响应面法优化金针菇菌糠多糖提取工艺

为了优化金针菇(Flammulina velutiper Sing)菌糠多糖的提取工艺,在单因素试验的基础上根据BoxBehnken中心组合试验设计原理对提取时间、水料比、提取温度进行三因素三水平的试验设计,采用响应面软件Design-Expert进行处理,得到金针菇菌糠多糖的最佳提取条件为:提取温度95℃,水料比15∶1,提取4.26 h,此条件下提取的多糖含量为13.704 mg/mL,与预测值13.320 mg/mL十分接近,表明该模型可行。     

响应面法优化泥螺糖胺聚糖提取工艺研究

[目的]探讨采用响应面法优化提取泥螺糖胺聚糖的工艺条件。[方法]以液料比、酶解时间和酶添加量为自变量,利用响应面法对泥螺糖胺聚糖的提取工艺进行优化,建立二次回归方程,确定泥螺糖胺聚糖的最佳提取工艺。[结果]3个因素对泥螺糖胺聚糖提取率的影响依次为:酶添加量酶解时间液料比。所建立的二次回归模型中失拟项的P值0.05,复相关系数为0.996 4,说明该模型具有较高的拟合度。经拟合得到泥螺糖胺聚糖提取的二次回归方程为:Y=26.36+0.22A+0.75B+1.23C-0.052AB+0.097AC-0.390BC-0.72A2-0.47B2-4.10C2。通过响应面法优化,确定泥螺糖胺聚糖的最佳提取工艺为:液料比2(V/W),酶解时间7.5 h,酶添加量0.80%,在此条件下泥螺糖胺聚糖提取率为0.265%。[结论]该研究为泥螺的综合开发利用和多功能糖胺聚糖的制备提供科学依据。     

响应面法优化雪胆多酚提取工艺

以雪胆(Hemsleya chinensis)为试验材料,采用Box-Behnken中心组合设计响应面优化的方法,优化雪胆多酚的提取工艺条件。以多酚提取率作指标,通过Design-Expert 8.0.6软件,基于单因素试验结果,建立雪胆多酚提取率与提取温度、乙醇浓度、液料比、提取时间4因素3水平的数学模型。结果表明,雪胆多酚提取率模型拟合度较好,显著性高,优化后的最佳提取工艺条件为提取时间59 min、乙醇浓度(V/V)50%、提取温度74℃、液料比16∶1(mL/g),此条件下雪胆多酚提取率为(1.479 6±0.004 1)mg/g。     

响应面法优化王浆蛋白酶解工艺研究

采用响应面分析法,优化胃蛋白酶酶解王浆蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,以1,1-二苯基-2-苦基苯肼(DPPH)清除率为响应值,研究了酶与底物的比值([E]/[S])、底物浓度以及酶解时间对蜂王浆酶解物抗氧化的影响.结果表明,最终确定出制备抗氧化肽的最优酶解条件为,[E]/[S]2.24％、底物浓度1.61％、酶解时间3.7h,在该条件下制备的王浆蛋白酶解物的DPPH自由基清除率为47.84％.     

响应面法对超声波提取藤茶二氢杨梅素工艺的优化

通过响应面分析法对超声波提取梵净山野生藤茶(Ampelopsis grossedentata)二氢杨酶素的工艺条件进行优化。以乙醇体积分数、料液比、提取时间为影响因素,在单因素试验的基础上,采用3因素3水平响应面分析法,根据Box-Benhnken中心组合试验设计原理,以二氢杨酶素提取率为响应值,进行响应面分析,优化超声提取梵净山野生藤茶中二氢杨梅素的条件。结果表明,超声波提取藤茶中二氢杨梅素最佳工艺条件为乙醇体积分数51.00%、料液比1∶26.00(g∶m L)、超声波时间40.00 min,在此条件下二氢杨梅素的提取率为28.41%,回归模型预测的二氢杨梅素提取率为28.61%,经验证RSD为1.16%,拟合度较好,说明响应面法优化超声提取藤茶二氢杨梅素的工艺条件稳定可行。     

响应面分析法优化超声提取连翘花黄色素工艺研究

以黄色素吸光度为衡量指标,在单因素试验基础上, 运用Box Behnken 中心组合采用四因子三水平试验模型,建立回归方程,以响应面分析法(RSM)对连翘花黄色素的提取工艺进行优化。结果表明,以料液比1∶28(V/m),乙醇浓度96%,超声时间31 min,超声温度72℃为提取条件,实际平均色素吸光度为0735　5,理论值为0755　7,二者相差较小。     

响应面法优化巴戟天多糖提取工艺

为确定巴戟天多糖热水浸提的最佳工艺,以多糖提取率为考察指标,选取液料比、浸提时间、浸提温度3个因素进行单因素试验和基于Box-Behnken设计的响应面试验,利用Design-Expert软件对多糖提取率的二次多项式回归模型进行分析,结果表明:浸提时间对巴戟天多糖提取率影响最为显著,巴戟天多糖提取的最佳工艺为液料比为25∶1 m L·g~(-1),浸提温度为81℃,浸提时间为3.1 h;该条件下多糖提取率为11.282 4%,与模型预测值接近,相对误差仅为0.38%,说明采用响应面法优化巴戟天多糖提取工艺合理可行。     

