随机选取28株肠炎沙门菌进行PFGE亚分型显示,这些菌株属于同一个聚类簇,表明它们可能来自于同一克隆株。     

酒泉市肃州区生猪屠宰场沙门氏菌污染情况调查与分析

为了解酒泉市肃州区生猪屠宰场各环节沙门氏菌污染情况,2021年4—9月从肃州区2个生猪屠宰场采集210份样品进行细菌分离鉴定及耐药性分析。结果发现,共18份样品检出沙门氏菌(8.57%),其中猪肉组织样品、器具样品和环境样品沙门氏菌检出率分别为6.67%(7/105)、4.76%(2/42)和14.28%(9/63);18株沙门氏菌中共检出5种血清型,分别为鼠伤寒沙门氏菌(6株)、罗森沙门氏菌(4株)、伦敦型沙门氏菌(4株)、肠炎沙门氏菌(3株)和德比型沙门氏菌(1株)。不同血清型菌株耐药谱存在差异,但这些菌株对阿莫西林、氨苄西林和磺胺甲氧嘧啶等耐药率较高,对头孢唑林、头孢他啶等相对敏感。以上结果表明,屠宰场不同样品沙门氏菌污染情况较为严重,且菌株血清型相对复杂,不同菌株耐药谱存在差异,这可能对猪肉售卖人员和消费者健康造成威胁。     

安徽地区禽源沙门氏菌分离鉴定与耐药性研究

为了解安徽地区禽源沙门氏菌的流行菌株和耐药情况,本研究通过培养特性、镜检、生化试验、PCR和血清型鉴定等,对疑似发病禽的116份病料进行沙门氏菌分离鉴定,并采用Kindy-Bauer法对分离菌株进行耐药性分析。试验共分离到42株禽源沙门氏菌,其中包含5个大群11种血清型。B群30株、A群2株、D群7株、C₁群2株、C₂群1株,其中以B群鼠伤寒沙门氏菌为优势菌株。42株分离菌对阿米卡星、左氧氟沙星和环丙沙星的耐药率均低于20%,而对氨苄西林、链霉素、呋喃唑酮、大观霉素、复方新诺明和多西环素的耐药率达50%以上,其中对氨苄西林的耐药率达97.62%,且41株分离菌株存在多重耐药。结果表明,目前安徽地区禽源沙门氏菌优势流行株是鼠伤寒沙门氏菌,流行菌株呈现较严重的耐药性。本研究为指导临床用药及禽源沙门氏菌的综合防制提供数据支撑。     

大理州鸡源沙门氏菌的分离鉴定及耐药性分析

为了解大理州鸡群沙门氏菌的流行和耐药情况,对15份采自大理州的疑似沙门氏菌感染发病鸡的病料进行细菌分离鉴定,通过染色镜检、生化试验、血清型试验及多重PCR鉴定等确诊为沙门氏菌感染,并通过药敏试验了解分离菌株的耐药状况。结果表明：此次共分离到6株沙门氏菌菌株,其中4株为鸡伤寒沙门氏菌,2株为鸡白痢沙门氏菌;不同菌株间表现出不同的抗生素敏感性,多数菌株对强力霉素、红霉素、克林霉素、多粘菌素B、利福平产生耐药;对新霉素、四环素中度敏感;对氨苄西林、阿莫西林、头孢氨苄、头孢噻肟、头孢他啶等13种抗菌药物敏感。为大理州鸡沙门氏菌的防治提供了依据。