“一种根结线虫分子鉴定引物集及其制备方法与应用”发明专利获公开

<正>据悉,近日国家知识产权局公开一件由中国农业科学院烟草研究所申请的发明专利:一种根结线虫分子鉴定引物集及其制备方法与应用。该发明提供了一种根结线虫分子鉴定引物集,通过如下方法获得:利用预测的南方根结线虫蛋白序列分别与南方根结线虫基因组和北方根结线虫基因组比对,设置比对序列的相似度即percent参数为75,得到单拷贝基因;将单拷贝基     

江苏省熏衣草根结线虫种类鉴定

根结线虫在中国广泛分布,能够寄生数千种作物,然而薰衣草上根结线虫的病害的发生及系统鉴定目前鲜有报道。本研究对薰衣草根结线虫病的症状进行观察,并进行了病原线虫的分离和形态学及分子鉴定。结果表明该病害由南方根结线虫侵染引起,侵染严重时根组织发黑溃烂,地上茎部呈黄褐色,叶片萎蔫发黄。利用分离的根结线虫卵块接种生长6周的健康薰衣草植株,接种10周后植株根组织出现严重根结症状,与自然发病相似。从根结中再次分离得到根结线虫经鉴定为南方根结线虫。本研究首次表明薰衣草根结线虫病害由南方根结线虫引起。     

安徽省4种寄主南方根结线虫鉴定

为了鉴定安徽省栝楼(Trichosanthes kirilowii)、桔梗(Platycodon grandiflorum)、木耳菜(Basella rubra)和小叶黄杨(Buxus sinica)上的根结线虫(Meloidogyne spp.)种类,并比较不同RKN种群间形态差异,运用形态学和酯酶同工酶凝胶电泳特征条带分析方法对安徽省4种寄主南方根结线虫进行种类鉴定。形态学观察和酯酶同工酶凝胶电泳特征条带分析结果均表明：栝楼、桔梗和木耳菜上的RKN均为南方根结线虫(Meloidogyne incognita);形态学观察结果表明：小叶黄杨上的根结线虫肥西种群为南方根结线虫(M. incognita)疑似种,酯酶同工酶凝胶电泳特征条带分析结果将其确定为南方根结线虫(M. incognita),木耳菜和小叶黄杨上发生的南方根结线虫为安徽省新种。该研究结果为本地根结线虫防治、南方根结线虫生理分化研究、种群和寄主间关系研究提供依据。     

青岛选育出抗根结线虫番茄品种

结线虫是一种主要寄生在植物根部须根或侧根上的病害，近年来，番茄根结线虫病害已成为番茄生产尤其是温室番茄生产的严重障碍。由青岛农业大学王富教授主持的“番茄抗根结线虫种质资源的创新和利用”通过鉴定标志着该问题得到了解决。该课题组通过远缘杂交、回交等育种方法和手段，初步鉴定出危害山东省番茄的主要根结线虫种类，并筛选出番茄抗根结线虫苗期人工接种鉴定的有效方法；     

盆栽榕树主要根结线虫的发生及其生物防控技术研究

盆栽榕树是福建省主要出口创汇植物产品,近年受根结线虫为害严重。笔者介绍南方根结线虫和花生根结线虫在盆栽榕树上的发生情况,并从抗性品种选育、天敌生物利用和植物源杀线剂研发等方面,解析盆栽榕树主要根结线虫的生物防控技术,以期实现对根结线虫的无公害与可持续控制。     

广东省甘薯根结线虫的鉴定

为了掌握广东省甘薯根结线虫病害发生情况,用常规分离法进行解剖分离,并对分离线虫进行形态鉴定和分子鉴定。从广东省粤东的陆丰、海丰和粤西的遂溪、吴川、廉江、雷州等地甘薯薯块带有明显根结的薯块进行分离,观察所分离根结线虫的2龄幼虫、雌成虫、会阴花纹特征,并通过根结线虫鉴定引物扩增条带约750 bp,结果表明引起广东省甘薯薯块危害的是象耳豆根结线虫。该病害逐年扩大危害对甘薯产业构成潜在威胁。     

