肿瘤坏死因子a对脂代谢和能量平衡的调节作用

ＴＮＦ－ａ在肥胖型动物和人脂肪组织中超量表达,对脂代谢具有重要的调节作用。近来发现,ＴＮＦ－ａ通过降低ＬＰＬ活性、对Ｇｌｕｔ４表达的下调作用、诱导瘦蛋白的表达和引起胰岛素抗性及热作用来调节脂代谢和能量平衡。     

α肿瘤坏死因子的研究进展

α肿瘤坏死因子(TNF-α)是一种由多核巨细胞产生的有广泛生物学活性的细胞因子,具有调节机体的免疫功能和导致肿瘤细胞坏死的特性。随着对TNF-α生物学活性研究的深入,TNF-α与各种疾病的关系越来越紧密,在许多疾病的研究中都将其作为检测的重要指标。论文通过对TNF-α的基因结构、在组织中的分布、生物学功能和检测方法的叙述,为有关TNF-α在生物学和医学方面更深入的研究提供参考依据。     

肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与肥胖

肿瘤坏死因子 ( Tumor Necrosis Factor,TNF)包括由活化的单核 /巨噬细胞产生的TNF- α和由活化的 T淋巴细胞产生的 TNF- β两种。二者在细胞来源、相对分子量、等电点、糖含量等方面有很大差别。 TNF-α是一种具有多种生物学活性的细胞因子 ,由 1 40 - 1 5 0个氨基酸残基组成 ,其中有两个反平行β片层 ,每个β片层有 5个β折叠。它由 TNFRI和 TNFRII两种受体组成 ,二者胞内结构区的同源性极低 ( 2 7% ) ,可能启动不同的生物学反应。研究发现TNF- α是与肥胖相关的蛋白质之一 ,对脂肪代谢具有重要调节作用。TNF- α通过抑制进食、增加机体产热量 ;促进脂肪分解、抑制脂肪合成 ;诱导产生瘦素 ;引起胰岛素抑制、抑制前脂肪细胞分化 ;诱导前脂肪细胞及脂肪细胞凋亡等作用调节脂肪代谢和能量平衡。同时 ,TNF- α在肥胖动物或人的脂肪组织中过量表达 ,也会给人和动物机体带来很多副作用     

银杏叶多糖对雏鸡肿瘤坏死因子α和γ干扰素产生的影响

体外给1日龄雏鸡腹腔注射马立克氏病强毒株（0．2mL／只），而后注射不同浓度银杏多糖悬液，最后一次给药后48h，采雏鸡脾组织，制备淋巴细胞。生物法测肿瘤坏死因子α（TNFα），ELISA测γ干扰素（IFNT）。结果表明，一定浓度的银杏多糖能提高雏鸡脾淋巴细胞培养上清中TNFα活性，且在一定范围内呈剂量依赖关系。     

人肿瘤坏死因子α逆转录病毒表达载体的构建

应用ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔｌｌｋｓ质粒构建了含人肿瘤坏死因子－α　ｃＤＮＡ的过渡性载体ｐＢＴ１和ｐＢＴ２。用限制性内切酶ＢａｍＨＩ与ＥｃｏＲＶ消化ｐＢＴ１ＤＮＡ，分离出了ＴＮＦ－α　ｃＤＮＡ基因片段，并在其平末端加入了ＢａｍＨＩ接头。进而将带有ＢａｍＨＩ粘性末端的ＴＮＦ－αｃＤＮＡ克隆到了逆转录病毒载体ｐＺＩＰＮｅｏＳＶ（Ｘ）１５′－端长末端重复序列（ＬＴＲ）下游的ＢａｍＨＩ切点上，构建了重组质粒ｐＺＩＰＴＮＦ。该重组质粒经琼脂糖凝胶电泳，限制性内切酶消化和核酸杂交鉴定分析，证明ｐＺＩＰＮｅｏＳＶ（Ｘ）１中插入了ＴＮＦ－α　ｃＤＮＡ，并且方向正确。本研究为应用重组逆转录病毒介导ＴＮＦ－α基因转移与治疗奠定了基础。     

鸡肿瘤坏死因子-α原核表达及生物活性鉴定

为研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)免疫功能,从鸡盲肠扁桃体克隆TNF-α的CDs保守区全序列,与pGEX-6p-1载体连接构建原核表达质粒,转化大肠杆菌M109,IPTG诱导蛋白表达,经包涵体洗涤、溶解、复性、亲和柱层析获得纯化的融合蛋白,经Western-blot鉴定为鸡TNF-α融合蛋白;用CEF/VSV法和MTT法检测表明,该融合蛋白的抗病毒活性为1.2×26 U/mg,在5-6稀释度下能显著促进淋巴细胞增殖.     

