发情和乏情初产母猪下丘脑-垂体-卵巢轴差异表达基因筛选及分析

研究旨在分析发情和乏情初产母猪下丘脑-垂体-卵巢轴基因表达的差异,探讨母猪乏情调控的分子机制。选用6头健康的断奶初产母猪,分为发情组（3头）和乏情组（3头）,屠宰后分别采集下丘脑、垂体、卵巢进行转录组测序（RNA-Seq）、GO功能富集、KEGG通路及相关蛋白的Western blotting分析。结果发现,发情组下丘脑、垂体、卵巢分别获得52 432 800、52 573 730和52 209 252条clean reads,与猪参考基因组（Sus scrofa 11.1）的比对率分别为78.69%、81.49%和79.26%;乏情组下丘脑、垂体、卵巢分别获得52 516 724,52 476 820和52 195 962条clean reads,与猪参考基因组的比对率分别为82.38%、83.05%和80.20%。与发情组母猪相比,乏情组母猪下丘脑中共有710个差异表达基因,其中上调基因392个,下调基因318个;垂体中共有707个差异表达基因,其中上调基因283个,下调基因424个;卵巢中共有956个差异表达基因,其中上调基因635个,下调基因321个。3种组织中的共有差异表达基因为36个。与母猪情期调控相关的亲吻素-1（KISS1）、G-蛋白偶联受体54（GPR54）、速激肽3（TAC3）、速激肽3受体（TACR3）、17-α-羟化酶/17,20碳链裂解酶（CYP17A1）、芳香化酶（CYP19A1）、类固醇激素合成急性调节蛋白（STAR）、促性腺激素释放激素受体（GnRHR）和雌激素受体1（ESR1）基因在乏情组母猪体内显著下调（P<0.05;P<0.01）。Western blotting分析结果显示,TAC3、TAC3R、KISS1和GPR54相关蛋白在乏情组母猪下丘脑中也显著下调（P<0.05）。GO和KEGG通路分析发现,差异表达基因显著富集于正调控胆固醇酯化反应、卵巢类固醇生成、GnRH信号通路、FoxO信号等一些与类固醇激素生成和卵泡发育相关的信号通路。本研究结果表明,发情和乏情初产母猪下丘脑-垂体-卵巢轴上与情期调控相关的基因存在差异表达,尤其是Kisspeptin/GPR54和TAC3/TACR3两大系统的mRNA及蛋白表达水平在乏情组母猪下丘脑中均显著下调,推测可能是Kisspeptin/GPR54和TAC3/TACR表达受损导致了下丘脑调节功能障碍,进而导致了初产母猪乏情。该研究为揭示初产母猪乏情分子调控机制提供了重要支持,为今后利用分子技术改善母猪乏情问题提供了重要理论依据。     

乏情和发情初产母猪卵巢microRNA差异表达分析

为了探索卵巢microRNA （miRNA）在初产母猪生殖调控中的作用,本研究利用Illumina高通量测序技术检测了乏情和发情初产母猪卵巢miRNA的表达谱,并对表达量较高且差异显著的miRNA进行生物信息学分析。结果显示,本研究构建的两个small RNA文库共鉴定出503个miRNAs,其中已知的303个,新预测的200个。在已知的miRNA中,ssc-miR-10b在两个文库中的表达量最高,其次为ssc-miR-143-3p和ssc-miR-26a;在新预测的miRNA中,chr13_2637_mature在两个文库中的表达量最高,其次为chr8_9994_mature。与发情母猪相比,共有145个miRNAs发生显著变化（read counts>10,∣log₂（fold-change）∣>1）,上调114个,下调31个。在进一步筛选的31个表达量较高且差异显著的miRNAs（read counts>1 000,∣log₂（fold-change）∣>1）中,新预测的chr13_2585_mature上调倍数最高,且只在乏情母猪卵巢中表达。31个miRNAs共预测到7 388个靶基因,KEGG信号通路分析显示,有2 788个靶基因注释到了297个KEGG通路,前20个最富集的通路部分与生殖过程或生殖活动调控相关,表明这31个miRNAs参与了初产母猪的生殖调控。本研究结果丰富了猪miRNA数据资源,为进一步深入研究初产母猪的繁殖性能提供了理论依据。     

促使乏情母猪发情的简易疗法

在兽医临床中,常碰到经产母猪断奶后长期不发情,给养猪业带来一定经济损失。笔者自1995～1997年先后诊治乏情母猪38例,用已烯雌酚与V_E综合疗法,治愈率达90％以上情期受胎率,取得较好效果。现将其疗法介绍如下,供参考。 (1)临床鉴别 乏情母猪外观体健康,膘情适中,无器质性疾病,无发情的外表症状,后备母猪达到配种年龄或经产母猪断奶后长期不发情。     

