小麦矮腥黑粉菌检疫鉴定研究进展和展望

小麦矮腥黑粉菌(Tilletia controversa Kuhn,简称 TCK)是我国十分重要的对外检疫性有害生物,是麦类腥黑穗病中危害最大、极难防治的病害之一.本文主要综述了近年来对其检疫鉴定的研究进展,并对其发展方向进行展望,以期为实现准确、快速地鉴定提供帮助.     

小麦腥黑粉菌萌发条件试验技术初探

1 前言通过对小麦矮腥 Tilletia contraversaKuihn.萌发光照条件对比试验结果表明,有9W 和11W 节能灯是 TCK 孢子萌发光照条件的可替代光源;用同一配方的新配制和配制后存放70天无污染的培养基均可使用,表面水汽少有利萌发。进口小麦初检时,曾出现过有些颜色较浅,成熟度较低的可疑孢子,其特征接     

小麦光腥黑粉菌原生质体的制备与再生

以优化原生质体的制备方法,建立小麦光腥黑粉菌的遗传转化体系为目的,研究了小麦光腥黑粉菌菌株培养时间、细胞壁裂解酶、酶解时间和渗透压稳定剂等对原生质体制备的影响。结果表明,以水琼脂培养基上培养7d的菌丝为初始材料,配置1.5%崩溃酶+1.5%溶壁酶+1.5%蜗牛酶的复合酶液,28℃酶解2 h后原生质体的获得率最高;以1.2 mol/L的氯化钾为渗透压稳定剂,得到的原生质体数量最多,且释放的原生质体能够均匀散乱分布,不聚集成堆;较适宜原生质体再生的培养基为TB3培养基,可产生较多的单菌落。     

小麦矮腥黑粉菌及其近缘种的RPB2基因片段序列分析

以小麦矮腥黑粉菌（Tilletia controversa Kühn）及其近缘种小麦网腥黑粉菌［T. caries （DC.）Tul.］、小麦光腥黑粉菌(T. laevis Kühn)和其他6种黑粉菌的DNA为模板,用RNA聚合酶II的第2亚基RPB2基因的通用引物RPB2-740F/RPB2-1365R进行PCR扩增。结果表明,3种小麦腥黑粉菌均能扩增出617 bp大小的DNA片段,供试的其他6种黑粉菌没有任何扩增产物。利用DNAMAN软件进行序列分析结果表明,3种小麦腥黑粉菌的RPB2蛋白基因序列的相似性为99.08%,存在17个碱基的差异。利用RPB2基因的通用引物作为小麦腥黑粉菌的内置对照引物,与小麦矮腥黑粉菌的特异引物CQUTCK2/CQUTCK3相结合可提高小麦矮腥黑粉菌检测的准确性。     

小麦光腥黑粉菌转化子最适固体培养基的筛选

为了筛选小麦光腥黑粉菌转化子最适培养基, 以提高小麦光腥黑粉菌转化子生长速度, 选取了3个菌落形态不同的转化子(ZHZ-1, ZHZ-2, ZHZ-3)进行培养试验?用6 mm打孔器打取菌饼, 将菌饼置于9种培养基上16℃避光培养?观察?测量小麦光腥黑粉菌转化子的菌丝生长情况?菌落直径等主要指标, 结果表明, 9种培养基中, 3种转化子都是在完全培养基(complete medium, CM)上生长状况最好, 菌丝生长速度最快?ZHZ-1转化子在CM培养基上菌落圆形, 有褶皱, 产生大量白色菌丝, 生长速度快?ZHZ-2转化子菌落圆形, 产生大量白色菌丝, 生长速度快?ZHZ-3转化子菌落云纹状, 有褶皱, 产生大量白色菌丝, 生长速度快?     

环氧乙烷熏蒸小麦矮腥黑粉菌应用技术的研究

应用环氧乙烷熏蒸进口小麦矮腥黑粉菌取代干热灭菌法获得成功,为进口小麦灭菌处理开辟了新的途径。试验表明环氧乙烷熏蒸小麦矮腥黑粉菌的有效剂量为175—200克/米~3,熏蒸期间粮温15—25℃,密闭熏蒸3—5天。同时还对矮腥黑粉菌有一定的持续效果。每立方米用150—200克的环氧乙烷熏蒸小麦,对种子的生活力有影响,不宜用于少量引种繁殖材料的熏蒸,只能作进口小麦灭菌处理。     

小麦光腥黑粉菌冬孢子总DNA提取方法比较

以小麦光腥黑粉菌冬孢子为试验材料,比较分析了改良CTAB法、氯化苄法、SDS法对小麦光腥黑粉菌冬孢子总DNA提取的效果。结果表明,SDS法无论在DNA纯度(R=A260 nm/A280 nm)和产量上均优于氯化苄法和CTAB法。利用SDS法能获得186 ng/mg的DNA产率,而氯化苄法和CTAB法只能分别获得145 ng/mg和112 ng/mg。采用SDS法提取的DNA纯度较高,-RSDS=1.485,氯化苄法(BC)和CTAB法所得DNA纯度无明显差异,分别为-RCTAB=1.254和-RBC=1.264。     

