RT-PCR方法检测上海地区猪轮状病毒

建立了检测猪轮状病毒的RT-PCR方法,特异性强,敏感性达到10 pg。用所建立的RT-PCR方法对上海地区散养户的临床腹泻猪和规模化猪场健康猪的200份粪样进行检测。结果显示,157份健康猪样品中检出阳性样品30份,阳性率平均为19.1%,其中仔猪阳性率为6.5%(3/46),保育猪阳性率为23.1%(12/52),育肥猪阳性率为23.5%(15/59);临床腹泻猪样品43份,检出阳性样品15份,阳性率为34.9%。     

西宁地区犬棘球绦虫感染情况调查

为了了解青海省西宁地区犬棘球绦虫的感染情况,用ELISA对采自于青海省西宁地区4个县的466份犬粪进行棘球绦虫抗原检测,结果总体阳性率为6%。其中西宁市犬粪样121份,阳性3份,阳性率2.48%;湟源县犬粪样105份,阳性5份,阳性率4.76%;湟中县犬粪样123份,阳性9份,阳性率7.32%;大通县犬粪样117份,阳性11份,阳性率9.4%。结果表明西宁市区犬棘球绦虫的感染率低于郊县,说明西宁市区犬棘球绦虫感染引起注意。     

内蒙古包头市部分规模化牛场BRV流行病学调查

为了解内蒙古自治区包头市部分规模化牛场牛轮状病毒(BRV)的流行情况,在包头市部分规模化牛场采集275份血液样本和300份粪便样本,采用RT-PCR和ELISA方法对血液样本和粪便样本进行牛轮状病毒抗原和抗体检测。结果显示,BRV抗原总阳性率为21.34%,抗体总阳性率为4.00%。在检测样品中,0～2月龄犊牛的抗原阳性率和抗体阳性率均最高,分别为51.00%和10.00%,本研究检测结果可为规模化牛场牛轮状病毒的防控提供参考。     

民和县南大山林区野生动物棘球绦虫病的调查

本文采用ELISA检测法对采集民和县南大山地区的109份狼粪样、51份狐狸粪样进行了棘球绦虫病调查,结果显示,狼棘球绦虫粪抗原阳性26份,阳性率为23.9%;狐狸棘球绦虫粪抗原阳性14份,阳性率为27.5%,表明民和县南大山地区的野生动物感染棘球绦虫病。     

牦牛病毒性腹泻病PCR诊断方法的建立

采用阻断ELISA方法对来自天峻县的327份牦牛血清进行了牛BVDV特异性抗体的检测,共检出231份血清阳性,血清阳性率为70.64%。其中:在135份野牦牛血清中检出110份阳性血清,阳性率为81.48%;在192份家牦牛血清中检出阳性121份,阳性率为63.02%。从231份ELISA检测阳性血清中随机抽取了20份,采用RT-PCR方法进行检测,结果共检出18份样品为BVDV/MV RT-PCR阳性,阴性血清未扩增出E0基因,RT-PCR方法检测结果与ELISA方法符合率为90%。     

新疆犊牛轮状病毒性腹泻流行状况的调查

从新疆4个不同地区7个规模化牛场采集犊牛腹泻粪便样品274份,用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行轮状病毒检测,其中有6个牛场检出阳性,各牛场阳性率在25%～50%之间,所有样品平均阳性率37.2%.部分样品用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法进行了符合性检测,符合率为85.7%,核酸电泳带型均为标准的4:2:3:2排列,进一步明确为A群轮状病毒感染.该结果表明轮状病毒是引起新疆境内犊牛腹泻的重要病原之一.     