乏情青年母猪的诱导发情研究

采用孕马血清促性腺激素(PMSG)、PG600及HCG+苯甲酸雌二醇分别对乏情青年母猪进行了诱导发情研究。结果表明:乏情青年母猪经上述3种激素制剂处理后,发情率分别为62.5%、85%和87.5%;情期受胎率分别为60.00%、88.24%和57.14%。与自然发情的青年母猪相比,乏情青年母猪肌注PMSG后,其窝产仔数、窝产活仔数分别提高1.2、0.9头,断奶-发情间隔缩短5.5d;而用肌注PG600的,其窝产仔数、窝产活仔数分别提高1.4、1.0头,断奶-发情间隔缩短5.6d。     

断奶母猪乏情原因分析与防治

断奶母猪发情的一般规律为:在仔猪断奶后2～7 d(经产母猪2～5 d,初产母猪3～7 d)即可发情配种.然而,生产中很多母猪在仔猪断奶后长期不发情,长者可达2～3个月,其比例可占繁殖母猪的15%左右,个别猪场可达30%以上.由于母猪断奶后推迟了发情时间,减少了母猪的年产胎次,影响了母猪的繁殖能力,造成的损失可想而知.     

夏季初产母猪乏情的原因调查

<正>母猪的乏情现象在国内外各大猪场普遍存在,且夏季高温季节,断奶母猪的乏情率要明显高于其他季节,国外引进的瘦肉型母猪出现乏情现象尤为明显,给养猪生产带来了严重的影响。笔者曾对2010-2012年间母猪繁殖数据做出分析,研究表明:7-9月份的高温组杜洛克母猪断奶后2周内发情率要比3-5月份的适温组低12.21%。引起断奶母猪乏情的原因很多,且受季节因素影响较大,本文针对浙江省某猪场夏季初产杜洛克母猪的乏情现象进行了一次调查与原因分析。     

外源生殖激素对乏情母猪诱发发情试验

1材料与方法试验动物由山东海阳市某种猪场提供。选择8月龄以上,体重(100±7·8)kg,无疾病、生殖器官发育好的长白×大约克后备乏情母猪40头,随机均分成试验组和对照组2组;选取胎次一致的断奶后20 d经公猪试情不发情的长白×大约克经产母猪40头,随机均分成试验组和对照组2组。分别进行诱发发情试验。2003年6月11日,试验组每头母猪按每100 kg体重1 000 U一次性肌肉注射PMSG。仔细观察母猪表现,当母猪开始出现发情症状时,记录时间。在母猪出现“静立反射”之后12~16 h进行第1次配种,间隔8~12 h再配1次。同时在发情配种的当天,每头颈部肌肉注…     

促使青年母猪和乏情母猪发情的方法

1断奶刺激乳腺发育及泌乳是由垂体促乳素、生长激素、促甲状腺素、雌激素、孕激素、促肾上腺皮质激素和胰岛素等共同作用的结果。另外,乳汁分泌还受吮吸对乳头的刺激强度、频率以及乳汁排出量的影响。母猪在泌乳期间血浆中促乳素的水平很高,从而抑制了促性腺激素的分泌,母猪表现为乏情状态,卵巢活动受到抑制。当断奶后,这些激素的综合作用,又使母猪迅速进入发情期。仔猪若4～5周龄断奶,一般母猪于断奶后1周左右发情。为使母猪     

繁殖母猪乏情的原因与防治

正常情况下，可繁母猪在仔猪断奶后2～7天（经产母猪2～5天，初产母猪3～7天）即可发情配种。然而，生产中许多母猪在仔猪断奶后长期不发情，长者可达2～3个月的时间，其比例可占繁殖母猪的15％左右，个别猪场可达30％以上。     

母猪乏情的防治

母猪乏情是指仔猪断奶后10-15d或长达数月仍不发情者。近年来,乏情母猪数量有不断增多趋势,导致母猪空怀期延长,年产仔数减少,养猪效益下降。所以,必须引起重视。     

生殖激素诱导乏情母猪发情的效果

母猪乏情是集约化猪场的常见问题,尤其是饲养瘦肉型品种猪和采用超早期断奶的猪场,从而给养猪生产带来了严重影响。目前,解决这一问题的常见方式是采用生殖激素人工诱导母猪再次发情。基于此,笔者采用氯前列醇钠等3种生殖激素对乏情大约克母猪进行了对比试验,结果如下。     

