口蹄疫病毒5'端非翻译区致病机理的分子基础

该文阐述了口蹄疫病毒5'端非翻译区的结构和功能,综述了近年来口蹄疫病毒5'端非翻译区与宿主细胞间关系及其致病机制方面的研究进展,分析了口蹄疫病毒5'端非翻译区致病机理的分子基础,认为其5'端非翻译区的基因组结构对口蹄疫病毒的复制和扩增是必不可少的,为进一步研究口蹄疫病毒的复制机理、毒力及其决定因素、致弱机理、致病机理及宿主嗜性提供理论参考.     

盐处理下两种砧木对甜樱桃‘萨米脱’光合影响的比较

在不同浓度NaCl处理下,测定了以‘吉塞拉5号’（G5）、B5为砧木的甜樱桃‘萨米脱’光合和叶绿素荧光参数。结果表明：盐胁迫下,两种砧木嫁接的‘萨米脱’叶片的Pn、Gs、Fv/Fo、ΦPSII和ETR值随着处理浓度的增加或处理时间的延长显著下降,适度盐胁迫对‘萨米脱’叶片的光合抑制主要是气孔限制（3‰和6‰ NaCl）,高盐胁迫主要为非气孔限制（9‰ NaCl）。两种砧木对所嫁接的‘萨米脱’光合影响效应因盐胁迫程度而异,适度盐胁迫下,以G5为砧木的Pn、Gs、Fv/Fo、ΦPSII和ETR值较以B5为砧木的下降时间晚且降幅小,但在高盐胁迫下则反之。     

多倍体化引起植物表型突变的分子机理研究

多倍体化后经常出现一些新的表型;但是,大量的表型变异发生的原因一直不清楚。 最近人们对拟南芥菜、棉花、小麦、油菜等人工合成四倍体的研究, 为理解这种表型变异的机制提供了线索。初步结果表明,无论同源多倍体还是异源多倍体化后, 既有基因的甲基化也有基因的脱甲基化, 某些甲基化状态的改变可以重复且独立发生。这些甲     

棉花黄萎病菌致病的分子机理

阐述了大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb)产生的细胞壁降解酶、蛋白酶和毒素在致病中的作用及微菌核形成机制,全面分析了基因组学途径、RNA干涉和农杆菌介导的转化等真菌功能基因组学技术在大丽轮枝菌致病分子机理研究上的进展.     

H5亚型高致病性禽流感病毒的全球传播与进化

旨在研究H5 亚型高致病性禽流感病毒的暴发、传播及进化规律,探索不同宿主、宿主行为、地理环境等因素对疾病传播与进化的影响,以期为该疾病未来预防与控制提供建议和理论支持。研究中利用空间分析技术、系统进化分析技术,研究了全球H5 亚型高致病性禽流感疫情（2004—2015 年）的时空爆发、传播和进化规律。结果表明：H5 亚型高致病性禽流感病毒在2004—2008 年出现集中暴发及大面积扩散后,于2011—2015 年出现第二次大面积暴发,同时伴随多种禽流感亚型。此外,对不同地区病毒的遗传差异进行分析,发现地理隔离会造成病毒在区域内鲜有进化或暴发;而病毒在一个地区持续性存在并感染不同宿主,导致病毒的进化及遗传的多样性。研究认为,地理隔离、宿主行为等因素是造成有些地区如南亚、北美洲,病毒遗传差异较小,而有些地区如东北亚、中国等病毒的遗传差异显著的原因之一。     

云南不同烟区‘KRK26’叶片解剖学的比较研究

为深入了解津巴布韦引进烤烟品种‘KRK26’特性,筛选出‘KRK26’最佳种植区域,优化云南省烤烟种植布局,采用显微切片的方法研究了栽种于5个烟区（云南玉溪、保山、文山、临沧、普洱）‘KRK26’上、中、下3个部位成熟期叶片的解剖结构。结果表明：不同烟区间 ‘KRK26’ 的叶片解剖结构存在较大差异,文山烟区‘KRK26’叶肉细胞发育良好、细胞间隙适中,叶厚、栅栏组织厚、组织比等高于或显著高于其他烟区,解剖特征优于其他烟区;临沧烟区‘KRK26’叶厚、栅栏组织厚均最小,与其他烟区差异达到显著水平,组织比极显著低于文山和保山,解剖特征较其他烟区为差。从与烟叶品质较密切的解剖结构特性来看,文山为‘KRK26’最适种植的烟区。     