小麦矮腥黑粉菌的鉴定及检测方法

由Tilletia controversa Kühn(TCK)引起的小麦矮腥黑穗病是重要的国际检疫性病害,也是我国对外的A类检疫对象。本文就该病原菌的形态学和生物学鉴定、分子检测方法进行了综述。展望了分子检测技术在病害检疫中的应用前景。     

小麦矮腥黑粉菌原生质体的制备与再生

本文优化了小麦矮腥黑粉菌原生质体的制备与再生条件。结果表明:小麦矮腥黑粉菌的冬孢子在土壤浸提液固体培养基中萌发后转接入T19液体培养基,培养45d,以菌丝作为酶解初始材料,用1.5%崩溃酶+1.5%溶壁酶+1.5%蜗牛酶复合酶液28℃酶解2.5h原生质体的获得率最高;以1.2mol/L的氯化钾为渗透压稳定剂,所得原生质体数量最多,且释放的原生质体能均匀分散分布,不聚集成堆;小麦矮腥黑粉菌的原生质体在TB3培养基上能长出较多的单菌落。     

禾草腥黑粉菌及其近似种的分类进展

随着绿化事业的发展 ,我国每年要从国外引进大量的草种 ,其中包括禾草腥黑粉菌Ｔｉｌｌｅｔｉａｆｕｓｃａ复合种的一些寄主如羊茅Ｆｅｓ ｔｕｃａｓｐｐ .、早熟禾Ｐｏａｓｐｐ .、雀麦Ｂｒｏｍｕｓｓｐｐ .等。在进境检疫中 ,口岸检验检疫部门经常截获潜在危险性检疫性有害生     

小麦印度腥黑穗病菌的湿热灭菌

本试验对来源于墨西哥的小麦印度腥黑穗病菌（TIM）的菌瘿和冬孢子粉分别进行了湿热处理。其中，冬孢子粉的处理组合66种，菌瘿的处理组合10种。结果表明，当处理温度为70℃，相对湿度为70％（90－180min)、75％（30－90min)、80％（20－50min)，85％（8－26min)、90％（5－14min)，及温度为75℃，相对湿度为65％（20－110min)、70％（15－45min)、75％（10－25min)、80％（3－12min)、85％（2－8min)，和温度为80℃，相对湿度为55％（20－80min)、65％）5－20min)、70％（3－12min)、75％（1－7min),80%(1-4min)时，均不能杀灭TIM冬孢子粉。当处理温度为85℃，相对湿度为80％时，杀灭TIM冬孢子粉的时间小于或等于3min；在该温湿度条件下，杀灭TIM菌瘿的时间小于或等于3min；在该温湿度条件下，杀灭TIM菌瘿的时间则需大于或等于5min。因为认为，85℃、相对湿度80％条件下处理5－6min能比较可靠地杀死疫麦麦麸中的TIM病菌。     

黑麦草腥黑粉菌分子检测方法的研究

寄生于黑麦草属植物有4种腥黑粉菌,分别是小麦矮化腥黑穗病菌(Tilletia.Controversa(TCK))、黑麦草腥黑粉菌(T.lolli)、黑麦草粒腥黑粉菌(T.walkeri)和新种(T.vankyi)。其中TCK、T.lolli和T.vankyi冬孢子形态非常相似,难以区分。本研究以寄生于黑麦草上的这3种腥黑粉菌为研究对象,设计T.lolli的特异引物,成功建立了T.lolli冬孢子的套式特异PCR检测方法。     

Physiological basis of bentazon tolerance in rice (Oryza sativa L.) lines

In the present study, 98.8 mm of bentazon was applied to 3‐leaf stage rice seedlings. Two tolerant lines, M202 and cv. TNG67, showed slightly visible injury, photosystem II inhibition, as well as a low level of lipid peroxidation 7 days after application compared with the susceptible lines. Further physiological study of the mechanism of differential tolerance among Japonica and Indica types indicated that, although the tolerant Japonica lines M202 and cv. TNG67 absorbed more ¹⁴C‐bentazon, most of the ¹⁴C remained in the treated leaf or translocated to older leaves. However, two susceptible lines, FSK (Japonica) and IR36 (Indica), absorbed less ¹⁴C‐bentazon throughout the experiment, and most of the ¹⁴C was translocated from the treated leaves to younger leaves, which might result in the death of developing tissues. In addition, more bentazon residue and less polar metabolites were detected in these two susceptible lines. It is proposed that the higher tolerance of lines M202 and TNG67 to bentazon could be mainly due to a higher rate of metabolism of this herbicide, and partially due to less translocation to developing tissues.     

