鸽新城疫HB株水佐剂灭活疫苗的制备及免疫特性

为有效控制临床中赛鸽新城疫的发生,将分离到的鸽新城疫河北毒株(HB株)灭活后制备成水佐剂疫苗,并对其物理性状、安全性、毒性、最佳免疫剂量和抗体产生时间、免疫持续期和保护效果及与鸡新城疫疫苗(LaSota株)对比效果进行检测。结果显示,使用0.10%甲醛37℃灭活16 h可彻底将病毒灭活,并且对病毒的效价影响最小;制备的水佐剂疫苗安全无毒副作用,采用0.3 mL剂量免疫雏鸽后7 d,有较低水平抗体产生,21 d抗体水平达到8.1 log2,28 d达到顶峰9.0 log2;免疫30 d后保护指数为100.0;与鸡新城疫疫苗(LaSota株)进行对比发现,制备的水佐剂疫苗攻毒保护率为100%,而鸡新城疫疫苗(LaSota株)仅为30%;制备的水佐剂疫苗在4℃条件下可保存180 d,20℃条件下可保存90 d。综上,采用鸽新城疫病毒HB株制备的水佐剂疫苗可在免疫后短时间内产生有效抗体,并且在受到强毒攻击时较鸡新城疫疫苗的保护率高。     

鸽新城疫油佐剂灭活苗的研制与应用

利用当地分离的鸽新城疫病毒研制出鸽新城疫油佐剂灭活苗,疫苗接种试验鸽无不良反应,实验室小批试验免疫后20 d抗体水平达到高峰,强毒攻击的保护率为100;,抗体水平在5 log2以上可维持120 d以上,表明初步研制的鸽新城疫病毒油佐剂灭活苗可使鸽产生较高水平的抗体,有较长的免疫持续期.为保证疫苗免疫持续期达到6个月以上和油佐剂灭活苗的稳定性,工厂化生产中增加了疫苗中的抗原含量,同时改进了制苗工艺.35日龄的童鸽,按照传统习惯在断乳后仅免疫一次,鸽群免疫后180 d抗体水平仍然在7 log2以上.大量的田间试用,效果理想,对鸽新城疫的防制起到了免疫预防的作用.     

鸽新城疫油乳剂灭活疫苗的研制

鸽新城疫是流行于鸽群的一种高度接触性急性传染病,对养鸽业威胁巨大,为有效防治鸽新城疫的发生,利用鸡新城疫病毒和分离到的鸽1型副黏病毒JB株研制了鸽新城疫油乳剂灭活疫苗,并对该疫苗的安全性、免疫效力、免疫期及保存期等进行了试验研究。结果表明,该疫苗使用安全,无不良反应;疫苗注射后1周就可检测到HI抗体,4周后达到高峰,HI抗体可持续6个月;免疫后21 d、60 d、120 d、180 d,分别用F48E9株和JB株2种病毒攻毒,其保护率均在80%以上,对照(未免疫)组鸽全部死亡;在2~8℃条件下保存12个月后,性能稳定,免疫肉鸽仍有较高的免疫抗体滴度。     

水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗保存期试验研究

对-20℃保存90d、120d、150d、180d、210d、240d、300d的水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗的病毒含量以及疫苗免疫试验进行测定。结果表明,保存180d的疫苗病毒含量基本保持不变,保存240d疫苗病毒含量有所下降;疫苗免疫240d中和抗体仍在临界保护值1:40以上,确定该疫苗在-20℃条件下保存期为180d。     

犬用犬瘟热、细小病毒性肠炎、传染性肝炎和狂犬病四联疫苗研制

用CDV弱毒、CPV弱毒、CAV－2型弱毒和ERA弱研制成功了犬用四联疫苗。该四联疫苗安全可靠，免疫原性强，免疫期6个月以上。室温可保存1d，4℃可保存2周，－20℃可保存6个月。该四联疫苗免疫剂量为3ml／只，CDV、CPV、CAV－2型和ERA弱毒疫苗效价为10^6.0-10^7.5，现场应用30万只犬，抗体阳转率90％。     