细粒棘球绦虫感染终末宿主检测方法的评价

对细粒棘球绦虫感染家/牧犬常用的检测方法开展比对试验,并予以评估。对人工感染细粒棘球绦虫试验犬含卵粪样在不同时段用饱和蔗糖液(1.28 g/m L)漂浮虫卵,镜检;经化学药物驱虫,收集人工感染试验犬驱虫前、后粪样,流行病学调查中收集的家/牧犬粪样,用粪抗原抗体夹心ELISA检测试剂盒检测,同时,对检出的家/牧犬阳性粪样,再用虫卵漂浮法复检;通过氢溴酸槟榔碱下泻法检查家/牧犬感染细粒棘球绦虫虫体,同时,对下泻犬粪样用粪抗原检测和虫卵漂浮法进行复检。饱和蔗糖液漂浮虫卵最佳时段为2 h,可检出虫卵量与其他时段差异显著(P0.05);人工感染犬驱虫前、后粪样经粪抗原检测,OD值差异极显著(P0.01);对12 288份家/牧犬粪样进行粪抗原检测,阳性样品991份,感染率为8.1%(991/12 288),对991份阳性粪样进行虫卵漂浮法复检,检查出54份粪样中含虫卵。经下泻法检查312只家牧犬,其中,262只犬下泻,检查出27只犬感染细粒棘球绦虫成虫;对262份下泻犬粪样进行粪抗原检测,阳性29份;对262份下泻犬粪样用虫卵漂浮法检查,仅14份粪样检出虫卵。犬粪抗原抗体夹心ELISA检测犬感染细粒棘球绦虫可及时区分驱虫前、后感染状况,其更为安全、快捷、准确。     

河南省肉牛病毒性腹泻的流行动态调查研究

从河南省15个县市的规模化肉牛场和散养户随机采取血清671份熏直肠粪拭子645份熏分别用微量细胞中和试验和双抗体夹心ELISA试剂盒检测牛病毒性腹泻/黏膜病(BVD/MD)的抗体和抗原。检测结果表明:十五个县市牛群的BVD/MD平均抗体阳性率为22.9%,其中肉牛抗体阳性率为21.0%鸦BVD/MD病毒抗原阳性检出率为7.22%～23.80%,从而证实中原地区肉牛群中已普遍存在有BVD/MD。     

我国部分地区牛轮状病毒的病原学调查及一株G10P[11]型牛轮状病毒的分离鉴定

应用轮状病毒RNA电泳方法,对内蒙古、黑龙江、新疆、北京、安徽等地共90份犊牛腹泻粪便样品进行检测.在内蒙古和新疆采集的粪样中共检出11份轮状病毒阳性样品,平均阳性率为12%(11/90).阳性样品经RT-PCR分型鉴定,新疆2份和内蒙古5份样品属于G10型,新疆另一牛场的4份样品属于G6型.对所有阳性样品进行病毒分离,获得1株能在MA104细胞上稳定传代的病毒株,经鉴定该分离株属于G10P[11]型轮状病毒,命名为HM26.G10型牛轮状病毒的分离在国内尚属首次.     

四川某猪场猪蓝耳病感染情况检测分析

为了解四川某猪场猪蓝耳病的感染和带毒情况,本试验采集未免疫过蓝耳病疫苗的3～4个月大架子猪的血液样本,用间接ELISA方法检测猪血清中的蓝耳病抗体,同时根据猪蓝耳病病毒ORF6基因设计引物,进行RT-PCR扩增。结果显示:蓝耳病ELISA抗体阳性率为63.4%(149/235);19份血液样本中,RT-PCR扩增出阳性1份,阳性率为5.26%。说明该猪场存在猪蓝耳病病毒感染,且架子猪的感染率较高,需要采取进一步防控措施。     

我国部分地区牛轮状病毒的病原学调查及一株G1OP[11]型牛轮状病毒的分离鉴定

应用轮状病毒RNA电泳方法，对内蒙古、黑龙江、新疆、北京、安徽等地共90份犊牛腹泻粪便样品进行检测。在内蒙古和新疆采集的粪样中共检出11份轮状病毒阳性样品，平均阳性率为12％（11／90）。阳性样品经RT-PCR分型鉴定，新疆2份和内蒙古5份样品属于G10型，新疆另一牛场的4份样品属于G6型。对所有阳性样品进行病毒分离，获得1株能在MA104细胞上稳定传代的病毒株，经鉴定该分离株属于G10P[11]型轮状病毒，命名为HM26。G10型牛轮状病毒的分离在国内尚属首次。     

