感染鸡贫血病毒雏鸡接种新城疫疫苗后免疫功能和免疫调节的变化

雏鸡1日龄感染鸡贫血病毒，8日龄接种Lasota疫苗，以未感染免疫雏鸡为对照，于免疫后7、14、28d检测血清免疫球蛋白IgG、IgM、IgA,在凝抑制抗体（HI）滴度；胸腺、法氏囊、脾脏T细胞、IgG^ 、IgM^ 、IgA^ ,抗体生成细胞数量及T、B细胞增殖反应；胸腺、脾脏细胞因子IL－2、IFN活性的变化。结果发现，感染CAV雏鸡Lasota疫苗免疫后，其血清IgG、IgM、IgA免疫球蛋白含量明显减少，HI抗体滴度降低；胸腺、法氏囊、脾脏T细胞、抗体生成细胞数量降低及T、B细胞增殖反应减弱，胸腺、脾脏IL－2及TNF诱生活性降低，表明其细胞免疫和体流免疫功能以及细胞因子免疫调节作用均未感染免疫雏鸡明显减弱。     

感染鸡传染性贫血病毒的雏鸡新城疫疫苗免疫后局部体液免疫球蛋白…

本试验对感染鸡传染性贫血病毒雏鸡新城疫疫苗免疫及其强毒攻击后，其泪液，气管液，肠液和胆汁的免疫球蛋白ＩｇＧ，ＩｇＭ，ＩｇＡ含量的动态变化进行了检测。结果发现，感染雏鸡泪液的ＩｇＧ，ＩｇＡ和气管液的ＩｇＧ及胆汁的ＩｇＧ，ＩｇＭ，ＩｇＡ含量无于接种ＮＤ疫苗后７－２８天明显低于未感染ＣＩＡＶ的免疫对照雏鸡，泪液的ＩｇＭ和气管液的ＩｇＡ含量在ＮＤ免疫后１４－２８天明显降低；肠液的ＩｇＡ和ＩｇＭ，ＩｇＧ仰望     

感染鸡传染性贫血病毒的雏鸡新城疫疫苗免疫后局部体液免疫球蛋白含量变化

本试验对感染鸡传染性贫血病毒（ＣＩＡＶ）雏鸡新城疫（ＮＤ）疫苗免疫及其强毒攻击后，其泪液、气管液、肠液和胆汁的免疫球蛋白ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ含量的动态变化进行了检测。结果发现，感染雏鸡泪液的ＩｇＧ、ＩｇＡ和气管液的ＩｇＧ及胆汁的ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ含量均于接种ＮＤ疫苗后７～２８天明显低于未感染ＣＩＡＶ的免疫对照雏鸡；泪液的ＩｇＭ和气管液的ＩｇＡ含量在ＮＤ免疫后１４～２８天明显降低；肠液的ＩｇＡ和ＩｇＭ、ＩｇＧ含量分别于免疫后７～１４和７、１４天也显著减少。表明ＣＩＡＶ感染雏鸡对ＮＤ疫苗免疫的局部体液免疫应答能力降低。ＮＤ强毒攻击后，ＣＩＡＶ感染ＮＤ免疫雏鸡泪液、气管液、肠液和胆汁的ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ含量及免疫保护率，均明显低于未感染ＣＩＡＶ的免疫对照雏鸡。     

鸡贫血病雏鸡ND免疫后局部免疫组织抗体生成细胞变化

对感染鸡贫血病毒（ＣＡＶ）雏鸡新城疫（ＮＤ）疫苗免疫及其强毒攻击后局部免疫组织——盲肠扁桃体和哈德尔腺的ＩｇＡ、ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体生成细胞数量的动态变化进行了检测。结果发现,ＣＡＶ感染雏鸡ＮＤ免疫后７、１４、２８ｄ及新城疫强毒（ｖＮＤＶ）攻击后,上述免疫组织的三种抗体生成细胞数量均不同程度地低于未感染ＣＡＶ的ＮＤ免疫对照雏鸡。其中盲肠扁桃体弥散区的ＩｇＡ减少最为明显。表明ＣＡＶ感染雏鸡消化道和呼吸道局部免疫组织对新城疫疫苗的体液免疫应答功能降低。新城疫强毒攻击后ＣＡＶ感染ＮＤ免疫雏鸡的免疫保护率也明显低于未感染ＣＡＶ的免疫对照雏鸡。     

