牦牛源副乳房链球菌的分离鉴定及部分生物学特性分析

从青海省某养殖场牦牛肺脏中分离出3株细菌,通过生化试验、16S rDNA序列分析、小鼠致病性试验和药敏试验检测.结果发现,这3株细菌为革兰氏阳性链球菌,与副乳房链球菌(Spu)同源性为99％;分离株在TSA琼脂培养基上呈光滑圆形,半透明的菌落,在血琼脂上呈α溶血;其中Spu-1分离株对小鼠具致病性;药敏试验显示,分离菌...     

榆林部分地区湖羊乳房炎病原菌的分离鉴定及耐药性和毒力基因检测

【目的】明确规模化湖羊场乳房炎的主要病原菌种类及其耐药性和毒力基因分布情况,指导临床治疗湖羊乳房炎合理用药。【方法】在6个规模化羊场采集临床型乳房炎乳样43份,采用细菌形态学鉴定、生化鉴定及16S rDNA序列分析的方法确定引起湖羊乳房炎的主要病原菌,采用纸片扩散法检测其耐药性,并通过PCR方法检测相关毒力基因。【结果】革兰染色镜检显示获得了革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌。革兰阳性球菌在Baird-Parker琼脂平板上呈现出边缘圆润,中间呈黑色的菌落;生化试验鉴定结果显示,分离株对甘露醇、过氧化氢和兔血浆凝固试验为阳性;经16S rDNA测序比对,与金黄色葡萄球菌高度相似的分离株共31株。革兰阴性杆菌在伊红-美蓝琼脂平板上呈现出黑紫色泛有金属光泽的菌落,在麦康凯琼脂平板上呈现出粉红色的菌落;生化试验鉴定显示,分离株对吲哚试验和甲基红试验为阳性,对VP试验和枸橼酸盐利用试验呈阴性;经16S rDNA测序比对,与大肠杆菌高度相似的分离株共12株。药敏试验结果显示,分离的金黄色葡萄球菌对环丙沙星、左氧氟沙星和头孢噻肟具有较高的敏感性,对青霉素、红霉素和链霉素耐药;分离的大肠杆菌对环丙沙星和左氧...     

犊牛肺源致病性大肠杆菌的分离鉴定及毒力基因检测

研究旨在鉴定引起犊牛呼吸系统疾病的细菌性病原,选择38份采集自阿克苏地区某规模化牛场病牛病料组织,进行细菌分离鉴定、16S rRNA基因鉴定、动物试验以及PCR扩增等.结果显示,分离株对营养要求很低,在麦康凯琼脂培养基上形成粉红色、边缘整齐、表面光滑湿润的菌落;在伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属光泽的菌落;综合生化试验结果...     

鸡源棒状杆菌的分离鉴定及同源性分析

笔者对发生传染性眼炎的病鸡送检病料进行了病原分离鉴定,为该病的实验室诊断提供参考资料。用接种环蘸取病鸡的眼结膜,在兔血琼脂平板和含5%小牛血清TSA琼脂平板上进行病原的分离培养、形态观察、生化试验、16Sr RNA PCR扩增、序列测定、同源性分析。结果从病鸡的眼结膜上分离到一株革兰氏阳性杆菌。该菌对营养要求高,在营养琼脂平板和LB琼脂平板上呈贫瘠的露滴状菌落,在兔血琼脂平板和含5%小牛血清的TSA琼脂平板上生长良好,呈不溶血圆形隆起、白色半透明、光滑湿润的露滴状菌落。该菌与棒状杆菌HM215052.1同源性达99.3%。说明该群鸡是由棒状杆菌所引起的传染性眼炎。     

一例鸡源金黄色葡萄球菌的分离鉴定与耐药性分析

采集关节肿胀、关节囊内有浆液性渗出物患病鸡肝脏及骨髓进行细菌分离,对分离菌进行形态学观察、革兰氏染色、生理生化试验、PCR鉴定、16S rDNA序列测定和药敏试验。结果从病鸡样品中分离出一株在普通琼脂平板上形成湿润、表面光滑、隆起的圆形菌落,菌落在血琼脂平板上能产生β溶血;分离菌为革兰氏阳性,符合金黄色葡萄球菌生化培养特性;PCR检测结果显示金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶基因呈阳性,细菌16S rDNA核酸序列Blast比对结果显示为金黄色葡萄球菌;分离菌对阿莫西林、四环素、青霉素G、氯霉素、复方新诺明和氨苄西林具有耐药性。结果为云南鸡源金黄色葡萄球菌病的临床诊断和防治提供了依据。     