肿瘤坏死因子的体外诱生及检测

试验以ＢＣＧ和ＬＰＳ为诱导物,在体外培养条件下刺激小鼠腹腔巨噬细胞诱生ＴＮＦ,培养上清对Ｌ９２９细胞具有细胞毒作用。结果显示,ＰＥＣ具有良好的体外诱生ＴＮＦ的能力,产生了并分泌ＴＮＦ的最佳条件是ＬＰＳ浓度为１μｇ／ｍＬ,培养时间为８ｈ;改良的结晶紫染色测定ＴＮＦ活性的方法具有简便,快速,易于重复等优点。     

牦牛肿瘤坏死因子-α基因部分片段的克隆测序

根据普通牛和其他哺乳动物基因的碱基序列和相关文献资料设计引物,用PCR扩增并测定了牦牛肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因的部分序列。结果表明,TNF-α基因片段(1160bp)包括外显子3～4、内含子2～3,3'侧翼区和外显子2的部分序列。通过GenBank中的Blastn序列比较分析,牦牛的TNF-α基因与普通牛种同源性高达98%。这为开展牦牛功能基因组计划和分子育种提供了理论依据。     

中药“孕宝”对子宫炎病牛肿瘤坏死因子—α含量的影响

为了探讨中药“孕宝”治疗母牛子宫炎提高受胎率的作用机理，本试验用ELISA方法测定了病牛服用中药前后血清及子宫粘液中肿瘤坏死因子－α（TNF-α）的含量（用OD值表示）。结果患子宫炎病牛子宫粘液和血清中OD值均高于健康牛。服用中药使病牛子宫粘液的OD值由0.2358±0.2821下降至0.0653±0．0267（n＝8），对照组病牛由0.2802±0.2772上升至0.3602±0.2763（n＝6）。用药组病牛血清OD值由0.6885±0.1838降至0.5328±0.1058（n＝8），而对照组无明显变化（n＝6）。这些试验表明，中药孕宝有降低子宫炎病牛炎性细胞因子TNF-α的作用。     

枸杞多糖对雏鸡肿瘤坏死因子α和γ干扰素水平的影响

考察枸杞多糖对雏鸡肿瘤坏死因子α和γ干扰素水平的影响。先给1日龄雏鸡腹腔注射马立克强毒株（0.2 m L/只）,后注射不同浓度枸杞多糖悬液,最后一次给药后48 h,采集雏鸡脾组织,分离淋巴细胞,分别以生物法和ELISA方法测定肿瘤坏死因子α（TNF-α）与γ干扰素（IFN-γ）水平。结果表明,一定浓度的枸杞多糖能提高雏鸡脾淋巴细胞中TNF-α和IFN-γ含量,且在一定范围内呈剂量依赖关系。     

犬晶状体摘除及同步植入人工晶状体肿瘤坏死因子-α和一氧化氮试验

本试验研究的目的在于研究犬在摘除晶状体后同步人工晶状体(intraocular lenses,I0L)植入后肿瘤坏死因子α(tumour necrsis factor-a,TNF-α)细胞因子、一氧化氮(nitric oxide,NO)自由基含量的试验.试验分为3组;试验第1组正常犬眼为对照组,试验2组犬眼为只进行晶状体摘除手术的组.试验3组为晶状体摘除手术后进行同步植入人造晶状体(IOL)的试验犬眼.结果:手术后3～12 d试验2组和试验3组TNF-α细胞因子、NO自由基含量明显比对照组高,以后逐渐降低;术后3～24 d.试验3组的TNF-α和NO含量比试验2组高.     

鸡肿瘤坏死因子α基因片段的分子克隆及序列测定

应用LPS诱生的鸡培养白细胞提取总RNA,参考几种动物的TNFα保守序列设计一对引物,以提取的培养白细胞总RNA为模板,通过RT-PCR扩增目的基因片段,将PCR产物与PUC19连接,转化到大肠杆菌DH52进行分子克隆,对提取的重组质粒经PCR鉴定和酶切鉴定,表明重组的基因片段是目的基因片段,其长度为576bp。     

肿瘤坏死因子体内抗瘤活性的研究

以Ｓ１８０瘤细胞株为靶细胞建立了动物肿瘤模型，分别以ＴＮＦ单用，ＴＮＦ－ＣＴＸ合用和脂质体－ＴＮＦ复合物三种给药方式，进行了肿瘤坏死因子体内抗瘤试验。结果表明，ＴＮＦ－ＣＴＸ合用，具有协同抗瘤作用，且能减轻副作用；脂质体－ＴＮＦ复合物能明显减轻ＴＮＦ的毒性反应，而不影响ＴＮＦ的抗瘤作用。     

