产胞外多糖乳酸菌的选育

为了筛选高产胞外多糖的乳酸菌,从酸奶、奶酪中通过富集和分离得到7株乳酸菌,以菌落拉丝实验为初筛指标和苯酚-硫酸法测胞外多糖产量的复筛方法得到1株高产胞外多糖乳酸菌的优良菌株YL2。并且对YL2菌株进行培养特征、个体形态特征和生理生化鉴定试验,初步确定YL2为乳杆菌属(Lactobacillus),其胞外多糖的产量为430.0mg/L。     

发酵期慕萨莱思中乳酸菌的分离及表型鉴定

为了解处于发酵期的慕萨莱思中乳酸菌(LAB)种类,对第10,20天的发酵液中乳酸菌进行分离并鉴定。采用平板菌落计数法计算发酵液中的乳酸菌总数,选择性培养基MRS、M17对慕萨莱思发酵液中的乳酸菌杆菌和球菌进行筛选,然后对分离株革兰氏染色后显微镜镜检观察菌体形态,生理生化生物学特性试验等方法鉴定属种。结果,此次样品第10,20天发酵液中的乳酸菌数量分别是3.9×105cfu/ml,5.0×105cfu/ml;得到7种乳酸菌,分别是德氏乳杆菌德氏亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp.delbrueckii)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、干酪乳杆菌干酪亚种(Lactobacillus casei cheese subsp.casei)、酒酒球菌(Oenococcus oeni)、藤黄微球菌(Micrococcus luteus)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、糊精片球菌(Pediococcus dextrinicus),它们是此次慕萨莱思样品处于发酵期微生态环境中的部分组成成分。     

阿鲁科尔沁牧区牛乳中乳酸菌生物学特性的研究—第一报：乳杆菌属的鉴定

本项研究从科尔沁草原的阿鲁科尔沁牧区南北4个苏木6个牧户中采集43个乳样。从43个乳样品分离到64株乳酸菌，对其中的47株进行了鉴定，结果分离到29株乳杆菌属的细菌。对其中10株进行了种的鉴定，结果4株为犊牛乳杆菌（Lactobacillus vitulinus)、2株德氏乳杆菌（L.delbrueckii)、2株植物乳杆菌（L.plantarum)、1株瘤胃乳杆菌（L.ruminis)、1株清酒乳杆菌（L.sake）共为5个种。本项研究发现，该牧区自然发酵酸乳中主要菌株是乳杆菌属细菌和肠球菌细胞的乳酸菌菌株，这些菌均属于中温发酵性菌株，经对其生物学特性的鉴定基本符合乳杆菌属、种的鉴定标准。     

高效降胆固醇植物乳杆菌的筛选及其益生潜能初探

为筛选出高效降胆固醇乳杆菌,挖掘其潜在益生功能,从民间自制泡菜样品中分离乳杆菌,采用邻苯二甲醛法筛选高效降胆固醇菌株,利用16S rDNA进行分子生物学鉴定,并通过耐酸、耐胆盐及抑菌性实验,测定菌株的益生潜能。结果表明:1)从分离出的11株乳杆菌中筛选出PL2、PL5、PL16和PL194等4株高效降解胆固醇菌株,其体外胆固醇降解率分别为48.22%、51.67%、48.43%和48.56%;2)结合菌落特征、部分生理生化试验及16S rDNA基因序列比对鉴定4株乳酸菌均为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum);3)该4株乳酸菌均可在pH2.0的环境下生存3h,菌株PL2和PL5可以在0.3%的胆盐浓度下存活3h;4)菌株PL5对致病性大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和福氏志贺氏菌均有显著的抑制作用。总之,植物乳杆菌PL5是具有开发前景的高效降胆固醇益生菌。     

新疆酸马奶中高产胞外多糖乳酸菌筛选鉴定及培养条件优化研究

[目的]从新疆伊犁牧民自制酸马奶中筛选出一株高产胞外多糖的乳酸菌,并对该菌产胞外多糖的培养条件进行优化,从而得到更多的胞外多糖,为乳酸菌产胞外多糖的培养条件提供理论依据.[方法]应用苯酚硫酸法筛选出产胞外多糖量高的乳酸菌,通过生理生化和糖发酵实验对产糖量高的乳酸菌进行鉴定;在培养条件的优化试验中,采用单次单因子法,探索初始pH值、培养时间、碳源及氮源等对乳酸菌产胞外多糖量的影响.[结论]鉴定出产胞外多糖量高的乳酸菌为干酪乳杆菌,并且确定干酪乳杆菌产胞外多糖的最佳合成条件为葡萄糖2;,蛋白胨1.5;,发酵时间28 h,初始pH值6.5,此条件下所合成胞外多糖量为121.6 mg/L.     

