转cry1Ac和CpTI双基因抗虫水稻对二化螟和大螟的致死效应及田间螟虫构成的影响

 就转cry1Ac＋CpTI双基因抗虫水稻不同生育期对二化螟Chilo suppressalis和大螟Sesamia inferens的室内致死特性及田间螟虫的构成进行了研究。室内测定结果表明，不同生育期转基因水稻对二化螟、大螟都表现明显的致死效应，但水稻生长后期的致死效果降低。转基因水稻对大螟的致死效应显著弱于对二化螟的，其中，二化螟除在齐穗期和成熟期有少量幼虫（0.5%~6.4%）存活到第4天外，其余均在第4天死亡；大螟在两种转基因水稻上的存活率高于二化螟，且少量个体（<1.6%）还能化蛹、羽化，但化蛹率和羽化率均明显低于在非转基因对照上的。早、晚两季水稻的田间调查结果表明，转基因水稻上两种螟虫虫口数量均显著低于相应的非转基因对照品种，转基因水稻上二化螟虫口减退率>99％；大螟虫口减退率相对较低，早、晚稻上有所不同，其中早稻 >93％，晚稻仅44％～64％。转基因水稻上残存螟虫中，大螟所占比例明显上升，推测转基因水稻对两种螟虫致死效应差异可能是其主要原因。     

转sck/cry1Ac 双基因抗虫水稻对二化螟和稻纵卷叶螟的抗虫效果

通过室内测定和田间观察 ,就转sck/cry1Ac双基因抗虫水稻MSB和MSA对我国主要水稻害虫二化螟和稻纵卷叶螟的抗虫效果进行了研究。室内离体植株测定结果表明 ,MSB、MSA高抗两种害虫 ,抗性水平受水稻苗龄影响。 6 5～71d苗龄水稻上害虫校正死亡率达 98.9%～ 10 0 % ,10 5～ 10 9d时抗性水平有所降低 ,但除MSB对二化螟的校正死亡率 (仍达 79.3% )降低明显 (P <0 .0 5 )外 ,MSA对二化螟及MSB、MSA对稻纵卷叶螟的校正死亡率 (92 .8%～ 98.1% )均无明显下降(P>0 .0 5 )。选取MSB进行的田间实验进一步明确 ,MSB对两种害虫有显著控虫效果 ,抗性水平与抗虫对照克螟稻 1号(含cry1Ab)无明显差异(P >0 .0 5 ) ,且略优于施药亲本明恢 86。相对于未施药明恢 86 ,MSB对两种害虫的防治效果分别为 92 .6 %、97.3% ,施药明恢 86则分别为 87.7%、89.8%。     

基因枪介导法获得转BtCry1Ac基因抗虫玉米植株的研究

利用基因枪介导法将含有Cry1Ac基因的质粒转入玉米愈伤组织,获得转Bt基因玉米植株,对所获得的转基因植株进行PCR分析和金标免疫试纸鉴定。结果表明,部分转化植株呈阳性,说明目的基因已经整合到玉米基因组中。将转基因植株自交获得T1代种子,对T1代植株进行田间抗虫鉴定,结果表明,与对照相比转基因玉米植株的抗虫活性明显强于非转基因植株。     

氟虫腈亚致死剂量处理对二化螟和大螟幼虫体内解毒酶系活力的影响

氟虫腈对二化螟Chilo suppressalis (Walker)和大螟Sesamia inferens (Walker)幼虫的LD50值各为0.1749 μg/g和10.1352 μg/g。经氟虫腈亚致死剂量（LD15）处理后,二化螟和大螟幼虫羧酸酯酶（CaE）和谷胱甘肽S 转移酶（GST）的比活力和最大反应速率（vmax）均显著增强,而多功能氧化酶（MFO）则显著降低。二化螟CaE和MFO的米氏常数（Km）经氟虫腈处理后均显著增高,而GST的无显著变化;大螟CaE、GST和MFO的Km均极显著降低。这表明氟虫腈在二化螟和大螟幼虫体内的代谢途径可能存在较大差异,而2种螟虫体内解毒酶对底物亲和力的不同可能导致两者对氟虫腈敏感性的差异。     

