增效醚对棉铃虫的毒理学研究

本文以棉铃虫 3龄幼虫为试虫材料对增效醚 (PBO)的毒理学进行了研究。结果表明 ,PBO对棉铃虫(H elicoverp a armigera) 3龄幼虫的 L D50 为 5.7532 μg/ larva;在活体抑制实验中 ,用 4 μg/ larva的剂量点滴处理1h后 ,幼虫体内乙酰胆碱酯酶 ACh E的活性被抑制 4 8.31% ,羧酸酯酶 Carb E被抑制 4 4 .97% ,多功能氧化酶MFO被抑制 6 0 .82 % ;在离体抑制试验中 ,PBO对 ACh E、Carb E和 MFO的抑制中率 (I50 )分别为 3.35× 10 -7mol/ L、4 .4 6× 10 -7mol/ L和 1.4 2× 10 -7mol/ L ;PBO对酯酶的抑制为不可逆抑制。因此 ,PBO的增效机理在抑制代谢酶系的水平上并不是专一的 ;对于棉铃虫而言 ,PBO具有明显的杀虫活性 ,用其进行增效实验判断MFO是否参与抗性时应注意 PBO的这一特点 ;同时文章还证明了磷酸三苯酯 (TPP)和顺丁烯二酸二乙酯(DEM)抑制作用的专一性。     

溴氰菊酯酶联免疫吸附分析方法研究

建立了定量测定溴氰菊酯间接竞争酶联免疫吸附分析方法(ic-ELISA)。合成了半抗原1-羧基-(3'-苯氧基苯基)甲基-3-(2',2'-二溴乙烯基)-2,2-二甲基环丙基羧酸酯(Med)和N-2-(羧基丙基)氨基甲酰基-(3'-苯氧基苯基)甲基-3-(2',2'-二溴乙烯基)-2,2-二甲基环丙基羧酸酯(Di)。分别采用碳二亚胺法和混合酸酐法将半抗原与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联制备了免疫原Di-BSA和包被原Di-OVA、Med-OVA。将制得的溴氰菊酯免疫原免疫动物获得多克隆抗体,经间接非竞争ELISA法测得其效价为2.5×105。通过对甲醇含量、离子强度、pH值等影响因素进行异源分析条件的优化,确立了溴氰菊酯间接竞争酶联免疫分析方法的最佳检测条件(30%甲醇、氯化钠0.4 mol/L、pH 7.5),并建立了标准竞争曲线。该方法的IC50值为0.55±0.05 mg/L,检测限(IC10)为3.76±0.35 μg/L,对大多数拟除虫菊酯无交叉反应。分别在自来水、河水和土壤样品中添加0.05 ~5.0 mg/L(或mg/kg)的溴氰菊酯,回收率分别为89.7% ~106.8%、82.4% ~101.7%、75.6% ~97.8%。     

微量滴度酶标板法测定棉蚜(Aphis gossypii Glover)酯酶特性与有机磷抗性的关系

通过生物测定表明高密棉蚜对有机磷的抗性高于北京棉蚜,用紫外分光光度计比色法(A法)及微量滴度酶标板法(B法 )测定高密棉蚜及北京棉蚜的α-乙酸萘酯酯酶活力和α-乙酸萘酯酯酶动力学。北京棉蚜和高密棉蚜的α- NA酯酶活力分别为 2.23、4.48(A法 )和1.13、3.30(B法)μmol·mg-1pro.·min-1,高密、北京棉蚜的酶活之比为 2 .00(A法 )、2 .92(B法) ;北京棉蚜、高密棉蚜的Km值分别为:6.06×10-5、7.51× 10-5(A法 )和 7.66×10-5、8.87×10-5 (B法) mol·L-1,Vmax值为2.53、5.82(A法)和1.28、3.61(B法)μmol·mg-1·min-1。比较紫外分光光度计比色法及微量滴度酶标板法的测定结果,表明微量滴度酶标板法的测定结果是可靠的。     