鸡肿瘤坏死因子的理化性质研究

应用卡介苗(BCG)和内毒素(LPS)在鸡体内诱导产生肿瘤坏死因子(TNF),检测TNF在pH值5.3、7.0、8.0和在60℃、65℃、70℃各处理30min,胰蛋白酶处理30min,对L929细胞的杀伤活性。结果表明,鸡TNF在pH7.0时活性最强,其次为pH5.3,pH8.0时活性最弱。60℃、65℃各处理30 min活性不受影响,70℃和胰蛋白酶处理30 min活性丧失。     

肿瘤坏死因子α在动物脂肪代谢中的作用

肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α)是人们发展的一种能调控脂肪代谢的活性蛋白质，近年来的研究发现，ＴＮＦ－α可抑制摄食，增加机体产热量，弱化葡萄糖转运蛋白（ＣＬＵＴ）基因的表达，降低脂蛋白脂酶（ＬＰＬ）的活性，降低葡萄糖的吸收量，减少机体脂肪的生成,诱导ob基因的表达，增加瘦蛋白（Ｌeptin）生成量，还会引起机体的胰岛素抗性，从而调节机体脂肪代谢和能量平衡，同时，ＴＮＦ－α在肥胖动物或人的脂肪组织中过量表达，也会给人和动物机体带来很多副作用。     

鸡肿瘤坏死因子的理化性质研究

应用卡介苗（BOG）和内毒素（LPS）在鸡体内诱导产生肿瘤坏死因子(TNF），检测TNF在pH值5．5、7．0、8．0和在60℃、65℃、70℃各处理30min，胰蛋白酶处理30min，对L929细胞的杀伤活性。结果表明，鸡TNF在pH7．0时活性最强，其次为pH5．3，pH8．0时活性最弱。60℃、65℃各处理30min活性不受影响，70℃和胰蛋白酶处理30min活性丧失。     

肿瘤坏死因子诱导凋亡配体TRAIL的研究进展

肿瘤坏死因子诱导凋亡配体TRAIL作为肿瘤坏死因子超家族成员之一,其能和死亡受体相结合从而选择性诱导肿瘤细胞凋亡,却不会影响正常细胞,其正逐渐成为临床上新型抗肿瘤制剂。本文从肿瘤坏死因子诱导凋亡配体TRAIL何受体诱导凋亡机制入手,探讨其在临床方面的应用。     

鸡包涵体肝炎肿瘤坏死因子α的动态变化与病变相关性的研究

应用FAV-Hb株试验感染1日龄SPF雏鸡,感染后分别于第1、2、3、4、5、7、10、13、16、21、26、31、36、41、46、51、56d扑杀,采外周血和脾脏,通过微量细胞病变法经L929细胞测定其TNFα活性,并对肝脏、脾脏、胸腺、法氏囊和盲肠扁桃体做病理学检查.结果表明FAV-Hb感染后第3 d在外周血开始测出TNFα活性,以后逐渐上升,第4 d达到小的峰值,随后下降,第13 d基本消失,并持续到第16 d,从21 dTNFα活性又开始回升,第46 d时达到最高峰,以后缓慢下降.感染鸡脾脏TNFα活性的变化规律与外周血基本一致,感染后第2 d起在脾脏测出少量TNFα,第7 d出现小峰值,以后下降到基本消失,从第21 d起重新测出TNFα,并逐渐上升,在36 d到56 d持续在较高的水平.病理组织学观察证实,FAV-Hb感染后,除肝脏和淋巴组织的损伤性变化外,从第1 d到第56 d,感染雏鸡肝脏的窦壁细胞,脾脏、胸腺、法氏囊和盲肠扁桃体的网状细胞表现出不同程度的活化增生,其增生程度与外周血和脾脏TNFα活性基本一致.鸡包涵体肝炎肿瘤坏死因子α动态变化的研究表明,FAV-Hb感染后,雏鸡体内TNFα的消长规律与病变的发生发展有较明显的相关性.     

超声乳化犬晶状体和植入人工晶状体后房水肿瘤坏死因子-α和一氧化氮实验研究

本实验研究的目的在于首例研究犬在超声乳化术(phacoemulsification)后同步人工晶状体(intraocularlenses,I-OL)植入后肿瘤坏死因子-α(tumournecrsisfactor-a,TNF-a)细胞因子、一氧化氮(nitricoxide,NO)自由基含量的实验。实验分为3组;实验第1组犬眼为对照组,随机选取没有进行超声乳化的实验犬眼。实验2组犬眼为只进行超声乳化手术的犬眼。实验3组为进行超声乳化手术并同步植入人造晶状体(IOL)的实验犬眼。结果:手术后3～12d实验2组和实验3组TNF-α细胞因子、NO自由基含量明显比对照组高,以后逐渐降低;术后3～24d,实验3组的TNF-a和NO含量比实验1组、实验2组高。