粳稻中花11 T-DNA插入突变体的分离和鉴定

通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法,对中花11成熟胚愈伤组织进行T-DNA转化,构建了含1489个独立的再生转化株系的突变体库,不仅为水稻功能基因组提供了一个有效的研究平台,还创造了一些具有优良农艺性状的突变材料,为水稻育种提供新的基因资源。插入第1代单本移栽且单本收获,第2代播种1066个家系,在水稻各个生育阶段从中独立筛选得到各类外形突变体66个。经过第三代重复筛选获得包括茎、叶、花和穗变异等各类突变52份。结果表明,外观性状的突变频率为3.4%。     

水稻组织培养与突变体筛选

水稻组织培养与突变体筛选石太渊（辽宁省农科院高粱所）６０年代日本开始水稻组织培养研究，首次从茎节间成功地诱导出愈伤组织。Ｎｉｓｈｉ等（１９６５）用稻根培养在ＬＳ加９．０μＭ２，４－Ｄ培养基上产生了愈伤组织。把它转移到不加生长素的相同培养基上光培，分化...     

水稻RNAi突变体库的创制和筛选

通过转化水稻hp RNA农杆菌文库至粳稻品种台北309,获得143株转基因植株。随机选取36株T0代转基因植株进行检测,其GUS阳性率为77.78%,且其中35份PCR阳性材料的插入片段均与粳稻日本晴的m RNA有较高匹配。对61份T1代突变体进行筛选,获得33份有突变表型的材料。初步获得1份类病斑突变体,序列分析表明其可能干扰基因的编码产物为RAL6-种子过敏蛋白RA5/RA14/RA17的前体,属于淀粉酶/胰蛋白酶抑制剂家族,该类基因在植物自然防御系统中扮演重要较色。     

EMS诱导国麦301小麦突变体库的建立与鉴定

利用化学诱变剂甲基磺酸乙酯(EMS)诱变处理国麦301小麦种子,构建小麦EMS突变体库,旨在为小麦功能基因组学研究和分子育种准备基础材料。对M2代全生育期田间及收获后进行生物学性状及农艺性状鉴定。结果表明,突变群体的表型变异率为6.398%;获得了幼苗、叶、茎、穗、熟期等的突变体769个,变异类型丰富。     

天然低谷蛋白水稻突变体的筛选

以初步筛选出的10份低谷蛋白含量水稻种质为材料,经SDS-PAGE测定发现：细老鼠牙的谷蛋白含量明显低于对照品种W3660,冷水糯、迟白谷的谷蛋白含量与对照相似。经考马斯亮蓝G．250法测定：迟白谷、细老鼠牙、冷水糯这3个品种与对照品种W3660,谷蛋白在总蛋白中的含量分别为42．33％、43．96％、37．71％、46．42％。低谷蛋白含量水稻种质可以为功能稻的培育和研究提供重要的物质基础。     

利用反义基因沉默策略构建水稻突变体库及突变体筛选

尝试利用鸟枪反义基因沉默策略构建水稻突变体库．利用水稻反义cDNA文库转化粳稻品种中花11,获得了来源于105块潮霉素(Hm)抗性愈伤组织的1486个转化植株．随机选择来源于11个独立转化系的335个T0植株进行Hm离体叶片筛选,结果表明所有植株均呈抗性,并且与PER检测结果相吻合,说明T0植株中不存在假转化体．Southern blot分析结果表明T0植株大部分为单位点整合．T0及T1代转化植株均呈现了一些形态变异,如矮化、无分蘖或多分蘖、结实率降低、粒型或穗型改变、小穗结构改变等．利用Hm离体叶片筛选法对部分T1群体进行筛选,得到了1个变异性状与Hm抗性共分离的突变体,该突变体的变异表型为结实率比非转化对照下降约50％,每穗颖花总数比对照减少约40％,二者的总效应导致突变体单穗产量比对照约下降70％．     

水稻、小麦碳酸盐耐性突变体的筛选

用 Na N3处理水稻、小麦 ,在 M3世代中筛选出了水稻碳酸盐耐性突变体。结果表明 ,水稻品种之间有耐性差异 ,耐性突变体有稳定遗传的趋势。可培育出稳定遗传的新材料。     

水稻转基因再生植株突变体筛选的研究

在水稻转基因植株抗虫性测定的同时,我们进行了转基因再生植株突变筛选的研究,发现;１．水稻转基因再生植株第１代矮化现象较普遍,但大多数植株可能是受组织培养的影响,在第２代即可恢复原种性,只有少数是变异株;而变异频率较大的性状是生育期,１９９５－１９９６年共获得４株矮化株和１２株早熟株。２．突变体植株遗传具相对稳定性,第２代株系内即表现整齐一致,不分离。３．经过基因转化处理后的再生植株发生突变的频率增     

利用 CRIS PR/Cas9 技术创制水稻中花 11 号 dwarf1 突变体

【目的】水稻异源三聚体 G 蛋白 α 亚基在植物生长与逆境应答中具有重要的生物学功能,在 水 稻中花 11 号品种中创制 Gα 蛋白编码基因 DWARF1（D1）的突变体,为水稻功能基因组学研究提供材料。 【方法】在中花 11 号的 D1 基因座位上设计靶向其外显子的 sgRNA 序列,构建 CRISPR/Cas9 载体,转化中花 11 号胚愈伤组织,经过抗性愈伤组织筛选和诱导分化后,对再生植株进行鉴定。【结果】筛选到 3 个含有不同编 辑形式的 d1 突变株系,实时荧光定量 PCR 分析发现,D1 mRNA 水平显著降低,表明无义突变介导的 D1 mRNA 降解过程亦被触发。在 3 个 d1 突变株中进一步鉴定到不含潮霉素抗性基因、不含载体骨架的植株,繁育后可以 得到无转基因痕迹、稳定遗传的 d1 敲除植株。对 d1 突变株的生长、发育情况进行观察发现,中花 11 号背景下 d1 突变株显著变矮、穗明显变小,株高和穗长为中花 11 号野生型的 50%~60%。种子变小及变圆,同时,种子 长宽比和千粒重降低约 40%。【结论】获得有效移码突变的中花 11 号背景 d1 突变株系,为进一步研究 G 蛋白 及其相关基因的功能创制遗传材料。     

