胶体金免疫层析法快速定量检测饲料中呕吐毒素

文章建立了胶体金免疫层析法快速定量检测饲料及饲料原料中的呕吐毒素的分析方法。该方法的检出限为200μg/kg,定量限为500μg/kg,相对标准偏差低于19.5%,回收率为75.7%~96.1%。该方法简便快速、灵敏准确、重现性好,可以用于对饲料及饲料原料中呕吐毒素的快速定量筛查检测。     

胶体金免疫层析法检测谷物中的黄曲霉毒素B1

采用胶体金免疫层析法检测谷物中的黄曲霉毒素B1,谷物样品经提取后,用胶体金免疫层析试纸条法对其进行黄曲霉毒素B1的测定,并与高效液相色谱法进行比较。结果表明:胶体金免疫层析试纸条法与高效液相色谱法的相符率可达90%以上,胶体金免疫层析试纸条法操作简单、快速、方便,可以应用于谷物中的黄曲霉毒素B1的现场快速检测。     

胶体金标记抗圆弧青霉菌毒素—青霉酸单克隆抗体的研究

本研究探讨了胶体金标记抗圆弧青霉菌毒素—青霉酸单克隆抗体探针的制备方法,摸索其最佳反应条件并对其活性进行检测。结果表明,胶体金标记抗青霉酸单克隆抗体的最佳pH为8.2,1mL胶体金标记的最小蛋白量为25μg。金标抗体与二抗发生牢固结合,即金标探针具有活性。该研究为青霉酸的胶体金免疫层析检测技术奠定了一定的基础。     

圆弧青霉菌毒素-青霉酸间接竞争ELISA检测方法的建立

对圆弧青霉菌毒素-青霉酸的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测条件进行优化,建立最佳反应条件下的间接竞争酶联免疫吸附试验。以间接非竞争ELISA基本操作步骤为基础,优化ELISA反应过程中的反应条件,最后建立青霉酸的间接竞争ELISA检测法。经在均一性良好酶标板测试,抗体最适工作浓度为1∶4×103,人工抗原的饱和浓度为3.35μg/mL。试验结果显示,37℃包被2 h,用0.2 g/L BSA封闭液封闭1 h可达到良好的封闭效果;底物的最适反应时间为10 min;以板外竞争反应模式为佳。试验初步建立了青霉酸间接竞争酶联免疫吸附法,为将来ELISA试剂盒的研制奠定基础。     

检测猪乙型脑炎抗体胶体金免疫层析法的建立与初步应用

利用蔗糖密度梯度超速离心浓缩纯化vero细胞培养SA14-14-2株猪乙脑病毒灭活抗原,进行胶体金点样和配比优化,制备GICA试纸条.结果最优浓缩样品配比构成是PBS 1.32 mL、灭活病毒液24 mL、30％蔗糖2.6 mL、55％蔗糖6.6 mL;用于胶体金偶联的抗原浓度约2.80 mg/mL.试纸条能明显区别阴阳性血清,阳性血清稀释1∶256能显示条带,优化后灵敏度达到1∶1024.与猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、Ⅱ型圆环病毒病阳性血清不发生交叉反应.用于检测2群免疫母猪抗体阳性率分别为86％和100％,说明疫苗免疫效果较好;检测未经免疫肉猪出现阳性结果,分别达到38％和24％,说明存在病毒隐形感染.     

胶体金免疫层析法检测兽药残留的原理和方法

兽药残留是危害人类身体健康和影响畜产品质量的因素之一,目前国际上通用的检测方法是初筛加确证的方法,即首先采用一种简便的方法对待检样品进行快速初筛,而后采用准确性较高的方法对初筛结果为阳性的样品再进行确证分析.     