玉米抗旱性的QTL分析研究进展和发展趋势

由于分子标记技术的广泛应用,使玉米抗旱性的复杂遗传机制得到逐步了解,其中的一个重要研究进展是通过对玉米抗旱性的数量性状位点(QTL)进行作图和定位,大致了解了一些对抗旱性有显著贡献的基因的染色体位置及其效应,这些结果为分子标记辅助选择和进一步的深入研究打下了基础。在总结分析国际上近十年来在玉米抗旱性QTL分析方面的研究资料的基础上,对研究中涉及到的主要性状及其相互关系、QTL分析中需要注意的主要问题和在该领域的主要研究进展进行了分析评述。认为构建通用的连锁图谱、与功能基因组学研究相结合、应用新的QTL分析技术和抗旱QTL的克隆及其利用将是今后的发展趋势。     

黄猄蚁饥渴耐受能力的初步研究

在实验室恒温条件下,通过完全饥渴、清水和蜂蜜水处理3种方式对黄猄蚁工蚁进行了饥渴耐受能力的测定。结果表明,完全饥渴处理的黄猄蚁工蚁平均存活时间为81.38h(24～132h),清水处理的黄猄蚁工蚁平均存活时间为92.25h(48～156h),两者差异显著(P<0.05)。蜂蜜水处理死亡的黄猄蚁工蚁平均存活时间为118.43h(60～156h),与完全饥渴和清水处理的黄猄蚁工蚁存活时间差异极显著(P<0.01)。在试验观察结束(156h)时,完全饥渴和清水处理的黄猄蚁工蚁全部死亡,而蜂蜜水处理的黄猄蚁工蚁仍有75存活。     

桔小实蝇热响应数学模型比较

利用恒温水浴槽对桔小实蝇的卵(16+2h)、1龄幼虫(48+2h)和非取食3龄老熟幼虫进行不同温度和时间组合的热水浸泡处理,分别利用热动力学模型、机率值模型、Logit模型和Log-Log模型对死亡率与处理时间的关系进行了分析比较,以明确最佳分析数学模型和热处理最耐受虫态。试验结果表明:热动力学模型为预测热处理致死时间的最佳数学模型;在44℃、45℃和46℃等温度条件下,桔小实蝇卵的耐热能力最强,其次为1龄幼虫,3龄幼虫耐热能力最差。该结果为利用热水浸泡处理等热处理技术对桔小实蝇进行检疫处理奠定了基础。     

匍柄霉属真菌对多菌灵耐药性分子机制的初步研究

 多菌灵是一类高效广谱的苯并咪唑类杀菌剂,用于防治多种重要的植物病害。尽管其对子囊菌、多数半知菌和担子菌有效,但对卵菌、接合菌和少数半知菌却无效,如腐霉属真菌（Pythium spp.）, 链格孢属真菌（Alternaria spp .）和匍柄霉属真菌（Stemphylium spp.）。其抗药性机制主要是由于β-微管蛋白氨基酸的突变,导致蛋白质序列发生变化从而影响药剂与靶标的结合。研究表明其抗药性与β-微管蛋白几个位点氨基酸突变有关^［1］。     

高温胁迫对禾谷镰孢生长和致病力的影响

为探究高温胁迫对禾谷镰孢生长和致病力的影响, 本研究测定了禾谷镰孢5株耐高温菌株和4株温度敏感型菌株在25℃和30℃下的菌丝生长速率、产孢量、孢子萌发率以及不同胁迫压力下的生长速率、致病力和DON毒素含量等。结果表明, 不论耐高温菌株还是温度敏感型菌株, 30℃高温对其菌丝生长均有抑制作用, 但对产孢量和孢子萌发有促进作用;30℃高温能减轻NaCl和CaCl2胁迫对禾谷镰孢生长的抑制, 但是不影响KCl、刚果红, SDS和H2O2对病原菌的抑制作用;在30℃下, 大部分耐高温菌株的致病力不变或降低, 而大部分温度敏感型菌株的致病力反而增加, 30℃对大部分菌株的DON毒素产量有一定促进作用。研究结果可为研究气候变化下小麦赤霉病的流行和预测提供理论基础。     

TaqMan-MGB探针在小麦印度腥黑穗病菌和黑麦草腥黑穗病菌鉴定上的应用

根据小麦印度腥黑穗病菌Tilletia indica和黑麦草腥黑穗病菌T.walkeri核糖体ITS序列设计了两对通用引物和两条特异性探针,建立了小麦印腥印度腥黑穗病菌Tilletia indica和黑麦草腥黑穗病菌T.walkeri的实时荧光PCR检测方法,检测的灵敏度为1个冬孢子.这种检测方法可以直接用于样品小麦印腥和黑麦草腥黑穗病菌冬孢子的快速检测,整个检测过程缩短至1天.