鹅沙门氏菌的分离鉴定及药敏试验

目的:对送检的疑似沙门氏菌的病死鹅进行病原菌的分离鉴定及药敏试验,为沙门氏菌病的实验室诊断提供参考资料,为养殖户用药提供指导。方法:对从病死鹅肝脏中分离得到的细菌进行培养,革兰氏染色,镜检,生化试验以及药敏试验。结果:从病死鹅的肝脏中分离到一株革兰阴性单个存在的杆菌。该菌在营养琼脂上生长为半透明、灰白色、圆形、湿润、隆起、中等大小的菌落。在麦康凯琼脂平板上为透明、表面光滑湿润、圆形、隆起的小菌落。该菌能利用葡萄糖既产酸又产气,利用麦芽糖只产酸,不利用乳糖和蔗糖,MR试验为阳性,VP试验为阴性,吲哚形成试验为阴性。结论:该送检病死鹅是由于感染了沙门氏菌病而引起的死亡。     

广西猪流产胎儿溶血葡萄球菌的分离鉴定及其16SrDNA基因系统进化分析

为了查清引起母猪流产的原因,从送检流产胎儿的内脏组织中分离培养细菌,对分离菌株进行革兰氏染色镜检、药敏试验、生化试验、16S rDNA基因序列测定、同源性分析及系统进化树构建.结果表明,分离菌株为革兰氏阳性球菌,其生长特性、菌落特征、生化试验鉴定结果基本符合《常见细菌系统鉴定手册》中溶血葡萄球菌的生化特性;但在血琼脂培...     

一株猪丹毒杆菌的分离与鉴定

为了鉴定贵州省黔东南州某养殖场发生的一起细菌感染的致病菌,试验采用常规分离培养、基因序列比较和动物回归试验等方法,分析了病原菌的致病力和药物敏感性。结果表明:该分离菌在血琼脂平板上长出圆形、湿润、露滴样细小菌落,菌落周围产生浅绿色溶血环,革兰氏染色为阳性细小杆菌,并能发酵葡萄糖、乳糖、果糖等糖类,硝酸盐还原呈阳性,硫化氢试验为阳性,以上特征与猪丹毒杆菌生物学特性相同;9.6×10~3cfu/m L的剂量可致死小鼠,具有较强的致病力,对大环内酯类药物最为敏感。     

牛源破伤风梭菌的分离与鉴定

1头进行了瘤胃瘘管手术的黄牛发病死亡,临床症状表现为肌肉强直性痉挛。本试验取其手术伤口部位的炎性肌肉进行了细菌分离,分离到1株破伤风梭菌CT-JX-1。该分离菌株为具有顶端芽孢的革兰氏阳性杆菌;在普通琼脂培养基形成出灰白色、扁平、粗糙的菌落,菌落中心部分致密,外缘呈蜘蛛网状;该菌株能液化明胶,对多种糖均不发酵。     

山羊干酪性淋巴结炎病原的分离和鉴定

2010年9月从一起以皮下浅表淋巴结肿大,后期呈脓性干酪样坏死的山羊病例的脓汁中,分得一株多形态、无荚膜和芽胞的革兰氏阳性的球杆菌,该菌在马丁汤和马丁琼脂平板上生长缓慢,在麦康凯琼脂上不生长,但在鲜血琼脂或犊牛血清琼脂上生长良好,48h可长成直径在1mm大小,灰白色、不透明、干燥、中央突起、边缘不整齐,在鲜血琼脂平板上呈β型溶血的菌落。经对病原分离培养、生化试验、动物致病性试验和PCR检测鉴定该菌为伪结核棒状杆菌。并根据药敏试验的结果对病羊进行治疗,提出了综合防治措施。     

云南鸡源副禽嗜血杆菌的分离鉴定与耐药性分析

无菌棉签深入病死鸡鼻窦腔深部无菌采集病料进行细菌分离,对分离菌进行形态学观察、生理生化试验、革兰氏染色、血凝活性测定、16S rDNA序列测定和药敏试验。结果在富含V因子血琼脂平板上分离到一株灰白色、圆形、边缘整齐的光滑型小菌落,菌落在血琼脂平板、麦康凯等培养基上无明显菌落生长;镜检观察为革兰氏阴性菌,具有血凝活性,符合副禽嗜血杆菌生化培养特性;细菌16S rDNA核酸序列Blast比对结果显示为副禽嗜血杆菌。分离菌株对妥布霉素、阿奇霉素、庆大霉素、阿米卡星具有敏感性。     

