不同佐剂免疫原对猪旋毛虫病的免疫保护作用比较研究

采用７ 日龄旋毛虫成虫可溶性抗原与弗氏完全佐剂（ＦＣＡ） 、白油司班佐剂、ＩＳＡ２０６佐剂和蜂胶佐剂乳化制备免疫原,对试验猪腹腔注射免疫３ 次,每次间隔７ｄ ,每头猪的免疫剂量为０５ｍｇ。最后一次免疫后７ｄ 攻击感染旋毛虫肌幼虫２００ 条／ｋｇ 体重。于感染后第３５ｄ 和第１２０ｄ 剖杀试验猪,用消化法检查计算每克肌肉的荷虫数。结果４ 种佐剂免疫猪肌幼虫的减虫率分别为９６１２ ％ 、８７９７ ％ 、８９８４ ％ 和９５１５ ％ ,其中以ＦＣＡ 和蜂胶佐剂免疫组的保护作用最好。表明４ 种佐剂均具有免疫增强作用,而蜂胶佐剂在乳化程序、注射、价格及免疫增强作用等方面都优于其它佐剂,更具有开发应用前景。     

五种旋毛虫抗原对猪的免疫保护作用研究

本实验研究了旋毛虫肌幼虫可溶性粗抗原、排泄分泌抗原（ＥＳ）、表面抗原（ＳＡ）及成虫ＥＳ、ＳＡ５种抗原对猪的免疫保护作用。结果５种抗原对猪均具有一定程度的免疫原性，可诱导猪体产生对攻击感染的抵抗力（减虫率），其中肌幼虫粗抗原为５５．２０％；肌幼虫ＥＳ为４２．５６％，肌幼虫ＳＡ为７２．２１％；成虫ＥＳ为３２．９２％；成虫ＳＡ为４２．１７％。免疫５种抗原后用肌幼虫“Ｂ”抗原、新生幼虫可溶性抗原及成虫可溶性抗原进行ＥＬＩＳＡ检测，均可测出血清抗体应答反应，其中以相应抗原测出的抗体应答较强烈。免疫５种抗原后猪外周血液中Ｂ淋巴细胞减少，Ｔｈ及Ｔｓ增加，Ｔｈ／Ｔｓ比值降低，呈暂时的细胞免疫抑制现象。     

旋毛虫新生幼虫对猪的免疫保护作用

给大白鼠经口感染７０００￣１００００条肌幼虫后７天剖杀，收集成虫。将７日龄成虫于１９９培养液中３７℃培养４８小时后过滤、离心收集新生幼虫。将冻融灭活的新生幼虫按不同数量与等体积弗氏完全佐剂乳化后按不同免疫程序经腹腔免疫猪。最后１次免疫后第７天攻击感染不同数量的肌幼虫。攻击感染后３５天剖杀全部试验猪，取膈肌脚消化检查，计算每克肌肉的荷虫量（ＬＰＧ）及免疫效力，同时观察免疫后及感染后的血清抗体消长变化     

猪旋毛虫病免疫方法的研究

本试验比较了３日龄及７日龄旋毛虫成虫可溶性抗原的免疫原性，比较了不同佐剂对免疫效果的影响，观察了不同免疫途径对免疫效果的影响及疫苗的免疫持续期。结果表明，３日龄及７日龄成虫可溶性抗原免疫猪所诱导产生的免疫力接近，说明免疫原性基本一致。以白油—司班佐剂乳化抗原的免疫效果优于弗氏完全佐剂（ＦＣＡ）乳化抗原，其减虫率分别为８６．３乏％与７０．２２％２而且白油—司班佐剂苗的粘稠度适中，便于注射。免疫途径对免疫效果的影响，以成虫可溶性抗原经腹腔注射（ＩＰ）的免疫效果优于肌肉注射（ＩＭ）。疫苗保存于４℃６个月不影响其免疫效力。猪免疫接种成虫可溶性抗原疫苗后免疫持续期至少６个月。     

