2001杨组培再生体系建立

以2001杨的春季新发嫩枝茎段、叶柄、叶片为外植体,尝试在MS和WPM基本培养基中添加多种组合激素,探索不定芽诱导、丛生芽伸长和生根最优条件,建立组织培养与植株再生系统。结果表明:MS培养基的诱导分化效果比WPM好;在MS+TDZ 0.025 mg·L^-1+6-BA 0.05 mg·L^-1+NAA 0.05 mg·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1的培养基上,不定芽诱导分化效果最好,茎段和叶柄诱导分化率可达90%,叶片诱导分化率 60%;丛生芽转入MS+KT 0.25 mg·L^-1+GA3 1.00 mg·L^-1+果糖30.00 g·L^-1的培养基中茎伸长效果最佳;每个叶片外植体诱导茎伸长的芽平均达6.4个,芽数量最多;不定芽在1/2MS+IAA 0.02 mg·L^-1+IBA 0.02 mg·L^-1+AC 3.00 g·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1培养基上形成的根条数多,生根率达90%。     

野生湖北百合不定芽诱导及再生植株的建立

为加强野生湖北百合资源保存与利用,选用黔东南州野生湖北百合为材料,选用鳞茎及茎段为外植体,探讨不同浓度激素配比对其不定芽诱导、增殖及生根的影响。结果表明:诱导不定芽的最佳培养基为MS+1.0mg·L-1 6-BA+0.5mg·L-1 NAA,但茎段诱导不定芽高于鳞片,出芽率分别为66.67%和59.63%,单块外植体出芽个数分别为2和1,且茎段污染率比鳞片的污染率低。茎段诱导最佳增殖培养基为MS+0.1mg·L-16-BA+1.0mg·L-1 NAA,增殖率为83.33%,平均增殖系数为2.11,其生长状况良好,为最佳增殖培养基。茎段诱导最佳生根培养基为1/2MS+0.3mg·L-1 NAA,诱导生根率高达93.33%,平均生根数为3.18。     

兰州百合组培快繁体系的构建

以兰州百合新鲜鳞茎为外植体,选择MS和1/2 MS培养基为基本培养基,采用正交设计研究不同消毒剂组合对外植体存活率、不同植物生长调节剂组合对愈伤组织诱导率和发芽率的影响;并用响应面法优化不同激素组合对生根率的影响。结果表明:(1)最佳消毒剂组合为75%乙醇消毒20 s+2%次氯酸钠溶液浸泡10 min,外植体成活率可达96.30%。(2)愈伤组织诱导最佳培养基配方为MS+0.3 mg·L^-1 NAA+3 mg·L^-1 6-BA,诱导率可达96.33%。(3)促进发芽的最佳培养基配方为MS+0.3 mg·L^-1 NAA+3 mg·L^-1 6-BA,发芽率可达98.00%。(4)促进生根的最佳培养基配方为1/2 MS+0.5 mg·L^-1 NAA+3 mg·L^-1 6-BA+2 mg·L^-1活性炭,生根率可达94.00%。本研究建立的组培快繁体系可用于兰州百合的快速大量繁殖,可为兰州百合组培苗的工厂化生产提供参考。     

手参愈伤组织培养及植株再生

以手参为对象,研究了外植体和植物生长调节剂对愈伤组织诱导,以及植物生长调节剂对不定芽分化及生根的影响,初步建立了其组织培养再生体系。结果表明,以茎尖外植体愈伤组织诱导率最高,在MS附加0.5 mg·L^-1 NAA的培养基上,诱导率可达60%;愈伤组织在MS附加0.1 mg·L^-1 NAA培养基上增殖效果较好;不定芽分化诱导以MS附加0.1 mg·L^-1 TDZ最高,可达53.3%,在MS附加0.1 mg·L^-1 TDZ和0.1 mg·L^-1 NAA的培养基更适合芽的增殖和生长;生根诱导以1/2MS培养基附加0.5 mg·L^-1的NAA的诱导率最高,可达30.6%。     

山桐子离体培养植株再生

以种子和叶片为外植体,研究了离体条件下外植体类型及植物生长调节剂对山桐子器官发生和植株再生的影响。结果表明:种子为诱导愈伤组织的适宜外植体; 在MS+1.0 mg·L^-16-BA +1.0 mg·L^-1 NAA +3%蔗糖+0.6%琼脂的培养基上,愈伤诱导率达96.8%; 继代培养在MS+0.08 mg·L^-1 TDZ + 1.5 mg·L^-16-BA +0.05 mg·L^-1 NAA 培养基上能成功的诱导芽的分化,诱导率达48.3%以上; 芽增殖的适宜培养基为1/2MS +0.03 mg·L^-1 TDZ +2.0 mg·L^-16-BA +0.1 mg·L^-1 NAA +3%蔗糖+0.6%琼脂,增殖系数为4.83; 在1/2MS+ 0.5 mg·L^-1 IBA +2%蔗糖+0.6%琼脂培养基上,无根苗生根率达88%。     