奶牛牛病毒性腹泻病毒与冠状病毒混合感染的PCR诊断

为了对河北省石家庄市某奶牛场发病及死亡奶牛进行确诊,试验对腹泻奶牛的粪样进行了牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和牛冠状病毒(BCoV)PCR检测,同时对病死奶牛脏器样品进行BVDV、BCoV、传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛轮状病毒(BRV)及牛细小病毒(BPV)的PCR检测。试验结果显示,6份粪样BVDV阳性率为50%,BCoV阳性率为33.3%,同一份粪样中可同时检测出BVDV和BCoV两种病毒。小肠、肺脏和肝脏中均检出BVDV和BCoV,未检测出IBRV、BRV和BPV。结果表明,BVDV和BCoV为阳性,IBRV、BRV和BPV结果为阴性。最后确诊为BVDV和BCoV的单一感染和混合感染。     

新疆巴州地区犊牛腹泻病原流行病学调查

为了解巴州地区犊牛腹泻的流行情况,分别抽检114头腹泻犊牛(本地杂交黄牛、黑白花奶牛、新疆牦牛)的脏器、血清和粪便样品共342份,对脏器进行细菌的分离培养鉴定,采用ELISA方法对血清进行副结核抗体检测,对粪便进行轮状病毒、冠状病毒、病毒性腹泻/黏膜病病毒的病原检测和寄生虫的分离鉴定。结果表明:沙门氏杆菌阳性率为42.1%,大肠杆菌阳性率为38.6%,病毒性腹泻病毒阳性率为24.6%,轮状病毒阳性率为21.9%,冠状病毒阳性率为14.0%,球虫阳性率为13.2%,隐孢子虫阳性率为14.0%。肉牛、牦牛细菌阳性率显著高于病毒和寄生虫(P0.05),奶牛病毒性腹泻病毒和轮状病毒阳性率显著高于细菌和寄生虫阳性率(P0.05)。说明巴州地区犊牛腹泻主要由沙门氏杆菌、大肠杆菌引起,不同犊牛品种感染的病原有差异。     

信鸽粪便样品中四种常见病原的检测与分析

为评估某大型信鸽饲养场信鸽的健康风险,本研究对新城疫病毒(NDV)、H9流感病毒(AIV-H9)、沙门氏菌和大肠杆菌等四种信鸽常发病原进行了检测,并对其常用敏感药物的使用现状评估。从样本总量为15000只左右的某信鸽群随机采集56份新鲜粪样,对沙门氏菌、大肠杆菌进行分离鉴定,取4份用K-B法检测常用药物耐药情况;随机取24份粪便样品分别提取RNA,用针对NDVHN和F基因2对引物、AIV-H9的1对引物分别进行RT-PCR检测NDV和AIV携带情况。结果表明,NDV和AIV-H9的RT-PCR检测结果显示均为阴性(0/24、0/24);沙门氏菌检测为阴性(0/56),大肠杆菌检测阳性率为71.42%(40/56);4份大肠杆菌阳性的粪样药敏试验结果显示为头孢西丁、头孢他啶敏感,本研究对该信鸽群的养殖健康以及合理用药等方面有一定的指导意义。     

青海省互助县畜间包虫病流行病学调查分析

为了解互助县畜间包虫病流行范围与防治效果,科学指导下一阶段包虫病防治工作,本研究于2021-2022年对互助县南门峡、威远、林川等牛羊养殖量较大的乡镇开展了畜间包虫病流行病学调查。终末宿主犬采取剖检法,犬粪采用包虫抗原ELISA法检测,牛羊采取屠宰后观察脏器包囊判定,分别统计犬和牛羊包虫感染率。另外,为掌握狼、狐狸等野生动物感染情况,采集其粪便进行了粪抗原检测。结果显示,共检测犬粪样品1 860份,阳性率为0.97%,剖检犬20条,阳性率为0;检查牛脏器1 178份,阳性率为6.45%,其中自繁自育牛613份,阳性率为3.59%,贩运育肥牛565份,阳性率为9.56%;检查羊脏器2 055份,阳性率为8.71%,其中自繁自育羊1 115份,阳性率为5.92%,贩运育肥羊940份,阳性率为12.02%;检测野生动物粪便28份,阳性率为14.3%。本调查为全县包虫病综合防治和净化提供了依据。     