青贮用乳酸菌的筛选及其生物学特性研究

【目的】筛选生长繁殖快、产酸能力强且耐酸的乳酸菌,以获得制备果渣青贮发酵剂的优良菌株。【方法】通过葡萄糖发酵产酸产气特征、产酸速率和生长曲线进行供试乳酸菌的筛选,对筛选出的优良菌株进行形态学、生理生化和分子生物学鉴定,并进一步研究其生长温度范围、酸碱耐受性、耐盐性,最后对菌株发酵液进行酸度滴定和有机酸组分分析。【结果】经筛选共获得R7、R3、Rg和Re 4株优良乳酸菌。经形态学、生理生化和16SrDNA序列分析,确定R7为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),R3为戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus),Rg为发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum),Re为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)。4株菌均可在15~50℃生长。菌株R7生长最快,降酸能力最强,发酵液乳酸含量最高,占总酸含量的95.40%,在pH值3.0条件下可以旺盛繁殖,同时可耐受质量浓度0.08g/mL NaCl。Re、R3生长及产酸仅次于R7,酸碱耐受性较强。Rg在50℃生长良好,可耐受高温。【结论】菌株R7、Re、R3、Rg具有生长快、产酸能力强、耐酸、产乳酸含量高等优良生物学特性,可应用于果渣青贮饲料添加剂的制备。     

发酵对米粉生产的降镉作用及其微生物学机理

镉作为一种毒性极大的重金属,极易在稻米中富集,严重危害食用者的身体健康。我国是水稻生产大国,但稻米镉超标事件时有发生,对食品安全构成严重威胁,因此迫切需要研究和开发镉污染稻米防治措施和“镉大米”安全利用技术。常德米粉生产过程可使镉超标稻米的镉含量低于国家标准(0.2 mg/kg),本研究从微生物角度对该过程的降镉效应进行探究。利用Illumina MiSeq高通量测序技术分析大米发酵液中细菌的种群组成结构特征;同时通过传统的微生物分离培养方法获取纯菌株并进行16S rRNA基因测序鉴定;在此基础上,以镉含量重度超标的稻米为试验材料,探究分离菌株的降镉效果。研究表明,发酵液中优势属为乳杆菌属(Lactobacillus)。通过分离培养共获得58株菌,其中乳杆菌属的菌株占比最大,发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)、德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii)、乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)均表现出一定的降镉效果。其中,乳酸片球菌P1和发酵乳杆菌L4的降镉能力最强,发酵48 h的降镉量可达到0.55 mg/kg。菌种添加后发酵体系p H值降低,乳酸含量升高,从而有利于蛋白结合态镉的溶出,可能是米粉加工过程中稻米镉含量降低的主要微生物作用机制。稻米粉碎可提高功能微生物活性,提升降镉效率。本研究证明大米发酵液中存在高效降镉的菌株可有效降低镉超标稻米镉含量,可为降镉微生物菌株挖掘以及镉超标稻米有效利用提供新思路。     

藏灵菇源干酪乳杆菌KL1高产胞外多糖发酵条件的优化研究

[研究目的]利用从藏灵菇中筛选的产胞外多糖(EPS)的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)研究提高多糖产量的环境因素;[方法]针对主要影响胞外多糖合成的四个因素,采用四因素三水平[L9(34)]正交试验确定了高产胞外多糖的优化发酵条件;[结果]发酵温度为37℃;发酵时间为12h;培养基起始pH为6.5;接种量为5%;[结论]在此优化条件下,胞外多糖的产量是优化前的1.39倍.     

植物乳杆菌SD26的筛选及对白色念珠菌的抑菌作用

[目的]从泡菜中成功筛选分离出1株乳酸菌并对其抑制白色念珠菌进行初步研究.[方法]采用涂布平板法从四川大凉山农家泡菜中分离筛选出1株乳酸菌,经形态学观察、生理生化试验及16SRNA基因序列对其进行鉴定.测定该筛选菌株对白色念珠菌的抑菌活性大小、生长曲线影响、最小抑菌浓度和细胞形态作用,初步研究其抑菌机理.[结果]菌株SD26为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),其对白色念珠菌的抑菌圈直径可达到26 mm,共培养能显著抑制白色念珠菌的生长.该植物乳杆菌SD26对活菌数为3.0 × 107 CFU/mL的白色念珠菌的最小抑菌活菌数为4.0×108 CFU/mL.电镜观察结果表明该植物乳杆菌SD26能破坏白色念珠菌细胞膜的完整性.[结论]从泡菜中筛选的乳酸菌为植物乳杆菌SD26,其对白色念珠菌的抑菌活性是通过破坏其细胞膜起作用.     