禽流感疫苗免疫鸡群后HI抗体消长规律及免疫保护临界值的测定

禽流感病毒(Avianinfluenzavirus,AIV)SD-1株(H5N2亚型)接种10日龄SPF鸡胚,收获24h后死亡的鸡胚尿囊液,按照《兽医生物制品规程》制备油乳剂灭活苗,并对200只14日龄雏鸡进行免疫,免疫后每隔1周抽取20只鸡测定HI抗体,并分别选择HI抗体水平为3log2、4log2、5log2、6log2和7log2时进行攻毒。结果表明,疫苗免疫鸡群后第8周抗体达到高峰(8log2),而后逐渐下降,第16周抗体降至5log2。攻毒试验表明,能够抵抗致死剂量AIV攻击的HI抗体临界值为5log2。     

鸡新城疫LaSota株油乳剂灭活疫苗抗体消长规律的研究

用鸡新城疫LaSota株接种10日龄SPF鸡胚,收获尿囊液,经甲醛灭活后与10号白油佐剂混合乳化制成油乳剂灭活疫苗。抽取其中三批,接种14日龄非免疫鸡100羽,4d后检测抗体,以后每隔1周或2周采血检测ND-HI抗体,并于抗体水平为2log2、4log2、6log2左右时攻毒。结果表明,免疫后4d即能检测出抗体,之后逐渐上升,至第4周抗体水平达到高峰且较稳定,然后缓慢下降,150d后HI抗体降至临界值以下。攻毒结果表明,能使鸡抵抗强毒攻击的抗体临界值为6log2。     

鸽新城疫病毒的分离鉴定及灭活油乳化疫苗的研制

通过对上海及周边地区鸽新城疫的流行病学调查、临床症状、病毒分离、病毒回归鸽试验及血清学试验，证实了鸽新城疫的广泛流行。利用分离的鸽新城疫毒株研制了鸽新城疫灭活油乳化疫苗，疫苗安全、免疫效果良好，第5周达到抗体高峰7．8log2，免疫持续期较长，能有效地抵御当前流行株强毒的攻击。     

雏鸡新城疫疫苗三种不同免疫程序的免疫效力

新城疫（ND）油乳剂灭活苗与LaSota株弱毒疫苗,采用三种不同方法对试验雏鸡进行免疫,依据HI抗体滴度的检测和攻毒试验,比较了雏鸡三种不同免疫程序的免疫效力,结果表明,3种程序免疫的雏鸡60日龄时对强毒攻击均得到完全保护,对母源抗体HI滴度5．2（log2HI值）的雏鸡,2日龄用ND油乳剂灭活苗和LaSota疫苗免疫优于2日龄用ND油乳剂灭活苗免疫或10日和20日龄用LaSota疫苗二次免疫。     

ELISA法检测猪瘟抗体消长规律的试验研究

本试验采用间接ELISA方法,对猪瘟（CSF）常规免疫的仔猪CSF抗体水平进行检测。试验分A、B两组,A组首免注射4头份猪瘟兔化弱毒疫苗,B组首免注射2头份猪瘟兔化弱毒疫苗;二免两组均注射2头份猪瘟兔化弱毒疫苗。试验结果表明,注射疫苗后10d,开始产生抗体,20~30d抗体达到峰值,二免后抗体峰值维持40d以上。首免4头份的仔猪比首免2头份的仔猪CSF抗体峰值出现的早,维持的时间长。     