转cry1Ab基因水稻对拟水狼蛛捕食作用间接影响的评价

室内评价了拟水狼蛛(Pirata subpiraticus)对取食转[i]cry1Ab[/i]基因水稻的稻纵卷叶螟([i]Cnaphalocrocis medinalis[/i])幼虫和褐飞虱([i]Nilaparvata lugens[/i])若虫的捕食量及功能反应。结果表明,拟水狼蛛对这2种猎物的捕食功能反应均符合HollingⅡ型圆盘方程。该蜘蛛对取食转[i]cry1Ab[/i]基因水稻的稻纵卷叶螟幼虫的捕食量和处理时间低或短于取食对照的,但差异未达显著水平,而瞬时攻击率显著低于对照。该蜘蛛对以转[i]cry1Ab[/i]基因水稻为食的褐飞虱若虫的捕食量、瞬时攻击率和处理时间与取食对照的相比有一定的变化,但差异均不显著。综合考虑,认为转[i]cry1Ab[/i]基因水稻对拟水狼蛛捕食作用无明显的负作用。     

转cry 1Iem基因大豆的培育及抗虫性检测

以大豆子叶节为外植体,应用农杆菌介导法,将抗虫(cry1Iem)基因转化大豆.筛选标记为bar基因.经Glufasinate筛选,获得大量抗性植株.对转基因T_0、T_1、T_2代植株进行PCR检测,初步证明cry1Iem基因已经整合到大豆基因组中.对T2代PCR阳性植株幼嫩豆荚,采用圆盘分隔法接人初孵幼虫,进行初步的抗虫性检测,得到1株具有明显抗虫效果和7株抗虫效果较好的转基因植株.     

转Cry1Ac+Cry2Ab基因棉花对天敌生长发育的影响

以转Cry1Ac基因棉和常规棉品种为对照,系统研究了转Cry1Ac+Cry2Ab棉花对小花蝽、龟纹瓢虫和中华草蛉生长发育的影响.结果表明,和常规棉品种相比,饲喂取食转Cry1Ac十Cry2Ab基因棉和转Cry1Ac基因棉品种叶片的棉铃虫初孵幼虫使各天敌不同龄期的生长发育历期均有所延长,前者延长的历期短,后者延长的历期长,但差异均未达显著水平.     

转Cry1Ac+Cry2Ab基因棉花对天敌生长发育的影响

 以转Cry1Ac基因棉和常规棉品种为对照,系统研究了转Cry1Ac+Cry2Ab棉花对小花蝽、龟纹瓢虫和中华草蛉生长发育的影响。结果表明,和常规棉品种相比,饲喂取食转Cry1Ac+Cry2Ab基因棉和转Cry1Ac基因棉品种叶片的棉铃虫初孵幼虫使各天敌不同龄期的生长发育历期均有所延长,前者延长的历期短,后者延长的历期长,但差异均未达显著水平。     

转反义vp1基因水稻再生苗的获得及分子鉴定

应用超级双元载体和农杆菌介导转基因技术,试图将反义vp1基因引入到容易穗萌的保持系冈46B和容易诱导愈伤组织的籼稻品种R893与容易转化的粳稻品种粳16中,结果冈46B获得再生苗41株,R893获得再生苗43株,粳16获得再生苗26株.经PCR检测,仅粳16中有2株携带潮霉素抗性基因,其中1株携带反义vp1基因;冈46B和R893中未能获得转基因再生苗.     

水稻穗期大螟药剂防治技术探讨

为有效控制水稻穗期大螟的危害,笔者针对性地开展了不同药剂、喷液量和用药时间等田间试验示范。结果表明,氯虫苯甲酰胺、稻丰散、阿维·二嗪磷、阿维·三唑磷、阿维·杀螟松、乐果·三唑磷和唑磷·敌百虫等对大螟均具有理想的防治效果,可作为水稻穗期大螟的防治药剂。其中,氯虫苯甲酰胺和稻丰散不仅在大螟卵孵期使用效果好,而且对低龄幼虫的杀灭效果也较明显。在常规喷雾施药时,每hm2的喷液量以1 000 kg较为适宜。大螟偏重发生时,宜在卵孵始盛与高峰期连续用药2次,必要时,在低龄幼虫高峰期或田间危害始见期,再复查补充用药1次。     

