蓝莓灰霉病菌防治药剂室内毒力测定

由灰葡萄孢引起的蓝莓灰霉病是蓝莓生长和贮藏期间的重要病害,为筛选出有效防治蓝莓灰霉病的药剂,采用菌丝生长速率法测定14种杀菌剂对蓝莓灰霉病菌的室内毒力。结果表明,化学杀菌剂毒力由强到弱依次为腐霉利、嘧菌酯、吡唑醚菌酯、氟硅唑、多菌灵、己唑醇、啶酰菌胺、溴菌腈、嘧霉胺和噻呋酰胺,EC₅₀值分别为0.56、0.81、0.82、1.46、1.65、1.77、11.86、13.76、55.85和425.76 mg·L^-1;生物杀菌剂毒力由强到弱依次为丁子香酚、中生菌素、多抗霉素和井岗霉素,EC₅₀值分别为1.13、13.65、59.47和499.38 mg·L^-1。     

梨梢枯病菌生物学特性及对药剂敏感性研究

通过对在中国新发现的梨梢枯病病原菌(Aureobasidium pullulans var. pullulans)在不同温度、pH、碳源、氮源和光照等培养条件和孢子致死温度的测定,明确病原菌的生长规律和死亡条件,并采用生长速率法对该病原菌进行9种杀菌剂的毒力筛选。结果表明:梨梢枯病病原菌菌丝生长的适宜温度为15～25 ℃,最适温度为20 ℃,温度高于35 ℃时,菌丝生长缓慢;菌丝生长最佳培养基为PDA培养基,产孢最佳培养基为OA培养基;甘露醇和酵母粉分别为菌丝生长和产孢的最佳碳源和氮源;菌丝可在pH 4～10条件下生长,pH 5为生长最适pH;光照对菌丝生长有促进作用,并且有利于病原菌产孢,在光暗交替的培养条件下,菌落会形成明显的轮纹。病原菌分生孢子的致死温度为48.9 ℃。该病原菌对75%肟菌·戊唑醇水分散粒剂的敏感性较高,其EC₅₀ <0.01 mg·L^-1;对70%甲基硫菌灵可湿性粉剂、50%多菌灵可湿性粉剂、43%氟菌·肟菌酯悬浮剂和325 g·L^-1苯甲·嘧菌酯悬浮剂的敏感性次之,其0.01 mg·L     

嗜果刀孢菌的室内药剂筛选及拮抗菌的种类鉴定

【目的】由嗜果刀孢菌(Wilsonomyces carpophilus)引起的穿孔病对野杏、野生樱桃李、栽培杏和桃的叶片、果实造成了严重危害。对嗜果刀孢菌的室内药剂筛选及拮抗菌的种类鉴定可有效防治野杏真菌性穿孔病。【方法】采用菌丝生长速率法和孢子萌发法测定8种杀菌剂对嗜果刀孢菌的室内毒力；同时从野杏叶片上分离出1株拮抗细菌，结合形态学特征、生理生化特性和基于16S r DNA基因序列的系统发育分析开展拮抗菌株的鉴定。【结果】室内毒力测定结果表明，50%多菌灵对嗜果刀孢菌菌丝生长抑制效果较好，75%百菌清抑制效果较差，有效中浓度(ρ，median effective concentration,EC₅₀)为918.8 mg·L^-1;27%戊唑·噻霉酮对分生孢子萌发毒力较强，EC₅₀为0.060 5 mg·L^-1,75%百菌清对分生孢子萌发毒力较弱，EC₅₀为1103.0 mg·L^-1；拮抗菌株XHG-1-3m²对嗜果刀孢菌抑制率为88....     

两种羊肚菌真菌性病害的鉴定及其防治药剂筛选

以六妹羊肚菌（Morchella sextelata）污染菌种中分离的病原性真菌为试材，采用菌丝生长速率法，研究了10种常见杀菌剂对病原菌的抑制效果，并与生石灰进行复配，以期筛选出适合六妹羊肚菌菌种生产与人工栽培的复配杀菌剂。结果表明：羊肚菌菌种2种常见的真菌性病害分别为绿色木霉（Trichoderma viride）与卵孢单端孢（Trichothecium ovalisporum）;在10种杀菌剂中，百菌清的抑菌效果最好，0.25 g·L^-1百菌清对绿色木霉与卵孢单端孢的抑制率分别为85.71%和64.16%;0.25 g·L^-1百菌清与1.2 g·L^-1生石灰制成的复配制剂对2株病原菌的抑制率均高于单剂处理，分别为93.25%、72.73%,而对六妹羊肚菌无显著抑制作用，或可应用于相关病害防治。     