绿磺隆、醚苯磺隆及其体外代谢物对乙酰乳酸合成酶的离体抑制作用

利用异源表达于酵母细胞中的小麦细胞色素P450cDNA(CYP71C6v1)研究了磺酰脲类除草剂绿磺隆、醚苯磺隆的代谢作用。结果表明,代谢产物5-羟基绿磺隆和5-羟基醚苯磺隆能够抑制乙酰乳酸合成酶(ALS酶)活性,且代谢产物与母体化合物绿磺隆、醚苯磺隆抑制ALS酶活性的IC50值差异小,但是代谢产物在茎叶喷雾小麦和菜豆时,均未表现出活性。绿磺隆及其代谢产物抑制小麦ALS酶活性的IC50值分别为7.1×10-9和7.9×10-9mol/L,抑制菜豆ALS酶活性的IC50分别为3.6×10-9和4.1×10-9mol/L;醚苯磺隆及其代谢产物抑制小麦ALS酶活性的IC50分别为4.6×10-9和5.3×10-9mol/L,抑制菜豆ALS酶活性的IC50分别为4.7×10-9和4.9×10-9mol/L。结果表明,在磺酰脲类分子苯环5位上进行结构改造,有可能得到高活性的化合物。     

不同理化因子对荒漠生物结皮中三种蓝藻生长的影响

对实验室分离荒漠生物结皮中的具鞘微鞘藻〔Microcoleus vaginatus(Vauch.)Gom.〕、眼点伪枝藻(Scy-tonema ocellatum Lyngb)、地木耳(Nostoc commune Vauch.)3种蓝藻分别进行了培养,利用正交设计的方法研究了pH值、K+、Ca2+、Mg2+4种理化因子对其生长的影响,初步探讨了3种蓝藻在实验室内生长所需的最适生理条件。研究结果表明,具鞘微鞘藻的最适生理条件:pH值为8,Ca2+浓度为3.54×10-5mol/L,Mg2+浓度为5.1×10-5mol/L,K+浓度为1.345×10-5mol/L;眼点伪枝藻的最适生理条件为:pH值9,Ca2+浓度为1.77×10-5mol/L,Mg2+浓度为5.1×10-5mol/L,K+浓度为2.69×10-5mol/L;地木耳的最适生理条件为:pH值为10,K+浓度为5.38×10-5mol/L,Ca2+浓度为1.77×10-5mol/L,Mg2+浓度为1.02×10-4mol/L。     

家蝇（Musca domestica Vicina L.）头部乙酰胆碱酯酶检测农药残留最佳条件研究

系统研究了敏感家蝇Musca domestica Vicina L.羽化后不同天数其头部乙酰胆碱酯酶(AChE)的比活力、敏感度以及酶源蛋白质含量的变化;缓冲液pH值对家蝇头部AChE比活力的影响。结果表明:家蝇初羽化至羽化后第15 d,其头部AChE的比活力逐渐升高 ,而酶源蛋白质的含量逐渐下降(187.022 2±9.021 3~83.022 2±7.111 1 μg/头)。羽化后2~4 d,其头部AChE的敏感度最高;初羽化和羽化后第15 d,敌敌畏的I50分别是羽化后第3 d的1.4倍和2.1倍。在一定的pH值范围内(6.6~8.0),家蝇头部AChE的比活力随缓冲液pH值的升高而增大。本研究为利用家蝇头部AChE检测有机磷残留量探索了最佳条件。     

磺酰脲类除草剂对抗、感性雨久花乙酰乳酸合成酶活性的影响

从2004年开始,延边地区稻田大量发生抗磺酰脲类除草剂苄嘧磺隆的抗药性生态型雨久花。为解析其抗药性突变机制,采用离体法测定了抗、感性雨久花乙酰乳酸合成酶活性。结果表明,抑制抗、感性雨久花乙酰乳酸合成酶活性50%的苄嘧磺隆剂量为253.44×10-7mol/L和2.80×10-7mol/L;抑制抗、感性雨久花乙酰乳酸合成酶活性50%的吡嘧磺隆剂量为1802.15×10-7mol/L和20.85×10-7mol/L。抗药性雨久花对苄嘧磺隆和吡嘧磺隆的抗性系数(RI50/SI50)值分别为90.6和86.5,并存在交互抗药性。确认抗药性突变系由其乙酰乳酸合成酶对磺酰脲类除草剂苄嘧磺隆、吡嘧磺隆反应钝化所致。     

