链霉菌Js-1T发酵条件及其对疣孢霉病的防治效果研究

[目的]探讨链霉菌Js-1T的发酵条件及防治效果。[方法]通过单因素试验优化链霉菌菌株Js-1T防治疣孢霉病的发酵培养基和条件,测定其发酵液对疣孢霉菌(Mycogone perniciosa)的田间防治效果。[结果]Js-1T菌株的最佳培养基配方为:甘露糖30.0 g,KNO32.0 g,Mg SO41.5 g,K2HPO41.0 g,Na Cl 0.1 g,水1 000 ml;最佳发酵条件为:30℃,p H=8,250 ml三角瓶装液量为100 ml。发酵液对疣孢霉菌的田间防治效果显著,对Ⅰ类、Ⅱ类、Ⅲ类3个类群疣孢霉菌引起的疣孢霉病的防治效果分别达68.77%、83.84%、85.62%。[结论]链霉菌Js-1T在疣孢霉病防治上具有很好的应用前景。     

一株高产果胶酶菌的分离及其产酶条件的优化研究

[目的]挖掘新的高效产果胶酶菌株,为优化苎麻生物脱胶技术奠定基础。[方法]从沤麻池的厌氧泥、腐败的麻、苎麻园土壤中分离高产果胶酶菌株,在果胶平板上筛选、复筛选其中生长速度快、透明圈大、高产果胶酶的菌株,对其发酵培养基的初始pH值、发酵温度、发酵时间及接种量进行优化。[结果]获得了8株高产果胶酶的菌株,其中HY11产果胶酶活最高;该菌株在pH值为6、温度为35℃、时间为30 h、2.0%菜籽饼为碳源、1.0%NH_4H_2PO_4为氮源的培养基中为最佳发酵条件,果胶酶活力达到453 U/mL,比优化前提高了33.52%。[结论]获得了高产果胶酶菌株HY11,优化后的条件大大提高了其产酶活力。     

被孢霉菌株L8诱变及其发酵条件的研究

本研究采用二联吡啶作为诱变剂,诱导被孢霉菌株Ｌ８突变,筛选高产不饱和脂肪酸的突变株Ｌ８３,碘值最高达８０．２,比出发菌株提高１５．９％。经过培养基和培养条件的调整,进一步提高碘值到１０２．３,提高了２７．５６％,经气相色谱ｒ－亚麻酸含量达７．０％,较理想的培养基及培养条件为：麦芽糖５％、尿素０．６８、ＫＨ２ＰＯ４０．３％,ＣｕＳＯ４ ２．５ｍｇ／ｋｇ,ＣａＣｌ２１００ｍｇ／ｋｇ、ＦｅＳＯ４２００ｍ     

果胶酶高产菌的筛选及发酵条件的优化

采用平板分离法从腐烂的大枣中筛选出果胶酶的高产菌株,通过L16(45)正交试验对该菌种的深层液体发酵条件进行优化.结果表明:该菌种深层液体发酵最适的发酵条件为葡萄糖添加量1%,蛋白胨0.5%,吐温-60添加量0.03%,发酵培养基初始pH值4.5,发酵温度40℃,在此条件下菌株的产酶能力可以达到10758U·mL-1.     

加利利链霉菌AF1产孢条件的优化

【目的】筛选加利利链霉菌(Streptommyces galilaeus)AF1菌株孢子的最佳培养条件。【方法】利用固体发酵法,首先采用单因素试验对培养加利利链霉菌(Streptommyces galilaeus)AF1菌株的固体产孢基质大米、玉米粉、木薯渣、黄豆粉、麸皮、麦片进行筛选,然后研究培养时间、温度、料液比、接种量、外加碳源、外加氮源对加利利链霉菌AF1产孢量的影响。在单因素试验的基础上,采用正交试验对AF1菌株的产孢条件进行优化。【结果】筛选的最佳固体产孢基质为大米。优化得到的最佳培养条件为培养温度28℃,培养时间6d,接种量10%(每20g大米接种2mL孢子悬液),初始料(g)液(mL)比为1∶1,葡萄糖添加量1.5%(质量分数),蛋白胨添加量1.5%(质量分数)。在最佳培养条件下,加利利链霉菌AF1产孢数可达3.87×109 g-1,比优化前提高了29%。【结论】在优化培养条件下得到的加利利链霉菌AF1产孢水平高,能适应大规模培养接种体的要求。     

响应面法优化黑曲霉（Aspergillus niger）SW06 产果胶酶发酵培养基条件

对果胶酶高产菌株黑曲霉(Aspergillus niger)SW06进行液体发酵工艺条件优化.首先采用单因素试验设计果胶酶发酵的最适温度和pH值,并筛选了最适的碳源、氮源和无机盐.在此基础上,采用中心组合设计进行回归分析及响应面分析,确定培养基的最佳组合.结果表明,果胶酶发酵的最适温度为28℃,最适pH值为5,最适碳源、氮源分别为果糖、蛋白胨.回归分析得到的优化发酵条件为:100 mL培养基中含果糖4.89 g、蛋白胨0.50 g、果胶0.60 g.在最优条件下发酵,果胶酶活最高可达4 175.65 U/mL.     