猪红细胞CD58分子协同NDⅣ疫苗免疫的佐剂效应

用从木瓜酶修饰的猪红细胞提取的 CD5 8分子 ,协同 ND 疫苗免疫 8日龄雏鸡 (分为试验 A组、对照 B组 ) ;用从正常猪红细胞提取的 CD5 8分子 ,协同 ND 疫苗免疫 18日龄雏鸡 (分为试验 C组、对照 D组 ) ,以β-微量法测定ND抗体效价 ,以 α-醋酸萘酯酶染色法检测鸡外周血 T细胞的变化 ,并分别用 NDV F4 8E9强毒株在免疫后 2 4 d攻击 A组和 B组鸡、39d攻击 C组和 D组鸡。结果表明 ,免疫前 ,8日龄雏鸡的 ND抗体效价为 2 5.8,18日龄雏鸡的 ND抗体均为阴性 ;免疫后 ,与对照 D组比较 ,试验 C组的 ND抗体提前 4 d达到 2 4 .8,并且试验 C组 ND抗体效价显著高于对照 D组 ( P<0 .0 1) ,保护期延长 ;试验 A组雏鸡体内 ND抗体变化和对照 B组相似 ,但试验 A组雏鸡外周血 T细胞数量显著高于对照 B组 ( P<0 .0 1或 P<0 .0 5 )。攻毒试验结果显示 ,试验 A组鸡死亡率为 33% ,对照 B组鸡死亡率为6 3% ;试验 C组鸡死亡率为 17% ,对照 D组鸡死亡率为 5 3%。本研究结果表明 ,猪红细胞 CD5 8分子具有较好的疫苗佐剂效应     

LAT、TSM和BDM方法检验猪旋毛虫病的比较

用乳胶凝集试验（LAT）、压片镜检法（TSM）和消化法（BDM）检验旋毛虫病的结果表明，LAT法比后两种方法检出率高，具有快速、简便及生前检验等优点。旋毛虫胶乳抗原具有重演性好，稳定性强，易于保存。可适用于基层兽医部门和现地大规模检疫。     

猪旋毛虫病疫苗后海穴免疫研究

本项目对猪旋毛虫病成虫可溶性抗原疫苗经后海穴免疫注射的效果进行了研究。大鼠经口感染旋毛虫肌幼虫后３或７ｄ剖杀，收集成虫。经超声粉碎、高速离心制备成虫可溶性抗原。将抗原与等体积ＦＣＡ乳化，按０．２５ｍｇ／头及０．５０ｍｇ／头的抗原量分别进行后海穴注射（ＡＰ）及腹腔注射（ＩＰ），免疫猪只，使之经受旋毛虫的实验室攻击感染及自然感染。结果表明，３日龄及７日龄成虫可溶性抗原的免疫原性基本一致。采用后海穴注射疫苗具有减少抗原用量、增强免疫效果的作用。免疫后猪血清抗体滴度增加，呈暂时的细胞免疫抑制现象。后海穴注射疫苗猪群保护率达１００％，增加一倍抗原量经腹腔注射的猪群保护率为７５．２６％。     

旋毛虫肌纪虫及成虫表面抗原对小鼠的免疫保护作用

将感染旋毛虫肌幼虫的大鼠剖杀，收集３日龄成虫及４０日龄以上肌幼虫。将洗净的肌幼虫和成虫于含有０．２５％溴化十六烷基三甲基胺（ＣＴＡＢ）及２％脱氧胆酸钠的ＰＢＳ中培养２．５小时，离心取上清，经透析、浓缩即为表面抗原。将肌幼虫及成虫表面抗原按不同剂量和等体积弗氏完全佐剂乳化后免疫小白鼠，每次腹腔注射０．２ｍｌ，共免疫３次，每次间隔１周。攻击感染后剖检结果表明，肌幼虫及成虫表面抗原均具有较好的免疫原性，     

不同时期旋毛虫抗原对肥大细胞的作用

观察旋毛虫不同时期抗原对肥大细胞释放组胺和β-氨基己糖苷酶的影响。用质量浓度为1、5、25、50、100μg/L的肌幼虫抗原、成虫抗原、新生幼虫抗原分别与2.5×104的肥大细胞37℃条件下作用10min。采用荧光检测系统检测在上清液面及下层颗粒组分中的组胺水平,计算组胺释放率;加入20μL相同质量浓度的旋毛虫不同时期抗原分别与50μL 5mol/L对硝基酚-N-乙酰-β-D-葡糖胺和肥大细胞37℃孵育2h,酶标仪测定D值,计算β-氨基己糖苷酶释放率。结果显示,25μg/L肌幼虫抗原刺激肥大细胞释放组胺率最高,50μg/L最低;成虫抗原50μg/L最高,1μg/L最低,但均高于阴性对照组(P<0.05);而新生幼虫刺激肥大细胞不释放组胺,旋毛虫各期抗原不刺激肥大细胞释放β-氨基己糖苷酶。结果表明,肥大细胞在抗寄生虫感染的最初阶段扮演重要角色。     