响应面法优化佛手总黄酮提取工艺

以乙醇溶液为提取溶剂从佛手(Citrus medica var.sarcodactylis)中提取总黄酮,在单因素试验的基础上以佛手总黄酮提取率为指标,选择提取温度、提取时间和液料比3个因素进行Box-Behnken中心组合试验,优化佛手总黄酮的提取工艺条件.结果表明,优化的提取工艺条件为体积分数60％的乙醇溶液作提取溶剂、提取温度69℃、提取时间1.9 h、液料比V乙醇∶m佛手粉=32∶1(mL/g)、提取2次,该条件下佛手总黄酮提取率为0.565 9％.     

响应面法优化白英生物碱的超声提取工艺条件

[目的]优选白英生物碱的最佳超声提取工艺条件。[方法]在单因素试验的基础上,选择超声时间、温度、料液比为自变量,以生物碱提取率为响应值,采用中心组合设计的方法,研究各自变量及其交互作用对生物碱提取率的影响。利用响应面分析方法,模拟得到二次回归方程的预测函数,并确定白英生物碱提取工艺的最适条件。[结果]最佳提取工艺条件为:超声时间53 min、温度65℃、料液比1∶20(g/ml)、提取2次;在此条件下,生物碱提取率达0.308%。[结论]该方法优选了白英生物碱的最佳超声提取工艺条件,为白英的进一步开发利用提供了依据。     

响应面法优化提取益母草多糖工艺

[目的]优化益母草多糖的最佳提取工艺条件。[方法]以多糖提取率为评价指标,选定超声提取温度、提取时间及固液比作为主要考察因素进行单因素试验,再通过3因素3水平Box-Behnken设计试验,建立益母草多糖提取率的二次多项回归方程,计算得到优化条件。[结果]益母草多糖优化提取条件为提取温度35.5℃、提取时间20.5 min、固液比1∶24(m/v,g/ml),益母草多糖的提取率为(7.10±0.13)%。[结论]此方法具有快捷、高效等优点,为益母草多糖的综合开发应用奠定理论基础。     

养殖大口黑鲈的遗传多样性分析

用RAPD技术分析了广东养殖大口黑鲈Micropterus salmoides 3个群体基因组DNA的多态性.结果表明:用12条随机引物对3个群体共88尾大口黑鲈的基因组DNA进行扩增,共获得了106个位点,平均每条随机引物扩增出8.8个位点;广州群体、顺德大良群体和顺德南水群体的多态位点比例分别为32.08%、33.02%和40.57%;Nei遗传多样性指数分别为0.1151、0.1176和0.1627;Shannon's遗传多样性指数分别为0.1708、0.1742和0.2378.这表明目前广东地区养殖大口黑鲈种质资源还具有一定的遗传多样性,但养殖群体的遗传多样性在降低,且具有不同程度的种质退化.     

大口黑鲈肝细胞原代培养方法的建立

取材大口黑鲈肝脏组织,培养其原代细胞,比较研究了组织块法和酶消化法两种培养方法及不同的培养条件,以确定其最佳培养方法和条件,同时观察了长期培养过程中肝细胞的形态变化。结果表明:组织块方法不适于大口黑鲈肝细胞的培养,未见细胞从组织块中迁出。而胰蛋白酶消化法获得良好稳定的培养效果。胰蛋白酶浓度0.25%,消化时间20 min,分步收集肝细胞,经台盼蓝检测和血球计数板计数,平均活力>90%,每克肝重可获得3×106个分离肝细胞。在细胞活力和数量两方面达到最佳平衡。在含20%胎牛血清、10μg/mL胰岛素的M199/L15培养基中,于4%CO2,28℃培养箱中长期培养并传代。     

大口黑鲈肝细胞原代培养方法的建立

取材大口黑鲈肝脏组织,培养其原代细胞,比较研究了组织块法和酶消化法两种培养方法及不同的培养条件,以确定其最佳培养方法和条件,同时观察了长期培养过程中肝细胞的形态变化。结果表明:组织块方法不适于大口黑鲈肝细胞的培养,未见细胞从组织块中迁出。而胰蛋白酶消化法获得良好稳定的培养效果。胰蛋白酶浓度0.25%,消化时间20 min,分步收集肝细胞,经台盼蓝检测和血球计数板计数,平均活力>90%,每克肝重可获得3×106个分离肝细胞。在细胞活力和数量两方面达到最佳平衡。在含20%胎牛血清、10μg/mL胰岛素的M199/L15培养基中,于4%CO2,28℃培养箱中长期培养并传代。     

加洲鲈与罗非鱼群体的RAPD分析

利用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术对加洲鲈和罗非鱼种群间的亲缘关系进行分析。结果显示加洲鲈与罗非鱼之间的带纹相似系数为0．236,遗传距离为0．764。表明加洲鲈和罗非鱼之间的亲缘关系较远。     