直接竞争酶联免疫吸附分析法测定小白菜中溴氰菊酯的残留量

应用作者所在实验室自制的、对溴氰菊酯具有特异性亲和力的多克隆抗体和酶标半抗原,建立了包被抗体-酶标半抗原直接竞争酶联免疫吸附分析法(DC-ELISA)。小白菜样品经超声提取、浓缩和10%甲醇定容后采用DC-ELISA法测定,并采用高效液相色谱法进行验证。结果表明:在抗体包被浓度为2.0 mg/L、辣根过氧化物酶(HRP)标记溴氰菊酯半抗原稀释2.0×105倍、包被介质为pH 7.2 PB、反应介质为含0.125 mol/L NaCl pH 6.8 PB的优化条件下,DC-ELISA法检测溴氰菊酯的线性范围为0.10~10 mg/L,溴氰菊酯对抗体-酶标半抗原反应的抑制中浓度(IC50)为1.68 mg/L,相对标准偏差(RSD,n=5)为2.11%,IC10值为0.16 mg/L。在5、1和0.2 mg/kg 3个添加水平下,DC-ELISA法测定小白菜中溴氰菊酯的平均回收率分别为97%、106%和95%,RSD(n=5)分别为8.5%、8.1%和8.1%。高效液相色谱法同步测定小白菜中添加0.2 mg/kg溴氰菊酯的回收率为107%。本研究建立的DC-ELISA法可用于小白菜中溴氰菊酯含量的快速测定。     

两种蜜蜂头部乙酰胆碱酯酶对杀虫药剂敏感度比较

通过对抑制动力学常数和抑制时间进程曲线的测定,比较了中华蜜蜂Apis cerana cerana Fabricius和意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica Spinola头部乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)对几种有机磷和氨基甲酸酯类杀虫药剂的敏感度。抑制时间进程曲线显示,意大利蜜蜂头部AChE对毒扁豆碱、灭多威、敌敌畏的敏感度高于中华蜜蜂,而两种蜜蜂对残杀威、硫双灭多威、甲胺磷及久效磷的敏感度没有明显差异。意大利蜜蜂头部AChE对毒扁豆碱、残杀威、硫双灭多威、克百威以及丁硫克百威的双分子速率常数(Ki)值分别为4.003×106、5.744×104、5.249×104、1.986×106和5.492×104 (mol/L)-1 ·min-1,均高于中华蜜蜂对这几种杀虫药剂的Ki值,后者分别为3.403×106、4.633×104、4.233×104、1.262×106和5.072×104 (mol/L)-1 · min-1。但中华蜜蜂头部AChE对灭多威的Ki值却高于意大利蜜蜂,前者为10.408×104,后者为4.872×104(mol/L)-1 ·min-1。对AChE被抑制后恢复速率(K3)的测定结果表明,中华蜜蜂头部AChE被残杀威和硫双灭多威抑制后恢复的速率显著低于意大利蜜蜂,但两种蜜蜂被毒扁豆碱、灭多威、克百威和丁硫克百威抑制后恢复的速率差异不显著。     