兵团第十四师四十七团设施蔬菜根结线虫种类鉴定

根据植物寄生线虫形态学特征,采用根结线虫特异性引物PCR扩增检测方法,鉴定第十四师四十七团设施蔬菜根结线虫种类。结果表明,15个供试根结线虫群体雌虫会阴花纹的形态特征与南方根结线虫的形态一致;特异性引物扩增检测结果显示仅有南方根结线虫的特异性引物扩增出了特异性条带。据此判断四十七团设施蔬菜根结线虫群体均为南方根结线虫（Meloidogyne incognita）,未发现与其它根结线虫复合侵染的现象。     

危害秋芹的根结线虫生态地理居群调查及其防治

通过对亚热带地区已感土壤根结线虫病病害的秋芹生产田间间取样调查发现：寄生秋芹根系危害秋芹生产的土壤根结线虫生态地理居群为勒克瑙根结线虫种（Ｍ．ｌｕｃｋｎｏｗｉｃａ）。其居群主要分布在秋芹根系较多的０～１５ｃｍ土层中。造成勒克瑙根结线虫危害秋芹生产的直接原因是,秋芹属于勒克瑙根结线虫的寄主植物。防治勒克瑙根结线虫危害最有效、最最经济的方法是利用勒克瑙根结线虫属于专性植物寄生虫的生物学特征,实行蔬菜轮作。     

安徽省明确4种寄主南方根结线虫种类

<正>为了鉴定安徽省栝楼、桔梗、木耳菜和小叶黄杨上的根结线虫种类,并比较不同RKN种群间形态差异,安徽农业大学植物保护学院科研人员运用形态学和酯酶同工酶凝胶电泳特征条带分析方法,对4种寄主南方根结线虫进行了种类鉴定。形态学观察和酯酶同工酶凝胶电泳特征条带分析结果均表明:栝楼、桔梗和木耳菜上的RKN均为南方根结线     

山东保护地蔬菜根结线虫种类鉴定

近年来在北方由于蔬菜大棚的大力发展,为根结线虫的越冬提供了良好的生活环境,保护地蔬菜根结线虫的发生日趋严重,为了鉴定危害山东省保护地蔬菜根结线虫的种类,从山东蔬菜主产区7个地市的蔬菜生产大棚中采集了14种蔬菜根结线虫寄主样本,采用ITS-PCR分子生物学鉴定方法对其进行了鉴定,表明山东蔬菜主产区的蔬菜根结线虫均为南方根结线虫(Meloidogyine incogaka).     

Screening techniques and sources of resistance to nematodes in cool season food legumes

Identification of sources of resistance in cool season legumes to cyst (Heterodera spp.), root-knot (Meloidogyne spp.), and stem nematode (Ditylenchus dipsaci) is generally based on number of cysts on roots, root-knot nematode induced gall index, and stem nematode reproduction in shoot tissue, respectively. Various levels of resistance to cyst nematodes have been detected in chickpea and pea. Resistance has also been identified in chickpea, faba bean, and pea to the root-knot nematodes. Broad based durable sources of resistance to plant parasitic nematodes are required. Basic research is needed to develop transgenic plants with resistance based on hatch stimulants, inhibitors, toxins, or repellents found in antagonistic rhizosphere microorganisms. Selection of genotypes that favor development of beneficial rhizosphere microorganisms or root endophytes that increase the plant resistance to nematode infection deserves attention.     

南方根结线虫食道腺表达基因7E12影响植物的初步研究

南方根结线虫(Meloidogyne incognita)是一种重要的植物寄生线虫,它的食道腺产生的分泌蛋白是对寄主造成危害的致病因子。鉴定这些编译分泌蛋白的基因的特性,是认知南方根结线虫对植物致病性或寄生性机理的关键所在。本研究通过使用烟草根部特异表达基因TobRB7的△0.3缺失的启动子,替换植物过表达载体pBI-121的 CMV(烟草花叶病毒) 35S 启动子,构建了南方根结线虫食道腺细胞表达的基因7E12的植物表达载体pBI-Trp-7E12和pBI-Trp。pBI-Trp在本研究中作为空白对照使用。利用农杆菌（Agrobacterium rhizogenes）侵染花粉管通道法把这两个载体转化了模式植物拟南芥。通过利用卡那霉素抗性培养基对已转化的拟南芥进行筛选,获得了T1代转基因植株。这为研究鉴定该基因的特性奠定了基础,以利于进一步研究南方根结线虫对植物的致病性机理。     