动物微生态制剂菌种的分离与鉴定--鸡肠源乳杆菌的分离与鉴定

试验的菌种是从宁夏固原山区完全自然生长的土种健康产蛋母鸡的大肠和盲肠中分离获得的,共分离出51株菌株．通过对这51株菌株的菌落形态的观察和革兰氏染色镜检．筛选出11株进行了乳杆菌属的生理生化鉴定,初步确定为乳杆菌(Lactobacillus)．再通过糖醇类发酵产酸鉴定,确定6株为类布氏乳杆菌(L．parabuchneri),4株为短乳杆菌(L.brevis),1株为戊糖乳杆菌(L．pentosus)．各项鉴定结果均符合乳杆菌属和种的鉴定标准．     

一株高产胞外多糖乳酸菌的筛选与鉴定

试验选用4种泡菜水和6种酸奶,通过平板涂布、划线分离、革兰氏染色、接触酶试验和凝乳实验得到32株乳酸菌,初筛测其拉丝长度和复筛测其胞外多糖(EPS)含量,从10株乳酸菌(拉丝长度大于1.5 cm)中筛选得到一株高产EPS菌株,其EPS产量为183.6±10.2 mg·L-1。通过菌落形态特征和16S r DNA序列分析鉴定此菌株为戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus),将其命名为Pediococcus pentosaceus S44。本研究为高产EPS乳酸菌发酵剂的开发和应用提供了理论依据。     

酸马奶中乳酸菌的分离、纯化与鉴定

分别从乌鲁木齐市水西沟镇、伊犁地区、吉尔吉斯斯坦和哈萨克斯坦采集的酸马奶样品中,分离纯化得到乳酸菌21株.经形态学、生理生化特性研究分别鉴定为乳杆菌属(Lactobacillus)17株,分别为干酪乳杆菌(L.casei)、消化乳杆菌(L.alimentarius)、詹氏乳杆菌(L.jensenii)、耐酸乳杆菌(L.acetotolerans) 、戊糖乳杆菌(L.pentosus)、德氏乳杆菌德氏亚种 (L.delbrueckii subsp.delbruerkii)、玉米乳杆菌(L.zeae);乳球菌属(Lactococcus)1株,为植物乳球菌(L.plantarum);肠球菌属(Enterococcus)1株,为粪肠球菌(E.faecalis);明串珠菌属(Leuconostoc) 1株,为肠膜明串珠球菌(L.mesentaroides)中的葡聚糖亚种(subsp. mesentaroides);链球菌属(Streptococcus)1株,为嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus ).     

阿鲁科尔沁牧区牛乳中乳酸菌生物学特性的研究——第一报:乳杆菌属的鉴定

本项研究从科尔沁草原的阿鲁科尔沁牧区南北 4个苏木 16个牧户中采集 43个乳样。从 43个乳样中分离到 6 4株乳酸菌 ,对其中的 47株进行了鉴定 ,结果分离到 2 9株乳杆菌属的细菌。对其中 10株进行了种的鉴定 ,结果 4株为犊牛乳杆菌 (L actobacillus vitulinus)、 2株德氏乳杆菌 (L .delbrueckii )、 2株植物乳杆菌 (L .plantarum )、1株瘤胃乳杆菌 (L .ruminis)、1株清酒乳杆菌 (L .sake )共为 5个种。本项研究发现 ,该牧区自然发酵酸乳中主要菌株是乳杆菌属细菌和肠球菌属细菌的乳酸菌菌株 ,这些菌均属于中温发酵性菌株 ,经对其生物学特性的鉴定基本符合乳杆菌属、种的鉴定标准。     

德氏乳杆菌对鸡肠道菌群的影响

[目的]探索德氏乳杆菌对鸡肠道菌群的影响。[方法]从肉鸡肠黏膜上分离培养制备试验菌株。在45只肉鸡雏苗中投喂添加由单一德氏乳杆菌制备的微生态制剂和土霉素,在55d的投喂期内,采用平板计数法检测好氧性异养菌、鸡伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和德氏乳杆菌的数量。[结果]从肉鸡肠黏膜上分离培养得到6株菌,均为G+菌,生理生化鉴定表明,S2为嗜酸乳杆菌,S4为德氏乳杆菌乳亚种,S6为德氏乳杆菌德氏亚种,S1、S3和S5为粪肠球菌。在投喂冻干菌粉30d后德氏乳杆菌数量达到稳定并在肠道内定植。同时,由于德氏乳杆菌的抑制作用,肠道中的鸡伤寒沙门氏菌数量下降最明显。德氏乳杆菌对鸡肠道的好氧性异养菌没有任何影响。[结论]德氏乳杆菌对鸡肠道菌群的影响与抗生素具有相近的效果,表明德氏乳杆菌作为饲料添加剂可以取代抗生素应用在肉鸡的养殖中。     