母猪乏情和返情的主要原因和对策

当前，在猪的繁殖方面，令养猪者十分头疼的问题是母猪的乏情和返情。所谓乏情就是不发情，后备母猪到了该发情的年龄和体重不发情，或者母猪断奶后发情推迟或不发情。返情就是配过的母猪，在一个情期（3周左右）后再发情，有的甚至屡配不孕。乏情和返情是造成猪群受胎率低、分娩率低和母猪年产胎次少的主要因素之所在。     

乏情母猪中药催情效果好

通常母猪断奶后很快就会发情，其发情出现的时间平均为断奶后7天。最早的为2天，最迟的为17天。母猪断奶后推迟发情或不发情，称为母猪乏情。具体是指经产母猪在仔猪断奶后加天内不能正常自然发情。甚至超过1-2个月还未出现发情征象。母猪乏情是目前集约化养猪场中普遍存在的繁殖障碍问题。究其原因主要是：后备母猪没有达到性成熟与体成熟。母猪初配年龄过早：母猪过肥；母猪饲料中多维、矿微与钙磷不足；母猪内分泌异常；产后感染疾病等。     

乏情母猪的催情技术

春季是母猪发情、配种的好季节,适时配种是提高母猪生产力、增加养殖效益的重要途径。所以在养殖实践中要采取有效措施,促进母猪正常发情,适时配种。     

对乏情母猪药物处理的效果观察

本文对杭州市种猪试验场2005~2006年两年长白猪183头的催情资料做了整理分析,结果表明:发情率律胎素组最高,孕马血清组其次,用卡方检验,2组间差异不显著,但与其余各组间差异显著(P<0.05);受胎率律胎素组最高,氯前列腺烯醇组其次;窝均总产仔数以PG600组最高;平均催情至发情间隔天数孕马血清加氯前列腺烯醇组最短,律胎素处理组最长;催情处理有效率律胎素组88%最高,孕马血清组62%其次;窝均总产仔数以PG600组最高。综合各项指标分析以律胎素组最好,孕马血清组其次。     

母猪乏情的原因及调控措施

<正>母猪久不发情,大大增加了养猪成本,给养殖户带来很大的经济损失,因此要想尽办法促使乏情母猪发情。导致母猪不发情的原因很多,主要与猪的遗传因素、品种、饲养管理、营养和疾病有关。     

氯前列烯醇结合孕马血清治疗初产乏情母猪的效果观察

选择浙江省农业科学院海宁科技牧场14头体况正常．外观健康无病，且断奶后1个月以上不发情的初产母猪，每头1次肌肉注射0．3毫克氯前列烯醇(PGFh，宁波激素制品厂生产，0．1毫克／支)，24小时后肌注2000国际单位孕马血清促性腺激素(PMSG，宁波第二激素厂生产，1000国际单位／支)。     

Leptin和下丘脑一垂体-性腺轴

Leptin是一种主要由脂肪组织分泌的蛋白质类激素，广泛存在于各组织、器官中。它可通过调节能量代谢来保持体脂相对稳定。近年来研究发现，Leptin作为一种代谢信号对下丘脑－垂体－性腺轴的调节功能发挥着重要作用。其可以调节胎儿胎盘和子宫代谢，可以使动物提前发情，缩短发情周期，因此，在提高动物繁殖性能上有重要的应用价值。     

LRH-A3对乏情青年母猪繁殖性能的影响

选择100头长×大乏情青年母猪,随机分为两组(试验组和对照组)每组各50头,应用外源性激素LRHA3对乏情母猪进行发情调节,比较乏情母猪的发情率、受胎率、断奶发情间隔、窝产仔数等指标。研究结果表明:LRHA3处理后,母猪的发情率、受胎率分别为93.76%和95.56%,比对照组分别提高了30.13%(P<0.01)和9.85%(P<0.05);母猪断奶发情间隔的平均天数为7.56d,比对照组缩短了7.07d(P<0.01);母猪第一胎、第二胎窝均产活仔数比对照组分别多2.11头(P<0.05)、1.94头(P<0.05)。由此可见,LRHA3对乏情母猪发情调节作用显著。     

治疗母猪乏情有诀窍

<正>笔者在生产中常常遇到一些养猪户所饲养的后备母猪或经产母猪出现不发情现象,有的养猪户甚至不得不淘汰掉高价买来的种猪,严重影响了养猪的经济效益。下面简单介绍治疗母猪乏情的常用方法,供广大养猪户参考。1公猪诱导法经常用试情公猪追爬不发情的空怀