马铃薯不同品种(系)和稻、薯轮作模式对根结线虫病的防治效果

根结线虫病是马铃薯连作减产的主要原因之一。为研究根结线虫病的农艺防治措施,本文开展了品种抗性评价、稻、薯轮作和土壤淹水下的线虫消减动态研究。抗性评价试验表明, 18个品种(系)中没有筛选到同时抗南方根结线虫和爪哇根结线虫的材料,品系1002-1和品种丽薯6号相对抗性较好,青薯9号和合作88相对敏感。马铃薯根结线虫发病土壤中可同时检测到卵、幼虫和成虫等不同形态。水旱轮作试验表明,经一茬水稻栽培可使土壤中根结线虫虫态完全消失,再种植马铃薯也不再发生根结线虫病,且马铃薯有效产量显著提高,青薯9号、合作88和丽薯6号的单株有效产量较对照分别提高50.5%、43.7%和26.0%,差异均极显著, 1002-1单株有效产量与对照差异不显著。由此可见,稻、薯轮作根结线虫防治效果明显。为进一步探索水旱轮作的防治机制,观察了土壤淹水进程中各种虫态消减动态。结果表明,在淹水过程中,根结线虫的卵、幼虫和成虫不同虫态此消彼长,要淹水60 d以上,土壤中才检测不到所有形态虫体。水早轮作中水稻生长期淹水时间足够长,满足防治线虫的淹水条件。因此结合抗病品种选用进行稻、薯轮作是防治马铃薯根结线虫病既绿色环保又可持续有...     

中药材白芷根结线虫调查研究

掌握白芷根结线虫发生及危害规律,为防治提供理论依据。2012—2014年,对南川白芷种植地进行根结线虫病调查;不同时期采用五点取样法采集白芷根结线虫病病株和病土,用蔗糖离心法分离根结线虫。结果表明,白芷根结线虫在粘土中发病较壤土、砂土、砂壤土轻;连作地发病较间作和轮作严重;根结线虫二龄幼虫密度由1月的71条/1000 g干土增加到10月的1615条/1000 g干土;根结线虫的土层分布调查发现,3月为根结线虫发病高峰期,水平分布根结线虫种群数量向白芷根部集中,而垂直分布根结线虫密度随着土层深度的不断增加而逐渐降低。     

设施栽培中蔬菜根结线虫生物防治研究进展

近年来,随着设施栽培的高速发展,诸多制约设施栽培蔬菜产业发展的问题随之出现。蔬菜线虫病害问题是最重要制约因素之一,其中以根结线虫（Meloidogyne spp.）的危害最为严重。根结线虫是植物根系定居性内寄生生物,因其广泛分布性和多寄生性,现已成为世界性的威胁农业生产的主要病原物。过去,该类病害的防治以化学药剂为主,并结合农业防治以及使用抗病品种等,但都有其局限性。随着科技的进步和人们环保意识的加强,生物防治引起了人们的高度重视。本文综述了生物防治的各类生防因子的研究进展,并就影响根结线虫生物防治的一些重要因素进行了深入分析,最后对生物防治进行了展望。     

Sr18生物杀线虫制剂防治黄瓜根结线虫病研究

利用生防菌株Sr18研制的生物杀线虫剂,于2003—2004年在山东省济南的日光节能温室内进行了防治黄瓜根结线虫病的研究。结果表明,通过发酵工程及生化分离手段制得的生物杀线剂1,2,3号均有显著的抗线虫括性,其中以2号浓缩水剂效果最为显著,可明显降低土壤内根结线虫2龄幼虫的数量,虫口减退率94．68％,收获期对黄瓜根结线虫病的防效高达80．27％,显著高于对照化学药剂益舒丰（65．84％）和生物药剂灭虫灵（52．44％）。另外,该制剂还具有促进植株生长和提高产量的效果,杀线剂2号处理区的平均株高和单株鲜重极显著高于空白对照组,分别增长16．32％和20．43％;杀线剂2号的黄瓜增产率为28．28％,优于益舒丰（19．8％）和灭虫灵（17．43％）处理。     