5种杀菌剂对苹果轮纹病菌的室内毒力测定

采用菌丝生长速率法在室内测定了5种杀菌剂对苹果轮纹病病原菌的毒力。结果表明,5种杀菌剂对苹果轮纹病病原菌菌丝生长均有较好的抑制作用,其中10%苯醚甲环唑微乳剂对苹果轮纹病病原菌的抑菌效果最佳,EC50(抑制中浓度)为0.0971mg/kg,其次为43%戊唑醇悬浮剂,EC50为0.2567mg/kg。     

牛樟芝菌丝体培养条件筛选

以牛樟芝为试验材料，采用单因素和正交试验的设计方案，研究不同碳源(乳糖、蔗糖、葡萄糖、可溶性淀粉、甘露醇)和氮源(黄豆粉、酵母粉、牛肉膏、蛋白胨、麦芽浸膏)对菌丝体生长的影响。通过观测其菌落大小、菌落长势、菌丝生长速度及生长指数，筛选出最适宜牛樟芝菌丝体生长的培养条件。结果显示，在单因素试验中葡萄糖是牛樟芝菌种的最适碳源，酵母粉是最适氮源，该条件下其菌丝密度高，颜色呈橘红色，生长速度快。以菌丝生长速度和生长指数作为评价指标的正交试验中，当培养基配方为马铃薯(煮汁) 200 g·L^-1、葡萄糖20 g·L^-1、酵母粉15 g·L^-1、KH₂PO₄ 1 g·L^-1、MgSO₄ 0.5 g·L^-1、维生素B₁ 0.1 g·L^-1时，牛樟芝菌丝生长速度达2.47 mm·d^-1，生长指数为12.35，明显优于其他试验组。     

甜瓜枯萎病病原菌鉴定及高效低毒化学防治农药筛选

以吉林省甜瓜枯萎病重度发生区域采集的发病果实为试材，采用组织分离法对其病原菌进行分离，同时利用形态学和分子生物学鉴定，以及科赫氏法则进行致病性验证；并通过菌丝生长速率法测定了8种生产中常用的化学药剂原药对该致病菌的毒力作用，研究了高效低毒化学农药对甜瓜枯萎病室内防治效果，以期为利用高效低毒化学农药田间防治甜瓜枯萎病提供参考依据。结果表明：拟轮枝镰刀菌(Fusarium verticillioides)是吉林省甜瓜枯萎病的一种新的致病菌，供试的8种化学药剂中咪鲜胺对F.verticillioides XT1的抑制作用最好，毒力作用最强，EC₅₀值为0.029 5μg·mL^-1,其次为戊唑醇和氟硅唑，其EC₅₀值分别为0.146 7μg·mL^-1和0.190 1μg·mL^-1;咪鲜胺、戊唑醇和氟硅唑的最小抑菌药物稀释浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)值分别为0.048、1.2μg·mL^-1和0.8μg·mL     

连翘褐斑病病原菌鉴定及其对杀菌剂敏感性研究

采用组织分离法分离纯化得到连翘褐斑病病原菌,依据科赫氏法则验证其致病性,结合病原菌形态学特征及其ITS、LSU和SSU序列的多基因联合分析,确定病原菌为链格孢Alternaria alternata。测定了培养基、温度、pH、光照、碳源和氮源等处理对该病原菌生长、产孢和孢子萌发的影响,并采用菌丝生长速率法测定其对8种杀菌剂的敏感性。结果表明,菌丝生长最适条件为25～30℃,pH 7.0,碳源为木糖醇和甘露醇,氮源为蛋白胨;产孢最适条件为25℃,pH 7.0,碳源木糖醇,氮源为尿素;孢子萌发最适条件为15～35℃,pH 5～9,碳源为木糖醇,氮源为牛肉浸粉。在测试的8种杀菌剂中,嘧菌环胺(EC50=0.032 mg·L^-1)和苯醚甲环唑(EC50=0.054 mg·L^-1)对其具有较强的抑制作用。     