山羊伪结核棒状杆菌的分离鉴定

从福建省不同羊场的山羊颈肩部淋巴结脓肿处分离到5株无荚膜、不形成芽孢的革兰氏阳性球杆菌,该菌在含血清的琼脂培养基上,可生长成直径1-2 mm、干燥、中央凸起、不透明、边缘不整齐、伴有β溶血环的菌落,而在普通培养基上生长不良,在麦康凯琼脂培养基上不能生长。根据其形态学、培养特性、生化特性及致病性试验和动物回归试验结果,判定所分离的5株菌为山羊伪结核棒状杆菌。     

一株犬种布鲁氏菌的分离与鉴定

对从一只流产贵宾犬全血中分离到的一株布鲁氏菌进行了形态结构、培养特性、生化特性研究以及凝集试验鉴定和多种属聚合酶链式反应(AMOS-PCR)鉴定.结果表明,分离菌为革兰氏阴性菌,在胰际琼脂培养基生长并呈典型的粗糙型布鲁氏菌菌落,菌落能被结晶紫溶液染成紫色.分离菌在琉瑾和复红培养基上生长,不产生H2S,与粗糙型布鲁氏菌阳性血清凝集,与光滑型布鲁氏菌阳性血清无凝集.用AMOS-PCR方法对分离菌进行鉴定,该分离菌具有犬种布鲁氏菌特有条带.鉴定结果表明分离菌符合犬种布鲁氏菌特性,将其命名为B.canis GB1.     

猪传染性胸膜肺炎的流行与诊治

1 病原 为胸膜肺炎放线菌,小到中等大小的球杆状到杆状,具有显著的多形性.菌体有荚膜,不运动,革兰氏阴性.为兼性厌氧菌,其生长需要血中的生长因子,特别是V因子,但不能在鲜血琼脂培养基上生长,可在葡萄球菌周围形成卫星菌落.因此,初次分离本菌时,一定要在血琼脂培养基上作葡萄球菌划线,37℃培养24小时后,在葡萄球菌菌落附近的菌落大小为0.5～1.0毫米并呈β溶血.在巧克力琼脂(鲜血琼脂加热至80～90℃、5～15分钟)上生长良好,37℃培养24～48小时后,可见圆形、隆起、表面光滑、边缘整齐的灰白半透明小菌落.     

麋鹿产气荚膜梭菌分离鉴定方法的建立与初步应用

探索了产气荚膜梭菌在营养琼脂、甘露醇卵黄琼脂和血琼脂平板上的菌落形态和培养特点,优化了产气荚膜梭菌的分离方法,并对分离菌株进行生化鉴定;在此基础上对北京南海子麋鹿苑和江苏大丰麋鹿国家级自然保护区的麋鹿自然感染情况进行了调查。结果发现,粪样中的产气荚膜梭菌在营养琼脂上生长呈半透明边缘不整的白色菌落,接种甘露醇卵黄琼脂和血琼脂平板,分别出现伴有卵磷脂酶乳光浑浊带的粉红色火山口状菌落和伴有双溶血环的灰绿色勋章样菌落。生化试验结果确认这些分离株均为产气荚膜梭菌。对北京南海子麋鹿苑和江苏大丰麋鹿国家级自然保护区麋鹿粪样检测发现,阳性率分别为13.04%(3/23)和19.51%(8/41)。说明本研究建立的麋鹿产气荚膜梭菌分离鉴定方法简便快速,确实可行;麋鹿产气荚膜梭菌自然感染率较高,应加强麋鹿产气荚膜梭菌病的防控。     

猪场猪传染性萎缩性鼻炎净化技术——病原分离及其特性研究

从临床上有明显咳嗽、流涕、鼻染和鼻甲骨变形的２０～６０日龄仔猪的鼻拭子分离到１２株细菌,经形态观察、培养特性、生化试验和动物感染试验,证明分离菌为支气管败血波氏杆菌（Ｂｒｏｄｅｔｅｌｌａ ｂｒｏｎｃｈｉｓｅｐｔｉｃａ）。该菌周身鞭毛、能运动,为革兰氏阴性小杆菌;在鲜血琼脂平板上产生β－溶血,在马铃薯浸液培养基上生长良好：形成黄棕色略带绿色的菌落,在改民丁琼脂上形成表面光滑、隆起、针尖魇菌落 ;不利     