加洲鲈与罗非鱼群体的RAPD分析

利用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术对加洲鲈和罗非鱼种群间的亲缘关系进行分析。品种间带纹相似系数（共享度）根据Lynch的公式进行计算：F_（xy）=2N_（xy）/N_x＋N_y（N_（xy）是RAPD指纹图谱中品种X和品种Y的共有带纹数,N_x和N_y分别为品种X和品种Y各自可分辨带纹总数）。品种间的遗传距离（D）根据2个品种的共享度（F）来计算：D=1-F。根据遗传距离的D值,再用UPGMA法求出各类间距离后再聚类。结果显示：从20个随机引物中筛选出4个清晰,多态性丰富的引物用于分析。各种群平均每一引物所获得的带纹数为：加洲鲈7.8±2.45,罗非鱼5.1±1.87。4个引物共扩增出加洲鲈35条带其中特异性带16条,罗非鱼21条带其中特异性带8条,测得加洲鲈与罗非鱼之间的带纹相似系数为0.236,遗传距离为0.764,表明加洲鲈和罗非鱼之间的亲缘关系较远。     

中国养殖大口黑鲈的亚种分类地位探讨

采用形态学方法和微卫星特异分子标记两种方法鉴定了中国养殖大口黑鲈Micropterus salmoides的分类地位。结果表明：中国养殖大口黑鲈的侧线鳞为58～68片,肋骨数为15对,这与原产地大口黑鲈北方亚种较一致;选择鉴别两亚种的特异性微卫星标记（Md06、Msal21）对中国养殖大口黑鲈进行特异性扩增,并以原产地大口黑鲈佛罗里达亚种和大口黑鲈北方亚种样品作为对照,结果为中国养殖大口黑鲈的特异性扩增片段大小和原产地北方亚种扩增条带相同。综合形态学和分子标记两方面的结果,表明中国养殖大口黑鲈应属于大口黑鲈北方亚种Micropterus salmoides salmoides。     

大口黑鲈养殖群体遗传多样性的分析

用RAPD技术对养殖的大口黑鲈M icropterus salm oides群体的遗传多样性进行了分析,即用20个随机引物对30个个体的基因组DNA进行PCR扩增,共扩增出2790条DNA片段,平均每个个体扩增出93条带。在检测到的93个位点中,多态位点数为49个,占52.7%,标记的分子量为0.2~3kb。个体间最大的遗传距离为0.4533,最小的遗传距离为0,其中有27个样品间的遗传距离较小(0.16~0),部分样品之间的遗传距离为0;有3个样品的遗传距离较大,表明大口黑鲈间的相似度较高,遗传多样性较少,但也有少数变异个体。30个个体的平均遗传距离为0.0796±0.1265,与胭脂鱼、黄颡鱼、鳑鮍、鲢、草鱼等其它淡水鱼类相比,它们的遗传多样性水平相仿。     

大口黑鲈北方亚种和佛罗里达亚种的同工酶分析

应用水平式淀粉凝胶电泳法,对2尾大口黑鲈的肌肉、肝脏、肾脏、心脏、眼、脑和鳃等7种组织的12种同工酶及蛋白质进行了检测筛选的预试验。实验认为,肌肉和肝脏的电泳带清晰、可以判别个体基因型的同工酶有7种,分别为AAT、GPI、IDH、LDH、MDH、ME和PGM。依据筛选结果,检测了50尾大口黑鲈北方亚种和40尾佛罗里达亚种肌肉和肝脏组织的7种同工酶,共检测出13个基因座位。除AAT-I＊基因座位之外的12／~-基因座位上两个亚种群体内的个体间无变异,平均杂合度观察值硪和平均杂合度预期值He均为0。田H。J＋和MD￡卜j＋两个基因座位在两个亚种间有明显差异,佛罗里达亚种均具有＋a基因,北方亚种均具有书b基因,可以此鉴定两个亚种。两亚种群体间的肫遗传距为0．1823。     

安徽省大口黑鲈苗种培育技术研究

2014年,在安徽省青阳县皖江特种养殖有限公司进行大口黑鲈苗种培育试验。试验中,试验组用新设计的方法培育鱼苗,对照组用传统方法培育鱼苗。结果表明:经过45 d的养殖,试验组鱼种平均全长61.38 mm,增长5.6倍,平均出塘鱼种3.255万尾/塘,成活率65.10%。对照组鱼种平均全长57.94 mm,增长5.3倍;平均出塘10.27万尾/塘,成活率25.08%;试验组苗种成活率约为对照组的2.6倍。     

1龄加州鲈形态特征及其相关参数分析

为全面了解加州鲈生物学特性,以期进一步丰富其生物学资料,为其分类和养殖提供科学依据,采用传统形态学方法和解剖学方法,观察和测量了其外部形态特征、可量和可数性状及内部结构特征.1龄加州鲈体型纺锤形,背部黑色,体侧青绿色,腹部白色,身体两侧分布有黑色条纹,身上布满栉鳞,其比肠长、比肠重和比内脏重分别为0.833、0.006...