鸡传染性贫血病对雏鸡新城疫疫苗免疫的抑制机理Ⅱ.T,B细胞功能变化

１日龄健康雏鸡感染ＣＩＡＶ后８天进行ＮＤ疫苗免疫和免疫后２９天用ｖＮＤＶ攻击，于免疫后７、１４、２８天和攻毒后１０天取材检测。结果，感染ＣＩＡＶ雏鸡ＮＤ免疫后，胸腺和脾脏Ｔ细胞增殖反应分别于７天和７－１４天比未感染免疫对照鸡明显减弱（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）法氏囊和脾脏Ｂ细胞增殖反应均于７－１４天明显减弱（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。ｖＮＤＶ攻击后，脾脏和胸腺Ｔ细胞增殖反应均比未感染ＣＩＡＶ     

鸡贫轿病雏鸡ND免疫后免疫器官抗体生成细胞动态变化

对感染染鸡传染性贫血病毒（ＣＩＡＶ）雏鸡新城疫（ＮＤ）免疫及其强毒攻击后，其免疫器官－－法氏囊、脾脏和胸腺和ＩｇＧ、ＩｇＭ和ＩｇＡ抗体生成细胞的动态变化进行了检测。结果发现，感染雏鸡ＩｇＧ抗体生成细胞于免疫后７～２８ｄ、在法氏囊和胸腺髓质及脾脏红髓和白髓区明显低于未感染的免疫对照雏鸡；ＩｇＭ生成细胞分别于免疫后７～２８ｄ、７ｄ或１４ｄ明显降低；而ＬｇＡ生成细胞于免疫后２８ｄ，公在法氏囊髓质区明显减     

鸡传染性贫血继发新城疫的病例防制

在生产实践中，传染性贫血病会造成免疫系统的损伤，引起免疫抑制，造成免疫失败。其特征是再生障碍性贫血，全身淋巴组织萎缩。现将一例鸡传染性贫血继发新城疫的病例介绍如下。     

实验性新城疫雏鸡免疫器官的病理学研究

给２８日龄伊莎雏鸡人工接种新城疫病毒后，应用常规病理学检验、细胞化学和免疫组化技术对免疫器官的病理学变化作了研究。接毒１２ｈ，法氏囊滤泡的髓质、胸腺小叶的髓质、脾白髓、盲肠扁桃体的淋巴小结及弥散淋巴组织的部分淋巴细胞和网状细胞首先出现核浓缩、胞浆固缩等坏死变化。接毒１～３ｄ（潜伏期），骨髓、法氏囊滤泡、胸腺小叶、脾白髓和红髓、盲肠扁桃体粘膜层及弥散淋巴组织的淋巴细胞、巨噬细胞和网状细胞发生核浓缩、碎裂、胞浆固缩，强嗜酸性等坏死变化。接毒４～６ｄ死亡病例，这些免疫器官的淋巴组织散在呈蜂窝状空泡结构坏死灶（法氏囊为滤泡坏死），进一步崩解成无结构嗜酸性颗粒状物质。这些坏死变化可作为雏鸡新城疫诊断的根据。     

鸡传染性贫血病对雏鸡新城疫疫苗免疫的抑制机理：Ⅰ.细胞因子的变化

１日龄健康ＡＡ雏鸡感染ＣＩＡＶ后８天进行ＮＤ疫苗免疫，免疫后２９天用ｖＮＤＶ攻击，于免疫后７，１４，２８免疫后７天，胸腺Ｔ细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）诱生活性比未感染的免疫对照鸡显降低（Ｐ＜０．０１）；脾脏Ｔ细胞ＩＬ－２诱生活性于７和２８天著降低（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。感染免疫鸡免疫后１４天脾脏淋巴细胞干扰素（ＩＦＮ）诱生活发性明显降低（Ｐ＜０．０１）。结果表明感染ＣＩＡＶ鸡对ＮＤ疫苗免疫     