Zn盐和干旱胁迫对纹党种子萌发和幼苗生理特性的影响

以甘肃道地中药材纹党(Codonopsis pilosula)为对象,通过室内砂培方法,研究了不同浓度(10-6mol·L-1,10-5mol·L-1,10-4mol·L-1,10-3mol·L-1)Zn2+和不同浓度(5%、10%、15%、20%、30%)PEG模拟干旱胁迫下对纹党种子萌发、幼苗生长、渗透调节物质积累和活性氧代谢的影响。结果表明:低浓度Zn2+和PEG能显著促进纹党种子萌发和幼苗生长,随着干旱胁迫和Zn2+浓度的加剧,种子萌发率显著降低,幼苗生长受阻,纹党种子萌发和幼苗生长能耐受的渗透势临界阈值为-0.94 MPa;叶片O2·产生速率和H2O2含量明显增加,SOD、POD、CAT和APX活性先升后降,高浓度Zn2+和PEG处理下GSH和As A含量明显降低,幼苗叶片中Pro、可溶性糖和MDA含量随Zn2+和PEG浓度升高而升高。10-6和10-5mol·L-1Zn盐可提高纹党对适度干旱胁迫的适应能力,而10-3mol·L-1的Zn盐与干旱胁迫下伤害度达到最大。     

小菜蛾不同亚细胞层羧酸酯酶的性质研究

本文对采自不同地区的小菜蛾种群幼虫不同亚细胞层羧酸酯酶 (Car E)的活性分布及性质进行了研究。结果表明 ,敏感品系和抗性种群 Car E活性亚细胞分布没有明显差异。不同种群各亚细胞层 Car E活性以线粒体层分布最高 ,占 34%～ 52 % ;微粒体层最低 ,占 7%～ 16 %。抗性种群线粒体层 Car E活性明显高于敏感品系。各种群以上清液层 Car E与 α- NA的亲和力最高 ,且各种群间没有明显差异。云南、北京、武汉、宣化种群(F0 )线粒体层 Car E与 α- NA的亲和力最低。测定的六个种群线粒体层 Car E与 α- NA的亲和力大小依次为 :AVMs抗性品系 (F16) >云南种群 >武汉种群 >台湾敏感品系 >宣化种群 (F0 ) >北京种群     

多杀菌素对甜菜夜蛾多酚氧化酶和羧酸酯酶的影响

报道了多杀菌素对甜菜夜蛾Spodopetera exigua(Hübner)多酚氧化酶(PPO)和羧酸酯酶(CarE)的影响, 多杀菌素对甜菜夜蛾表现了很高的毒力,对三龄幼虫的LC50值为0.80 mg/L。离体条件下,1.0×10-3~0.5 mg/L多杀菌素对甜菜夜蛾多酚氧化酶的抑制率超过50％,且表现为随药剂浓度的增加抑制能力增强的趋势。活体条件下,0.1~0.8 mg/L多杀菌素在处理的早期诱导虫体内多酚氧化酶的活性增加,但12 h后却显著抑制多酚氧化酶的活性。1.0×10-3~1.0 mg/L多杀菌素在离体条件下对羧酸酯酶不表现任何抑制作用,但活体条件下同样能诱导虫体内羧酸酯酶活性增强。     

防治苹果树腐烂病杀菌剂的室内筛选

 The inhibitory effects of 10 fungicides on apple tree valsa canker were compared on dishes and twigs. The results showed that conidia germination and mycelial growth were inhibited by all fungicedes tested. The EC₅₀ value of Difenoconazole was 6. 1×10^-3μg·mL^-1, the lowest among tested fungicide in inhibiting conidia germination. Tebuconazole and Imazalil also showed obvious inhibition effect. Thiophanatemethyl was the least efficient with the EC₅₀ value 2.6×10¹ μg·mL^-1. Difenoconazole also showed the highest activity for inhibiting mycelial growth with ECho value of 2.3×10^-2 μg·mL^-1. Tebuconazole was better than other fungicide. Thiophanate-methyl and Propineb were the least efficient with quite high EC₅₀ value. Furthermore, the size of the lesion after inoculation on excised twigs also revealed that Difenoconazole was most efficient because it showed the smallest lesion of 394 mm² compared with other tested fungicides. So Difenoconazole and Tebuconazole could be used to control apple tree valsa canker in field to subsititute forbided fungicides such as asomate.     