根霉菌ZJ-8产纤维素酶液体发酵条件优化

以稻草粉为主要原料,通过单因素和正交试验对根霉菌ZJ-8液体发酵产纤维素酶的最佳工艺条件进行优化.研究结果表明:以5.0%稻草粉为碳源,3.0%豆饼粉为氮源,250 mL三角瓶装液量60 mL,接种量5.0%,培养温度30 ℃,初始pH值5,培养120 h,产酶活力最高,CMC酶活为14.72 U/mL.     

微孢根霉产凝乳酶的发酵条件优化

筛选得到一株高产凝乳酶的菌株F518,鉴定为微孢根霉。通过单因素试验优化了微孢根霉F518液体发酵产凝乳酶的发酵条件。结果表明:发酵产酶的最适碳源为酒糟,最适氮源为酵母浸粉,培养基最适初始pH为5.0。在优化后的发酵条件下30℃培养72h,微孢根霉F518产凝乳酶活性最高,达到1 001SU/mL。微孢根霉F518在凝乳酶生产方面有很大的应用前景。     

侧孢芽孢杆菌HBL-26发酵条件的优化研究

为对拮抗菌株HBL-26的发酵培养基进行优化,通过正交试验设计对发酵液的4个单因子进行优化筛选,经软件分析后确定发酵培养基最佳配方为:葡萄糖6g.L-1、牛肉膏14g.L-1、NaCl 6g.L-1、MnSO40.05g.L-1。同时,得到回归方程:Y=5.34 X1-1.72 X2+14.44 X3-6.43 X4+8.35,其标准差S=14.23;F=4.202;显著值Sig.=0.019<0.05。最后通过单因子试验对菌株HBL-B26的发酵条件进行了优化,确定的最优培养条件为:培养基初始pH 8、发酵温度30℃、发酵最佳时间为48h。     

一株碱性果胶酶产生菌的筛选、鉴定及发酵条件优化

采用平板分离结合刚果红染色法从野生苎麻土壤中分离得到1株果胶酶产生菌Lys-5304。经形态观察和16S r DNA测序鉴定,该菌株鉴定为欧文氏菌(Erwinia amylovora)。通过单因素试验和响应面分析,该菌产果胶酶的最优条件为:葡萄糖3.0 g/100 m L,菜子粕0.2 g/100 m L,接种量1.5 m L,培养基起始p H 8.0,摇床转速180 r/min,发酵周期为72 h,培养温度为37℃。在此条件下,该菌的果胶酶活力达到1 021.33 U/m L,具有一定应用潜力。     

橘皮果胶酶高产菌株的筛选与产酶条件的优化

为合理利用橘皮进行工业化提取果胶酶,采用平板分离法进行果胶酶高产菌株的筛选与产酶条件的优化。结果表明:经过初筛和复筛分离得到1株果胶酶的高产菌株,根据形态特征观察初步鉴定其为黑曲霉。其固态发酵最优产酶条件为:橘皮粉0.5g,硫酸铵0.20g,麸皮10g,水10mL,28℃培养3d,在此条件下,该菌株的酶活力可达到1 447.86U·mL-1。     

毕赤酵母重组菌GS115-Ch-Glu发酵培养基设计及发酵条件优化

以毕赤酵母重组菌(Pichia pastoris)GS115-Ch-Glu为研究对象,进行了亚麻子发酵脱毒工艺的研究,并对重组菌的发酵培养条件进行优化。结果表明,毕赤酵母重组菌GS115-Ch-Glu发酵扩大培养的培养基最佳碳源为2.5%玉米淀粉,最佳氮源为5.0%黄豆粕。优化后的基础发酵培养基发酵条件为温度28℃、转速250 r/min、发酵时间33 h、初始p H 6.5、接菌量1.5%、装液量50 m L/250 m L。在此最佳发酵条件下,菌体产量为9.0×1010个/m L。     

产脂肪酶菌株的筛选、鉴定及响应面法优化发酵条件

从土壤中分离纯化出高产脂肪酶的菌株,通过在360nm紫外光下比较罗丹明B(Rhodamine B)筛选培养基中荧光圈的大小后得到7株菌株。利用对硝基苯酚-分光光度法测定目的菌株的酶活大小对菌株进行复筛,最终得到一株酶活较高的菌株Youzh-1,经细菌形态观察,16S rRNA序列分析,确定其为荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens strain ORTB3)。对此菌株进行发酵条件的优化,首先对发酵条件进行单因素的优化,在单因素实验的基础上对Youzh-1设计Box-Behnken实验进一步优化培养基最终得到最优发酵条件为葡萄糖18.825g/L、牛肉膏25.98g/L、,氯化钠10g/L、硫酸镁0.1g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、橄榄油乳化液12ml/ml,在温度41℃、pH6的条件下进行发酵实验验证,经过测定发现其脂肪酶粗酶酶活为79.87U/ml,相比初始酶活37.67U/ml提高了112%。这为脂肪酶的工业化生产提供了理论依据。     