稻螟赤眼蜂防治水稻二化螟效果初探

为验证人工释放赤眼蜂对水稻二化螟的防治效果,笔者于2012年开展了相关试验示范。蛾始盛期开始放蜂,放蜂面积6 670 m2,3次放蜂,总放蜂量30万头。试验结果表明,放蜂田虫伤株率2.63%~3.84%,加权平均为3.28%;防控效果为77.30%~84.73%,加权平均为79.62%。科学放蜂对控制水稻二化螟、保护水田的生态环境以及提高稻米品质有重要意义。     

路明卫拌种处理对水稻生长和防治二化螟的效果

水稻生产中,二化螟的抗药性问题日益突出,为害逐年加重。路明卫是一种防治水稻螟虫的悬浮种子处理剂,其主要成分是50%氯虫苯甲酰胺。为合理安全使用该农药,达到预期防治效果,开展了路明卫种子包衣处理对水稻发芽、出苗、秧苗素质以及二化螟防效的田间试验,同时进行了田间示范验证。结果表明,路明卫安全可靠,用其(10 m L/667 m²)处理干谷或芽谷,不影响种芽的伸长、种子发根和秧苗素质;且省工高效,用路明卫拌种后可减少水稻分蘖期间(播种至播后60 d)1次二化螟农药防治,不增加水稻枯鞘、枯心的发生,还表现出显著的抗卷叶螟优势。     

印楝素对水稻二化螟的生物活性及控制作用

 系统地研究了印楝素对水稻二化螟的生物活性及作用方式。试验结果表明，印楝素乳油对二化螟有胃毒、拒食、忌避、内吸等多种作用方式。0.75和0.50 mg/L印楝素乳油处理茭白饲喂3龄幼虫，幼虫分别于3、6 d内全部死亡；0.375、0.300和0.250 mg/L印楝素乳油低剂量处理茭白饲喂3龄幼虫，幼虫拒食率分别达94.38%、88.74%、80.07%；成虫产卵量分别下降80.70%、62.05%、40.86%。6、3和2 mg/L印楝素乳油处理初孵蚁螟，24 h内死亡率达100%。印楝素乳油对成虫产卵有显著的忌避作用。稻田喷施0.3%印楝素乳油62.5和125 mL/667 m2防治二化螟，21 d保苗效果分别为88.14%和94.13%，防治效果分别为85.36%和90.76%。表明印楝素对二化螟有较高的生物活性和理想的控制效果。     

快速冷耐受对水稻二化螟滞育幼虫的生理效应

 为从生理生化水平上探讨快速冷耐受(RCH)对二化螟滞育幼虫的生理效应,分别对正常饲养(CK)、非快速冷耐受(NRCH)和RCH处理过的二化螟幼虫的水分、脂质、总糖、小分子碳水化合物含量及SOD、POD、CAT活性进行了测定。结果表明,RCH处理组水分含量较对照组显著下降,POD活性对照组显著上升,脂质、总糖、海藻糖、葡萄糖、甘油含量及SOD和CAT活性无显著差异;NRCH处理组水分含量较对照组显著降低,而POD活性则显著下降,其余未见显著变化;RCH处理组仅见POD活性较对照组显著增加。由此可见,RCH处理对二化螟滞育幼虫体内水分和POD诱导效应显著。     

5—氮胞苷介导的转基因cry1Ab的阶段复活及其对水稻的生物学效应

用不同浓度的和5－氮胞苷溶液配合不同时间处理了发生的在转录水平的转基因cry1Ab沉默水稻。结果表明，5－氮胞苷处理能使8％－30％转基因水稻植株的转基因cry1Ab恢复表达活性，复活性基因表达的Cry1Ab蛋白含量可达0.147％，45mg/L5-氮胞苷处理1d可使转基因cry1Ab的复活率及Cry1Ab蛋白含量达最高。同时，5－氮胞苷处理使转基因水稻植株出现矮化，分蘖数、单株粒重下降，穗长减小及开花期延迟等发育异常现象。5－氮胞苷作为一种弱诱变剂在克服转基因沉默及创造具优良农艺性状的转基因植物中具有一定的应用价值。