抗IBD高免卵黄抗体的研制

应用ＩＢＤ二价弱毒细胞苗和二价油乳剂灭活苗对鸡进行加强免疫，待高免鸡血清ＩＢＤＡＧＰ抗体效价达１：２５６以上时，收集高免蛋，用于制备抗ＩＢＤ高免卵黄抗体，制出的高免卵黄抗体ＩＢＤＡＧＰ效价为１：６４～１：１２８，用这种高免卵黄抗体对万余只ＩＢＤ病鸡进行治疗，剂量为每只鸡肌注１ｍｌ，总有效率在９０％以上。由此可见，ＩＢＤ高免卵黄抗体具有特异性好、治愈率高、取材方便、制造简便和使用方便等优点，适用于基层推广使用。     

传染性囊病抗原-抗体复合苗免疫雏鸡的效果

用ＩＢＤＶ抗体与某ＩＢＤ商品疫苗民ＩＢＤＶ－Ａｂ复合苗,用ＩＢＤＶ－Ａｂ复活 合苗与ＩＢＤ商品疫苗在有母源抗体的雏鸡中进行免疫对比试验,试验鸡随机分为４组,饲养在隔离器中,第１组为空白对照组,第２组为攻毒对照组,第３组在１０ｄ龄用复合苗进行免疫第４组在１０ｄ龄用商品苗进行免疫、各组从１１ｄ龄起每隔１０ｄ采血,用酶联免疫吸附试验检测血清中ＩＢＤ抗体水平,３５ｄ龄时进行攻毒试验,试验结果显示,２１ｄ龄     

斑点ELISA检测鸡传染性支气管炎病毒及抗体

采用鼠抗鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）高免血请作第１抗体，利用酶标羊抗鼠ＩｇＧ作第２抗体，建立间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ程序检测ＩＢＶ抗原；利用鸡抗ＩＢＶ血清阻断试验检测ＩＢＶ抗体。试验表明，本程序检测ＩＢＶ抗原及其抗体具有高度过感性和特异性。最低抗原检出量达１０￣（－８）ｇ数量级，阳性检出率９８％，阳性阻断率１００％。     

污染场地雏鸡新城疫法氏囊病的综合控制试验

在鸡法氏囊病（ＩＢＤ）和新城疫（ＮＤ）常发鸡场进行ＩＢＤ、ＮＤ的综合控制试验表明，严格环境卫生、消毒工作是控制污染鸡场ＩＢＤ、ＮＤ发生的关键措施。根据雏鸡ＩＢＤ、ＮＤ母源抗体下降和免疫抗体产生情况，应用合适的疫苗，选择正确的免疫程序，是免疫成功的重要保证。对农村专业户鸡场的雏鸡，在３周龄前进行ＩＢＤ苗的多次免疫或在其母源抗体偏低的日龄（１６～１８日龄）以后进行大剂量的ＩＢＤ（Ｄ７８）疫苗强化免疫均可控制鸡群ＩＢＤ的发生。对ＩＢＤ、ＮＤ发病鸡或其隐性感染鸡群尽早注射高免蛋黄可有效控制病情；注射高免蛋黄后１０天，超常量应用ＩＢＤ疫苗及ＮＤⅣ系疫苗免疫可预防ＩＢＤＤ、ＮＤ的继续感染。     

鸡传染性法氏囊病琼扩抗原的制备,标化及其应用

鸡传染性法氏囊病琼扩抗原的制备、标化及其应用罗函禄，范文明，张菊英，刘建平（江苏省农科院牧医所南京２１００１４）鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）琼脂扩散试验（ＡＧＰ），是检测鸡群ＩＢＤ抗体水平和高免血清、高免卵黄液效价的重要手段之一。本文探讨了ＩＢＤ琼扩抗...     

用自家IBD组织灭活苗研制卵黄抗体的试验

利用南京某养鸡场自家ＩＢＤ组织灭活油乳苗研制抗ＩＢＤ高免卵黄抗体，用于治疗该养鸡场ＩＢＤ发病鸡，取得了显著疗效。     

不同母源抗体水平雏鸡IBD免疫程序的探讨

采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测了１ｄ龄石岐杂雏鸡的ＩＢＤ母源抗体，根据不同母源抗体水平的高低，将１ｄ龄石岐杂雏鸡的ＩＢＤ母源抗体分为高、中、低３种水平．针对每个ＩＢＤ母源抗体水平的雏鸡设计了３种不同的ＩＢＤ双价苗的免疫程序．用ＥＬＩＳＡ检测免疫前后ＩＢＤ抗体的动态变化，并于２３ｄ龄时用ＩＢＤ强毒对雏鸡进行攻毒．结果说明，不同母源抗体的雏鸡，其ＩＢＤ的最佳免疫时机是不同的．作者建议使用ＩＢＤ双价苗免疫石岐杂雏鸡时，可根据１ｄ龄鸡群ＩＢＤ母源抗体的平均ＥＬＩＳＡ滴度，用公式“最佳接种日龄＝（抗体滴度－３４．６４）／２．８２＋１”预测最佳首免日龄．作者最后提出了一个控制石岐杂肉鸡ＩＢＤ流行的方法．     