环氧虫啶对苜蓿蚜的毒力及对其体内解毒酶活性的影响

为研究桥环新烟碱类化合物对苜蓿蚜的影响,以吡虫啉为对照药剂,采用带虫浸叶法测定了环氧虫啶等桥环新烟碱类化合物对苜蓿蚜的毒力及对其体内解毒酶活性的影响。结果表明:以环氧虫啶为代表的七元桥环新烟碱类化合物对苜蓿蚜具有较好的杀虫活性,其中,环氧虫啶的LC50值为3.454 mg/L,高于八元桥环新烟碱化合物。酶抑制剂顺丁烯二乙酯（DEM）和胡椒基丁醚（PBO）对环氧虫啶均具有显著的增效作用,增效比分别为4.02和3.22;而对照药剂吡虫啉仅PBO对其具有明显增效作用。与空白对照组相比,经LC50浓度环氧虫啶和吡虫啉处理后,存活苜蓿蚜体内谷胱甘肽S-转移酶（GSTs）和细胞色素P450s活力均显著升高（P<0.05）,其中,环氧虫啶处理组GSTs和P450s活力分别达到（2.730±0.012）和（0.239±0.009）μmol/（mg pro.·min）,诱导能力弱于吡虫啉;而苜蓿蚜体内羧酸酯酶（CarE）活性则无明显变化。研究显示,在苜蓿蚜对环氧虫啶的解毒代谢过程中,GSTs和细胞色素P450s可能发挥着主要作用。     

寄主植物对桃蚜羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶的诱导作用

在１９９５～１９９６年研究了寄主植物对桃蚜［Ｍｙｚｕｓｐｅｒｓｉｃａｅ（Ｓｕｌｚｅｒ）］羧酸酯酶（ＣａｒＥ）和乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）的诱导作用。在试验的甘蓝、茄子和桃树３种寄主植物中，取食甘蓝的桃蚜种群ＣａｒＥ和ＡＣｈＥ活性最高，取食茄子和桃树的桃蚜种群ＣａｒＥ活性没有明显不同，而ＡＣｈＥ活性取食茄子的桃蚜种群明显高于取食桃树的种群。ＣａｒＥ与底物的亲和力是桃树＞茄子＞甘蓝，而ＡＣｈＥ与底物的亲和力则是甘蓝＞茄子＞桃树。ＡＣｈＥ与毒扁豆碱的双分子速率常数（Ｋｉ）值大小顺序为甘蓝＞桃树＞茄子     

嗜卷书虱和嗜虫书虱酯酶性质的比较研究

对嗜卷书虱Liposcelis bostrychophila和嗜虫书虱L. entomophila羧酸酯酶及乙酰胆碱酯酶(AChE)的生物化学性质进行了初步研究。结果表明:嗜虫书虱的羧酸酯酶活性明显高于嗜卷书虱,嗜卷书虱和嗜虫书虱羧酸酯酶对底物α-NA的Km值分别为0.665 7、0.285 7 mmol/L,Vmax值分别为1.672 2和2.463 1 mmol·(mg·30 min)-1。嗜卷书虱和嗜虫书虱乙酰胆碱酯酶的活性差异不显著,嗜虫书虱略高于嗜卷书虱。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳,检测出8条嗜卷书虱、7条嗜虫书虱酯酶同工酶谱带,嗜卷书虱的酶谱分布比嗜虫书虱广。     

小菜蛾对溴氰菊酯抗性选育及其机理

本研究用溴氰菊酯在室内以点滴法处理小菜蛾４龄幼虫，连续继代药剂淘汰选育其抗药性，至Ｆ６５代，抗药性提高到１１６３倍，已形成高抗生品系。其抗性的形成发展趋势为前期相对缓慢，中期较快，后期迅速增长。于１９９２、１９９３、１９９４年分别以氯氰菊酯、敌敌畏、杀虫双、灭虫剂有明显 正交互抗性，对其它非菊酯类杀虫虫没有产生交互抗性。用聚丙烯酰胺凝胶电泳地（ＰＡＧＥ）测定表明，小菜蛾对溴氰菊酯抗性的产生可能与非