贫血病雏鸡Lasota疫苗免疫后免疫器官组织T细胞亚群变化

应用微波间接酶标抗体染色法(WIEAS)对鸡贫血病毒(CAV)感染雏鸡Lasota疫苗免疫后免疫器官组织的CD4^ 、CD8^ T细胞数量及CD4^-与CD8^ T细胞比值的变化进行了动态研究，结果发现，CAV感染1日龄雏鸡Lasota疫苗免疫后，其胸腺、脾脏和盲肠扁桃体的CD4^ 、CD8^ T细胞数量及CD4^ 与CD8^ T细胞比值均程度不同地低于CAV未感染Lasota疫苗免疫对照雏鸡。表明，CAV感染雏鸡免疫器官组织对Lasota疫苗的细胞免疫应答机能降低或减弱。     

鸡贫血病病毒套式PCR检测方法的建立及应用

鸡贫血病病毒不仅引起鸡的传染性贫血 ,而且也是引起鸡免疫抑制病的主要病原。本研究首次在国内建立了鸡贫血病病毒的套式PCR检测方法。试验证明此方法具有高度的特异性和敏感性 ,以鸡马立克氏病毒、鸡网状内皮组织增生病毒、鸡传染性法氏囊病毒、正常MDCC_MSB1细胞DNA作为模板扩增时均未出现可见带 ,在检测鸡的各种组织病料时均未出现假阳性结果 ,该法比一次性PCR的敏感性高约 1 0 0 0倍 ,能检测到约一个拷贝的鸡贫血病病毒DNA ,而一次性PCR只能检测到3.6× 1 0 3 个拷贝。此方法已成功地应用于临床试验。对于鸡贫血病毒的许多鸡胚分离物和细胞分离物 ,一次性PCR不能扩增出可见电泳条带 ,而套式PCR都能扩增出特异的DNA片段 ,从而说明 ,套式PCR的敏感性大大高于一次性PCR ,可消除一次性PCR产生的假阴性结果     

Ⅱ型犬腺病毒自然弱毒YCA18株的实验免疫研究

应用YCA18株第8代细胞培养物（YCA18－8）经口鼻和静脉接种犬腺(CAV)SN本＜1：2的易感犬作安全试验，结果未见任何CAV临床症状与病理解剖学改变；用不同剂量的YCA18－8分组免疫CAV易感犬，经SN抗体测定与用CAV强毒攻击试验，结果SN抗体达1：16以上的犬95％以上可获得免疫保护，最低免疫量为10^4TCID50；应用YCA18－8分别免疫母源抗体达1：4和1：8的两组试验犬，第一次免疫14d后SN抗体均未有升高，追加2－3次免疫后SN抗体才逐渐上升至1：16以上的免疫保护水平；用CAV易感犬和MDCK分别将YCA18连续传8代和20代，结果对犬仍然安全，对犬的免疫原性未见下降，最低免疫量仍为10^4TCID50；与CDV和CPV弱毒作免疫互扰试验，结果与各弱毒的单独免疫结果未见差异；将YCA18－8冰冻保存于一30℃，6个月内TCID50仍不低于10^-4/0.1ml，经加明胶－蔗糖低温真空冻干后，4℃和－30℃保存1年，TCID50均仍维持在10^-4/0.1ml以上，经YCA18－20 3次免疫的试验犬，1年后SN抗体仍在最低抗体保护值1：16以上。     

PCR、斑点杂交及间接免疫荧光试验对鸡传染性贫血病临床诊断的应用比较

应用能特异性扩增出鸡传染性贫血病毒（ Ｃ Ａ Ｖ） ０５８ ｋｂ Ｄ Ｎ Ａ 的已知引物，对江苏某地区疑为 Ｃ Ａ Ｖ感染的 １５～３０ 日龄病鸡的肝 Ｄ Ｎ Ａ 样品进行了 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增。结果，在被检的 ２０ 份样品中，有 ６ 份为 Ｐ Ｃ Ｒ 阳性，阳性率 ３０％ 。利用地高辛标记的 ０８５ ｋ ｂ 的 Ｃ Ａ Ｖ 核酸探针对相同样品进行斑点杂交，结果与 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增相同。对应的病鸡血清经间接免疫荧光试验（ Ｉ Ｉ Ｆ Ａ）发现，有 ７ 份为 Ｃ Ａ Ｖ 抗体阳性，与 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增结果的符合率为 ７７％ 。初步结果表明，江苏某地区存在 Ｃ Ａ Ｖ 感染， Ｉ Ｉ Ｆ Ａ 与 Ｐ Ｃ Ｒ 的结果有差异     