滇杨组织培养再生及遗传转化体系建立

【目的】建立高效的滇杨Populus yunnanensis离体叶片再生及遗传转化体系,有助于滇杨基因工程育种研究。【方法】以滇杨叶片为外植体,研究不同植物生长调节剂组合对叶片愈伤组织和不定芽诱导及生根的影响,从而获得滇杨再生组培苗;进一步以农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导法探讨菌液吸光度、侵染时间和共培养时间等对滇杨遗传转化效率的影响。【结果】滇杨愈伤组织诱导的最适培养基为1/2 MS+0.005 mg·L^-1噻苯隆(TDZ)+0.010 mg·L^-1萘乙酸(NAA),诱导率达91.7%;不定芽诱导的最佳培养基为1/2 MS+0.002 mg·L^-1 TDZ+0.010 mg·L^-1 NAA,诱导率为75.0%;生根最适培养基为1/2 MS+0.010 mg·L^-1 NAA+0.100 mg·L^-1吲哚乙酸(IBA),生根率高达96.7%,平均生根数为2.57条。利用pBI121-GUS载体转化滇杨,最适转化菌液吸光度D(60...     

火焰南天竹组培快繁体系的探讨

以观赏灌木火焰南天竹幼嫩茎尖为研究对象,研究不同灭菌时间对成活率及污染率的影响,以及不同培养基和激素浓度对不定芽诱导、增殖和生根的影响。试验表明,在无菌环境下,用70%酒精消毒5 s,再用10%NaClO灭菌12 min的灭菌效果最佳;最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+IBA 0.1 mg·L^-1+AC 1.0 g·L^-1,最高诱导率为87%;最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+IAA 0.1 mg·L^-1L +AC 1.0 g·L^-1,增殖系数最高可达5.29;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg·L^-1 +AC 4.0 mg·L^-1,生根率最高可达98%。将火焰南天竹组培苗移入泥炭土∶蛭石∶珍珠岩为8∶1∶1的混合基质中成活率较高,最高可达94%,且组培苗长势良好。     

野生湖北百合不定芽诱导及再生植株的建立

为了加强野生湖北百合资源保存与利用,选用黔东南州野生湖北百合为材料,鳞茎及茎段为外植体,探讨不同浓度激素配比对其不定芽诱导、增殖及生根的影响。结果表明:诱导不定芽的最佳培养基为MS+1.0mg·L~(-1) 6-BA+0.5mg·L~(-1) NAA,但茎段诱导不定芽高于鳞片,出芽率分别为66.67%和59.63%,单块外植体出芽个数分别为2和1,且茎段污染率比鳞片的污染率低。茎段诱导最佳增殖培养基为MS+0.1mg·L~(-1) 6-BA+1.0mg·L~(-1) NAA,增殖率为83.33%,平均增殖系数为2.11,其生长状况良好,为最佳增殖培养基。茎段诱导最佳生根培养基为1/2MS+0.3mg·L~(-1) NAA,诱导生根率高达93.33%,平均生根数为3.18。     

‘高原之火’北美海棠叶片组培快繁再生体系

以‘高原之火’北美海棠叶片为外植体,研究‘高原之火’北美海棠叶片愈伤组织的诱导及不定芽再生技术体系,并对不定芽发生过程进行组织细胞学观察。结果表明:叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+0.15 mg·L^-1 TDZ+1.5 mg·L^-1 NAA,诱导率高达80%,愈伤组织不定芽分化率达60%,每块愈伤组织芽数最高达18.8个;不定芽增殖与壮苗最佳培养基为1/2MS+0.5 mg·L^-1BA+0.5 mg·L^-1IBA及1/2MS+1.0 mg·L^-1BA+1.0 mg·L^-1IBA,增殖系数达3.4,每瓶正常不定芽数达10.2个;芽苗在1/4MS+1.0 mg·L^-1IBA+0.15%活性炭培养基上不定根诱导率最高,达86.7%;生根小苗炼苗移栽后成活率达80%;叶片不定芽诱导过程的组织细胞学观察表明,不定芽的发育起源为混合型,一种为外起源,一种为内起源,内起源为主要方式。     