胶体金免疫层析法快速检测禽蛋中甲硝唑残留分析研究

应用胶体金免疫层析法快速检测禽蛋中的甲硝唑残留,研究该检测方法的灵敏度、准确性和特异性。结果显示,胶体金免疫层析试纸条肉眼判断禽蛋中甲硝唑的检出限为0.5μg/kg,假阳性率≤5%,假阴性率为0%;试纸条与其他8种硝基咪唑类药物有交叉反应,但甲硝唑的检出限最低;试纸条对实际样本的检测结果与液相色谱-质谱/质谱法基本一致。胶体金免疫层析法具有操作简单、检测速度快、成本低的优点,可用于现场大批量禽蛋样本中甲硝唑残留的初步筛选。     

胶体金免疫层析法与试管凝集试验检测布鲁氏菌的比较

采集济宁市某县300个羊血清,选用2个厂家生产的布鲁氏菌胶体金快速检测试剂卡和试管凝集试验分别对采集的羊血清进行检测。比较2种布鲁氏菌胶体金快速检测试剂卡与试管凝集试验检测布鲁氏菌的阳性率,对检测效果进行比较。结果表明,这2个胶体金快速检测试剂卡检测的阳性率与试管凝集试验检测的阳性率有所差异,因此,在选用市场上现有的布鲁氏菌胶体金快速检测试剂卡时,应该与国标试管凝集试验比较确定。     

圆弧青霉菌毒素——青霉酸ELISA定量检测试剂盒的研制

为了建立用于定量检测饲料与食品中青霉酸的ELISA试剂盒,试验在合成青霉酸人工抗原并免疫小鼠获得特异单克隆抗体的基础上,利用间接竞争ELISA方法对试剂盒各项技术参数进行测定,最终获得特异、快速的检测试剂盒。结果表明:在优化的条件下,该试剂盒对青霉酸标准品的最低检测浓度为1.6μg/mL;线性方程为y=9.54x+5.844 4(R2=0.996 4),线性范围为0.1～25.6μg/mL;回收试验的平均回收率分别为80.5%、83.3%、85.36%,37℃可保存48 h左右,与黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、T-2毒素、伏马毒素等的交叉反应率小于0.01%,具有良好的特异性。说明已初步研制出用于检测饲料中青霉酸的ELISA试剂盒。     

胶体金免疫层析法用于禽流感亚型诊断

依据AIV H5亚型单克隆抗体技术，结合胶体金免疫层析试验，同时制备H5亚型诊断试纸条。H5试纸条对H5亚型标准毒株、以及9株疑似H5亚型毒株检测为阳性结果，同时对H9亚型标准毒株及传染性支气管炎、新城疫抗原等检测结果为阴性，本试验制备试纸务的检测结果与血凝试验和血凝抑制试验结果一致，与NP基因和H5引物扩增结果一致。研究表明：本试验制备的H5亚型试纸条具有快速、经济、灵敏度高、特异性强、重复性好、易于判读、操作简便等优点，可用于AIV H5亚型的特异诊断和流行学调查，为开发成品化检测试纸条提供理论依据。     

莱克多巴胺胶体金免疫层析法快速检测试纸条的研制

为研制一种快速、简便的基于胶体金免疫层析法的试纸条,快速检测猪尿中莱克多巴胺（ractopamine,RAC药物残留）,采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒,标记莱克多巴胺单克隆抗体并喷于玻璃纤维上制备胶金垫,RAC-BSA偶联抗原和羊抗鼠IgG分别结合于硝酸纤维膜上,依次将样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水纸组装并切割成莱克多巴胺胶体金免疫层析快速检测试纸条。试验结果表明该快速检测试纸条的检测限为5 ng/mL,可在8~10 min内完成测试,肉眼即可判断,无需其他检测设备。该试纸条灵敏度、特异性、稳定性和重复性均达到临床使用要求,适用于现场快速检测和筛选工作。     

胶体金免疫层析法快速检测食品和兽药中的氯霉素残留

1引言氯霉素（Chloramphenicol,CAP）是一种广谱抗生素,其抗菌效果好,价格低廉,曾广泛应用于预防和治疗动物疾病。然而氯霉素具有严重的毒副作用,会引起动物机体正常菌群失调,同时可能引起人的再生障碍性贫血,粒状白细胞缺乏症等疾病。     

胶体金免疫层析法快速检测食品和兽药中的氯霉素残留

1引言
　　氯霉素（Chloramphenicol,CAP）是一种广谱抗生素,其抗菌效果好,价格低廉,曾广泛应用于预防和治疗动物疾病。然而氯霉素具有严重的毒副作用,会引起动物机体正常菌群失调,同时可能引起人的再生障碍性贫血,粒状白细胞缺乏症等疾病。     