2个水稻黄叶突变体的遗传初步分析

从粳稻品种中花11的转基因植株后代中,获得了2份黄叶突变体（Y-347和Y-427）,经PCR等分析,表明这2个黄叶突变均与Ds转座子插入无关。通过突变体与正常中花11杂交和回交试验,证明这2个黄叶突变体均为单基因隐性突变。根据2个突变体间的杂交结果,初步表明,这2个突变体是由2个位点发生突变产生的。     

Cd对水稻根尖细胞的遗传损伤效应

以水稻(Oryza sativa L.)为材料,研究了不同浓度Cd对根尖细胞的遗传损伤作用.结果表明,随着Cd浓度增加和处理时间延长,水稻幼苗根尖细胞有丝分裂指数明显降低;4个时期相比,Cd对中期的影响最小.微核率随着cd胁迫浓度的增加和时间的延长而增加,但浓度过高时,微核率反而有所降低;此外,Cd能诱发根尖细胞染色体畸变,染色体畸变率随着Cd处理浓度的增加和处理时间的延长而升高,呈现明显的剂量-效应和时间-效应关系.以上结果表明,Cd可引起水稻根尖细胞有丝分裂抑制和染色体损伤,具有明显的遗传毒性.     

论亚洲栽培粳稻的起源

采用生物考古学方法在苏州阳澄湖畔的草鞋山遗址发掘出距今6000年前的古稻田,以此为追根求源的理论依据,论证了亚洲栽培粳稻的起源;探查分析研究与考古发掘出的这一古稻田比日本福冈县板付遗址发掘出的古稻田早3500年左右,证实了稻作起始于中国;亚洲栽培稻种的演化也并非是由籼型野生稻进化为栽培籼稻,再由籼稻进化成粳稻的一元论之说。     

粳稻外观品质的选择效果

为改良江苏粳稻的外观品质,以日本优质粳稻与江苏高产粳稻杂交后代为材料,研究了垩白粒率、垩白度和透明度等外观品质的选择效果.结果表明,在F4～F6代对垩白粒率、垩白度和透明度等外观品质进行选择的效果较好,上下世代间外观品质的表现有明显的相关关系,在F4和F5代外观品质达国际一级的单株,其下一代有70%以上单株的外观品质仍可达到一级标准.不同组合优质单株的出现机率存在明显差异.     

水稻地方品种资源条纹叶枯病的抗性鉴定(英文)

[目的]鉴定水稻地方品种资源条纹叶枯病的抗性。[方法]利用田间自然诱发鉴定对国内外的119份地方水稻品种资源材料进行了水稻条纹叶枯病的抗性鉴定。[结果]在119份供试材料中,56份籼稻材料中55份抗水稻条纹叶枯病;63份粳稻材料中,2份粳稻抗条纹叶枯病,其余61份都不抗水稻条纹叶枯病。[结论]该研究表明我国的地方品种资源蕴藏着丰富的抗水稻条纹叶枯病资源,这些抗病资源的开发利用将有助于解决我国和东南亚国家长期单一使用Stv-bi基因的现状。     

水稻空间诱变后代的微卫星多态性分析

选用299对微卫星引物，对经卫星搭载回收的水稻品种“特籼占13”种子种植后选育出的5个突变株的后代进行DNA多态性分析，结果表明：变异植株与原种之间均存在着不同程度的微卫星多态性。在有效扩增的283对引物中，引物多态性频率介于0．35％－2．47％之间，且多态性位点在水稻基因组中是随机分布的。     

食味仪测定与感官评价相结合鉴定优质粳稻食味特性

利用食味仪测定和感官评价2种方法,对来自国内外不同地域的60份优质常规粳稻品种(系)进行了食味特性评价.用不同方法分析食味测定值与食味品尝综合值的相关性,结果均表明两者呈极显著正相关.供试粳稻稻米食味测定值与仪器测定中的直链淀粉含量关系最密切;与感官评价指标中的气味、味道、口感、综合评分均呈极显著正相关,其中与综合评分相关系数最大(r=0.516**).相关分析和回归分析则表明食味品尝综合值与蛋白含量负相关程度大于直链淀粉含量.食味品尝指标中,综合评分与回生度相关性不显著,与味道相关系数最大(r=0.913**).分析表明,常规粳稻食味特性鉴定应将仪器测定和感官品尝两者结合进行.研究揭示的食味评价指标及获得的一批优良食味粳稻品种资源也为粳稻食味品质改良提供了重要的参考依据和物质基础.     

水稻粳型亲籼系籼粳型属性的程氏指数鉴定

为了提高鉴定粳型亲籼系籼粳型属性的准确性，用程氏指数鉴定了待测粳型亲籼系及其杂交后代的籼粳型属性。结果表明：用程氏指数鉴定粳型亲籼系的籼粳型属性的结果准确率较高，且年度间和季度间的稳定性好；偏粳型品种与籼型或偏籼型品种杂交，其F1多为籼型和偏籼型。用程氏指数法从15个待测粳型亲籼系中鉴定出1个粳型品系和4个偏粳型品系。另外，秧苗的KClO3抗性可作为鉴定粳型亲籼系籼粳型属性的一个指标，改良程氏指数能提高鉴定粳型亲籼系籼粳型属性的准确性。