口蹄疫病毒受体猪源β1亚基基因的克隆和分子特征

首次从FMDV试验感染康复猪的舌皮和肺组织中克隆到了整联蛋白β1亚基的基因并对其核苷酸序列和推导的氨基酸序列以及蛋白结构进行了分析。猪整联蛋白β1亚基基因的编码区含有2 397个核苷酸,编码798个氨基酸残基,含有10个潜在的糖基化位点(NXTX/NXSX),2个表皮生长因子相似结构域和3个半胱氨酸丰富区。其信号肽由20个氨基酸组成,胞外域由708个氨基酸组成,跨膜区由29个氨基酸组成,胞浆域由41个氨基酸组成。猪β1基因与牛、猩猩、猫、犬、人、小鼠和鸡的β1基因的核苷酸序列一致性分别为99.5%,90.0%,91.8%,90.7%,90.2%,86.5%和77.4%,推导的氨基酸序列一致性分别为99.9%,93.9%,97.5%,96.7%,94.2%,92.4%和94.9%。通过生物学软件分析发现β1亚基形成复杂的二、三级结构,其中1~20位、729~757位氨基酸区段疏水性较强,分别是该亚基的信号肽和跨膜区。为进一步深入研究FMDV嗜性、与宿主细胞的相互作用、病毒的侵入机制等问题奠定了基础。     

云南烟区烤烟‘KRK26’中部叶片质体色素在烘烤中降解产物的种类、含量及其相关性

探索云南烟区‘KRK26’叶片质体色素在烘烤中的降解特征,为其香气品质评价和烘烤参数优化提供参考。基于气-质联用法研究云南玉溪烟区津引烤烟‘KRK26’中部叶片质体色素在三段式烘烤中降解产物的种类、含量及其相关性。结果表明：在烘烤中,‘KRK26’类胡萝卜素的主要降解产物有11种,叶绿素的有3种。β-大马酮、β-二氢大马酮、二氢猕猴桃内酯、巨豆三烯酮1、2、3和4、金合欢基丙酮和茄酮含量的最高值均出现在干筋期,3-羟基-β-二氢大马酮和3-氧代-α-紫罗兰醇的均在定色前期,吡咯、新植二烯和呋喃的分别在变黄前期、定色后期和变黄中期。类胡萝卜素和叶绿素不同降解产物含量间的差异、类胡萝卜素降解产物含量在烘烤不同阶段间的差异均达到极显著水平,但叶绿素降解产物含量在不同阶段间的差异未达到显著水平。质体色素降解产物的含量间存在极显著、显著、不显著正相关或显著、不显著负相关。类胡萝卜素的优势降解产物在各烘烤阶段均主要为茄酮、总巨豆三烯酮、金合欢基丙酮和β-大马酮,叶绿素的为新植二烯;新植二烯含量占类胡萝卜素和质体色素主要降解产物总量始终分别在94.0%和89.8%以上。所以,新植二烯、茄酮、总巨豆三烯酮、金合欢基丙酮和β-大马酮是决定‘KRK26’香味品质的主要物质。     

不同品种牛IGF-I基因5′调控区序列的多态性分析

采用PCR-SSCP方法,检测134头牛IGF-I基因5′调控区的多态性。结果表明,在外显子1上游510bp处检测到一个C→T的碱基突变,有两个等位基因和三种基因型。统计结果发现,在夏洛莱牛和草原红牛群体中等位基因A占优势,但是在利木赞牛群体中却是等位基因B占优势,西门塔尔牛群体中两种等位基因的比例相对平均。AB基因型在4个群体中均为优势基因型。夏洛莱牛、西门塔尔牛、利木赞牛群体均处于Hardy-Weinberg平衡状态（P﹥0.05）,而草原红牛群体处于非平衡状态（P﹤0.05）。为今后对牛的肉质性状研究打下分子生物学基础。     