不同佐剂大肠杆菌疫苗对免疫效果的影响

采用培养后大肠杆菌菌液、大肠杆菌与矿物油佐剂及氢氧化铝佐剂分别制备免疫原。对兔间隔14 d皮下免疫注射2次,每只兔的免疫剂量为1 ml/kg。最后一次免疫注射后20 d,取兔血清进行凝集试验测其抗体效价。结果表明：加矿物油佐剂苗的抗体效价最高（1∶256）,不加佐剂苗的抗体效价次之（1∶128）,加入氢氧化铝佐剂苗的抗体效价最低（1∶64）。     

猪旋毛虫对猪,犬的感染性研究

用消化法所得的猪旋毛虫蚴分别接种猪，犬，结果表明：猪旋毛虫对猪，犬的感染性存在着明显差异，在猪的繁殖力指数为１１７．０４，而在犬为３０．６０，说明哈尔滨地区猪旋毛早相当于旋毛形线虫；其对猪感染性较高而对犬感染较差，但能通过犬的感染而对人体健康构成威胁。     

猪软骨多糖与H22鼠肝癌细胞共培养物对小鼠体液免疫保护作用的研究

本试验以猪软骨多糖与H22鼠肝癌细胞的共同培养物(PS&H22)为研究对象,探讨其对小鼠体液免疫的影响.结果表明:PS&H22组小鼠的生命延长率和存活率极显著高于模型组(P<0.01);免疫荧光检测结果显示PS&H22免疫小鼠血清可与H22细胞发生特异性结合,说明免疫小鼠体内存在抗H22细胞特异性抗体;ELISA检测表明PS&H22免疫小鼠抗体效价大于12800,进一步证明免疫小鼠血清中抗体含量高,且其抗肿瘤体液免疫得到增强.     

野生动物体内的旋毛虫对猪的感染性研究

野生动物体内的旋毛虫对猪的感染性研究宋铭忻周源昌（东北农业大学动物医学系，哈尔滨１５００３０旋毛虫病是由旋毛形线虫［Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌａｓｐｉｒａｌｉｓ（Ｏｗｅｎ，１８３５）Ｒａｉｌｉｅｔ，１８９５］引起的一种重要人兽共患病，全球分布，对人类健康威胁...     

不同佐剂猪细小病毒灭活苗免疫效果比较试验

猪细小病毒病是由细小病毒科猪细小病毒（Porcine Darvoviurs,PPV）引起的初产母猪以产死胎、畸形胎、木乃伊胎及病弱仔猪,偶有流产,但母猪本身无明显症状。此病流行很广,在欧、美、亚、非及大洋洲很多国家均有报道,我国的各省市相继分离到猪细小病毒,本病对养猪业的危害极大。     

适用于蛋鸡免疫的猪源ETEC菌毛蛋白佐剂的筛选

为筛选卵黄抗体的优良佐剂,以3株猪源致病性大肠杆菌(ETEC)菌毛蛋白为模式抗原,分别与6种佐剂制备多价菌毛蛋白疫苗,免疫海兰褐壳蛋鸡。结果显示,3次免疫后,所有试验组蛋鸡产蛋率均有不同程度下降,但SPA、ISCOMs、弗氏佐剂、蜂胶佐剂组的产蛋率下降程度较为轻微;对鸡体血清抗体和制备获得的卵黄抗体的效价检测结果均显示:SPA和ISCOMs组虽较SPB、SPC、弗氏佐剂组抗体水平略低,但持久度较好,且通过对蛋鸡外观形态和注射部位组织变化情况的观察显示,两者不会刺激鸡体热反应或炎症反应,无任何表观副作用。因此,更适合作为蛋鸡制备猪源ETEC卵黄抗体的优良佐剂。     

不同佐剂制备的猪伪狂犬基因缺失标记灭活疫苗免疫效果的比较研究

佐剂的剂型对疫苗稳定性、安全性及免疫效力均有一定的影响。为筛选优质佐剂以提高猪伪狂犬基因缺失标记灭活疫苗(JS2012ΔgE株)的免疫效果,分别使用水包油包水佐剂(ISA206)、水包油佐剂(ISA28VG)、油包水佐剂(ISA70VG)及水佐剂(Gel02)制备疫苗,并检测各组疫苗理化特性、安全性及免疫效力。结果显示：4种佐剂制备的猪伪狂犬灭活疫苗的理化特性、安全性均达到质量标准;免疫效力比较中,ISA70VG组相比其他免疫组具有较高的抗体水平且持续时间较长,其次为ISA206组;攻毒后,ISA70VG组和ISA206组无任何临床症状及病变。综合安全性及免疫效力,ISA206佐剂及ISA70VG更适合作为制备猪伪狂犬基因缺失标记灭活疫苗(JS2012ΔgE株)的佐剂。