基因分析实现CAV VP1基因在大肠杆菌中的高效表达

通过分子生物学软件DNASTAR对CAV VP1的基因分析发现,CAV VP1基因的5端非抗原区编码蛋白的密码子中存在连续的大肠杆菌稀有密码子。为了在大肠杆菌中高效表达CAV VP1,文章研究扩增了不含5’端稀有密码子的CAV VP1基因,并将其插入原核表达载体pGEX-4T-1,构建了重组表达载体pGEX-VP1,成功进行了高效表达。电泳条带分析表明,融合蛋白的表达量在44%左右,为研究CAV VP1的抗原性提供了丰富的来源。     

幼雏克雷伯氏菌病研究

本文在国内首次报告了一起由种鸡输卵管、泄殖腔带菌垂直传播，造成种蛋蛋白带菌，引起死胚、弱雏和幼雏腹泻败血症死亡的幼雏肺炎克雷伯氏菌病，病菌也可以通过口腔、脐孔行水平传播。     

云南省地方品种鸡群4种垂直传播病毒血清流行病学调查

为了解云南省地方品种鸡群中禽白血病病毒(ALV)、禽网状内皮组织增生症病毒(REV)、鸡传染性贫血病毒(CAV)和禽脑脊髓炎病毒(AEV)的感染情况,采用ELISA方法对云南省滇东、滇西、滇中、滇南和滇北5个区域8个地方品种鸡群的2295份血清样品进行了上述4种垂直传播病毒的抗体检测。结果显示:云南省8个地方品种鸡群中,ALV、REV、CAV和AEV平均抗体阳性率分别为27.02%、72.77%、98.47%和76.25%,二重、三重、四重感染率分别为32.90%、36.38%、15.90%;不同区域、不同品种鸡群中均存在上述4种病原的感染,抗体阳性率有一定差异,但无规律性。结果表明,云南省地方品种鸡群中4种垂直传播病毒感染率较高,流行面较广,且呈现严重的混合感染状态。结果提示:应重视这4种可垂直传播病原的流行控制,谨防因病毒混合感染导致重大疫病免疫失败;继续加强抗体检测,及时淘汰阳性鸡群,净化种群,同时定期进行疫苗污染监测,提升饲养管理水平,保障云南省地方鸡种质资源的安全健康发展。     

MEV、ADV和CAV三种病毒多重PCR检测方法的建立

建立一种同时检测貂肠炎病毒(MEV)、貂阿留申病毒(ADV)和犬腺病毒(CAV)的多重PCR诊断方法.引用已有的CAV引物,并根据GenBank发表的MEV、ADV序列保守区域设计特异性引物进行PCR扩增,可同时得到扩增长度为795(MEV)、451(ADV)、1 019 bp(CAV)3奈特异性片段,对猪细小病毒(PPV),犬瘟热病毒(CDV)进行PCR检测结果为阴性.各种模板、引物之间相互不构成干扰.敏感性试验证明,可以检测到模板中MEV 101.5 TCID50和CAV 100.5 TCID50的病毒含量,对ADV检测的敏感性更高.     

CAV基因T程亚单位苗与IBDV二联灭活疫苗的研究

IBDV为自行分离的VVIBDV COB－C1组织毒,毒价为CELD5010^5.0/0.2mL,CAV为VP1和VP2基因克隆进家蚕杆状病毒转基因载体质粒中,后经重组,筛选后获得的重组VP1和VP2基因产物,IBDV经甲醛灭活后与CAV按适当比例混合。1：4与白油佐剂研制成油包水型乳化剂二联疫苗,经安全试验、免疫保护试验证明该二联灭活疫苗安全有效,免疫种鸡群后可使其后代产生IBDV和CAV抗体,雏鸡得到较好的保护。     

鸡贫血病毒感染鸡细胞凋亡研究

用TUNEL法检测了1 日龄SPF雏鸡感染鸡贫血病毒(CAV)后胸腺和骨髓细胞的凋亡情况。结果,接种CAV 后6、10、20 d,骨髓细胞的凋亡率分别达51% 、52% 、57% ;接种后6 d,胸腺细胞凋亡率为53% ,比对照鸡胸腺和骨髓细胞的凋亡率明显升高( P< 0.01)。用流式细胞仪对胸腺细胞悬液所作的细胞凋亡分析结果与TUNEL法检测结果一致。