口蹄疫病毒3D基因真核表达载体pEGFP-3D的构建及其融合蛋白分子在BHK细胞中的定位

为研究口蹄疫病毒RNA聚合酶3D基因的分子生物学特性及定位,构建了3D基因真核表达载体pEGFP-3D,观察了3D在BHK-21细胞中的瞬时表达情况.从重组质粒pMDl8.T-3D扩增到3D基因,与pGEM-T easy载体连接,将鉴定为阳性的重组质粒pGEM-3D与表达载体pEGFP-N1分别经Barn H Ⅰ/Hind Ⅲ酶切,进行定向亚克隆;重组表达质粒pEGFP-3D经PCR、酶切鉴定.阳性质粒进行测序.利用脂质体介导阳性pEGFP-3D质粒转染BHK-21细胞.免疫组化检测转染细胞中3D基凶表达情况和3D基因在细胞中的定位,Western blotting验证pEGFP-3D融合基因的表达.结果表明,成功构建了重组表达质粒pEGFP-3D,并在BHK-21细胞中进行了表达.免疫组化分析表明,3D蛋白主要定位于细胞核;Western blotting证实pEGFP-3D融合蛋白在80 kDa处出现阳性条带,说明表达的外源蛋白具有免疫活性.pEGFP-3D表达载体转染细胞后很快就能通过观察荧光蛋白而检测出基因的瞬时表达情况,为基因转染研究中确定转染效率、3D的表达情况及蛋白定位等提供了直观的靶标,有望应用于FMDV聚合酶分子的生物学特性研究.     

玉米ZmGS5基因克隆、分子特性分析及对拟南芥的遗传转化

高产是玉米育种的重要目标,籽粒大小是决定籽粒产量的重要因子。基于水稻中控制籽粒大小的OsGS5基因编码序列,利用同源克隆方法,获得了玉米ZmGS5基因,其cDNA全长为1 695bp,开放阅读框1 491bp,编码496个氨基酸,含有Peptidase-S10结构域、1个信号肽和1个丝氨酸羧肽酶（serine carboxypeptidases,SCP）类蛋白所特有的催化活性中心,这些都与SCP家族结构特点相符,也与OsGS5相关研究结果相同;磷酸化位点分析结果表明,ZmGS5含有丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸等蛋白激酶识别位点。qRT-PCR分析显示ZmGS5在雄穗和叶片中的表达量较高,而在胚及胚乳中的表达量相对较低。除此之外,采用农杆菌介导法,建立了拟南芥的遗传转化体系,得到纯合转基因株系,T₃代转基因拟南芥种子千粒重为0.0169g,较野生型千粒重（0.0139g）高。     

小麦品系M8003-5抗条锈病基因遗传分析和分子作图

为了利用小麦抗条锈病品系M8003-5中的抗病基因,用当前7个流行的条锈菌生理小种对小麦品系M8003-5的抗条锈性进行了鉴定,发现该品种对当前的各优势小种均有良好抗性。在温室内以病菌小种Su11-4对M8003-5在进行苗期抗条锈性鉴定和遗传分析,初步确定M8003-5对Su11-4的抗性由1对显性基因控制,位于7DS上的SSR标记Xbarc5、Xwmc463、Xwmc405、Xbarc126、Xgwm295、Xgwm44、Xwmc702、Xwmc438、Xwmc121、Xgwm111和Xbarc121与该基因连锁,最近的为Xwmc702和Xwmc438,遗传距离分别为3.5 cM和4.3 cM。分子标记及其相关分析表明,此基因可能来自黑麦,与已定位于7D染色体上的抗病基因不同,暂命名为YrM8003。利用与其紧密连锁的标记Xwmc702和Xwmc438测黄淮麦区43个主栽品种,结果显示,有20%的品种具有与YrM8003基因相同的标记位点。这一结果有助于YrM8003在抗条锈病育种的应用。     

内生真菌HND5分子鉴定及其生物学特性研究

HND5具有内生性并且对多种病原真菌有拮抗作用,是一株很有应用潜力的生防菌株。本研究对该菌株核糖体内转录间隔区和β微管蛋白基因内转录间隔区进行了分析,其序列和紧密枝顶孢同源性最高。生物学特性研究表明其生长最适培养基为PDA,最适温度为28℃,最适pH为7,最适碳氮源分别为蔗糖和硝酸钠,菌株对重铬酸钾具有耐受性。     