不同鸭坦布苏病毒病疫苗免疫效果的比较

本研究选取鸭坦布苏病毒病弱毒疫苗(ZJ407-168株、WF100株)、灭活疫苗(ZJ407株、HB株)共4种疫苗,在实验室和鸭场对不同日龄的鸭进行免疫试验,并用间接ELISA法检测免疫后不同时期的抗体。抗体检测结果发现:弱毒疫苗免疫组在免疫后2周抗体阳性率就可达到100%,而灭活疫苗免疫组在免疫后4周抗体阳性率才达90%以上。但灭活疫苗免疫组抗体持续时间长,免疫后6个月抗体阳性率还能维持在90%以上,弱毒疫苗免疫组免疫后3个月抗体阳性率已下降至60%~70%。此外,灭活疫苗免疫组检测到的抗体D值离散差异小,而弱毒疫苗免疫组检测到的抗体D值参差不齐。本研究的结果表明,弱毒疫苗免疫组产生抗体比灭活疫苗免疫组要早14 d,但灭活疫苗免疫组检测到的抗体D值整齐,持续时间较长。上述结果可为临床防疫根据不同疫苗产生抗体的特点,合理使用疫苗,制定有效的免疫程序提供依据。     

鸡新城疫疫苗预防鸽Ⅰ型副黏病毒病的免疫研究

利用鸡新城疫、鸽I型副黏病毒病可交叉免疫的共性,采用成熟的鸡新城疫灭活油佐剂疫苗连续免疫鸽,使鸽产生有效的保护抗体到8log2以上,使得种鸽持有较高的母源抗体保护乳鸽,并通过免疫试验提出了免疫程序推荐应用于鸽群。     

H5亚型禽流感灭活疫苗的研制

以H5N1亚型禽流感病毒接种鸡胚，收取鸡胚液为抗原研制了禽流感灭活疫苗，并对制苗抗原以及疫苗的物理性状、安全性、免疫效力、免疫剂量和保护期等进行了试验。结果表明，获得了较高效价的制苗抗原．灭活前后HA分别为2^10.0-11.0和2^9.0-10.0。试制疫苗物理性状符合要求，安全性良好。试验鸡在免疫14d后血清抗体达到2^7.5，210d血清HI抗体仍维持在2^5.0左右；免疫后18d使用高致病性H5亚型禽流感病毒攻毒，获得100％的保护。分别使用0．1，0．3和0．5mL免疫鸡，发现0．3～0．5mL剂量组免疫后血清抗体达到2^7.4-8.0。疫苗在2～8℃保存540d，疫苗物理性状没有改变，免疫后血清HI抗体可以达到2^7.5。这提示研制的疫苗可以有效控制禽流感H5亚型的流行。     

鸡新城疫活疫苗血清学效力检验与靶动物免疫攻毒保护结果相关性试验

为研究鸡新城疫活疫苗血清学效力检验与靶动物免疫攻毒保护结果相关性,试验分别通过血清学和免疫攻毒两种方法测定了疫苗对试验鸡只的免疫效力。结果表明,疫苗免疫鸡只的血清HI抗体效价与抗攻毒保护呈现正相关。当鸡新城疫血清HI抗体效价达到5.0 log2时,攻毒保护率为100%,此时可认为疫苗对鸡新城疫病毒达到完全保护。为保证疫苗质量,建议鸡新城疫血清HI效价5.0 log2时,可判定疫苗效力检验合格。     

减蛋综合征病毒HSH23株与AV127株免疫效力比较研究

[目的]比较本室分离EDS75VHSH23毒株与AV127参考毒株的免疫效力。[方法]采用本室制备的ND—IB—EDS（HSH23株）三联灭活疫苗和市售ND—IB—EDS（AV127株）三联灭活疫苗,分别免疫海兰褐商品蛋鸡,免后采血测定EDSHI抗体,并于免后7周用AV127株强毒攻击。[结果]免后4、7周,本室三联苗EDSHI抗体分别为8．9、8．05log2,而市售三联苗分别为7．6、5．95log2,对照鸡抗体为阴性。攻毒后,疫苗免疫鸡产蛋率始终保持90％以上,而对照组鸡产蛋率急剧下降到40％左右,蛋质量变差;攻毒后第26天对照组试验鸡产蛋开始有所恢复,产蛋率达60％,攻毒后第32～42天产蛋率约75％,仍未恢复到正常水平。统计3组试验鸡攻毒后6周内平均每只鸡的产蛋个数,本室三联苗组、市售三联苗组及对照组分别为39．48、38．41和26．60枚,每只免疫组鸡比对照组多产鸡蛋12枚。[结论]EDS76VHSH23株、AV127株均具有良好的免疫原性。     