响应面法优化六妹羊肚菌液体种培养基配方

以六妹羊肚菌(Morchella sextelata)GZCC0287菌株为试材,采用单因素试验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验、响应面法,研究了碳源、氮源、无机盐、CMC-Na对六妹羊肚菌丝生物量及菌丝球浓度的影响,以期为羊肚菌液体菌种生产、栽培种、工业化生产提供参考依据。结果表明:红糖、酵母粉、KH₂PO₄、MgCl₂·6H₂O为最佳碳源、氮源和无机盐,最佳培养基配方为红糖50.49g·L^-1、酵母粉10g·L^-1、KH₂PO₄1g·L^-1、MgCl₂·6H₂O 2.37g·L^-1、CMC-Na 10.11g·L^-1,菌丝生物量达到(5.21±0.45)g,菌丝球浓度达到(2567±127)个·mL^-1,以1000个·mL^-1浓度接种栽培种,发菌快,长势好,满袋时间10~15d。     

1株庐山野生桑黄菌的分离鉴定与培养特性研究

对采自江西省庐山国家级自然保护区的野生桑黄子实体进行组织分离、形态学鉴定和系统发育分析,证实分离的菌株为锦带花桑黄。利用单因素试验法对该菌株的培养特性进行研究,确定该菌株生长的最适pH为6.0,最适生长温度为27.5℃,最佳碳氮比为5∶1。经正交试验对固体培养基进行优化,得到菌株最适培养基为红糖20 g·L^-1、酵母浸膏2 g·L^-1、KH₂PO₄ 0.5 g·L^-1、琼脂20 g·L^-1,菌丝生长速度为5.38 mm·d^-1。     

生物源杀菌剂及其与戊唑醇复配对苹果主要炭疽菌的室内活性评价分析

苹果免套袋生产已经成为苹果产业转型升级的必然趋势，然而去袋后，主要由胶孢刺盘孢和尖孢刺盘孢侵染引起的苹果炭疽病会引发烂果、落果，严重影响苹果产量和品质，且面临果面农药残留的问题。为此，筛选可用于防控上述病害的生物源杀菌剂至关重要。采用菌丝生长速率法首先测定了8种生物源杀菌剂对2种病菌菌丝生长的抑制效果，结果表明，50亿cfu/g多粘类芽孢杆菌、100亿cfu/g枯草芽孢杆菌、300亿cfu/g解淀粉芽孢杆菌对2种病菌菌丝生长的抑制效果较好，对胶孢刺盘孢的EC₅₀值分别为1.489×10^-5、5.911×10^-1、1.717×10^-5μg/mL，对尖孢刺盘孢的EC₅₀值分别为2.810×10^-4、1.302×10^-1、1.110×10^-2μg/mL。进而分析了上述药剂与常用化学药剂43%戊唑醇的最佳复配比，结果表明，100亿cfu/g枯草芽孢杆菌与43%戊唑醇按1∶1比例复配时，对胶孢刺盘孢的抑制效果最好，增效比为...     

新鱼腥草素钠对柑橘指状青霉的抑菌作用

通过离体和活体试验测试新鱼腥草素钠(SNH)对柑橘绿霉病的病原菌指状青霉(Penicillium digitatum)的抑菌效果,最小抑菌浓度和最小杀菌浓度分别为1和2 mmol·L^-1;随SNH浓度升高,指状青霉孢子萌发率显著下降,相对电导率显著上升;透射电镜结果表明,1 mmol·L^-1 SNH处理可破坏指状青霉细胞结构,导致细胞质成分溶解,线粒体结构消失,发生质壁分离。同时,1 mmol·L^-1 SNH可抑制多种柑橘真菌病害的生长,具有广谱抑菌性。采用5、10 mmol·L^-1 SNH+指状青霉孢子混合液人工接种夏橙果实,其病斑直径显著小于对照。这些结果表明,SNH可显著抑制指状青霉的生长,具有成为柑橘绿霉病防控药剂的前景。     