阿鲁科尔沁牧区牛乳中乳酸菌生物学特性的研究

本项研究从科尔沁草原的阿鲁科尔沁牧区南北4个苏木16个牧户中采集43个乳样。从43个乳样中分离到64株乳酸菌，对其中的47株进行了鉴定，结果分离到29株乳杆菌属的细菌。对其中10株进行了种的鉴定，结果4株为犊牛乳杆菌(Lactobacillusvitulinus)、2株德氏乳杆菌(L.delbrueckii)、2株植物乳杆菌(L.plantarum)、1株瘤胃乳杆菌(L.ruminis)、1株清酒乳杆菌(L.sake)共为5个种。 本项研究发现，该牧区自然发酵酸乳中主要菌株是乳杆菌属细菌和肠球菌属细菌的乳酸菌菌株，这些菌均属于中温发酵性菌株，经对其生物学特性的鉴定基本符合乳杆菌属、种的鉴定标准。     

一株植物乳杆菌的分离鉴定及特性研究

从泡菜中富集培养分离到12株乳酸菌,经测定发酵液pH值筛选到一株产酸性能较好的菌株PS-9,结合菌落形态特征、生理生化特性及菌株特异性序列分析等手段,确定其分类归属,并对其特性进行了研究。结果表明PS-9为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),菌株PS-9在pH值2.0环境中的存活率为85.2%,0.4%胆盐浓度环境中存活率为37.2%,对鸡大肠杆菌O78和金黄色葡萄球菌C56011的抑菌圈直径均超过18 mm。     

干酪乳杆菌胞外多糖的分离纯化及结构分析

[目的]分离纯化干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）胞外多糖,并对其进行初步分析。[方法]使用DEAE Sepharose Fast Flow离子交换柱将干酪乳杆菌LC2W产粗多糖分级纯化,并对所得单一组分进行Sepharose CL-6B和高效液相分析。[结果]分离纯化干酪乳杆菌胞外多糖得到3个组分：G1、G2、G3,分别为粗多糖质量的21.33%、33.53%、29.67%,总回收率为84.53%。G1、G2为中性多糖,Sepha-rose CL-6B和高效液相分析表明,其都是均一组分,平均分子量分别为6.65×105、1.01×104Da。[结论]为今后更深入研究乳酸菌产胞外多糖的结构和生物活性等提供参考。     

新疆小芦苇青贮中乳酸杆菌的分离鉴定

[目的]筛选新疆小芦苇青贮中优良的乳酸杆菌.[方法]研究将从自制的新疆小芦苇青贮中分离出乳酸杆菌进行鉴定,对鉴定出的菌株进行产酸试验,确定新疆小芦苇青贮中的优势菌株.[结果]试验共分离得到了11株乳酸杆菌,根据<伯杰氏细菌鉴定手册>(第八版)中的种属表述结果,经鉴定2株(Hz2-1和Hz2-2)为戊糖乳杆菌(L. pentosus),2株(Hz3-1和Hz3-2)为植物乳杆菌(L.plantarum),2株(Zar2-8和Zar2-9)为牛粪乳杆菌(L.dung),2株(Zar8-3和Zar8-4)为短乳杆菌(L. brevis),3株(Gsr1-1、Hz1-1和Zar9-4)为德氏乳杆菌保加利亚亚种(L.delbrueckii subsp.bulgaricus).[结论]从不同菌株发酵产酸试验的结果来看,发现Hz2-1,Hz3-1具有较强的产酸能力,pH最低可达3.50,是新疆小芦苇青贮发酵过程中的主要产酸菌株.     

抗真菌乳酸菌的筛选及菌种鉴定

采用双层培养基法从中国传统发酵食品(发酵乳、泡菜、发酵肉)中筛选到20株对真菌有拮抗作用的乳酸菌菌株。对其中7株具有明显拮抗作用菌株的抑菌谱进行了初步研究,这7株菌对啤酒酵母、汉逊酵母、枯草芽胞杆菌等有明显的抑制作用,对黑曲霉可明显抑制其孢子的成熟。对其中2株菌进行了常规生理生化及16SrRNA分子鉴定,鉴定结果为干酪乳杆菌鼠李糖亚种。     

香菇胞外多糖高产菌株的紫外诱变选育

以香菇808#为出发菇,采用紫外辐射诱变处理其孢子,通过拮抗试验,筛选出与亲本菌株有较明显拮抗线的诱变菌株,并测定其香菇胞外多糖含量。结果表明,通过筛选,获得20个诱变菌株产胞外多糖高于亲本菌株,其中诱变菌株YBS21的胞外多糖含量相对较高,为1.34 g/L,比亲本菌株高42.6%;经10代培养,菌株YBS21的胞外多糖含量为1.33 g/L,高产胞外多糖遗传性状较为稳定。