水稻耐冷性研究Ⅲ.特定颖花结实率作为耐冷性指标的分子依据

以云南稻种耐冷性资源昆明小白谷及弱耐冷性的日本品种十和田配制的杂交F2代为材料,采用159个RFLP及SSR分子标记构建的连锁图和STATISTIC等分析软件,以单株结实率作为耐冷性评价指标.分析结果显示单株结实率与单株特定颖花结实率之间的相关系数(r)为0.8364;与耐冷性(以单株结实率为指标)相关的分子标记有43个,分布在8条染色体     

球等鞭金藻Δ5去饱和酶基因IgD5在拟南芥中的功能鉴定

从球等鞭金藻中克隆到一个Δ5去饱和酶基因, 命名为IgD5。系统发育树分析表明, 该基因编码产物与来源于巴夫藻Pavlova salina的Δ5去饱和酶亲缘关系最近。此前通过酿酒酵母表达系统, 证明IgD5对ω6脂肪酸具有Δ5去饱和酶活性, 但并未鉴定IgD5对ω3脂肪酸的催化活性。我们将IgD5转化能够内源合成二高-γ-亚麻酸(DGLA, 20:3Δ^8,11,14)和二十碳四烯酸(ETA, 20:4Δ^8,11,14,17)的已携带2个基因的拟南芥(简称TMA2), 通过PCR及RT-PCR筛选阳性植株, 提取转基因阳性植株叶片总脂肪酸, 用气相色谱分析法检测到花生四烯酸(AA, 20:4Δ^5,8,11,14)和二十碳五烯酸(EPA, 20:5Δ^5,8,11,14,17), 含量分别达7.44%和2.07%, 转化效率分别为68%和60%, 证明IgD5在转基因植物中具有Δ5去饱和酶的活性, 对ω3/ω6脂肪酸没有明显偏好性, 并且催化活性远高于其在酵母中的活性。在转IgD5的TMA2中除了AA和EPA, 没有检测到其他新脂肪酸, 表明IgD5底物专一性很强, 是一个可用于植物转基因替代生产鱼油的良好基因。     

Genetic and Molecular Characterization of Vernalization Genes Vrn‐A1, Vrn‐B1, and Vrn‐D1 in Spring Wheat Germplasm from the Pacific Northwest Region of the U.S.A.

The objective of this study was to determine the Vrn‐1 allelic composition of spring wheat germplasm from the Pacific Northwest region of the USA. Individual plants from 56 spring wheat lines were crossed to near‐isogenic tester lines carrying the dominant allele Vrn‐A1, Vrn‐B1 or Vrn‐D1. F₂ progeny were evaluated for growth habit in the field and Vrn‐1 allelic composition was determined through chi‐square analysis. Lines also were analysed with DNA sequence‐based Vrn‐1 allele‐specific markers. A majority of the germplasm carried the dominant allele Vrn‐A1a alone or in combination with Vrn‐B1, Vrn‐D1 or Vrn‐B3 alleles. Vrn‐B1 and Vrn‐D1 were almost always associated with other dominant Vrn‐1 allele(s). Based on DNA sequence analysis, a novel Vrn‐B1 allele referred to as Vrn‐B1b, which carried a single nucleotide polymorphism (SNP) and a 36 bp deletion, was identified in cultivar ‘Alpowa’. These results will be useful to wheat breeders for choosing parents with different Vrn‐1 alleles for crossing to maximize diversity at the Vrn‐1 loci with an expectation of identifying superior Vrn‐1 allelic combinations for cultivar improvement.     

Vitamin C,B5, and B6 contents of segregating potato populations detected by GC‐MS: a method facilitating breeding potatoes with improved vitamin content

Vitamin C, B5, and B6 contents of potato tubers were measured by gas chromatography‐mass spectrometry (GC‐MS). Two diploid potato populations derived from two different crosses were analyzed. Plants were grown at two locations under different environmental conditions. Measurements of vitamin content of tubers showed high variation in both populations. A weak correlation was found between the vitamin concentrations of tubers harvested at the two locations. Correlations between the mean values of vitamins in field‐grown tubers and in different tissues derived from in vitro or greenhouse‐grown potato plants were also determined. A very high correlation between the vitamin content of field‐ and greenhouse‐grown tubers, and between field‐grown tubers and sink leaves of greenhouse‐grown plants was detected. This finding can facilitate breeding by preselection of individuals with improved vitamin content under greenhouse conditions at their early developmental stage.