一例非致病性肠杆菌污染孵化厅的报告

某孵化厅在进行微生物常规监测时,发现孵化器空间含有大量革兰氏阴性杆菌,经跟踪监测发现在孵化厅消毒药池中含有该菌。检测过程介绍如下: 一.细菌特征 培养特性:该菌为革兰氏染色小杆菌,在营养琼脂培养基上生长旺盛,菌落较小、光滑、湿润、微显荧光;麦康凯培养基上菌落呈黄色;伊红美蓝培养基上菌落不变色。 生化特性:尿素酶阴性、山梨醇阳性、蔗糖阴性、甘露醇阳性、麦芽糖阳性、葡萄糖阳性、三糖铁产酸、产气、产H_2S、斜面产碱,运动力阳性、柠檬酸阴性、丙二酸钠阳性、卫矛醇阳性、赖氨酸阳性。 二.运动接种试验 为了检查该菌的致病性,将该菌做了一日龄雏鸡接种试验。     

叠氮钠血琼脂在猪丹毒丝菌分离培养中的应用

为了从污染样本中分离猪丹毒丝菌,使用叠氮钠血琼脂作为其选择性培养基进行该病原分离培养,同时对比阳性菌株在哥伦比亚(Columbia)血琼脂上的生长特性来评估叠氮钠血琼脂的适用性。结果显示:271份样本中猪丹毒丝菌的分离率为61.62%,除链球菌、葡萄球菌及念珠菌外,其他细菌的生长得到了很好的抑制;通过与Columbia血琼脂的比较发现,菌株在叠氮钠血琼脂上生长具有菌落小、溶血环大的特性,易于辨认。研究表明,叠氮钠血琼脂适合猪丹毒丝菌生长,并具有较强的选择性及特殊的培养特征,可应用于临床。     

一起赛鸽烟曲霉菌病的诊断

为了鉴定门诊遇到的一起以呼吸困难为主要临诊症状,以肺脏、气囊、腹膜等组织器官灰白色粟粒状结节为主要病变的赛鸽是否感染了霉菌,采集病死鸽组织样本进行霉菌的分离培养、菌落形态观察和染色镜检试验,从赛鸽组织样本中分离鉴定到一株烟曲霉菌.烟曲霉菌在高盐察氏琼脂培养基上呈现烟绿色绒毛状、棉絮样丝状菌落.光镜观察可见散在分布的霉菌...     

1株罗曼粉鸡源申氏不动杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为了解贵州省某养殖场罗曼粉鸡发病病原的特征及其耐药性,本试验从病死鸡中分离出一株革兰氏阴性菌,命名为GZ2019,并对其进行纯化培养、生化试验、16S rRNA序列分析、药敏试验及动物回归试验。分离菌在普通琼脂培养基上呈圆形凸起、表面光滑、半透明的灰白色小菌落,鲜血营养琼脂培养基上菌落形态与普通琼脂培养基上的一致,但不溶血;革兰氏染色结果镜检显示,分离菌为成双排列的阴性球杆菌,偶见单个存在或链状排列;生化试验结果显示,分离菌枸橼酸盐利用、过氧化氢酶反应为阳性,硝酸还原、氧化酶、葡萄糖发酵等反应为阴性,无运动性;16S rRNA序列分析结果显示,分离株与不动杆菌的核苷酸同源性在72.6%~99.9%之间,与申氏不动杆菌LUH 4760株（GenBank登录号：AJ275041）、SNSK 752株（GenBank登录号：MG584984）、MCDA01株（GenBank登录号：KY385627）及RP1株（GenBank登录号：MG461636）的核苷酸同源性高达99.9%;药敏试验结果显示,分离菌对头孢曲松和痢特灵敏感,对头孢哌酮、头孢呋辛、头孢他啶等5种药物中度敏感,对新霉素、环丙沙星、羧苄西林等17种药物耐药;动物回归试验结果显示,试验组小鼠隔离饲养1周仅死亡1只,死亡率为20%,表明该分离菌致病性较弱。本试验成功分离出1株低致病性申氏不动杆菌GZ2019,可为鸡源申氏不动杆菌病的预防和治疗提供一定的参考依据。