金石和伯爵百合鳞茎诱导及膨大研究

为找到适应金石和伯爵百合鳞茎诱导和膨大的最适培养基及光照条件,以金石和伯爵百合的愈伤组织为材料,研究激素、蔗糖和光周期对鳞茎诱导和膨大的影响。结果表明,MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+蔗糖60 g/L是诱导愈伤组织形成小鳞茎的最佳培养基;该培养基可诱导金石组培苗叶片和根直接产生不定芽;30 g/L的蔗糖质量浓度对金石和伯爵百合小鳞茎的增质量效果均好于其他蔗糖浓度下小鳞茎的增质量效果;光环境有利于小鳞茎的膨大。研究可为金石和伯爵2个百合品种的鳞茎商业化生产提供科学参考。     

铁皮石斛组培快繁技术

以铁皮石斛茎段为外植体,探究最佳的外植体消毒方法和最适的诱导、增殖、生根培养基,进而优化铁皮石斛组培快繁体系。结果表明,最佳外植体消毒方法为30%次氯酸钠消毒10 min,外植体污染率6%,死亡率0;最适诱导培养基为基础培养基(MS)+2 mg·L^-1细胞分裂素(BA)+0.5 mg·L^-1萘乙酸(NAA),在此培养基中再生芽生长快速且健壮,诱导率为5.6;最适增殖培养基为MS+0.5 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 BA,在此培养基中丛生芽芽势健壮,生长快,增殖率为3.8;最适生根培养基为MS+0.5 mg·L^-1 NAA,在此培养条件下组培苗的平均根数达7.3条,平均根长5.8 cm,根系正常且生长快速。本研究优化了铁皮石斛组培快繁体系,可为组培快繁工厂化生产流程的进一步优化提供依据。     

山西野生卷丹百合鳞茎组织培养

以卷丹百合(Lilium lancifolium)鳞茎鳞片为外植体,探讨影响其分化的主要因素。正交试验结果表明,诱导卷丹百合鳞茎鳞片不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导鳞茎鳞片愈伤组织最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;继代培养中发现,小鳞茎在添加50 g/L蔗糖MS培养基中生长量最大,添加40 g/L蔗糖有利于愈伤组织生长,且小鳞茎生根率高,生根数量多。     

东方百合‘索邦’的离体培养研究

东方百合‘索邦’作为市售主流鲜切花百合品种,具有巨大的市场潜力。为满足市场需求,利用花器官作为初始材料,对东方百合‘索邦’离体培养涉及的愈伤组织诱导、丛生芽增殖及生根培养等相关技术进行研究。结果表明,子房为合适的初始诱导外植体,进一步扩繁诱导愈伤组织时适宜选用叶片下部或鳞茎片为外植体,合适的愈伤组织诱导培养基为MS+2.0 mg·L^-1 2,4-D+0.2 mg·L^-1 6-BA +30 g·L^-1 蔗糖+6.5 g·L^-1 琼脂,pH 5.8。丛生芽增殖培养基为MS+1.0 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA +30 g·L^-1 蔗糖+6.5 g·L^-1 琼脂,pH 5.8。生根培养基为MS+0.5 mg·L^-1 NAA +30 g·L^-1 蔗糖+6.5 g·L^-1 琼脂,pH 5.8。结果为进一步完善东方百合‘索邦’的离体培养体系,进行优质种球的规模化生产提供基础。     

唐古特瑞香愈伤组织培养与再生体系建立

以唐古特瑞香幼嫩叶片为材料,进行愈伤组织诱导与植株再生试验,以期建立唐古特瑞香再生体系,为其无性系的快速繁殖奠定基础。将幼嫩叶片进行表面灭菌后接种于初代培养基中,初代培养时,存在褐化现象,愈伤诱导前需进行除褐培养,除褐后的外植体经愈伤诱导、不定芽分化、增殖培养、生根培养和幼苗出瓶移栽的试验过程,筛选出了最佳培养方案。除褐培养基以MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+PVP 200 mg·L^-1效果较好,在此培养基上连续转移3次后褐变消失。愈伤诱导培养基为MS+6-BA 3.0 mg·L^-1+2,4-D 2.0 mgL^-1,诱导率95.5%;芽苗分化培养基为MS+ZT 2.0 mg·L^-1+TDZ 0.1 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1,分化率93.2%,平均芽数为8.66条;不定芽增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+IBA 0.3 mg·L^-1,增殖倍数为12.21,平均苗高4.81 cm;生根培养基为1/2 MS+NAA 0.5 mg·L^-1,生根数平均为3.83条,生根率为88.72%以上;组培苗移栽于珍珠岩中生长良好,成活率达90%以上。本研究初步建立了唐古特瑞香再生体系,为其无性繁殖奠定了理论基础。     