崇左市屠宰猪旋毛虫感染情况调查报告

用快速酶联免疫吸附法(FAST—ELISA)对全市七个县(市、区)2002-2006年的主要屠宰场采集的8201头份猪血清进行旋毛虫抗体检验,结果2002～2006年旋毛虫抗体阳性率分别为16.8%、14.7%、52.3%、23.1%、20.5%,平均阳性率为25.9%。同时,对上述血清ELISA检测阳性猪的膈肌脚肉样2128份进行旋毛虫压片镜检和集样消化法检测,结果均未发现旋毛虫体。     

吡喹酮对犬细粒棘球蚴绦虫病防治效果

本文采用剖检法和ELISA法对青海省民和县22个乡镇的6条犬进行了剖检、180份犬粪样进行了包虫粪抗原检测,以此判定犬细粒棘球蚴绦虫病防治效果。试验结果表明,与2016年相比,2017年犬细粒棘球蚴绦虫感染率为0,犬包虫粪抗原阳性率为2.7%,阳性率明显下降,防治效果显著。     

特种野猪猪瘟的流行病学调查及防控

为了解我国特种野猪猪瘟的流行情况,试验采用RT-PCR和ELISA的方法对随机从山东、安徽、河南、江苏、河北等十多个省市70个特种野猪养殖场采集样品2 100份,其中疑似病猪样品350份,进行猪瘟病原和抗体的检测。结果表明:所有样品中,猪瘟病毒RT-PCR检出阳性率为1.82%,疑似样品中猪瘟病毒RT-PCR检出阳性率为10.92%。猪瘟抗体阳性率为78.30%;疑似病猪抗体阳性率为27.80%。可见特种野猪养殖场猪瘟抗体水平较低,养殖场存在猪只带毒现象。     

正常猪血清中轮状病毒抗体的测定

用 SPA 介导 ELISA 法检测了785份健康猪血清中的抗轮状病毒抗体,其阳性率达68.3%。其中哺乳仔猪阳性率为57.7%:架仔猪为66.8%:肥猪为72.6%;母猪为83.3%。在哺乳仔猪中,以7日龄仔猪血清抗体为最高,以后随日龄增长而逐渐下降,至5周龄时为最低.6周龄后又逐渐上升。     

规模化奶牛场犊牛腹泻的病原检测与分析报告

为了调查某规模化奶牛场犊牛腹泻的发病原因,试验采用血清抗体检测、细菌分离培养、寄生虫卵镜检和病毒核酸检测方法对腹泻犊牛的血样和粪便进行了检查。结果表明,该奶牛场牛病毒性腹泻/黏膜病病毒抗体阳性率为65.00%,牛轮状病毒抗体阳性率25.00%,牛冠状病毒抗体阳性率15.00%;分离到1 株结肠弯曲杆菌和1 株空肠弯曲杆菌;所检腹泻犊牛粪便和血液样品中,4 份粪便样品和1 份血液样品检出牛冠状病毒,2 份粪便样品检出轮状病毒,1 份粪便样品和1 份血液样品检出牛病毒性腹泻/黏膜病病毒,同一份粪便样品中同时检出牛病毒性腹泻/黏膜病病毒和牛冠状病毒;通过镜检,球虫卵囊检出率77.78%,在1 份粪样中发现蛔虫卵,2 份粪样中发现其他线虫卵。该牛场流行性腹泻的原因可能为夏季高温潮湿引起犊牛免疫力下降导致的多病原体感染。