肉鸽新城疫人工免疫初步研究

对36只试验鸽进行2次鸽新城疫弱毒疫苗免疫,一次鸽新城疫灭活疫苗免疫后,将其随机分成A、B、C三组,分别间隔2、4、8周使用灭活疫苗强化免疫,首免后定期检测抗体水平,结果表明:A、B、C三组均能保持一个高的抗体水平,均可持续6个月以上,且A组的抗体水平明显较B、C组高(P<0.01),根据我们所监测的抗体水平及经济实用的原则,我们推荐C组的免疫程序作为杨凌地区鸽新城疫的参考免疫程序,即:对鸽群进行2次鸽新城疫弱毒疫苗免疫、一次鸽新城疫灭活疫苗免疫后,分隔8周使用灭活疫苗强化免疫1次。     

猪细小病毒病弱毒疫苗的保存期试验

将2批猪细小病毒病弱毒疫苗分别在2—8℃保存11个月、12个月、13个月,-20℃保存22个月、24个月、26个月,进行物理性状、无菌检验、支原体检验、外源病毒检验、安全试验及免疫效力试验,探讨不同保存条件和保存期对疫苗的影响。结果表明:物理性状、无菌检验、支原体检验、外源病毒检验均符合《中国兽药典》的要求。安全试验每批次疫苗接种乳鼠全部健活;以10头份/头的剂量接种PPV HI抗体阴性猪,接种后定期采集血样和鼻肛分泌物进行病毒分离,结果均为阴性。疫苗在2—8℃保存至13个月,-20℃保存至26个月TCID_(50)均≥10~(6.25)笛/头份;接种PPV HI抗体阴性豚鼠抗体全部转为阳性;疫苗免疫PPV HI抗体阴性猪,免疫后1个月、7个月分别用PPV强毒攻击获得100%保护。     

鸭禽流感疫苗免疫程序研究报告

为了科学制定鸭的禽流感疫苗免疫程序,进行了以下三方面的试验:①不同品种雏鸭母源抗体消长情况测定.结果表明,5～7日龄雏鸭AI-HI抗体可维持较高水平,15～17日龄下降至4.0log2以下.②疫苗首免后抗体检测.结果表明,鸭首次免疫后2周可测出AI-HI抗体,4周时达到高峰;抗体水平持续4周后开始下降.肉鸭免疫一次抗体水平差异较大,不能完全预防禽流感的发生.③肉种鸭及蛋种鸭免疫程序及抗体消长规律的测定.结果表明,7～14日龄初免,60日龄二次免疫和120日龄加强免疫(三次免疫),种鸭的AI-HI抗体水平最高分别可达到9log2、11 log2,二次免疫后8个月其AI-HI平均抗体水平为5.6 log2,三次免疫后10个月其AI-HI平均抗体水平为7.6 log2以上.     

禽流感免疫抗体消长规律研究

用禽流感(AI)灭活疫苗免疫120日龄蛋鸡后,分别于30,50,70,90,110,130d检测AI-HI抗体。检测结果表明,30dAI抗体为5.0log2;70d为7.11log2,抗体效价达到最高值;到90d,AI抗体效价为6.12log2,开始下降;110dAI抗体效价降至4.65log2;120dAI抗体效价已降到临界值以下,为3.2log2。AI灭活疫苗免疫期在120d以内。     

禽流感双乳相灭活疫苗的研究

用AIVH5N1和H9N2毒株作抗原,采取分步乳化法制成双乳相灭活疫苗。经无菌检验、稳定性和安全性试验,疫苗A和C符合兽用生物药品规程的要求,经免疫效力和保护力测定,疫苗可于免疫后3～5d产生HI抗体,9～14d抗体达高峰值,其中H5N1的HI抗体可达9log2以上,H9N2可达11log2以上,疫苗保护力与常规疫苗相近,但产生保护力的时间明显提早;疫苗在4℃条件下,保存期可达1年,免疫期为6～9个月。