优异党参种质“凤党”离体繁殖技术

以“凤党”优株种子离体培养的无菌苗茎段为外植体，研究植物生长调节剂对其愈伤组织诱导及再分化的影响。结果表明，愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.5 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 6-BA，芽分化的最适培养基为MS+0.1 mg·L^-1 NAA+0.5 mg·L^-16-BA，生根的最适培养基为1/2 MS+0.2 mg·L^-1 NAA+0.2 mg·L^-1 IBA，愈伤组织诱导率、芽分化率及生根率分别可达91%、100%和97%。建立的离体再生植株快速繁殖体系，为“凤党”优异种质推广利用和工厂化育苗奠定了基础。     

丽江百合组织培养及再生体系建立

为我国特有易危种丽江百合(Lilium lijiangense)的种质资源保护、快速繁殖及园林应用奠定基础,以野生丽江百合鳞片为外植体,探究其最佳灭菌方法,鳞茎不同部位诱导不定芽的能力,以及不同植物生长调节剂对丽江百合愈伤组织及不定芽诱导、不定芽增殖、生根结鳞茎的影响。结果表明,丽江百合鳞片最佳灭菌方案为5%NaClO 8 min+75%乙醇30 s;鳞片分化能力为基部>中部>上部;愈伤组织和不定芽诱导最佳培养基配方为MS+2.0 mg/L6-BA+0.1 mg/L NAA;不定芽增殖最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;最佳生根结鳞茎培养基为1/2MS+0.1 mg/LNAA+0.01 mg/L IBA。该研究成功建立了一套适宜丽江百合的组织培养和再生体系。     

亚洲百合不定芽的诱导及再生植株的建立

以亚洲百合鳞茎为外植体,采用不同浓度激素组合对其进行不定芽的诱导、增殖以及生根进行研究,以期建立该种亚洲百合组织培养快速繁殖体系。试验结果表明:诱导亚洲百合不定芽的最佳培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,其出芽率为83.33%,最适宜诱导不定芽增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,其增殖率为92.75%,诱导生根的最佳培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L,其生根率为92.86%。试验结果可为亚洲百合生产扩繁、脱毒复壮、基因转化等工作提供参考。     

新铁炮百合花器官组织培养研究

以新铁炮百合的花梗、花托、花瓣、花丝和花柱(去除柱头)为外植体,进行离体培养及快速繁殖研究。结果表明,5种花器官均能直接诱导产生不定芽,其诱导能力大小为花托花梗花丝花瓣、花柱。诱导不定芽的适宜培养基为:MS+2.0mg·L-16-BA+0.2mg·L-1NAA;不定芽增殖的适宜培养基为MS+2.0mg·L-16-BA+1.0mg·L-1KT+0.2mg·L-1NAA;生根的适宜培养基为1/2MS+0.03mg·L-1NAA;适合新铁炮百合小鳞茎种植的基质为1/4园土+1/4泥炭土+1/2锯末。     

掌叶覆盆子的组织培养技术

对掌叶覆盆子进行组织培养研究,结果表明,利用茎段能诱导出不定芽,最佳诱导培养基为MS+1.5 mg·L^-1 BA+0.2 mg·L^-1 NAA,诱导率可达93.3%;最佳分化培养基为MS+2.0 mg·L^-1 KT+0.4mg·L^-1 NAA,芽生长健壮,增殖达到3.6倍;最佳生根培养基为1/2 MS+0.2 mg·L^-1 NAA,生根质量较好,平均每株生根4.8条。     

双片苣苔的离体培养

以珍稀植物双片苣苔（Didymostigma obtusum）叶片和叶柄为外植体,以MS为基本培养基,研究了外植体的消毒方式,不同生长调节剂及其组合对不定芽诱导及生根的影响,探讨不同光照、pH、叶片放置方式等因素对不定芽诱导的影响。结果表明:适量的链霉素有利于外植体消毒,叶片诱导不定芽发生的适宜培养基为MS+2.0 μmol·L^-1 TDZ+0.2 μmol·L^-1 NAA,叶柄诱导不定芽发生的适宜培养基为MS+2.0 μmol·L^-1 TDZ+1.0 μmol·L^-1 BA,pH为5.6~6.0,叶背面朝下接种有利于叶片不定芽的诱导发生,适当增强光照有利于芽苗的生长;适宜生根培养基为1/2MS+2 μmol·L^-1 IBA+2 μmol·L^-1 NAA,生根率达100%,根系生长较好;试管苗移栽到腐殖质和黄泥（2∶1）的混合基质中,置于半荫温室中,成活率达100%。