11种杀菌剂对柑桔褐腐疫霉Phytophthora citrophthora的室内毒力

由疫霉菌引起的苗疫、褐腐病是柑桔苗期和结果期间的重要病害。为筛选出有效防治药剂,采用菌丝生长速率法测定了11种杀菌剂对柠檬褐腐病病原柑桔褐腐疫霉Phytophthora citrophthora的室内毒力。结果表明,氟噻唑吡乙酮与双炔酰菌胺的抑菌作用强,EC₅₀值分别为0.000 6、0.011 6 mg/L;烯酰吗啉、氟菌·霜霉威和霜脲氰的抑菌作用较强,EC₅₀值分别为0.464 8、0.608 8、0.647 1 mg/L;其余杀菌剂的毒力一般或较差,甲霜·锰锌、代森锰锌、百菌清、三乙膦酸铝、氢氧化铜和丁子香酚的EC₅₀值分别为4.034 0、13.230 0、25.400 0、41.740 0、69.150 0和71.510 0 mg/L。     

无花果黑点病病原鉴定及防控药剂室内初步筛选

果实黑点病严重危害威海市青皮无花果的生产,该病害在无花果近成熟期发生,发病时果皮产生大量黑斑,对果实外观品质影响较大,果实黑点病病原的鉴定和防治药剂的筛选对于其防控十分重要。通过组织分离法从病果上分离纯化得到病菌分离物,根据致病性测定、形态学特征及ITS基因序列的系统发育分析,威海市青皮无花果黑点病病原菌初步鉴定为链格孢Alternaria alternata(GenBank登录号为OP415640),命名为WH-4。采用生长速率法测定15种药剂在常规生产使用浓度下对该病原菌的抑制效果,结果显示,450 g/L咪鲜胺水乳剂的抑菌效果最好,菌丝生长抑制率为74.1%;40%氟硅唑乳油的抑菌效果最差,菌丝生长抑制率为7.9%。同时,450 g/L咪鲜胺水乳剂、40%苯醚甲环唑悬浮剂、300 g/L苯甲·丙环唑微乳剂、125 g/L氟环唑悬浮剂可作为防治由A. alternata引起的无花果黑点病的优选药剂。这些结果将为威海市青皮无花果黑点病的防控提供依据和指导。     

柑橘炭疽病的病原鉴定和综合防治措施

采集桔园感病柑橘,进行病原菌分离鉴定并研究了其对农药的敏感性、形态学和ITS1-5.8S rDNA-ITS2序列分析。结果表明:病原菌为胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）;对11种市售农药都具有敏感性,其中氟硅唑、中生菌素、多抗霉素、丙森锌、氟菌唑、异菌脲6种药物对病菌菌丝生长的抑制活性较高,以氟硅唑最为灵敏,其EC₅₀为0.041μg/mL,丙森锌和中生菌素次之,EC₅₀分别为1.59、4.73μg/mL;氟硅唑和百菌清对孢子的抑制效果较好,丙森锌、佳爽和多抗霉素也有一定的保护作用。根据药敏试验和文献方法制定了综合防治方案。     

2017 年辽宁省番茄灰霉病菌对腐霉利的抗药性现状及机制研究

从辽宁省8 个地区的番茄种植区中采集、分离纯化得到番茄灰霉病（Botrytis cinerea）单孢菌株115 株，采用菌丝生长速率法测定其对腐霉利的抗药性，并对抗药性分子机制进行研究。结果表明，辽宁省番茄灰霉病菌对腐霉利的抗药性呈现加重的趋势，8 个地区番茄灰霉病菌对腐霉利的敏感性差异较大，EC₅₀ 值分布在0.05～16.30 mg·L^-1 之间，平均为3.99 mg·L^-1，抗性频率达到83.48%，以中抗菌株为主，但在阜新和盘锦地区检测到高抗菌株。对抗性菌株BcOS1 基因序列分析表明，所选抗性菌株在第369 位和第373 位的氨基酸同时发生突变。     