胶体金免疫层析法快速检测牛奶中氟喹诺酮类药物残留

利用胶体金标记的抗氟喹诺酮类单克隆抗体制备了氟喹诺酮类胶体金免疫检测试纸条。该试纸条对牛奶中恩诺沙星、沙拉沙星、双氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、培氟沙星、氟甲喹、达氟沙星检测限为20g／L。对依诺沙星、恶喹酸检测限为40g／L,检测时间5min,与三聚氰胺、磺胺类药物、氯霉素、大环内酯类药物、氨基糖苷类药物、四环素类药物在500g／L浓度时,不发生交叉反应。试纸条的检测结果与仪器检测结果一致,重复性较好,在4℃条件下可以保存12个月,所以该研究制备的氟喹诺酮类药物残留检测试纸条可用于牛奶中11种氟喹诺酮类药物残留。     

胶体金免疫层析法在畜禽产品兽药残留检测中的应用

畜禽产品的兽药残留检测工作的开展是比较重要的,具有保障畜禽产品质量安全,选择科学有效的检测方法才能有助于保障兽药残留检测的质量效果,本文对胶体金免疫层析法的应用进行探究,希望能为实际检测工作的开展提供参考.     

胶体金免疫层析法在畜禽产品兽药残留检测中的应用

畜禽养殖过程中,为了有效防治畜禽各类疾病发生,减少经济损失,通常会在养殖过程中添加一些药物进行预防和治疗。而大量不科学使用药物,使得畜禽体内药物蓄积量不断增加,最终形成严重的兽药残留。抗生素是动物疫病防治过程中应用十分广泛的一类药品。本次主要以鸡肌肉中磺胺嘧啶为试验对象,建立了一种胶体金免疫层析方法,就该种方法在畜禽产品兽药残留检测中的应用进行分析。     

胶体金免疫层析法快速检测牛奶中氟喹诺酮类药物残留

利用胶体金标记的抗氟喹诺酮类单克隆抗体制备了氟喹诺酮类胶体金免疫检测试纸条.该试纸条对牛奶中恩诺沙星、沙拉沙星、双氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、培氟沙星、氟甲喹、达氟沙星检测,检测限为20μg/L;对依诺沙星、恶喹酸检测,检测限为40μg/L.检测时间为5min.与三聚氰胺、磺胺类药物、氯霉素、大环内酯类药物、氨基糖苷类药物、四环素类药物在500μg/L浓度时,不发生交叉反应.试纸条的检测结果与仪器检测结果一致,重复性较好,在4℃条件下可以保存12个月.本研究制备的氟喹诺酮类药物残留检测试纸条可用于牛奶中11种氟喹诺酮类药物残留的检测.     

中药成分辛弗林对胶体金免疫层析法检测β-受体激动剂的影响

旨在探究陈皮、青皮、木瓜、厚朴、红景天等5种中药材提取液以及饲喂了陈皮和青皮的猪尿液胶体金免疫层析法检测结果呈阳性的原因。建立测定猪尿及中药提取物中辛弗林的LC-MS/MS检测方法,测定陈皮、青皮的提取物和饲喂陈皮、青皮后猪尿中的辛弗林浓度。用小鼠肝微粒体孵育CGIA检测呈阳性的陈皮、青皮、木瓜和厚朴4味中药提取物。饲喂陈皮和青皮后的猪尿液检出辛弗林,浓度分别为1.36和1.65 μg·mL^-1;在陈皮和青皮的提取复溶液中检出辛弗林,浓度分别为132.6和312.7 μg·mL^-1。厚朴和木瓜两种中药提取物经过肝微粒体孵育后,在2~5 h逐渐由CGIA检测阳性转为阴性,陈皮和青皮孵育后,0~6 h的结果均为CGIA检测阳性;阴性中药组CGIA检测均呈阴性,而添加辛弗林的阳性对照组0~6 h CGIA检测均呈阳性。猪较大剂量使用陈皮和青皮会引起猪尿β-受体激动剂CGIA检测出现假阳性,该假阳性现象跟中药成分辛弗林有关,体外试验中辛弗林不易被小鼠肝微粒体代谢。