双抗体ELISA检测鸡传染性法氏囊病病原

用单克隆抗体双抗体ＥＬＩＳＡ法检测自然发病鸡和人工感染鸡的法氏囊及其它脏器和ＩＢＤＶ细胞毒，病鸡的法氏囊ＩＢＤＶ检出率约１００％，其它脏器较低，ＩＢＤＶ细胞毒毒价明显低于组织毒。     

Dot－ELISA在鸡IBD免疫检测及诊断中的应用研究

利用鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）细胞适应株在鸡胚ＣＥＦ单层培养物上增殖后经超速冷冻离心制备抗原，以国产ＮＣ膜为载体建立了检测与诊断鸡ＩＢＤ的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法。经与ＡＧＰ、ＶＮ、ＥＬＩＳＡ等方法进行比较，表明本方法灵敏，快速，简易，特异性强，重复性良好。对ＩＢＤ免疫抗体的检测结果表明，采用首次以ＩＢＤ弱毒苗与灭能油乳剂苗同时免疫、再次用油乳剂苗加强免疫的接种程序，可获得显著而持久的抗体水平；带母源抗体（ＭＡｂ）的雏鸡于２１日龄首次免疫，效果良好；带ＭＡｂ的鸡胚于１８日胚龄接种ＩＢＤ弱毒苗，雏鸡出壳后可在较长时间内获得良好的保护。     

中药散剂与高免血清和高免蛋黄对鸡IBD治疗效果的对比研究

将试验用鸡随机分组，分别组成中药散剂、高免血清、高免蛋黄治疗组和发病、空白对照组。人工攻毒发病后，中药散剂按每只鸡每日１ｇ的药量拌于饲料，令鸡自然采食，连用５ｄ；高免血清每只鸡肌肉注射 ０．５ ｍＬ／ｋｇ体重；高免蛋黄每只鸡肌肉注射 １．５ ｍＬ。试验结果表明：中药散剂、高免血清、高免蛋黄对人工感染ＩＢＤ的治愈率分别为９８．３％、９８．３％、９６．７％，生物统计结果差异不显著．证明中药散剂、高免血清、高免蛋黄对鸡ＩＢＤ治疗均属特效药物。且中药散剂因其价格低廉、使用方便、高效无毒的特点，更适用临床对ＩＢＤ的防治。     

鸡法氏囊病细胞毒油乳剂灭活苗对种母鸡的免疫效果

鸡法氏囊病（ＩＢＤ）血清琼扩抗体阴性的５月龄非免母鸡，接种抗原量１．６６７×１０７．６ＴＣＩＤ５０的地方ＩＢＤ细胞毒油乳剂灭活苗后４个月，鸡血清ＩＢＤ琼扩抗体检查１００％阳性，血清平均抗体水平大于１：７．８；鸡群所产的蛋中，至少有９１．３％的鸡蛋卵黄ＩＢＤ琼扩抗体检查为阳性，６５．２％以上的鸡蛋卵黄抗体效价达１：４，平均卵黄抗体水平大于１：５．２，可抵御一般强毒的侵袭。母鸡免后６个月时，只有５７．６％的鸡蛋卵黄ＩＢＤ琼扩抗体检查为阳性，鸡蛋的平均卵黄抗体水平降到１：４以下。     

传染性法氏囊病病毒主要结构蛋白基因及其表达产物免疫学试验

用传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）ＶＰ２、ＶＰ３重组质粒ＤＮＡ及其大肠杆菌表达产物全菌裂解液油乳剂苗肌肉注射１４日龄仔鸡,免疫后１４和２１ｄ测定血清ＥＬＩＳＡ抗体效价,并于免疫后２１ｄ用ＩＢＤＶ南京野毒株攻击。结果显示：（１）ＶＰ２基因重组质粒ＤＮＡ除可诱导产生较高的ＥＬＩＳＡ抗体外,还可明显降低仔鸡ＩＢＤＶ攻击所引起的急性发病率和死亡率;（２）ＶＰ３－ＧＳＴ融合蛋白表达产物全菌裂解液可较早地诱导产     