一种消毒剂对陕西关中东部温室西瓜生长及土壤的影响

渭南是陕西省西瓜种植主产区,但多年连作种植加上不合理的田间管理使得土壤理化性质恶化,病虫害加剧,果实品质下降等问题突出。为了有效地改良土壤环境,促进当地西瓜产业的发展,本试验以小型礼品西瓜 “玲珑王”为供试作物,探究了使用土壤消毒剂之后西瓜的生长、根结线虫发病以及土壤微生物和酶活性的变化。结果表明,西瓜生长后期株高茎粗随着消毒剂浓度的增加都有所增加;植株总鲜重、西瓜产量和含糖量均表现为52.5 kg/ hm2浓度处理最高,亩产比对照高7.30%;随着消毒剂浓度的增加根结线虫发病率降低,二者相关系数为0.747;加入消毒剂之后土壤在0~10与10~20 cm土层细菌总数均低于对照,而四种土壤酶的活性均高于对照,且蔗糖酶与碱性磷酸酶的活性也均表现为52.5 kg/ hm2浓度处理最高。     

产紫青霉对烟草根结线虫病的生物防治研究

为评估产紫青霉对烟草根结线虫病的生防潜质,采用产紫青霉K1对南方根结线虫二龄幼虫及卵的活性进行了室内生测,同时利用了产紫青霉K1生物菌剂对烟草根结线虫病进行了2年2地的田间防效测定。结果表明：（1）产紫青霉K1菌株对南方根结线虫具有较强的毒杀活性,48 h对根结线虫2龄幼虫的校正致死率高达94.53%,对卵孵化的相对抑制效率达90.75%;（2）3种用量的产紫青霉对烟草根结线虫的防治效果及烤烟综合农艺性状、产质量和均价均优于33.00 kg/hm²的淡紫拟青霉,其中以41.25 kg/hm²产紫青霉的防治效果、综合农艺性状、产值量和均价最好,平均防效为80.60%,烟叶产量、产值和均价分别为2119.50 kg/hm²、56762.77元/hm²和26.78元/kg。因此,产紫青霉K1在烟草根结线虫生物防治领域具有较大的潜能,可作为攀枝花烟草根结线虫病生防菌加以开发应用,推荐使用方法及用量为在烟草移栽时使用41.25 kg/hm²产紫青霉K1一次。     

猪屎豆与淡紫拟青霉联合防治烟草根结线虫病的效果评价

为明确猪屎豆与淡紫拟青霉对烟草根结线虫病的联合作用,以猪屎豆根系粉为材料,研究了猪屎豆根系水提液对淡紫拟青霉的生长、产孢量、孢子萌发率及南方根结线虫致死率的影响,同时设置3个处理（单独间作猪屎豆、单独施用淡紫拟青霉、间作猪屎豆同时施用淡紫拟青霉）对猪屎豆与淡紫拟青霉联合防治烟草根结线虫病的协同增效效应进行了综合评价。结果表明：（1）猪屎豆根系粉适能促进紫拟青霉的生长、产孢及萌发,0.01 g/mL猪屎豆根系粉的淡紫拟青霉培养物的水提液处理南方根结线虫J2,24 h校正致死率高达96.08%。（2）烤烟间作猪屎豆同时施用淡紫拟青霉,能显著增加烤烟的株高和叶片宽度,烟草根结线虫病的防效高达67.5%,较单独间作猪屎豆的防效提高了22.9%,较单独使用淡紫拟青霉的防效提高了10.2%。本研究认为猪屎豆与淡紫拟青霉协同作用防治烟草根结线虫具有显著的协同增效效应。