产类胡萝卜素的海洋红酵母的培养条件优化研究

[目的]优化产类胡萝卜素的海洋红酵母的培养条件。[方法]以海洋红酵母Z44为试验菌株对其培养条件进行优化,同时,研究了添加物及培养条件对细胞量及类胡萝卜素产量的影响。[结果]得到的培养基组成为:蔗糖25.0 g/L,酵母膏20.8 g/L,草酸铵4.2g/L,KH2PO44.0 g/L,Na2HPO44.0 g/L,MgSO4.7H2O 0.2 g/L,CaCl20.2 g/L,氟化铵10 mg/L,柠檬酸30 mg/L,L-亮氨酸30 mg/L,L-缬氨酸40 mg/L。在培养基中加入氟化铵、柠檬酸、L-亮氨酸及L-缬氨酸时,红酵母的类胡萝卜素产量是对照值的1.5倍。对培养条件的优化结果为:装液量为250 ml三角瓶中装60 ml的培养基,接种量8%,培养温度30℃,初始pH为5.5,培养结束时间为66 h,培养条件优化后,红酵母的生物量及类胡萝卜素产量分别为28.2 g/L和6.72 mg/L,分别是未优化时的1.26倍和1.87倍。[结论]研究可为海洋红酵母生产类胡萝卜素的工业化应用提供参考。     

沼泽红假单胞菌产类胡萝卜素发酵条件优化

利用单因素试验与正交试验的方法,对沼泽红假单胞菌B9(Rhodopsedomonas palustris B9)产类胡萝卜素培养基和培养条件进行优化。结果表明:最佳培养基成分为:KH2PO40.6g,K2HPO40.9g,酵母膏1.5 g,蛋白胨2.3g,MgSO40.2g,CaCl20.3g,NaCl0.5g,最佳培养条件为:接种量为8%,温度为26℃,pH值为自然pH值。培养7d后,类胡萝卜素产量可达2.863mg·g-1(以干重计)。     

腈水合酶产生菌发酵条件的优化及其酶学性质研究

通过腈水合酶生产菌Rhodococcus sp．SHZ-1菌株的发酵过程研究，阐明了发酵液pH、葡萄糖含量以及细胞浓度变化与酶活之间的关系。在发酵过程中调节pH以及补加葡萄糖，使酶活从2294U／mL，增加到5226U／mL，提高了1．28倍。腈水合酶的酶学性质研究表明，温度30℃，反应体系在pH中性范围酶活达到最高。该酶对于底物有很强的耐受性，丙烯腈浓度为7．2％时，酶活最高；产物丙烯酰胺浓度过高，则会严重抑制酶的活性。     

蛹虫草发酵条件的初步优化

采用单因素法,研究了蛹虫草发酵过程中培养温度、培养时间、种龄、接种量、培养基初始pH值等因素对蛹虫草发酵的影响,最后通过蛹虫草的菌丝收率,来确定最佳发酵条件。研究结果表明：培养基初始pH值为6．0,种龄为4d,培养温度为27℃,培养时间为55h,接种量为7．5％（v／v）,在该条件下所得蛹虫草菌丝收率最高,以此确定蛹虫草发酵的最佳条件。     

烟用饼肥快速发酵方法研究及应用

进行了大堆发酵试验,研究了饼肥发酵过程中温度、养分含量变化等。同时进行了大田试验,分析了施用发酵饼肥后烤烟田间效用等,研究了快速发酵技术对烤烟综合质量的影响。结果表明,饼肥快速发酵最优组合各组分含量为饼肥38%~45%、稻草粉10%~14%、普钙2.5%~3.0%、HM腐熟剂0.01%~0.03%、水40%~48%;最佳配比为饼肥41.66%、稻草粉11.11%、普钙2.78%、HM腐熟剂0.01%、水44.44%。施用上述配比发酵后的饼肥可明显提升烤后烟叶的化学成分协调性和感官评吸质量。     

苏云金芽孢杆菌A322菌株发酵培养基和发酵条件的优化

以菌体生长对数末期发酵液OD600值为优化标准,通过单因素和正交试验方法对前期室内实验筛选得到的对棉铃虫(Helicoverpa armigera Hubner)有较高活性的苏云金芽孢杆菌Bt A322菌株进行培养基优化,并进行发酵。结果表明,最佳培养基配方为0.5%黄豆粉+0.5%酵母粉+0.5%葡萄糖+0.5%胰蛋白胨+0.2%碳酸钙+0.1%磷酸二氢钾+0.1%硫酸镁。最佳培养条件为培养时间20 h,初始p H值7.5,发酵温度30℃,摇床转速为200 r·min-1,接种量3%,250 m L三角瓶适宜装35 m L培养基。优化后的菌体生长量OD600值比优化前的提高了44.7%。