贵州红阳猕猴桃棒孢叶斑病病原菌分离鉴定及防治药剂筛选

为明确贵州省红阳猕猴桃叶片上一种病害的病原菌,对病叶采用组织分离法分离得到6株病菌,通过ITS、EF-1α、β-tubulin基因进行多基因分子鉴定,6株病菌均为多主棒孢霉Corynespora cassiicola (Berk.&M.A.Curtis) C.T. Wei。采用菌丝生长速率法测定了10种杀菌剂对病原菌的抑菌效果,其中45%咪鲜胺微乳剂、20%咪鲜·嘧菌酯悬浮剂、30%吡唑醚菌酯悬浮剂、250 g/L丙环唑乳油、50%唑醚·喹啉铜水分散粒剂、10%苯醚甲环唑水分散粒剂的抑菌效果较好,EC50分别为0.52、0.88、2.56、2.94、4.80、4.90 mg/L。同时对6种杀菌剂进行了田间药效试验,结果表明20%咪鲜·嘧菌酯悬浮剂800倍液、10%苯醚甲环唑水分散粒剂750倍液、50%唑醚·喹啉铜水分散粒剂1 500倍液、45%咪鲜胺微乳剂1 500倍液防效较好,防效分别为80.86%、79.54%、76.86%、76.17%,可用于田间防治由多主棒孢霉引起的猕猴桃棒孢叶斑病。     

杭州芦笋茎枯病病原鉴定与防治

2018—2020年,杭州佳慧芦笋种植基地疑似发现芦笋茎枯病危害,为了明确病原菌种类,将采集的病样进行致病菌分离纯化和鉴定,明确该病害为芦笋茎枯病,根据病原菌形态特征、通用引物及特异性引物扩增序列比对结果,该病原菌与天门冬拟茎点霉〔Phomopsis asparagi(Sacc.)Bubak〕同源性为100%,鉴定为天门冬拟茎点霉。生物学活性测定结果表明,25%吡唑醚菌酯悬浮剂对该病菌菌丝完全抑制,75%百菌清可湿性粉剂对菌丝的抑制作用次之,EC₅₀为0.13 μg · mL^-1。盆栽试验验证,25%吡唑醚菌酯悬浮剂对茎枯病防治效果最好,达94.56%,可作为防治芦笋茎枯病高效药剂。     

利用均匀设计法优化鸡(土从)母种培养基

鸡(土从)菌丝生长缓慢,在培养过程中极易被污染,为了提高鸡地从菌丝生长速度,减少被污染的机率,在前期单因素试验筛选鸡(土从)母种培养基中的碳源、氮源、氨基酸、维生素、无机盐、蚁穴浸提物、抑菌剂等结果的基础上,选取马铃薯汁、麦芽糖、酵母膏、VB_9、脯氨酸、可溶性碳酸钙清液、磷酸二氢钾、硫酸镁、蚁穴浸液、链霉素等10个因子,每个因子设12个水平,采用U₁₂(12¹⁰)均匀设计表设计试验方案,对鸡(土从)母种培养基进行优化。最优母种培养基配方为马铃薯汁126.20 mL·L^-1、麦芽糖11.63 g·L^-1、酵母膏5.50 g·L^-1、VB_9 47.90μg·L^-1、脯氨酸23.37μg·L^-1、可溶性碳酸钙清液0、磷酸二氢钾0.07 g·L^-1、硫酸镁4.19 g·L^-1、蚁穴浸提物61.82 mL·L^-1、链霉素2.33 mg·L^-1。利用该优化配方的培养基培养的鸡(土从)母种,其菌丝生长速度快,长势强。     

贵长猕猴桃蒂腐病病原菌分离鉴定及防治药剂毒力测定

为明确引起贵长猕猴桃蒂腐病的病原菌种类并筛选出有效的防治药剂,本研究从自然发病果实中进行病原菌分离,通过菌株致病性测定、形态学及分子生物学等鉴定明确病原菌,并针对病原菌采用6种不同杀菌剂对其抑菌效果进行研究。结果表明,分离获得的有效菌株中GC-1和GC-2可引发蒂腐病,将有效菌株的序列结果与NCBI进行核酸Blast比对,GC-1和GC-2分别与木贼镰刀菌Fusarium equiseti和粉红螺旋聚孢霉Clonostachys rosea的同源性达99%和100%,结合GC-1和GC-2病原菌形态特征分析,明确引起贵长猕猴桃蒂腐病的病原菌为木贼镰刀菌和粉红螺旋聚孢霉。室内毒力测试结果表明,甲基硫菌灵对木贼镰刀菌抑菌效果最好,EC₅₀值为8.200 7 mg/L;其次是异菌脲、咪鲜胺、多菌灵、戊唑醇和苯醚甲环唑,EC₅₀值分别为19.643 1、23.245 4、37.750 5、70.253 3和139.217 9 mg/L。多菌灵对粉红螺旋聚孢霉的抑菌效果最好,EC₅₀值为7.854 0 mg/L;其次是咪鲜胺、苯醚...