兔源IBD抗独特型抗体疫苗的制备及对鸡的初试

用纯化的抗ＩＢＤＶ抗体作为抗原免疫家兔,并分离制得效价较高（１：１６）的兔源ＩＢＤ抗独特型抗体,分别与氏安全和福氏不完全佐剂按１：１比例乳化制成抗ＩＢＤＶ独特型抗体疫苗,免疫接种普通迪卡公雏鸡和ＳＰＦ鸡,然后用ＩＢＤＶ强毒株攻毒,得到保护率分别为１００／１００,１００／１００,５０／５０和大群免疫接种应答为１００％的免疫保护效果。     

鸡传染性支气管炎（IB）诊断方法的研究

本试验用鸡胚大量繁殖鸡传染性支气管炎病毒,收集尿囊液,用１％胰蛋白酶处理制备ＩＵＢＶ血凝抗原,建立了血凝－血凝抑制检测ＩＢＶ抗体的方法,其特异性强,操作简便。另外,本试验建立Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法用于检测ＨＢＶ,病料经处理后,点样于硝酸纤维素膜,加兔抗ＩＢＶ抗体,经ＰＰＡ－ＤＡＢ－Ｈ２Ｏ２显色,其检测结果与双抗体夹心ＥＬＩＳＡ的检测结果一致。     

鸡抗病促生长剂的试验研究

采用ＤＮＡ重组技术和蚀斑技术获得融合基因的重组病毒，制备了鸡生长抑制因子（ＳＳ）免疫原，与鸡传染性ＩＢＤ、ＮＤ免疫原共同高免健康产蛋鸡，使其卵黄中产生高效价的抗鸡ＳＳ、ＩＢＤ、ＮＤ抗体，利用含高效价的卵黄制成鸡抗病促生长剂。实验结果表明，该制剂对人工感染的ＩＢＤ鸡治愈率为９７．５％，预防保护率９８．４％；对流行区自然感染的ＩＢＤ鸡治愈率９６％，预防保护率９７％。对健康肉仔鸡应用，可使其育成出栏时间提前３天，每只平均比对照增重１３５．７ｇ；饲料转化率提高８．３７％。     

用自家IBD组织灭活苗研制卵黄抗体的试验

利用南京某养鸡场自家ＩＢＤ组织灭活油乳苗研制抗ＩＢＤ高兔卵黄抗体，用于治疗该养鸡场ＩＢＤ发病鸡，取得了显著疗效。     

鸡传染性法氏囊病高免血清的制备与检验

[目的]探索一种新的制备鸡传染性法氏囊病高免血清的方法。[方法]采用IBDV灭活苗对27日龄SPF鸡作基础免疫,活疫苗作3次加强免疫,四免后21 d采血制备高免血清。[结果]试验结果表明随着免疫次数的增加,试验鸡IBD中和抗体滴度逐步增加,一免和二免后中和抗体分别为12 log2和13 log2,三免和四免后中和抗体达到最高值15 log2。[结论]采用该方法免疫SPF鸡,有效保护了法氏囊不受损伤,3次免疫即可获得高效价的IBDV抗血清。     

Dot—ELISA在鸡IBD免疫检测及诊断中的应用研究

利用鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）细胞适应株在鸡胚ＣＥＦ单层培养物上增殖后经超速冷冻离心制备抗原，以国产ＮＣ膜为载体建立了检测与诊断鸡ＩＢＤ的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法。经与ＡＧＰ、ＶＮ、ＥＬＩＳＡ等方法进行比较，表明本方法灵敏，快速，简易，特异性强，重复性良好。对ＩＢＤ抗体的检测结果表明，采用首次以ＩＢＤ弱毒苗与灭能油乳剂苗同时免疫，再次用油乳剂苗加强免疫的接种程序，可获得显著而持久的抗体水平，带     

抗病促长剂治疗鸡传染性法氏囊病的效果

鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）是严重危害养鸡生产的一大传染病。由于ＩＢＤ的感染和流行,常常造成其它疫苗免疫接种效果不佳,甚至导致免疫失败,给养鸡生产造成极为严重的经济损失。为寻求控制鸡ＩＢＤ的有效药剂,特进行了该试验。１　材料与方法选择自然感染ＩＢＤ的发病鸡群进行试验。抗病促长剂由河南省农科院畜牧兽医研究所生物技术室研制提供。治疗方法是将自然感染ＩＢＤ的发病鸡群,随机分为３组。第１组用抗病促长剂进行肌肉注射,每只每次１．０～２．０ｍｌ,１天１次,连用２天;第２组用高免蛋黄液进行肌注,每只每次１．５～…     

传染性法氏囊病病毒dsRNA核酸提取

用免疫沉淀法从感染鸡法氏囊组织中分离传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ），用差速离心法从感染的鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）中分离ＩＢＤＶ，再从分离的ＩＢＤＶ中抽提ｄｓＲＮＡ。在ｄｓＲＮＡ提取物受ＤＮＡ降解产物影响时，可用ＤＮａｓｅⅠ消化去除，核酸再经琼脂糖凝胶电泳纯化。